食品中糖精鈉的測定方法食品中糖精鈉的檢測分析方法

1、食品中糖精鈉的測定方法丨食品中糖精鈉的檢測分析方法云南環(huán)科儀器有限公司南京科捷分析儀器有限公司駐西南辦事處1主題內容與適用范圍本標準規(guī)定了食品中糖精鈉的測定方法。本標準適用于食品中糖精鈉的測定。最低檢出量：高效液相色譜法取樣量為10g，進樣量為10此時，最低檢出量為1. 5ng。第一篇高效液相色譜法（第一法）2、 食品中糖精鈉的測定 原理樣品加溫除去二氧化碳和乙醇，調pH至近中性，過濾后進高效液相色譜儀，經(jīng)反相色譜分離后，根據(jù)保留時間和峰面積進行定性和定量。取樣量為10g，進樣量為10?L時最低檢出量為1 . 5ng。3、 食品中糖精鈉的測定試劑3.1甲醇：經(jīng)濾膜（0. 5呵）過濾。3.2氨水

2、（I + 1）:氨水加等體積水混合。3.3 乙酸銨溶液（0. 02mol/L）:稱取1. 54g乙酸銨，加水至1000mL溶解，經(jīng)濾膜（0 . 45?m）過濾。3.4 糖精鈉標準儲備溶液：準確稱取0 . 0851g經(jīng)120C烘干4h后的糖精鈉（C6H4CONNaSO 2 2出0），加水溶解定容至100. 0mL。糖精鈉含量1.0mg/mL，作為儲備溶液。3.5糖精鈉標準使用溶液：吸取糖精鈉標準儲備液10. 0mL放入100mL容量瓶中，加水至刻度。經(jīng)濾膜（0. 45叩）過濾。該溶液每毫升相當于0. 10mg的糖精鈉。4、 食品中糖精鈉的測定儀器高效液相色譜儀，紫外檢測器。5、 食品中糖精鈉的測

3、定 分析步驟5.1樣品處理汽水：稱取5. 0010. 00g，放入小燒杯中，微溫攪拌除去二氧化碳，用氨水（1 + 1 ）調pH約7。加水定容至適當?shù)捏w積，經(jīng)濾膜（0. 45?m）過濾。果汁類：稱取5.0010. 00g，用氨水（1 + 1）調pH約7,加水定容至適當?shù)捏w積，離心沉淀，上 清液經(jīng)濾膜（0. 45gm）過濾。配制酒類：稱取10. 0g，放小燒杯中，水浴加熱除去乙醇，用氨水（1 + 1）調pH約7，加水定容至20ml，經(jīng)濾膜（0. 45?m）過濾。5.2高效液相色譜參考條件色譜柱：YWG C184.6mmX250mm1Qi m 不銹鋼柱5.2.2 流動相：甲醇：乙酸銨溶液(0.02m

4、ol/L)(5 + 95)。5.2.3 流速： 1mL/min 。5.2.4 檢測器：紫外檢測器，波長230nm，靈敏度 0.2AUFS5.3 測定取樣品處理液和標準使用液各10?L（ 或相同體積 ）注入高效液相色譜儀進行分離，以其標準溶液峰的保留時間為依據(jù)進行定性，以其峰面積求出樣液中被測物質的含量，供計算。5.4 計算式中： X 1樣品中糖精鈉含量， g/kg；m1 進樣體積中糖精鈉的質量， mg；V2進樣體積，mL ;V 1 樣品稀釋液總體積，mL；m2樣品質量，g。結果的表述：報告算術平均值的三位小數(shù)。5.5 允許差相對相差w 10%。5.6 其他應用 5.2 的高效液相分離條件可以同

