回心草總黃酮清除羥基自由基活性研究

1、CEREALSANDOILSPROCESSING食品工程·技術(shù)回心草總黃酮清除羥基自由基活性研究李超李姣姣（徐州工程學(xué)院食品工程學(xué)院）【摘要】以回心草為原料，以60%的乙醇水溶液為提取劑，得到回心草提取液，其中回心草總黃酮提取率為0.166%。向Fenton反應(yīng)體系中加入回心草提取液，可以有效地清除體系中的羥基自由基(·OH)。清除·OH的效果隨著提取液加入量的增加而增大，當總黃酮濃度19.89g/mL時，清除效果最佳達68.00%。【關(guān)鍵詞】回心草；總黃酮；清除自由基中圖分類號：TS2023文獻標識碼：A文章編號：1673-7199(2010)08-0163-0

2、3儀器有限公司?；匦牟萦置柌荩瑸檎嫣\科植物大葉蘚及南大葉蘚的干燥或新鮮全草。為傳統(tǒng)民間習(xí)用藥，常單用或與大棗、冰糖或胡椒共豬心同用，治療冠心病、心絞痛、心肌炎等。本試驗以回心草為原料，以60%的乙醇水溶液為提取劑，通過提取、過濾、定容得到回心草提取液。通過向產(chǎn)生羥基自由基的化學(xué)反應(yīng)體系中加入回心草提取液，清除反應(yīng)中產(chǎn)生的自由基，從而闡明回心草中總黃酮清除羥基自由基的作用和抗衰老的功能。1.3方法按文獻4方法稍加修改：精密稱取蘆丁20mg置于1.3.1標準曲線的建立250mL容量瓶中，加60%乙醇稀釋至刻度，搖勻，配成0.08mg/mL的對照品儲備液。精密量取對照品儲備液0、1.0、2.0、

3、3.0、4.0、5.0mL，分別置于10mL具塞刻度試管中，先依次分別加60%乙醇5.0、4.0、3.0、2.0、1.0、0mL，再加入0.3mL5%NaNO2搖勻后靜止6min，再加入0.3mL10%Al(NO3)3搖勻后靜止6min，最后加入4mL1mol/LNaOH后用60%乙醇定容至刻度，搖勻后靜止10min，于波長510nm處測定吸光度。以蘆丁濃度為橫坐標，吸光度值為縱坐標，得回歸方程：1.1材料與方法原料及主要試劑回心草，安徽亳州藥材市場；蘆丁對照品，中國藥品生物制品檢定所；乙醇，NaNO2，Al(NO3)3，NaOH等皆為分析純。A=11.688C0.0301，R20.9990，

4、結(jié)果表明在0.0080.040mg/mL之間線性良好。1.3.2回心草總黃酮樣品溶液制備精確稱取3g過40目的回心草粉末置于燒杯中，加人36mL60%乙醇后，按照超聲時間5min、超聲功率1.2儀器與設(shè)備風(fēng)選中藥粉碎機，山東省青州市精誠機械制造有限公司；SENCOR201L旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器，上海申生科技有限公司；KBS-250型數(shù)控超聲波細胞粉碎機，昆山市超聲儀器有限公司；SHZD()循環(huán)水式真空泵，鞏義市英峪予華儀器廠；XMT-152電熱恒溫干燥箱，上海躍進醫(yī)療器械廠；HH-4型電熱恒溫水浴鍋，上海梅向醫(yī)療器械廠；FA2104N電子分析天平，上海精密科學(xué)儀器有限公司；756紫外可見分光光度計，上海

5、成光75W和占空比3s/5s設(shè)置好超聲處理程序后，開動超聲制樣，然后將提取液過濾，定容，測定。1.3.3回心草總黃酮清除羥基自由基的試驗測定1.3.3.1清除羥基自由基的試驗原理根據(jù)Fenton方法產(chǎn)生·OH自由基的模型，H2O2與亞鐵離子反應(yīng)生成·OH自由基，該反應(yīng)為：163技術(shù)·食品工程CEREALSANDOILSPROCESSINGH2O2+Fe2+OH-+·OH+Fe3+自由基一般存活時間比較短而且具有較高活性的特點，而水楊酸能有效地捕捉羥基自由基且產(chǎn)生有色產(chǎn)物，因此，若在該體系加入一定量的水楊酸，將發(fā)生如下反應(yīng)：生成的有色產(chǎn)物在510nm處被較

6、強地吸收。這樣，我們可以在一定反應(yīng)時間后，測定吸光度值(此值可作為A0值)。若在該體系中再加入黃酮類化合物，由于黃酮類化合物具有清除羥基自由基的特點，從而降低甚至完全清除羥基自由基，而使有色物質(zhì)的濃度極大降低。在此條件下測定體系的吸光度值(此值可作為清除一定量的羥基自由基的A值)，則即可用來測定黃酮類化合物對羥基自由基的清除效率。其清除效率可根據(jù)下式進行計算：清除率1（AxAx0）×100式中，A0為空白對照液吸光度，即只加入硫酸亞鐵、水楊酸-乙醇、雙氧水，不加提取液的吸光度；AX為加入硫酸亞鐵、水楊酸-乙醇、雙氧水、加入相同體積的提取液后的吸光度；Ax0為加入硫酸亞鐵、水楊酸-乙醇

