第8-10章 酶化學(xué)

1、第五章 酶化學(xué)一：填空題 1.全酶由_和_組成，在催化反應(yīng)時，二者所起的作用不同，其中_決定酶的專一性和高效率，_起傳遞電子、原子或化學(xué)基團的作用。 2.輔助因子包括_，_和_等。其中_與酶蛋白結(jié)合緊密，需要_除去，_與酶蛋白結(jié)合疏松，可用_除去。 3.酶是由_產(chǎn)生的，具有催化能力的_。 4.酶活力的調(diào)節(jié)包括酶_的調(diào)節(jié)和酶_的調(diào)節(jié)。 5.T.R.Cech和S.Altman因各自發(fā)現(xiàn)了_而共同獲得1989年的諾貝爾獎(化學(xué)獎)。 6.1986年，R.A.Lerner和P.G.Schultz等人發(fā)現(xiàn)了具有催化活性的_，稱_。 7.根據(jù)國際系統(tǒng)分類法，所有的酶按所催化的化學(xué)反應(yīng)的性質(zhì)可以分為六大類_

2、，_，_，_，_和_。 8.按國際酶學(xué)委員會的規(guī)定，每一種酶都有一個唯一的編號。醇脫氫酶的編號是EC.1，EC代表_，4個數(shù)字分別代表_，_，_和_。 9.根據(jù)酶的專一性程度不同，酶的專一性可以分為_專一性、_專一性和_專一性。 10.關(guān)于酶作用專一性提出的假說有_，_和_等幾種。 11.酶的活性中心包括_和_兩個功能部位，其中_直接與底物結(jié)合，決定酶的專一性，_是發(fā)生化學(xué)變化的部位，決定催化反應(yīng)的性質(zhì)。 12.酶活力是指_，一般用_表示。 13.通常討論酶促反應(yīng)的反應(yīng)速度時，指的是反應(yīng)的_速度，即_時測得的反應(yīng)速度。 14.常用的化學(xué)修飾劑DFP可以修飾_殘基，TPCK常用于修飾_殘基。 1

3、5.酶反應(yīng)的溫度系數(shù)一般為_。 16.調(diào)節(jié)酶包括_和_等。 17.解釋別構(gòu)酶作用機理的假說有_模型和_模型兩種。 18.固定化酶的優(yōu)點包括_，_，_等。 19.固定化酶的理化性質(zhì)會發(fā)生改變，如Km_，Vmax_等。 20.同工酶是指_，如_。 21.pH影響酶活力的原因可能有以下幾方面：(1)影響_，(2)影響_，(3)影響_。 22.溫度對酶活力影響有以下兩方面：一方面_，另一方面 _。 23.脲酶只作用于尿素，而不作用于其他任何底物，因此它具有_專一性；甘油激酶可以催化甘油磷酸化，僅生成甘油-1-磷酸一種底物，因此它具有_專一性。 24.酶促動力學(xué)的雙倒數(shù)作圖(Lineweaver-Bur

4、k作圖法)，得到的直線在橫軸上的截距為_，縱軸上的截距為_。 25.磺胺類藥物可以抑制_酶，從而抑制細(xì)菌生長繁殖。 26.谷氨酰胺合成酶的活性可以被_共價修飾調(diào)節(jié)；糖原合成酶、糖原磷酸化酶等則可以被_共價修飾調(diào)節(jié)。 27.判斷一個純化酶的方法優(yōu)劣的主要依據(jù)是酶的_和_。二：是非題 1. 酶可以促成化學(xué)反應(yīng)向正反應(yīng)方向轉(zhuǎn)移。 2. 對于可逆反應(yīng)而言，酶既可以改變正反應(yīng)速度，也可以改變逆反應(yīng)速度。 3. 酶的化學(xué)本質(zhì)是蛋白質(zhì)。 4. 酶活性中心一般由在一級結(jié)構(gòu)中相鄰的若干氨基酸殘基組成。 5. 酶只能改變化學(xué)反應(yīng)的活化能而不能改變化學(xué)反應(yīng)的平衡常數(shù)。 6. 酶活力的測定實際上就是酶的定量測定。 7