5、時測定苯甲酸、山梨酸和糖精鈉，色譜圖如下：（圖略）第二篇 薄層色譜法 （第二法 ）6、食品中糖精鈉的測定 原理在酸性條件下，食品中的糖精鈉用乙醚提取、濃縮、薄層色譜分離、顯色后與標準比較，進行定性和 半定量測定。7、食品中糖精鈉的測定 試劑7.1 乙醚：不含過氧化物。7.2 無水硫酸鈉。7.3 無水乙醇及乙醇 （95%）。7.4 聚酰胺粉： 200 目。7.5 鹽酸（1 + 1）:取100mL鹽酸，加水稀釋至 200mL。7.6 展開劑7.7 顯色劑溴甲酚紫溶液 (0.4g/L) ：稱取 0.04g 溴甲酚紫，用乙醇 (50%)溶解，加氫氧化鈉溶液 (4g/L)1.1mL 調節(jié) pH 為 8，

6、定容至 100mL 。7.8硫酸銅溶液(100g/L):稱取10g硫酸銅(CuS04 5出0)，用水溶解并稀釋至100mL。7.9 氫氧化鈉溶液 (40g/L)。7.10糖精鈉標準溶液：準確稱取0.0851g經(jīng)120C干燥4h后的糖精鈉，加乙醇溶解，移入100mL容量瓶中，加乙醇(95%)稀釋至刻度。此溶液每毫升相當于1mg糖精鈉(C6H4CONNaSO 2 2出0)。8、 食品中糖精鈉的測定儀器8.1 玻璃紙：生物制品透析袋紙或不含增白劑的市售玻璃紙。8.2 玻璃噴霧器。8.3 微量注射器。8.4 紫外光燈：波長 253.7nm。8.5 薄層板：10cmX20cm 或 20cmX20cm。8

7、.6 展開槽。9、 食品中糖精鈉的測定分析步驟9.1 樣品提取9.1.1 飲料、冰棍、汽水：取 10.0mL 均勻試樣 (如樣品中含有二氧化碳，先加熱除去。如樣品中含有酒精，加 4%氫氧化鈉溶液使其呈堿性，在沸水浴中加熱除去 )置于 100mL 分液漏斗中， 加 2mL 鹽酸(1+1)，用 30，20， 20mL 乙醚提取三次，合并乙醚提取液，用 5mL 鹽酸酸化的水洗滌一次，棄去水層。乙醚層通過無水 硫酸鈉脫水后，揮發(fā)乙醚，加 2.0mL 乙醇溶解殘留物，密塞保存，備用。醬油、果汁、果醬等：稱取20.0g或吸取20.0mL均勻試樣，置于100mL容量瓶中，加水至約60mL， 加 20mL 硫

8、酸銅溶液 (100g/L) ，混勻，再加 4.4mL 氫氧化鈉溶液 (40g/L) ，加水至刻度，混勻，靜置 30min， 過濾，取 50mL 濾液置于 150mL 分液漏斗中，以下按 自“加 2mL 鹽酸( 1 1 ) ”起依法操作。9.1.3 固體果汁粉等：稱取 20.0g 磨碎的均勻試樣，置于 200mL 容量瓶中，加 100mL 水，加溫使溶解、放 冷。以下按 自“加 20mL 硫酸銅溶液 (100g/L) ”起依法操作。9.1.4 糕點、餅干等蛋白、脂肪、淀粉多的食品：稱取 25.0g 均勻試樣，置于透析用玻璃紙中，放入大小適當?shù)臒瓋龋?50mL 氫氧化鈉溶液 (0.8g/L)

9、，調成糊狀，將玻璃紙口扎緊，放入盛有 200mL 氫氧化鈉溶 液(0.8g/L)的燒杯中，蓋上表面皿，透析過夜。量取125mL透析液(相當12.5g樣品)，加約0.4mL鹽酸(1 + 1)使成中性，加 20mL 硫酸銅溶液 (100g/L) ，混勻，再加 4.4mL 氫氧化鈉溶液 (40g/L) ，混勻，靜置 30min ， 過濾。取120mL(相當10g樣品)，置于250mL分液漏斗中，以下按自加2mL鹽酸(1 + 1) ”起依法操作。9.2 薄層板的制備稱取1.6g聚酰胺粉，加0.4g可溶性淀粉，加約 7.0mL水，研磨35min，立即涂成0.250.30mm厚 的10cmx 20cm的薄

