EMA-關(guān)于基因毒性雜質(zhì)限度指南的問(wèn)答(中文)

1、EMA關(guān)于基因毒性雜質(zhì)限度指南的問(wèn)答2010-9-23背景:本問(wèn)答文件的目的是對(duì)2006年出版的基因毒性雜質(zhì)限度指南（EMEA/CHMP/QWP/251344/2006）進(jìn)行相關(guān)內(nèi)容統(tǒng)一和說(shuō)明。問(wèn)答Q1：該指引并不要求對(duì)已批準(zhǔn)銷售的產(chǎn)品進(jìn)行基因毒性雜質(zhì)再評(píng)估，除非有一個(gè)特定的“重要原因”（cause-for-concern）。請(qǐng)問(wèn)什么是“重要原因”？ A1：如果原料藥的生產(chǎn)過(guò)程基本上沒(méi)有改變，就不需要對(duì)基因毒性雜質(zhì)進(jìn)行重新評(píng)價(jià)。但是，如果新知識(shí)表明有新原因時(shí)，例如幾年前發(fā)現(xiàn)的甲磺酸鹽藥物可能形成甲磺酸烷基的基因毒性雜質(zhì)，這需要進(jìn)行基因毒性雜質(zhì)的再評(píng)估，包括EP藥典中收載的所有甲磺酸鹽

2、類產(chǎn)品，并出示“生產(chǎn)聲明”。Q2：該指引指出：即使按決策樹程序其水平低于毒理學(xué)關(guān)注閾值(threshold of toxicological concern,TTC)，也要盡可能地減少已知或未知的誘變雜質(zhì)（mutagenic impurity）。如果已知其誘變雜質(zhì)的水平低于TTC（TTC是一個(gè)非常保守的值），為什么要還進(jìn)一步減少呢？實(shí)際上這還涉及定量限在1ppm左右的分析方法，可以這樣做但可能沒(méi)結(jié)果，這是否有必要呢？A2：如果一個(gè)誘變雜質(zhì)的水平低于毒理學(xué)關(guān)注閾值（相當(dāng)于臨床劑量1.5微克/天），就沒(méi)有必要這樣做。除非它具有一個(gè)高度關(guān)注的風(fēng)險(xiǎn)結(jié)構(gòu)：如N -亞硝基，黃曲霉毒素類和氧化偶氮物就需要這

3、樣做。Q3：該指引規(guī)定：“當(dāng)一個(gè)潛在的雜質(zhì)包含“警示結(jié)構(gòu)”（structural alerts）時(shí)，應(yīng)考慮用細(xì)菌突變?cè)囼?yàn)對(duì)其雜質(zhì)進(jìn)行的基因毒性分析”。 i）如果一個(gè)雜質(zhì)能誘發(fā)“警示結(jié)構(gòu)”，該雜質(zhì)的致突變?cè)囼?yàn)（Ames）結(jié)果為陰性時(shí)，是否就足以得出結(jié)論：該化合物不屬于關(guān)注的遺傳毒性雜質(zhì)？是否還需要進(jìn)一步的確認(rèn)研究？ ii）“警示結(jié)構(gòu)”不存在就足以說(shuō)明不屬于關(guān)注雜質(zhì)呢？ iii）假設(shè)某雜質(zhì)屬于“警報(bào)結(jié)構(gòu)”，但只要加以控制確保其雜質(zhì)水平低于TTC，不進(jìn)行常規(guī)檢測(cè)是否可以接受？A3回答：i）是的。只要按Q3A/B的要求做Ames試驗(yàn)顯示陰性時(shí)，即可認(rèn)定該雜質(zhì)不屬于“警報(bào)結(jié)構(gòu)”，就不需要進(jìn)一步確認(rèn)研究。

4、ii）是的。通過(guò)仔細(xì)評(píng)估，如果“警報(bào)結(jié)構(gòu)”不存在，即可認(rèn)定“關(guān)注雜質(zhì)”（concern impurity）不存在。通常這種評(píng)估常用構(gòu)效關(guān)系的評(píng)估軟件，如DEREK或MCASE軟件。iii）是的。當(dāng)一個(gè)潛在的基因毒性雜質(zhì)水平控制在TTC的水平時(shí)，就不強(qiáng)制要求進(jìn)行基因毒性的常規(guī)檢測(cè)，除非它具有非常強(qiáng)的基因毒性物質(zhì)類（N -亞硝基化合物及偶氮化合物或黃曲霉毒類化合物）。Q4：什么是限定新雜質(zhì)出現(xiàn)的適當(dāng)戰(zhàn)略（在三期臨床階段或商業(yè)批生產(chǎn)階段）？，例如，下列戰(zhàn)略是否可以接受？當(dāng)發(fā)現(xiàn)一個(gè)新未知雜質(zhì)在0.05-0.09的范圍就不需采取行動(dòng)，在0.10至0.15范圍，即使它會(huì)誘導(dǎo)出“警示結(jié)構(gòu)”，只要對(duì)含有這種雜

