園藝植物科學(xué)研究導(dǎo)論5園藝植物制片方法ppt課件

1、 第五章第五章 園藝植物制片方法園藝植物制片方法 植物制片是進行園藝植物科學(xué)研究所需用的一種基本植物制片是進行園藝植物科學(xué)研究所需用的一種基本方法，比如進行植物各個器官的解剖構(gòu)造觀察、花芽分方法，比如進行植物各個器官的解剖構(gòu)造觀察、花芽分化研究、授粉受精觀察、貯藏營養(yǎng)觀測以及染色體觀察化研究、授粉受精觀察、貯藏營養(yǎng)觀測以及染色體觀察等都需要進行制片。通過對切片結(jié)果的分析，可以比較等都需要進行制片。通過對切片結(jié)果的分析，可以比較不同試驗處理的效果以及了解不同樹種和品種相應(yīng)的生不同試驗處理的效果以及了解不同樹種和品種相應(yīng)的生物學(xué)特性等。植物制片技術(shù)是一個相對獨立的體系，內(nèi)物學(xué)特性等。植物制片技術(shù)是

2、一個相對獨立的體系，內(nèi)容繁多。在本章內(nèi)容中，將介紹在園藝植物科學(xué)研究中容繁多。在本章內(nèi)容中，將介紹在園藝植物科學(xué)研究中常用的一些基本方法和原理。常用的一些基本方法和原理。 第一節(jié)第一節(jié) 徒手制片徒手制片 一、徒手制片切片及特點一、徒手制片切片及特點 徒手制片一般指徒手用刀片把新鮮的植物材料切成薄片的制片方法。徒手制片一般指徒手用刀片把新鮮的植物材料切成薄片的制片方法。 此制片法主要優(yōu)點是：（此制片法主要優(yōu)點是：（1能及時觀察研究植物生活組織的結(jié)構(gòu)和天然色能及時觀察研究植物生活組織的結(jié)構(gòu)和天然色彩；（彩；（2方法及用具簡單，不需切片機等機械設(shè)備，短時間即可完成。主要方法及用具簡單，不需切片機等機

3、械設(shè)備，短時間即可完成。主要缺點是缺點是1對于微小、柔軟、水分過多以及堅硬的材料，難以用徒手切成薄對于微小、柔軟、水分過多以及堅硬的材料，難以用徒手切成薄片；（片；（2對于操作不熟練者，往往切成厚薄不勻或不完整的切片。對于操作不熟練者，往往切成厚薄不勻或不完整的切片。二、徒手制片的方法及注意事項二、徒手制片的方法及注意事項 徒手制片最主要的工具就是刀片，常可用單徒手制片最主要的工具就是刀片，?？捎脝蚊姹０驳镀?。要獲得良好的切片，首先要保持刀面保安刀片。要獲得良好的切片，首先要保持刀口的鋒利。切片方法及步驟為：口的鋒利。切片方法及步驟為： （1 1準(zhǔn)備工作盛好清水的培養(yǎng)皿、顯微鏡、準(zhǔn)備工作盛好清

4、水的培養(yǎng)皿、顯微鏡、載玻片、蓋玻片、刀片等用具）。載玻片、蓋玻片、刀片等用具）。 （2 2拿取材料進行切片，材料可以是新鮮拿取材料進行切片，材料可以是新鮮的材料，也可以是經(jīng)過固定的材料切片時，將的材料，也可以是經(jīng)過固定的材料切片時，將欲切材料斷面和刀片上滴上清水以保持材料濕欲切材料斷面和刀片上滴上清水以保持材料濕潤）。潤）。 （3以左手拇指、食指、中指捏住材料，拇指應(yīng)低于食指，以免切傷手指；材料高出指尖。 （4右手執(zhí)刀，將刀平放在食指上，刀口朝內(nèi)，刀面與材料斷面平行，然后以均勻快捷的動作自左前方向右后方以臂力帶動刀片水平切割移動，不要用腕力。同時還要注意，切時動作要迅速，材料一次切下，切忌停頓

