W8201養(yǎng)殖水質(zhì)亞硝酸鹽氮的測定-微教材

1、 水產(chǎn)養(yǎng)殖技術(shù)國家級教學(xué)資源庫水產(chǎn)養(yǎng)殖水質(zhì)監(jiān)控技術(shù)課程-微教材微課編號W8201微課名稱養(yǎng)殖水質(zhì)亞硝酸鹽氮的測定（分光光度法）所屬項目養(yǎng)殖水質(zhì)亞硝酸鹽氮的檢測與調(diào)控任務(wù)養(yǎng)殖水質(zhì)水體中亞硝酸鹽氮的測定關(guān)鍵詞亞硝酸鹽氮微課類型實驗實訓(xùn)型是否重點建設(shè)是 否 微課形式仿真、實操 微課設(shè)計模式講授型、直觀演示法教學(xué)目標(biāo)1. 了解亞硝酸鹽氮的分光光度法的原理2. 掌握亞硝酸鹽氮的分光光度法測定步驟3.熟知亞硝酸鹽氮的分光光度法操作要點教學(xué)內(nèi)容知識點技能點1. 分光光度法測亞硝酸鹽氮的原理2. 亞硝酸鹽氮的分光光度法測定步驟3. 數(shù)據(jù)處理1. 分光光度計的使用2. 標(biāo)準(zhǔn)系列的制備知識講解水體中亞硝酸鹽一旦超

2、標(biāo)，將會給養(yǎng)殖戶帶來巨大經(jīng)濟損失，養(yǎng)殖過程中，水質(zhì)亞硝酸鹽的控制與管理是養(yǎng)殖成功的關(guān)鍵。 水質(zhì)亞硝酸鹽氮的測定，技術(shù)方法參照GB7493-87（水質(zhì) 亞硝酸鹽氮的測定 分光光度法），本標(biāo)準(zhǔn)等效采用ISO6777-1984水質(zhì)亞硝酸鹽氮測定 分子吸收分光光度法。1.方法原理在磷酸介質(zhì)中，pH值為1.8時，試份中的亞硝酸根離子與4-氨基苯磺酰胺反應(yīng)生成重氮鹽，它再與N-(1-萘基)-乙二胺二鹽酸鹽 偶聯(lián)生成紅色染料，在540nm波長處測定吸光度。如果使用光程長為10mm的比色皿，亞硝酸鹽氮的濃度在0.2mg/L以內(nèi)其呈色符合比爾定律。2試劑 在測定過程中，除非另有說明，均使用符合國家標(biāo)準(zhǔn)或?qū)I(yè)標(biāo)準(zhǔn)

3、的分析純試劑，實驗用水均為亞硝酸鹽的二次蒸餾水。2.1顯色劑 500ml燒杯內(nèi)置入250ml水和50ml磷酸，加入200g4-氨基苯磺酰胺。再將100gN-(1-萘基)-乙二胺二鹽酸鹽溶于上述溶液中，轉(zhuǎn)移至500ml容量瓶中，用水稀至標(biāo)線，搖勻。 此溶液貯存于棕色試劑瓶中，保存在25，至少可穩(wěn)定一個月。注：本試劑有毒性，避免與皮膚接觸或吸入體內(nèi)。2.2亞硝酸鹽氮標(biāo)準(zhǔn)貯備溶液：CN=250mg/L。稱取1232g亞硝酸鈉(NaNO2)，溶于150ml水中，定量轉(zhuǎn)移至1000ml容量瓶中，用水稀釋至標(biāo)線，搖勻。用高錳酸鉀標(biāo)準(zhǔn)溶液（C(1/5KMnO4)=0050mol/L）標(biāo)定。本溶液貯存在棕色試

4、劑瓶中，加入1ml氯仿，保存在2-5，至少穩(wěn)定1個月。2.3亞硝酸鹽氮中間標(biāo)準(zhǔn)液：CN=500mg/L。取亞硝酸鹽氮標(biāo)準(zhǔn)貯備溶液5000ml置250ml容量瓶中，用水稀釋至標(biāo)線，搖勻。此溶液貯于棕色瓶內(nèi)，保存在25，可穩(wěn)定一星期。2.4亞硝酸鹽氮標(biāo)準(zhǔn)工作液：CN=1.00mg/L。取亞硝酸鹽氮中間準(zhǔn)液1000ml于500ml容量瓶內(nèi)，水稀釋至標(biāo)線，搖勻。此溶液使用時，當(dāng)天配制。 注：亞硝酸鹽氮中間標(biāo)準(zhǔn)液和標(biāo)準(zhǔn)工作液的濃度值，應(yīng)采用貯備溶液標(biāo)定后的準(zhǔn)確濃度的計算值。3儀器所有玻璃器皿都應(yīng)用2mol/L鹽酸仔細(xì)洗凈，然后用水徹底沖洗。常用實驗室設(shè)備及分光光度計。4采樣和樣品41采樣和樣品保存 實驗

5、室樣品應(yīng)用玻璃瓶或聚乙烯瓶采集，并在采集后盡快分析，不要超過24h。 若需短期保存(12天)，可以在每升實驗室樣品中加入40mg氯化汞，并保存于25。52試樣的制備 當(dāng)試樣pH11時，可能遇到某些干擾，遇此情況，可向試份中加入酚酞溶液(10g/L)1滴，邊攪拌邊逐滴加入磷酸溶液(1+9)，至紅色剛消失。經(jīng)此處理，則在加入顯色劑后，體系pH值為1.80.3，而不影響測定。 試樣如有顏色和懸浮物，可向每100ml試樣中加入2ml氫氧化鋁懸浮液，攪拌，靜置，過濾，棄去25ml初濾液后，再取試份測定。 6步驟61試份 試份最大體積為500ml，可測定亞硝酸鹽氮濃度高至020mgL。濃度更高時，可相應(yīng)用

6、較少量的樣品或?qū)悠愤M(jìn)行稀釋后，再取樣。62測定 用無分度吸管將選定體積的試份移至50ml比色管(或容量瓶)中，用水稀釋至標(biāo)線，加入顯色劑10ml，密塞，搖勻，靜置，此時pH值應(yīng)為1803。 加入顯色劑20min后、2h以內(nèi)，在540nm的最大吸光度波長處，用光程長10mm的比色皿，以實驗用水做參比，測量溶液吸光度。注：最初使用本方法時，應(yīng)校正最大吸光度的波長，以后的測定均應(yīng)用此波長。63空白試驗 按62所述步驟進(jìn)行空白試驗，用50ml水代替試份。64校準(zhǔn) 在一組六個50ml比色管(或容量瓶)內(nèi)，分別加入亞硝酸鹽氮標(biāo)準(zhǔn)工作液0、1.00、300、500、700和1000ml，用水稀釋至標(biāo)線，然后按62第二段開始到末了敘述的步驟操作。從測得的各溶液吸光度，減去空白試驗吸光度，得校正吸光度Ar，繪制以氮含量(g)對校正吸光度的校準(zhǔn)曲線，亦可按線性回歸方程的方法，計算校準(zhǔn)