7、、加入相同體積的提取液，不加雙氧水引發(fā)反應(yīng)的吸光度，即本底吸光度，在計算中予以扣除。1.3.3.2A0值的測定(以純水為參比)在25mL的比色管中依次移取2mL2mmol/L硫酸亞鐵溶液和2mL的6mmol/L雙氧水溶液，混合均勻后用6mmol/L水楊酸的乙醇溶液定溶至刻度。在3637的恒溫水中反應(yīng)15min后在分光光度計上測其A值。此值即為A0值。1.3.3.3Ax值的測定(以純水為參比)在25mL的比色管中依次移取2mL2mmol/L硫酸亞鐵溶液和2mL的6mmol/L雙氧水溶液，加入5mL不同濃度的提取液，混合均勻后用6mmol/L水楊酸的乙醇溶液定溶至刻度。在3637的恒溫水中反應(yīng)15

8、min后在分光光度計上測其A值。此值即為Ax值。1.3.3.4Ax0值的測定(以純水為參比)在25mL的比色管中依次移取2mL2mmol/L硫酸亞鐵溶液和2mL的雙蒸水，加入5mL不同濃度的提取164液，混合均勻后用6mmol/L水楊酸的乙醇溶液定溶至刻度。在3637的恒溫水中反應(yīng)15min后在分光光度計上測其A值。此值即為Ax0值。結(jié)果與分析2.1標準曲線與回歸方程根據(jù)試驗所得標準曲線回歸方程為：A=11.688C0.0301式中：A為吸光度；C為濃度，mg/mL。標準曲線如圖1圖1標準曲線計算樣品液濃度，結(jié)果如下：在510nm下測得回心草總黃酮提取液的吸光度A=0.091，根據(jù)上述公式計算

9、得到：C=99.5g/mL。2.2總黃酮的提取表1總黃酮提取效果樣品1樣品2樣品3平均值提取率（）01650169016401662.3對羥基自由基抑制作用的效果分別取回心草總黃酮提取液1、2、4、6、8、10mL放入10mL容量瓶中，稀釋至刻度，然后再從此溶液中取5mL在25mL試管中反應(yīng)，作為不同濃度的回心草總黃酮的樣品液，分別標示為16樣品。根據(jù)羥基清除率公式計算清除率，其結(jié)果見表2，回心草總黃酮濃度與清除率關(guān)系如圖2所示。表2總黃酮對羥基自由基清除率樣品號總黃酮濃度（gmL）A0AxAx0清除率（）濃度1199015014800211533濃度2398015014100232133濃度

10、3796015012800233000濃度41194015011900414800濃度51591015011500515733濃度61989015010600586800CEREALSANDOILSPROCESSING食品工程·技術(shù)禽蛋清洗的現(xiàn)狀與分析程相法阮競蘭王宗才（河南工業(yè)大學(xué)機電工程學(xué)院）【摘要】本文綜述了我國禽蛋業(yè)發(fā)展現(xiàn)狀，指出了禽蛋清洗生產(chǎn)的重要性，并對禽蛋清洗設(shè)備的國內(nèi)外現(xiàn)狀進行了討論?！娟P(guān)鍵詞】禽蛋；現(xiàn)狀；潔蛋；設(shè)備中圖分類號：TS2534文獻標識碼：A文章編號：1673-7199(2010)08-0165-03義。禽蛋生產(chǎn)在我國已有多年的歷史，我國是世界上最重要的禽

11、蛋生產(chǎn)和消費大國，從1985年至今，禽蛋產(chǎn)量已連續(xù)18年雄居世界第一位。特別在改革開放后，中國禽蛋生產(chǎn)實現(xiàn)跳躍式發(fā)展，養(yǎng)禽業(yè)連續(xù)20多年持續(xù)穩(wěn)步增長，禽蛋產(chǎn)量一直位居世界首位，并形1我國禽蛋業(yè)的發(fā)展現(xiàn)狀禽蛋富含蛋白質(zhì)、脂肪、礦物質(zhì)和維生素，具有很高營養(yǎng)價值。在我國，禽蛋是人們?nèi)粘Ｉ钪袠O其重要的營養(yǎng)來源之一，與人民的生活息息相關(guān)，其重要性與以肉、奶為主的西方國家相比，具有更大的意表明，回心草提取物中不同濃度的黃酮類物質(zhì)對羥基自由基具有較好的清除能力，同時濃度與清除率之間具有較好的相關(guān)性，黃酮類物質(zhì)濃度為19.89g/mL清除率為68.00%，濃度在1.9919.89g/mL的范圍內(nèi)與清除率呈正相關(guān)。參考文獻1王波，劉屏，沈月毛，等.回心草化學(xué)成分研究J.中國中藥雜圖2總黃酮濃度與羥基自由基清除率的關(guān)系志，2005，30(12)：895897.2戴暢，劉屏.民族草藥回心草的研究進展J.中草藥，2005，36(12)：19021904.3嚴啟新，張榮平，何廣新，等.回心草的開發(fā)利用J.中國野生植物資源，1998，17(2)：2829.由表2和圖2可知：回心草總黃酮對羥基自由基有一定的清除作用，且清除率在1.9919.89g/mL的濃度范圍內(nèi)，是隨著總黃酮濃度的增大而增大的。當濃度為19.89g/mL時，清除率達到最大為68.00%。4劉北林，董繼生，霍紅.山楂黃酮最佳提取