5、或拉鋸式切割。 （5 5連續(xù)切數(shù)片后，將切下的薄片輕輕移入盛水的培連續(xù)切數(shù)片后，將切下的薄片輕輕移入盛水的培養(yǎng)皿中備用。然后挑選薄而透明的切片，放在載玻片上養(yǎng)皿中備用。然后挑選薄而透明的切片，放在載玻片上的水滴中，加上蓋玻片制成臨時制片進行觀察。的水滴中，加上蓋玻片制成臨時制片進行觀察。 在試驗中，有時因各種情況所取材料無法馬上進行在試驗中，有時因各種情況所取材料無法馬上進行制片?？梢詫⑵浔４嬖诠潭ㄒ褐?，常用的固定液為制片?？梢詫⑵浔４嬖诠潭ㄒ褐?，常用的固定液為F.A.AF.A.A固定液，它不但是優(yōu)良的固定液也是優(yōu)良的保存固定液，它不但是優(yōu)良的固定液也是優(yōu)良的保存液液 ，其配方為：，其配方為：

6、5ml5ml福爾馬林甲醛）：福爾馬林甲醛）：5ml5ml冰醋酸：冰醋酸：50-70%50-70%的乙醇的乙醇90ml90ml。 用徒手切片的材料不宜過大，一般以表面不超過5-8mm 為宜。對于過于柔軟或微小的材料如葉片、細小的根尖等需要借助一些夾持物方可進行切片，如果臨時制片需保存一段時間，（1將材料封在水中，每隔20-30分鐘再加一滴水，此法可保持?jǐn)?shù)小時；（2用10%-30%的甘油水溶液代替清水封片，并將制片放在鋪有濕濾紙的大培養(yǎng)皿中保存，或用石蠟或指甲油封邊保存，可保存1-2周或更長時間。 第二節(jié)第二節(jié) 壓片及涂片壓片及涂片 涂片和壓片是進行植物染色體觀察研涂片和壓片是進行植物染色體觀察研

7、究常用的制片方法。究常用的制片方法。 涂片是將新鮮的材料或者是經(jīng)過固定涂片是將新鮮的材料或者是經(jīng)過固定的材料于載片上，托涂成均勻一層，經(jīng)染色后的材料于載片上，托涂成均勻一層，經(jīng)染色后蓋上蓋玻片鏡檢。蓋上蓋玻片鏡檢。 壓片是將處理后的材料于載片上分散壓片是將處理后的材料于載片上分散后加蓋片，用拇指或鑷子輕輕擠壓蓋片，使組后加蓋片，用拇指或鑷子輕輕擠壓蓋片，使組織分散成一片，然后鏡檢?？椃稚⒊梢黄缓箸R檢。 進行染色體觀察時注意，若進行染色體數(shù)目測定要求取樣個體數(shù)在5個以上，細胞總數(shù)在30個以上；若進行染色體核型分析組型分析)則要求取樣應(yīng)是來源于不同個體的5個細胞。 一、常規(guī)壓片法 1.取材：于

8、細胞分裂旺盛時期取樣。一般取根尖、莖尖。 2.預(yù)處理：防止紡錘體的形成，使細胞分裂停止在中期階段；使染色體收縮變短，便于觀察統(tǒng)計。常用藥劑有秋水仙堿溶液、8-羥基喹啉、對二氯苯飽和水溶液、富民隆。預(yù)處理的時間一般為2-12小時。 3. 固定：把細胞迅速殺死，使蛋白質(zhì)變性沉淀，盡量保持材料結(jié)構(gòu)的原有狀態(tài)，以備進一步處理。 常用的固定液為卡諾固定液，即3：1的純酒精:冰醋酸溶液。固定時間一般為1-24小時。 4.解離：根尖、莖尖等體細胞組織，需經(jīng)過某些處理，除去細胞之間的果膠層并使細胞軟化，這種細胞分離和軟化后的組織才便于壓片。最常用的是酸水解和酶處理兩種。染色：?？捎面跔柛旧ɑ虼姿嵫蠹t等核染

9、色染色：?？捎面跔柛旧ɑ虼姿嵫蠹t等核染色劑進行染色。劑進行染色。壓片：將材料移至載玻片上，蓋上蓋玻片，用解壓片：將材料移至載玻片上，蓋上蓋玻片，用解剖針或用鉛筆的橡皮頭在蓋玻片上輕輕敲擊，使細胞剖針或用鉛筆的橡皮頭在蓋玻片上輕輕敲擊，使細胞分散，再用拇指輕擠壓蓋片使組織成為一薄層。分散，再用拇指輕擠壓蓋片使組織成為一薄層。鏡檢：將壓片置于顯微鏡下觀察，選擇染色體分鏡檢：將壓片置于顯微鏡下觀察，選擇染色體分散、清晰的細胞進行統(tǒng)計記數(shù)，并可照相繪圖，以便散、清晰的細胞進行統(tǒng)計記數(shù)，并可照相繪圖，以便進行核型分析。同時可用記號筆在載玻片和蓋玻片上進行核型分析。同時可用記號筆在載玻片和蓋玻片上分別

