HLC操作須知饅頭版ppt課件

1、高效液相色譜儀操作須知目 錄v1 儀器安裝條件及注意事項(xiàng)儀器安裝條件及注意事項(xiàng)v2 操作使用注意事項(xiàng)操作使用注意事項(xiàng)v2.1 流動相使用的注意事項(xiàng)流動相使用的注意事項(xiàng)v2.2 流動相的更換流動相的更換v2.3 儲液器的注意事項(xiàng)儲液器的注意事項(xiàng)v2.4 管路連接的注意事項(xiàng)管路連接的注意事項(xiàng)v2.5 基本操作注意事項(xiàng)基本操作注意事項(xiàng)v3 各單元日常維護(hù)各單元日常維護(hù)v3.1 色譜柱的保養(yǎng)事項(xiàng)色譜柱的保養(yǎng)事項(xiàng)v3.2 手動進(jìn)樣閥的維護(hù)注意事項(xiàng)手動進(jìn)樣閥的維護(hù)注意事項(xiàng)v3.3 高壓恒流泵的維護(hù)注意事項(xiàng)高壓恒流泵的維護(hù)注意事項(xiàng)v3.4 紫外檢測器的維護(hù)注意事項(xiàng)紫外檢測器的維護(hù)注意事項(xiàng) 1、儀器安裝條件及

2、注意事項(xiàng)、儀器安裝條件及注意事項(xiàng)v1) 安裝本儀器的實(shí)驗(yàn)臺應(yīng)水平，穩(wěn)定，并具有足夠的放置空間；v2) 避免在具有腐蝕性氣體、大量灰塵或能產(chǎn)生強(qiáng)磁場的地方安裝本儀器，否則將會影響儀器的正常運(yùn)轉(zhuǎn)并且縮短儀器使用壽命；v3) 由于儀器所用溶劑是易燃并有毒，故安裝設(shè)備的房間應(yīng)徹底通風(fēng)，且具有向外排風(fēng)的裝置，否則會引起中毒或身體不適，也會引起火災(zāi)；v4) 應(yīng)安裝四個(gè)以上三芯電源插座220V, 510A）,必須具有專門的接地線留意，絕不能將電源線的中線作為接地線），并確保儀器電源的電壓穩(wěn)定，否則會導(dǎo)致儀器的不正常運(yùn)作；v5) 如果實(shí)驗(yàn)室無專用的接地線，一般可用1520mm的銅棒打入地下 11.5米，用1.

3、2mm左右的塑膠單股導(dǎo)線連接到電源插座的接地端。v6) 如實(shí)驗(yàn)室電壓不穩(wěn)，應(yīng)使用穩(wěn)壓器等必要設(shè)備，使電源電壓穩(wěn)定。v7) 實(shí)驗(yàn)室的室溫盡可能控制在15-30范圍內(nèi)，并且波動要小；濕度在45%-85%范圍內(nèi)；v8) 空調(diào)或其他設(shè)備產(chǎn)生的氣流不要直吹儀器，避免光線直射及振動；v9) 儀器啟動順序：先開高壓恒流泵和紫外檢測器，待紫外檢測器自檢完畢，回到默認(rèn)波長254nm后，打開工作站軟件；v10) 儀器關(guān)閉順序：先按泵停止，關(guān)閉氘燈，退出工作站軟件，然后再關(guān)儀器。v11) 儀器應(yīng)由專人負(fù)責(zé)，如果使用人員不固定，請準(zhǔn)備7時(shí)用大粒度同種填料作預(yù)柱；溶劑的化學(xué)腐蝕不能太強(qiáng)；要避免微粒在柱頭沉降；v為防止高

4、壓沖擊，泵上的壓力限制不宜太高，一般在1520MPa為宜，在舊柱或梯度洗脫時(shí)應(yīng)稍高些，以避免因上限設(shè)置過低而造成正常使用中的中途停機(jī)；色譜柱長時(shí)間不用，存放時(shí)，柱內(nèi)應(yīng)充滿溶劑甲醇或乙腈），兩端封死。3.2 手動進(jìn)樣閥的維護(hù)注意事項(xiàng)手動進(jìn)樣閥的維護(hù)注意事項(xiàng)v在每次使用后，必須沖洗進(jìn)樣閥。進(jìn)濃度差異比較大的樣品時(shí)要用專用工具不是帶針頭的注射器）。必須反復(fù)沖洗進(jìn)樣閥的取樣位和進(jìn)樣位各數(shù)次，每次數(shù)毫升，以防止無機(jī)鹽沉積、樣品微粒造成閥內(nèi)部磨損或阻塞及樣品的交叉污染。v安裝進(jìn)樣閥時(shí)，閥的5，6出口要與注射器在同一水平線上，以防止發(fā)生虹吸現(xiàn)象，導(dǎo)致進(jìn)樣量的重復(fù)性變異。v進(jìn)樣量的多少要根據(jù)定量環(huán)的體積決定：