10、層板，室溫干燥后，在80C下干燥1h。置于干燥器中保存。9.3 點樣在薄層板下端2cm處，用微量注射器點10?L和20?L的樣液二個點，同時點 3.0, 5.0，7.0，10.0丄糖 精鈉標準溶液，各點間距 1.5cm。9.4 展開與顯色將點好的薄層板放入盛有展開劑或的展開槽中，展開劑液層約0.5cm，并預先已達到飽和狀態(tài)。展開至10cm，取出薄層板，揮干，噴顯色劑，斑點顯黃色，根椐樣品點和標準點的比移值進行定性， 根據(jù)斑點顏色深淺進行半定量測定。9.5 計算式中：X2樣品中糖精鈉的含量，g/kg或g/L ;m3測定用樣液中糖精鈉的質量，mg;m4樣品質量(體積)，g(mL);V3樣品提取液殘

11、留物加入乙醇的體積，mL;V4點板液體積，mL。第三篇 離子選擇電極測定方法 (第三法 )10、 食品中糖精鈉的測定原理糖精選擇電極是以季銨鹽所制 PVC 薄膜為感應膜的電極， 它和作為參比電極的飽和甘汞電極配合使用 以測定食品中糖精鈉的含量。當測定溫度、溶液總離子強度和溶液接界電位條件一致時，測得的電位遵守 能斯特方程式，電位差隨溶液中糖精離子的活度 (或濃度 )改變而變化。被測溶液中糖精鈉含量在0.021mg/mL范圍內。電極值與糖精離子濃度的負對數(shù)成直線關系。11、 食品中糖精鈉的測定試劑11.1 乙醚：使用前用鹽酸 (6mol/L) 飽和。11.2 無水硫酸鈉。11.3 鹽酸(6mol

12、/L):取100mL鹽酸，加水稀釋至 200mL，使用前以乙醚飽和。11.4 氫氧化鈉溶液 (0.06mol/L) ：取 2.4g 氫氧化鈉加水溶解并稀釋至 1000mL。11.5 硫酸銅溶液(100g/L):稱取硫酸銅(CuSO4 5HQ)10g溶于100mL水中。11.6 氫氧化鈉溶液 (40g/L) 。11.7 氫氧化鈉溶液 (0.02mol/L) ：將 11.4 稀釋而成。11.8 磷酸二氫鈉c(NaH2PO4 2H2O)= 1mol/L 溶液：取 78g 磷酸二氫鈉(NaH 2PO4 -2H2O)溶解后于 500mL 容量瓶中，加水稀釋至刻度，搖勻。11.9 磷酸氫二鈉c(Na2HP

13、O4 "20)= 1mol/L :取 89.5g 磷酸氫二鈉(Na2HPO4 T2Hq)于 250mL 容量 瓶中溶解后，加水稀釋至刻度，搖勻。11.10總離子強度調節(jié)緩沖液：87.7mL磷酸二氫鈉溶液(1mol/L)與12.3mL磷酸氫二鈉溶液(1mol/L)混合即 得。11.11糖精鈉標準溶液：準確稱取0.0851g經(jīng)120C干燥4h后的糖精鈉結晶移入 100mL容量瓶中，加水稀 釋至刻度，搖勻備用。此溶液每毫升相當于1.0mg糖精鈉(C6H4CONNaSO2 - 2出0)。12、 食品中糖精鈉的測定儀器12.1 精密級酸度計或離子活度計或其他精密級電位計，準確到±1m

14、V。12.2 糖精選擇電極。12.3 217型甘汞電極：具雙鹽橋式甘汞電極，下面的鹽橋內裝入含1%瓊脂的氯化鉀溶液 (3mol/L) 。12.4 磁力攪拌器。12.5 透析用玻璃紙。12.6 半對數(shù)紙。13、 食品中糖精鈉的測定分析步驟13.1 樣品提取13.1.1 液體樣品：濃縮果汁、飲料、汽水、汽酒、配制酒等。準確吸取25mL 均勻試樣 (汽水、汽酒等需先除去二氧化碳后取樣),置于250mL分液漏斗中，加2mL鹽酸(6mol/L),用20, 20, 10mL乙醚提取三次， 合并乙醚提取液，用 5mL 經(jīng)鹽酸酸化的水洗滌一次，棄去水層，乙醚層轉移至 50mL 容量瓶，用少量乙醚 洗滌原分液漏