10、做記號，以便再次觀察和照相。分別做記號，以便再次觀察和照相。封固：好的壓片，可采用冷凍干燥后，用光學(xué)樹膠封固保存。也可進行脫水透明等步驟制成永久切片。若臨時保存，可以用石蠟封邊，放于培養(yǎng)皿中于冰箱冷凍室內(nèi)短期保存。 二、去壁低滲法涂片法）1.取材：同上述常規(guī)壓片法。2.預(yù)處理前處理）：同上述常規(guī)壓片法。3.前低滲：將處理后的材料防災(zāi)0.075M KCl低滲液中，在20-25條件下處理30分鐘左右.具具B B染色體的黑麥基因組核型染色體的黑麥基因組核型4去壁：倒去KCl溶液，加入2.5%混合酶液纖維素酶與果膠酶各占2.5%），在溫度25-30下處理2-5小時左右。酶液與材料的比例適當(dāng)，酶液不能過

11、少。5. 后低滲：倒去酶液，用蒸餾水沖洗2-3次，然后在蒸餾水中停留5-10分鐘左右后進行后低滲。6. 固定：用甲醇:冰醋酸3:1固定液固定。7. 涂片：將去壁固定的材料放在載玻片上，加一滴固定液，然后用鑷子將材料夾碎，去掉大塊殘渣，然后從載玻片一側(cè)向材料輕輕吹氣，使組織分散成一薄層。8. 火焰干燥：將載片于酒精燈上微微加熱烤干。9染色：用40:1的Giemsa染液染色4-30分鐘或更長，蒸餾水清洗，空氣干燥后可用樹膠封片。10. 鏡檢：于顯微鏡下觀察。 第三節(jié) 石蠟制片 石蠟切片是光學(xué)顯微鏡的制片技術(shù)中最常用的一種方法，屬于永久制片。一般的植物材料都可以用此法制片。但有制作時間較長，操作過程

12、復(fù)雜以及材料易發(fā)硬或發(fā)脆等缺點。 操作程序如下：操作程序如下： 1. 材料的采集與分割：根據(jù)制片的目的和要求采集材料的采集與分割：根據(jù)制片的目的和要求采集材料，材料要有代表性。材料采后應(yīng)盡快進行分割材料，材料要有代表性。材料采后應(yīng)盡快進行分割固定。為使固定液能迅速的滲透材料，要進行材料固定。為使固定液能迅速的滲透材料，要進行材料分割。分割塊宜小不宜大，一般不超過分割。分割塊宜小不宜大，一般不超過1cm3，分割，分割后立即殺死固定。后立即殺死固定。2. 殺死與固定：利用藥劑迅速把細胞殺死，以保持殺死與固定：利用藥劑迅速把細胞殺死，以保持材料本來的狀態(tài)和結(jié)構(gòu)。常用的固定液有材料本來的狀態(tài)和結(jié)構(gòu)。常

13、用的固定液有F.A.A固定固定液、卡諾固定液等，前者還可作保存液。液、卡諾固定液等，前者還可作保存液。 3.3.脫水：除去組織中的水分，便于透明、浸蠟、包脫水：除去組織中的水分，便于透明、浸蠟、包埋等步驟的進行。常用的脫水劑為酒精。脫水采用埋等步驟的進行。常用的脫水劑為酒精。脫水采用等級脫水系列脫水），即從較低濃度酒精開始，等級脫水系列脫水），即從較低濃度酒精開始，逐漸替換到高濃度酒精。逐漸替換到高濃度酒精。4.4.透明：將脫水劑從材料中除去，使材料透明，增透明：將脫水劑從材料中除去，使材料透明，增加折光系數(shù)；便于下步的浸蠟和包埋等程序。透明加折光系數(shù)；便于下步的浸蠟和包埋等程序。透明劑是一種