5、質(zhì)的成分進(jìn)行Ames試驗(yàn)即可？A4：出現(xiàn)新的低于鑒別閾值（identification threshold）的未知雜質(zhì)時(shí)，ICH指南沒(méi)有要求有任何行動(dòng)；但是當(dāng)高于鑒別閾值，低于確認(rèn)閾（qualification threshold）并且可能成為“警示結(jié)構(gòu)”時(shí)，并且該原料藥中含該雜質(zhì)的最小濃度為250g/板（Ames方法的評(píng)估檢測(cè)線，詳見(jiàn)Kenyon et等,Reg Tox & Pharm, 2007, 75-86），就需要對(duì)含有這種雜質(zhì)的活性成分進(jìn)行Ames實(shí)驗(yàn)并成陰性。Q5：該指引指出，“毒理學(xué)關(guān)注閾（TTC）值高于1.5微克/天，在一定條件下是可以接受的，例如短期接觸.”，階段性T

6、TC與臨床接觸的持續(xù)時(shí)間有關(guān)，例如抗生素。如果是這樣的話，什么是短期接觸的可接受水平？A5：高于1.5 g /天微克以上的基因毒性雜質(zhì)的要逐案處理。對(duì)于短期治療，更高水平的接受能力原則見(jiàn)問(wèn)題6的回答。Q6：該指引的措辭意味著它覆蓋了ICH Q3A沒(méi)有涉及的問(wèn)題。ICH指南范圍不包括NDA前的臨床申請(qǐng)（或備忘錄）。然而，實(shí)踐表明，臨床研發(fā)階段涉及的基因毒性指南同樣適合于注冊(cè)法規(guī)要求。在研發(fā)階段如何控制基因毒性雜質(zhì)呢？A6：根據(jù)該指南的范圍，它主要適用于“新的活性物質(zhì)”中的基因毒性雜質(zhì)，包括臨床申請(qǐng)和備忘錄中提到的新活性物質(zhì)和臨床試驗(yàn)申請(qǐng)中提到的新活性物質(zhì)。事實(shí)上，臨床試驗(yàn)的化學(xué)品和藥品質(zhì)量文件要

7、求指（CHMP/QWP/185401/2004）已經(jīng)對(duì)IMP中的雜質(zhì)對(duì)志愿者和患者的安全性提出過(guò)要求。要基于安全和毒性數(shù)據(jù)提供雜質(zhì)的規(guī)格與接受標(biāo)準(zhǔn)。CHMP認(rèn)可在臨床研發(fā)階段采用TTC分段概念。在臨床研發(fā)時(shí)段，短期的TTC應(yīng)符合下列要求。允許的日吸入量與接觸時(shí)間關(guān)系見(jiàn)下表。下面這些值都是考慮了單次校正因子為2后通過(guò)線性外推的模式來(lái)計(jì)算偏差得來(lái)的。接觸時(shí)間單劑量1個(gè)月3個(gè)月6個(gè)月12個(gè)月允許的日吸入量120g60g20g10g5gQ7：按指引條款要求，意味著1.5微克/天的TTC值可適用于每一個(gè)原料藥中的基因毒性雜質(zhì)，請(qǐng)問(wèn)這樣的理解是否確切？A7：在原料藥中存在一個(gè)以上的基因毒性雜質(zhì)時(shí)，1.5微

8、克/天TTC值對(duì)每一個(gè)結(jié)構(gòu)不相關(guān)的雜質(zhì)是適用的。在結(jié)構(gòu)相似的情況下，基因毒性雜質(zhì)的作用模式一致，并具有相同的分子靶向，在這種情況下，建議基因毒性雜質(zhì)的總和為1.5微克/天。這可能不符合實(shí)際，特別是最大日劑量很高而且又要求按低限要求申報(bào)時(shí)。此時(shí)應(yīng)根據(jù)下列因素逐案考慮：原料藥的每日最高劑量；治療適應(yīng)癥;產(chǎn)生基因毒性雜質(zhì)的合成步驟；消除這些雜質(zhì)生產(chǎn)純化能力；控制這些雜質(zhì)的分析方法能力。在這種情況下將這種檢測(cè)方法能力強(qiáng)的分析方法作為常規(guī)檢測(cè)將是困難的，人們可以在開發(fā)過(guò)程或首次商業(yè)批生產(chǎn)中考慮使用這種分析方法，以充分證明其實(shí)際值低于TTC值。在這種情況下，使用風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估的方法，定期檢測(cè)而不是常規(guī)檢測(cè)是可以