15、斗合并入容量瓶，并用乙醚定容至刻度，必要時加入少許無水硫酸鈉，搖勻，脫水備用。13.1.2 含蛋白質、脂肪、淀粉量高的食品：糕點、餅干、醬菜、豆制品、油炸食品，稱取20.00g 切碎樣品，置透析用玻璃紙中，加 50mL 氫氧化鈉溶液 (0.02mol/L) ，調勻后將玻璃紙口扎緊，放入盛有 200mL 氫 氧化鈉溶液(0.02mol/L)的燒杯中，蓋上表面皿，透析 24h，并不時攪動浸泡液。量取 125mL透析液，加約0.4mL鹽酸(6mol/L)使成中性，加20mL硫酸銅溶液混勻，再加 4.4mL氫氧化鈉溶液(40g/L)，混勻。靜置30min，過濾。取100mL濾液于250mL分液漏斗中，

16、以下按 自 加2mL鹽酸(6mol/L)起依法操作。蜜餞類：稱取10.00g切碎的均勻樣品，置透析用玻璃紙中，加50mL氫氧化鈉溶液(0.06mol/L)，調勻后將玻璃紙扎緊， 放入盛有 200mL 氫氧化鈉溶液 (0.06mol/L) 25.00g 13.2 測定0.5，1.0，2.5，5.0，10.0mL 糖精鈉標準溶液 （相當于 0，0.5，1.0， 2.5，5.0，10.0mg 糖精鈉 ），分別置于 50mL 容量瓶中，各加 5mL 總離子強度調節(jié)緩沖液，加水至刻度，搖 勻。將糖精選擇電極和甘汞電極分別與測量儀器的負端和正端相連接，將電極插入盛有水的燒杯中，按其 儀器的使用說明書調節(jié)至

17、使用狀態(tài)，在攪拌下用水洗至電極起始電位（例如某些電極起始電位達 320mV） 。取出電極用濾紙吸干。將上述標準系列溶液按低濃度到高濃度逐個測定，得其在攪拌時的平衡電位值 （ mV）。在半對數(shù)紙上以毫升（毫克）為縱坐標；電位值（-mV）為橫坐標繪制標準曲線。1322樣品的測定：準確 吸取20mL 13.1條下的乙醚提取液置于 50mL燒杯中，揮發(fā)至干殘渣，加5mL總離子強度調節(jié)緩沖液。小心轉動，振搖燒杯使殘渣溶解，將燒杯內容物全部定量轉移入50mL 容量瓶中，原燒杯用少量水多次漂洗后，并入容量瓶中，最后加水至刻度搖勻。依法測定其電位值（-mV） ，查標準曲線求得測定液中糖精鈉毫克數(shù)。13.3 計

18、算式中：X3樣品中糖精鈉的含量，g/kg或g/L ；m5測定液中糖精鈉的質量，mg；V5乙醚提取液的體積，mL ；V6分取乙醚提取液的體積，mL ；m6樣品的質量或體積，g或mL。結果的表述：同 5.4。13.4 干擾本法對苯甲酸鈉的濃度在2001000mg/kg時無干擾；山梨酸的濃度在50500mg/kg，糖精鈉的含量在100150mg/kg范圍內，約有3%10%的正誤差，水楊酸及對羥基苯甲酸酯等對本法的測定有嚴重干擾。 附加說明：GB/T 5009.28 1996 （食品標準）本標準由衛(wèi)生部衛(wèi)生監(jiān)督司提出。本標準第一法由天津市食品衛(wèi)生監(jiān)督檢驗所、遼寧省食品衛(wèi)生監(jiān)督檢驗所、 武漢市衛(wèi)生防疫站、 浙江省 衛(wèi)生防疫站、四川省衛(wèi)生防疫站負責起草；第二法由衛(wèi)生部食品衛(wèi)生監(jiān)督檢驗所負責起草；第三法由上海 市食品衛(wèi)生監(jiān)督檢驗所