14、既能與脫水劑混合，又能與包埋劑混合的劑是一種既能與脫水劑混合，又能與包埋劑混合的藥劑。常用的透明劑為二甲苯和氯仿，適用原則也藥劑。常用的透明劑為二甲苯和氯仿，適用原則也是逐級進行，可減少材料收縮。是逐級進行，可減少材料收縮。 5.5.浸蠟：逐漸除去透明劑浸蠟：逐漸除去透明劑, ,并為包埋劑所代替。常并為包埋劑所代替。常用的包埋劑是石蠟。浸蠟過程是使石蠟慢慢溶于浸用的包埋劑是石蠟。浸蠟過程是使石蠟慢慢溶于浸有材料的透明劑中，溶解在透明劑中的石蠟漸漸深有材料的透明劑中，溶解在透明劑中的石蠟漸漸深入到材料的細胞中去，最后使透明劑完全被石蠟取入到材料的細胞中去，最后使透明劑完全被石蠟取代，以便切片。代

15、，以便切片。6.6.包埋：將浸蠟后的材料包埋在石蠟中。此步驟要包埋：將浸蠟后的材料包埋在石蠟中。此步驟要迅速，且不要使石蠟塊中有氣泡。注意將樣品編號迅速，且不要使石蠟塊中有氣泡。注意將樣品編號封于蠟塊上，以免樣品混淆，以備切片。封于蠟塊上，以免樣品混淆，以備切片。7.7.修塊和切片：將已包埋好的蠟塊切成小塊，每一小塊修塊和切片：將已包埋好的蠟塊切成小塊，每一小塊包含一塊材料。然后按照所需的切面，進行修整。把蠟包含一塊材料。然后按照所需的切面，進行修整。把蠟塊粘接在載蠟器上，用切片機將蠟塊切成連續(xù)的蠟帶。塊粘接在載蠟器上，用切片機將蠟塊切成連續(xù)的蠟帶。8.8.粘片：將切下來的切片粘在潔凈的載玻片

16、上。粘片時粘片：將切下來的切片粘在潔凈的載玻片上。粘片時先在載玻片上滴上一小滴粘片劑，加幾滴蒸餾水，然后先在載玻片上滴上一小滴粘片劑，加幾滴蒸餾水，然后用鑷子小心把切片放在水上，在用鑷子小心把切片放在水上，在35-4035-40下，用撥針將下，用撥針將切片伸直、展平，傾斜載片，使水流去并烘干。切片伸直、展平，傾斜載片，使水流去并烘干。9.9.脫蠟、染色、脫水透明和封片：粘片后要經(jīng)過脫蠟、脫蠟、染色、脫水透明和封片：粘片后要經(jīng)過脫蠟、染色、再次脫水透明，然后封片永久保存。染色、再次脫水透明，然后封片永久保存。 脫蠟、染色和脫水透明的過程仍采用等級法逐漸進行。最后加拿大樹膠封片，然后貼標(biāo)簽鏡檢及保

17、存。 以上是石蠟制片的一般步驟；為了獲得良好的制片效果，需要制片者的大量實踐并在實踐中不斷摸索、積累經(jīng)驗方可。亮葉忍冬葉片解剖構(gòu)造亮葉忍冬葉片解剖構(gòu)造韭菜根橫切面韭菜根橫切面女貞莖橫切女貞莖橫切面皮孔）面皮孔）南瓜莖橫切面局部南瓜莖橫切面局部第四節(jié)第四節(jié) 電鏡制片電鏡制片 電子顯微鏡簡稱電鏡大體上分兩類，一是掃描電鏡，二是透射電鏡。掃描電鏡能直接觀察到樣品表面的三維立體結(jié)構(gòu)，如植物的花、葉、果實的表面結(jié)構(gòu)等；投射電鏡可觀察到植物組織的超微結(jié)構(gòu)，如葉綠體的膜結(jié)構(gòu)韌皮部疏導(dǎo)組織結(jié)構(gòu)等等。它們的制片方法有很大不同。一、掃描電鏡常規(guī)制片方法一、掃描電鏡常規(guī)制片方法（一取材（一取材 基本要求是基本要求是

18、 ：動作應(yīng)迅速、部位要準(zhǔn)確：動作應(yīng)迅速、部位要準(zhǔn)確 ；刀片；刀片要鋒利；尺寸不宜過大要鋒利；尺寸不宜過大 ；采取易分散的材料，要注；采取易分散的材料，要注意防塵、樣品分散；數(shù)量必需取夠。意防塵、樣品分散；數(shù)量必需取夠。 （二）（二） 清洗清洗 共清洗共清洗3 3次。次。 清洗掉樣品表面雜質(zhì)等附著物；清洗掉樣品表面雜質(zhì)等附著物； 除掉沒有和樣品成分發(fā)生反應(yīng)的固定劑。常用的清洗除掉沒有和樣品成分發(fā)生反應(yīng)的固定劑。常用的清洗液有蒸餾水、生理鹽水、各種緩沖液以及含酶的清洗液有蒸餾水、生理鹽水、各種緩沖液以及含酶的清洗液，可依具體情況選擇液，可依具體情況選擇 。（三固定（三固定 目的是目的是 盡量完善的