5、. 酶反應(yīng)速度一般用單位時間內(nèi)底物的減少量來表示。 8. 從鼠腦分離的己糖激酶可以作用于葡萄糖(Km=mol/L)或果糖(Km=mol/L)。則己糖激酶對果糖的親和力更高。 9. Km是酶的特征常數(shù)，只與酶的性質(zhì)有關(guān)，與酶濃度無關(guān)。 10. Km是酶的特征常數(shù)，在任何條件下，Km是常數(shù)。 11. Km是酶的特征常數(shù)，只與酶的性質(zhì)有關(guān)，與酶的底物無關(guān)。 12. 一種酶有幾種底物就有幾種Km值。 13. 當(dāng)S>> Km時，v 趨向于Vmax，此時只有通過增加E來增加v。 14. 酶的最適pH是一個常數(shù)，每一種酶只有一個確定的最適pH。 15. 酶的pH 酶活性曲線均為鐘罩形。 16.

6、酶的最適溫度與酶的作用時間有關(guān)，作用時間長，則最適溫度高，作用時間短，則最適溫度低。 17. 酶反應(yīng)的溫度系數(shù)高于一般反應(yīng)的溫度系數(shù)。 18. 金屬離子作為酶的激活劑，有的可以相互取代，有的可以相互拮抗。 19. 增加不可逆抑制劑的濃度，可以實現(xiàn)酶活性的完全抑制。 20. 正協(xié)同效應(yīng)使酶促反應(yīng)速度增加。 21. 正協(xié)同效應(yīng)使酶與底物親和力增加。 22. 正協(xié)同效應(yīng)使酶促反應(yīng)速度對底物濃度變化越來越敏感。 23. 競爭性可逆抑制劑一定與酶的底物結(jié)合在酶的同一部位。 24. 由1克粗酶制劑經(jīng)純化后得到10mg電泳純的酶制劑，那么酶的比活較原來提高了100 倍。 25. 酶反應(yīng)的最適pH只取決于酶蛋

7、白本身的結(jié)構(gòu)。 26. 負(fù)協(xié)同性不能用MWC(齊變模型)理論來解釋。三：單選題 1. 利用恒態(tài)法推導(dǎo)米氏方程時，引入了除哪個外的三個假設(shè)？ A.在反應(yīng)的初速度階段，E+PES可以忽略 B.假設(shè)S>>E，則S-ESS C.假設(shè)E+SES反應(yīng)處于平衡狀態(tài) D.反應(yīng)處于動態(tài)平衡時，即ES的生成速度與分解速度相等 2. 用動力學(xué)的方法可以區(qū)分可逆、不可逆抑制作用，在一反應(yīng)系統(tǒng)中，加入過量S和一定量的I，然后改變E，測v，得vE曲線，則哪一條曲線代表加入了一定量的可逆抑制劑？<br> A.1 B.2 C.3 D.不可確定 3. 在一反應(yīng)體系中，S過量，加入一定量的I，測vE曲線，

8、改變I，得一系列平行曲線，則加入的I是： A.競爭性可逆抑制劑 B.非競爭性可逆抑制劑 C.反競爭性可逆抑制劑 D.不可逆抑制劑 E.無法確定 4. 競爭性可逆抑制劑抑制程度與下列哪種因素?zé)o關(guān)？ A.作用時間 B.抑制劑濃度 C.底物濃度 D.酶與抑制劑的親和力的大小 E.酶與底物的親和力的大小 5. 下圖中I代表了：<br> A.競爭性可逆抑制劑 B.非競爭性可逆抑制劑 C.反競爭性可逆抑制劑 D.不可逆抑制劑 E.無法確定 6. 哪一種情況可用增加S的方法減輕抑制程度？ A.不可逆抑制作用 B.競爭性可逆抑制作用 C.非競爭性可逆抑制作用 D.反競爭性可逆抑制作用 E.無法確定