9、接受的。 Q8.：2008年3月歐洲藥典委員會(huì)對(duì)具有潛在基因毒性雜質(zhì)頒發(fā)過(guò)一個(gè)政策。這項(xiàng)政策將在制定和修訂藥典中得到應(yīng)用。它提供了非常務(wù)實(shí)的一個(gè)政策來(lái)指導(dǎo)如何處理現(xiàn)行藥典中收載的活性物質(zhì)中存在的潛在基因毒性雜質(zhì)。這些政策是否適用于沒(méi)有收載到藥典中的API嗎？ A8：是的。在這個(gè)指南執(zhí)行前已批準(zhǔn)的API是適用的。在注冊(cè)申報(bào)文件中應(yīng)遞交相關(guān)的規(guī)格要求。只有當(dāng)研究數(shù)據(jù)表明存在遺傳毒性雜質(zhì)時(shí)才需要采取行動(dòng)，僅存在“警示結(jié)構(gòu)”時(shí)不足以引發(fā)的后續(xù)措施，除非在出現(xiàn)一個(gè)高度關(guān)注的風(fēng)險(xiǎn)結(jié)構(gòu)，例如：N -亞硝基，黃曲霉毒素類和氧化偶氮化合物。如果似使用新的合成路線，該合成路線可能引起潛在基因遺傳毒性雜質(zhì)出現(xiàn)或先前

10、確認(rèn)的潛在基因毒性雜質(zhì)水平提高，這種情況應(yīng)與主管機(jī)關(guān)進(jìn)行討論。Q9：在原料藥生產(chǎn)過(guò)程中，對(duì)于理論推測(cè)存在或?qū)嶋H存在的潛在基因毒性雜質(zhì)質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的設(shè)定依據(jù)是什么？A9回答：各種不同情形時(shí)的潛在基因毒性雜質(zhì)質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)可以依據(jù)下面的情況來(lái)進(jìn)行設(shè)定：例1：一個(gè)潛在基因毒性雜質(zhì)潛在基因毒性雜質(zhì)的定義是基于“潛在雜質(zhì)”的定義得來(lái)的。潛在雜質(zhì)是指按照理論推測(cè)在生產(chǎn)或儲(chǔ)存過(guò)程中可能產(chǎn)生的雜質(zhì)。它可能在(新)原料藥中存在，也可能不存在（ICH Q3A，術(shù)語(yǔ)）。 如果一個(gè)潛在基因毒性雜質(zhì)僅僅是理論上推測(cè)存在，也就是說(shuō)基于理論推測(cè)存在但生產(chǎn)中并未實(shí)際檢測(cè)到（由生產(chǎn)工藝開發(fā)階段的研究證實(shí)），則不需要將其列入到原料藥的質(zhì)量

11、標(biāo)準(zhǔn)中。例2：合成最后一步前，實(shí)際生成或引入了一個(gè)（潛在）基因毒性雜質(zhì)如果在最后一步合成前，實(shí)際生成或引入了一個(gè)（潛在）基因毒性雜質(zhì)，可以不將其納入原料藥質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)中，但是必須保證該雜質(zhì)在合成中間體中有合理的控制限度并且在原料藥檢測(cè)結(jié)果中明確其含量不超過(guò)來(lái)源于TTC或其他認(rèn)可標(biāo)準(zhǔn)的30%（推薦使用標(biāo)準(zhǔn)加入法檢測(cè)原料藥）。但是如果不能滿足這些要求，就必須在原料藥質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)中進(jìn)行日常檢測(cè)。如果一個(gè)基因毒性雜質(zhì)不可在中間階段控制，那么適用例3情況。例3：最后一步合成中，實(shí)際生成或引入了一個(gè)（潛在）基因毒性雜質(zhì)如果在最后一步合成中實(shí)際生成或引入了一個(gè)（潛在）基因毒性雜質(zhì)，必須在原料藥質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)中控制該雜質(zhì)。如果在原料藥中該雜質(zhì)的含量不超過(guò)TTC或其他認(rèn)可標(biāo)準(zhǔn)的30%，可實(shí)行定期檢測(cè)。至少要提交6批中試批或3批大生產(chǎn)的數(shù)據(jù)。如果不能滿足這個(gè)要求，就必須在原料藥質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)中進(jìn)行日常檢測(cè)。以下為文件中涉及的定義基因毒性雜質(zhì)：某種雜質(zhì)在適當(dāng)?shù)幕蚨拘栽囼?yàn)?zāi)Ｊ街斜硎緸榛蚨拘裕缂?xì)菌基因誘變（Ames）試驗(yàn)潛在基因毒性雜質(zhì)：某種雜質(zhì)其結(jié)構(gòu)警示可能具有基因毒性，但未經(jīng)過(guò)試驗(yàn)測(cè)試模式。這里潛在意指可能具有基因毒性，而不是指雜質(zhì)的存在與否