19、穩(wěn)定和保存樣品細胞內(nèi)的各種成分和結(jié)構(gòu)，使盡量完善的穩(wěn)定和保存樣品細胞內(nèi)的各種成分和結(jié)構(gòu)，使其接近生活時的狀態(tài)。其接近生活時的狀態(tài)。 常用的方法是戊二醛常用的方法是戊二醛四氧化鋨雙固定法。先四氧化鋨雙固定法。先用用1-3%1-3%的戊二醛的戊二醛/ /緩沖液固定數(shù)分鐘至數(shù)小時，再用緩沖液固定數(shù)分鐘至數(shù)小時，再用1%1%鋨酸鋨酸/ /緩沖液在緩沖液在44下固定下固定30-60min30-60min。 （四脫水和置換（四脫水和置換 采用系列乙醇或丙酮逐級脫水，一般為：采用系列乙醇或丙酮逐級脫水，一般為： 30%50%70%80%95%100%30%50%70%80%95%100%，每步，每步15-2

20、0min15-20min。 （五枯燥（五枯燥 是制片關(guān)鍵一步。目的是去除樣品中的游離水或已取代游離水的是制片關(guān)鍵一步。目的是去除樣品中的游離水或已取代游離水的脫水劑，使樣品中不含有液態(tài)物質(zhì)脫水劑，使樣品中不含有液態(tài)物質(zhì) 。臨界點干燥法是目前公認(rèn)的較好。臨界點干燥法是目前公認(rèn)的較好方法。方法。 （六粘樣（六粘樣 將干燥好的樣品用導(dǎo)電膠將樣品粘在樣品臺上，并做將干燥好的樣品用導(dǎo)電膠將樣品粘在樣品臺上，并做好標(biāo)記。常用的有銀粉導(dǎo)電膠、石墨粉導(dǎo)電膠、雙面膠帶、好標(biāo)記。常用的有銀粉導(dǎo)電膠、石墨粉導(dǎo)電膠、雙面膠帶、普通膠水等。普通膠水等。（七鍍膜噴涂）（七鍍膜噴涂） 是把粘貼到樣品臺上的樣品和樣品臺表面同

21、時噴涂上是把粘貼到樣品臺上的樣品和樣品臺表面同時噴涂上一層金屬膜，使樣品具有良好的導(dǎo)電性，以便下一步觀察。一層金屬膜，使樣品具有良好的導(dǎo)電性，以便下一步觀察。一般噴涂一般噴涂10-20nm10-20nm厚的金屬膜，常用的金屬有金、銅、鋁、厚的金屬膜，常用的金屬有金、銅、鋁、金金- -鈀。鈀。（八觀察（八觀察 噴好的樣品就可以用掃描電鏡進行觀察了噴好的樣品就可以用掃描電鏡進行觀察了一般一般20kv20kv）。如果一時不能觀察，需把樣品）。如果一時不能觀察，需把樣品放入干燥器中保存，以防受潮或被污染。放入干燥器中保存，以防受潮或被污染。OK！掃描電子顯微鏡掃描電子顯微鏡蘋果花粉粒蘋果花粉粒蜀葵花粉

22、粒蜀葵花粉粒一串紅花粉粒一串紅花粉粒二、透射電鏡制片基本方法超薄切片）二、透射電鏡制片基本方法超薄切片）（一取樣（一取樣 要求取樣要有代表性、迅速、準(zhǔn)確、及時、體積小、要求取樣要有代表性、迅速、準(zhǔn)確、及時、體積小、低溫、防損傷。一般要求體積低溫、防損傷。一般要求體積0.5-1.0mm20.5-1.0mm2。（二固定（二固定 目的是要在分子水平上真實的保存細胞超微結(jié)構(gòu)的目的是要在分子水平上真實的保存細胞超微結(jié)構(gòu)的每一細節(jié)。常用的方法是化學(xué)固定法，目前大部分植物每一細節(jié)。常用的方法是化學(xué)固定法，目前大部分植物材料采用的固定方法是戊二醛材料采用的固定方法是戊二醛鋨酸雙固定法，即先用鋨酸雙固定法，即先