9、 7. 酶的競爭性可逆抑制劑可以使： A.Vmax減小，Km減小 B.Vmax增加，Km增加 C.Vmax不變，Km增加 D.Vmax不變，Km減小 E.Vmax減小，Km增加 8. 下列常見抑制劑中，除哪個外都是不可逆抑制劑？ A.有機磷化合物 B.有機汞化合物 C.有機砷化合物 D.氰化物 E.磺胺類藥物 9. 溶菌酶在催化反應(yīng)時，下列因素中除哪個外，均與酶的高效率有關(guān)？ A.底物形變 B.廣義酸堿共同催化 C.鄰近效應(yīng)與軌道定向 D.共價催化 E.無法確定 10. 下圖中哪條曲線是負(fù)協(xié)同效應(yīng)別構(gòu)酶的vS曲線？<br> A.1 B.2 C.3 D.無法確定 11. 假定Rs=(

10、酶與底物結(jié)合達90%飽和度時的底物濃度)/(酶與底物結(jié)合達10%飽和度時的底物濃度)，則正協(xié)同效應(yīng)的別構(gòu)酶: A.Rs>81 B.Rs=81 C.Rs<81 D.Rs81 E.Rs81 12. 以Hill系數(shù)判斷，則具負(fù)協(xié)同效應(yīng)的別構(gòu)酶: A.n>1 B.n=1 C.n<1 D.n1 E.n1 13. 丙二酸對琥珀酸脫氫酶的影響屬于： A.反饋抑制 B.底物抑制 C.競爭性可逆抑制 D.非競爭性可逆抑制 E.反競爭性可逆抑制 14. 酶的活化和去活化循環(huán)中，酶的磷酸化和去磷酸化位點通常在酶的哪一種氨基酸殘基上？ A.天冬氨酸 B.脯氨酸 C.賴氨酸 D.絲氨酸 E.甘氨

11、酸 15. 測定酶活性時，通常以底物濃度變化小于多少時測得的速度為反應(yīng)的初速度？ % B.0.5% C.1% D.2% E.5% 16. 在生理條件下，下列哪種基團既可以作為的受體，也可以作為的供體？ A.His的咪唑基 B.Lys的氨基 C.Arg的胍基 D.Cys的巰基 E.Trp的吲哚基 17. 對于下列哪種抑制作用，抑制程度為50%時，I=Ki？ A.不可逆抑制作用 B.競爭性可逆抑制作用 C.非競爭性可逆抑制作用 D.反競爭性可逆抑制作用 E.無法確定 18. 在一酶反應(yīng)體系中，若有抑制劑I存在時，最大反應(yīng)速度為，沒有抑制劑I存在時，最大反應(yīng)速度為，若，則I為： A.競爭性可逆抑制劑

12、 B.非競爭性可逆抑制劑 C.反競爭性可逆抑制劑 D.不可逆抑制劑 E.無法確定四：問答題 1.簡述酶作為生物催化劑與一般化學(xué)催化劑的共性及其個性。 2.簡述Cech及Altman是如何發(fā)現(xiàn)具有催化活性的RNA的。 3.寫出催化下列反應(yīng)的酶的分類名稱(類型)<br> 4.試指出下列每種酶具有哪種類型的專一性。<br>(1)脲酶(只催化尿素的水解，但不能作用于)<br>(2)-D-葡萄糖苷酶(只作用-D-葡萄糖形成的各種糖苷，但不能作用于其他的糖 苷，例如果糖苷)<br>(3)酯酶(作用于的水解反應(yīng))<br>(4)L-AA氧化酶(只作用

13、于L-AA，而不能作用于D-AA)<br>(5)反丁烯二酸水合酶只作用于反丁烯二酸(延胡索酸)，而不能作用于順丁烯二酸 (馬來酸)<br>(6)甘油激酶(催化甘油磷酸化，生成甘油-1-磷酸) 5.甘油醛-3-磷酸脫氫酶，相對分子質(zhì)量4萬，由4個相同亞基組成，每個亞基上有一個活性位點，在最適條件下，5g純酶制品每分鐘可以催化2.8mol甘油醛-3-磷酸轉(zhuǎn)化為甘油酸-3-磷酸。請計算酶的比活力和單個活性位點的轉(zhuǎn)換數(shù)。 6.稱取25mg蛋白酶配成25ml溶液，取2ml溶液測得含蛋白氮0.2mg，另取0.1ml溶液測酶活力，結(jié)果每小時可以水解酪蛋白產(chǎn)生1500ug酪氨酸，假定1