5、v當(dāng)樣品量較少時(shí)：進(jìn)樣體積由注射器的進(jìn)樣體積決定，但最大體積要小于環(huán)體積的3/4。v當(dāng)樣品量較多時(shí)：進(jìn)樣體積由定量環(huán)的體積決定，為保證樣品完全把定量環(huán)內(nèi)的流動相置換干凈，進(jìn)樣量應(yīng)為環(huán)體積的35倍。v進(jìn)樣時(shí)必須使用專用的液相注射器。絕對禁止用氣相注射器尖針頭進(jìn)樣。注射器前應(yīng)裝置專用的樣品過濾器。3.3 高壓恒流泵的維護(hù)注意事項(xiàng)高壓恒流泵的維護(hù)注意事項(xiàng)v泵的密封圈是最易磨損的部件，密封圈的損壞可引起系統(tǒng)的許多故障。密封圈的壽命與材料質(zhì)量、使用壓力大小、緩沖液的使用情況以及合理的保養(yǎng)有關(guān)。采取下列措施可以延長密封圈的壽命：vA、在沒有流動相或流動相還沒進(jìn)入泵頭的情況下，絕對不能啟動泵，防止造成柱塞桿

6、與密封圈的干磨；vB、每次使用完畢后應(yīng)將整個(gè)系統(tǒng)液路中的緩沖液沖洗干凈，防止鹽沉積，整個(gè)液路應(yīng)浸泡在無緩沖液的溶液或有機(jī)溶劑中；長期不使用也應(yīng)定期開泵沖洗整個(gè)液路；vC、用HPLC級的試劑；vD、使用不銹鋼濾芯，要注意防止因泵阻塞造成壓力過高而損壞柱塞桿或燒壞電機(jī)；vE、壓力下限應(yīng)設(shè)置在0.51MPa,以防止儲液器中的流動相被抽干或嚴(yán)重滲漏而引起柱塞桿與密封圈干磨；vF、有柱后清洗功能的高壓恒流泵還要注意保留清洗液，否則將失去柱后清洗效果。 3.4 泵的壓力不穩(wěn)定泵的壓力不穩(wěn)定v 處于良好操作狀態(tài)的泵，應(yīng)該能使色譜圖上的基線平穩(wěn)；保留時(shí)間的重復(fù)性好。在等度洗脫時(shí)壓力波動小于2%。梯度洗脫時(shí)壓力

7、變化應(yīng)是緩慢和平穩(wěn)的。v 在日常使用過程中，若出現(xiàn)壓力不穩(wěn)的現(xiàn)象。原因有幾點(diǎn)：v1) 管路里有氣泡，建議由流動相多走些時(shí)間?；虼蜷_排空閥，用配件里的針筒多抽幾下。還有就是關(guān)緊排空閥，堵住檢測器上的背壓管，使流通池的壓力增加，趕出氣泡。v2) 輸入單向閥失效所致，這也是經(jīng)常遇見的。v3) 密封圈磨損導(dǎo)致泄漏所造成。v判斷輸入單向閥失效的步驟為：v1） 在不開UV檢測器與工作站的前提下，將其中一臺泵接上蒸餾水作為流動相。v2） 打開排空閥，用針筒抽出些流動相，確認(rèn)泵中已有該流動相，然后將針筒內(nèi)的液體排出，并重新接在排空閥上。v3） 按“設(shè)置鍵選擇：流量5ml/min，時(shí)間5min留意：此時(shí)排空閥仍

8、要打開，否則將沖壞色譜柱）v4） 沖洗完畢后，查看針筒內(nèi)流動相體積是否為25ml55=25），若正確，則說明該泵在低壓情況下無故障；若不正確，則說明該泵中某一單向閥失效一般為輸入單向閥）。v5） 用同樣方法測試另外一泵v6如果是雙泵梯度分析系統(tǒng)，泵壓力不穩(wěn)一般是其中一臺泵壓力不穩(wěn)所致，須逐個(gè)分析。等度只要測試一臺就可以了。造成單向閥失效原因：造成單向閥失效原因：1液相色譜從成品到客戶手中有一段時(shí)間，出廠前液相色譜從成品到客戶手中有一段時(shí)間，出廠前每臺儀器都要經(jīng)過調(diào)試，一段時(shí)間內(nèi)不用會造成內(nèi)每臺儀器都要經(jīng)過調(diào)試，一段時(shí)間內(nèi)不用會造成內(nèi)部殘留流動相與寶石球粘連的情況?？蛻糸L期不用部殘留流動相與寶石