23、用戊二醛作預(yù)固定，然后用鋨酸作后固定。對于一般植物戊二醛作預(yù)固定，然后用鋨酸作后固定。對于一般植物葉、幼莖、幼根可用葉、幼莖、幼根可用3%3%的戊二醛固定的戊二醛固定2 2小時，用小時，用1-2%1-2%四四氧化鋨固定氧化鋨固定2-32-3小時。小時。 （三脫水（三脫水 常用的脫水方法是逐級脫水，即采用的脫水劑濃度梯常用的脫水方法是逐級脫水，即采用的脫水劑濃度梯度為度為30%50%70%80%90%95%100%30%50%70%80%90%95%100%（100% 100% 濃度濃度中換中換3 3次），常用的脫水劑為乙醇或丙酮。每一級脫水劑次），常用的脫水劑為乙醇或丙酮。每一級脫水劑中停留時

24、間為中停留時間為10-20min10-20min，脫水劑用量一般為樣品體積的，脫水劑用量一般為樣品體積的1010倍以上。倍以上。（四滲透與包埋（四滲透與包埋 將脫完水的組織先后經(jīng)過脫水劑和環(huán)氧樹脂滲透液將脫完水的組織先后經(jīng)過脫水劑和環(huán)氧樹脂滲透液是常用的包埋劑，目前常用的型號為是常用的包埋劑，目前常用的型號為Epon812Epon812），比例），比例分別為分別為3 3：1111：1111：3 3，每步，每步30-60min30-60min。將滲透好的。將滲透好的樣品塊放到適當(dāng)模具中，灌上包埋液包埋，經(jīng)過加溫聚樣品塊放到適當(dāng)模具中，灌上包埋液包埋，經(jīng)過加溫聚合形成一種固體基質(zhì)也叫包埋塊），已備

25、切片。合形成一種固體基質(zhì)也叫包埋塊），已備切片。（六超薄切片（六超薄切片 標(biāo)準(zhǔn)的超薄切片應(yīng)該是厚度適中、均勻、平整、無刀痕、標(biāo)準(zhǔn)的超薄切片應(yīng)該是厚度適中、均勻、平整、無刀痕、無顫紋和皺褶?；静襟E為：準(zhǔn)備切片刀和銅網(wǎng)無顫紋和皺褶?；静襟E為：準(zhǔn)備切片刀和銅網(wǎng)修整包修整包埋塊埋塊切片切片撈片。撈片。 銅網(wǎng)準(zhǔn)備：超薄切片要放在載網(wǎng)上才能進行染色等操作，銅網(wǎng)準(zhǔn)備：超薄切片要放在載網(wǎng)上才能進行染色等操作，并最終放到電鏡中觀察。載網(wǎng)是用無磁性金屬材料做成的，并最終放到電鏡中觀察。載網(wǎng)是用無磁性金屬材料做成的，厚厚5050微米，直徑一般為微米，直徑一般為3mm3mm，一般用銅材料，所以又叫銅網(wǎng)。，一般用銅

26、材料，所以又叫銅網(wǎng)。銅網(wǎng)要經(jīng)過清洗，方可使用。目前清洗方法主要有：超聲銅網(wǎng)要經(jīng)過清洗，方可使用。目前清洗方法主要有：超聲波清洗法、酸堿清洗法。波清洗法、酸堿清洗法。 支持膜的準(zhǔn)備：銅網(wǎng)的網(wǎng)孔很小，但對于放置超薄切片支持膜的準(zhǔn)備：銅網(wǎng)的網(wǎng)孔很小，但對于放置超薄切片及其他樣品來說，網(wǎng)孔還嫌大，不足以平坦地支持切片，及其他樣品來說，網(wǎng)孔還嫌大，不足以平坦地支持切片，所以要在銅網(wǎng)上覆一層透明的膜所以要在銅網(wǎng)上覆一層透明的膜支持膜。支持膜。 切片刀準(zhǔn)備：超薄切片刀有兩種，一是金剛刀，二是玻璃刀。前者價格昂切片刀準(zhǔn)備：超薄切片刀有兩種，一是金剛刀，二是玻璃刀。前者價格昂貴、質(zhì)地堅硬、經(jīng)久耐用；后者制作方便、價格低廉、但刀刃較脆、不耐用、貴、質(zhì)地堅硬、經(jīng)久耐用；后者制作方便、價格低廉、但刀刃較脆、不耐用、不能切硬質(zhì)材