14、個酶活力單位定義為每分鐘產(chǎn)生1ug酪氨酸的酶量，請計算：(1)酶溶液的蛋白濃度及比活(2)每克酶制劑的總蛋白含量及總活力。 7.Decamethonium是一種用于肌肉松弛的藥物，是乙酰膽堿酯酶的抑制劑，這種抑制作用可以通過增加乙酰膽堿的濃度來逆轉(zhuǎn)或解除。請問這種藥物是否與酶共價結(jié)合？屬于哪種類型的抑制劑？并解釋為什么可以通過增加乙酰膽堿的濃度來解除抑制。 8.乙酰膽堿酯酶也可以被DFP失活，因為DFP可以與酶的Ser殘基共價結(jié)合，但是decamethonium可以對酶起保護作用。在一定量的酶和DFP存在時，decamethonium可以使酶失活的速度降低，請解釋。 9.試比較Km與Ks的定義

15、及其相互關(guān)系。 10.Vmax和米氏常數(shù)可以通過作圖法求得，試比較vS圖，雙倒數(shù)圖，vv/S作圖，S/vS作圖及直接線性作圖法求Vmax和Km的優(yōu)缺點。 11.指出下列反應(yīng)式分別代表了哪種機制的雙底物雙產(chǎn)物反應(yīng)。 12.(1)為什么某些腸道寄生蟲如蛔蟲在體內(nèi)不會被消化道內(nèi)的胃蛋白酶，胰蛋白酶消化？<br>(2)為什么蠶豆必需煮熟后食用，否則容易引起不適？13.-糜蛋白酶(24000)可以水解苯甲酰-L-酪氨酸乙酯。比活為45.0mol/min/mg 酶。已知-糜蛋白酶只有一個活性位點。求轉(zhuǎn)換數(shù)。 14.-胰凝乳蛋白酶可以催化N-乙酰-L-Phe-p-硝基苯酯的水解，在不同的底物濃度

16、下測反應(yīng)初速度得到一組實驗數(shù)據(jù)，見下表。求Km和Vmax。 15.使用下表數(shù)據(jù)，作圖判斷抑制劑類型(競爭性還是非競爭性可逆抑制劑)。<br> 16.甘油醛-3-磷酸脫氫酶(150000)的活性位點有一個Cys殘基，假定為使5ml1.2mg/ml的酶溶液完全失活，需要mg碘乙酰胺 (185)，計算酶的催化亞基的數(shù)目。 17.對活細(xì)胞的實驗測定表明，酶的底物濃度通常就在這種底物的Km值附近。請解釋其生理意義。為什么底物濃度不是大大高于Km或大大低于Km呢？ 18.有時別構(gòu)酶的活性可以被低濃度的競爭性抑制劑激活，請解釋。 19.(1)對于一個遵循米氏動力學(xué)的酶而言，當(dāng)S=Km時，若v=35mol/min，Vmax是多少mol/min？(2)當(dāng)S=2´10-5 mol/L，v=40mmol/min，這個酶的Km是多少？(3)若I表示競爭性抑制劑，Ki=4´10-5M，當(dāng)S=mol/L和I=mol/L時,v是多少？(4)若是非競爭性抑制劑，在、S和I條件與(3)中相同時，v是多少？(5)大致繪出此酶v-S關(guān)系的曲線圖形a.沒有抑制劑存在時；b.有競爭性抑制劑存在時如(3)；c.有非競爭性抑制劑存在時如(4) 20.在不同底物濃度的反應(yīng)體系中，分別測有無抑制劑存在時的v，數(shù)據(jù)如下：求有無抑制劑存在時的Vmax和Km(Km)，并判斷這種抑制劑是什