9、球粘連的情況。客戶長期不用也會造成類似情況，建議客戶在長期不使用情況下，也會造成類似情況，建議客戶在長期不使用情況下，每周用甲醇作為流動相，開機(jī)每周用甲醇作為流動相，開機(jī)1小時(shí)使液路充滿液小時(shí)使液路充滿液體。體。2流動相內(nèi)雜質(zhì)或其它原因污染了單向閥。雖然有流動相內(nèi)雜質(zhì)或其它原因污染了單向閥。雖然有的客戶認(rèn)為流動相已過濾過了，但長期使用后，由的客戶認(rèn)為流動相已過濾過了，但長期使用后，由于液相色譜是微量分析儀器，難免會產(chǎn)生類似情況。于液相色譜是微量分析儀器，難免會產(chǎn)生類似情況。這是液相色譜的普遍現(xiàn)象，國內(nèi)外的泵只要是被動這是液相色譜的普遍現(xiàn)象，國內(nèi)外的泵只要是被動單向閥，都會有類似現(xiàn)象發(fā)生，這并不

10、是儀器的質(zhì)單向閥，都會有類似現(xiàn)象發(fā)生，這并不是儀器的質(zhì)量問題，而是日常維護(hù)的一部分?，F(xiàn)在介紹一個(gè)簡量問題，而是日常維護(hù)的一部分?，F(xiàn)在介紹一個(gè)簡單而有效的單向閥失效的處理辦法。單而有效的單向閥失效的處理辦法。單向閥失效處理方法：1） 擰下輸入單向閥一共兩個(gè)）2） 將2個(gè)單向閥放入有蒸餾水的超聲波清洗器，清洗10分鐘。3） 用本公司提供的專用針頭沖一下將針頭擰緊在單向閥輸入端即可，見配件清單）。沖的時(shí)候注意要用手按住單向閥前頭的墊圈，防止沖時(shí)墊圈被沖落。4） 完畢后，將輸入單向閥裝回原位即可。（注意單向閥須擰緊）若兩個(gè)泵在低壓狀態(tài)下流量都正確，則建議分別將兩泵連接上色譜柱進(jìn)行高壓測試。高壓測試具體

11、操作方法：1） 在雙泵分析系統(tǒng)連接的前提下，只須先打開其中一泵確認(rèn)接好流動相）2） 設(shè)置流量1ml/min3） 啟動泵4） 觀察運(yùn)行期間，泵的壓力是否穩(wěn)定。若穩(wěn)定，說明泵無問題；若泵壓力不穩(wěn)，則應(yīng)檢查各管路接頭有無泄露，并將有泄漏的接頭擰緊；若無泄漏，則問題可能還是出在單向閥上，須再次沖單向閥，反復(fù)試驗(yàn)。（注：不必打開UV檢測器）5） 重復(fù)上述步驟，對另一臺泵進(jìn)行高壓測試。如還出現(xiàn)壓力不穩(wěn)的情況，有可能是密封圈受損，建議更換。v預(yù)防泵故障的幾項(xiàng)措施:v 1）、用高質(zhì)量試劑和HPLC級溶劑； 2）、過濾流動相和溶劑； 3）、脫氣； 4）、每天開始使用時(shí)放空排氣；v 5）、工作結(jié)束后從泵中洗去緩沖液； 6）、不讓水或腐蝕性溶劑滯留泵中； 7）、定期更換墊圈； 8）、需要時(shí)加潤滑油； 9）、查閱有關(guān)泵操作手冊中的其它建議。 10）、為了能盡快排除故障，平時(shí)應(yīng)常備密封圈、單向閥輸入與輸出）、泵頭裝置、各式接頭、保險(xiǎn)絲等零部件及更換工具。3.4 紫外檢測器的維護(hù)注意事項(xiàng)紫外檢測器的維護(hù)注意事項(xiàng)v要保持檢測器中流通池清潔，每天用后注意沖洗整個(gè)液路。要定期用強(qiáng)溶劑反向沖洗檢測池