六味地黃湯對(duì)雌性致衰模型小鼠生殖器官影響的實(shí)驗(yàn)研究

1、六味地黃湯對(duì)雌性致衰模型小鼠生殖器官影響的實(shí)驗(yàn)研究<    【關(guān)鍵詞】   六味地黃湯； 卵巢早衰Abstract：ObjectiveTo observe the effects of Liuw Ei Dihuang Tang on causing senility to ovaria of mice. MethodsTo establish senility model through subcutaneous injection of D-galactogen into the neck and back of mice, which

2、 were subsequently treated with Liuw EI Dihuang Tang and ethylene cyclohexne. Meanwhile, to observe the effects of Liuwei Dihuang Tang on the content of -endorphin, sero-estrogen and progestogen, and on ovaria and uterine histomorphology. ResultsLiuwei Dihuang Tang could improve the content of -endo

3、rphin, increase the cornified and epithelial cell and epidermal cell in the vaginal exfoliated cell smear of mice. ConclusionLiuwei Dihuang Tang serves the same function as estrogen, which restores the normal functioning of ovaria by regulating the workings of subthalamus-hypophysis-ovarian axis.Key

4、 words：Liuwei Dihuang Tang;   POF    六味地黃湯（LW）是中醫(yī)滋補(bǔ)腎陰的代表方劑。由熟地、山茱萸、山藥、茯苓、澤瀉、牡丹皮6味藥組成,其特點(diǎn)是長(zhǎng)于三陰(肝脾腎)并補(bǔ)而以補(bǔ)腎為主的方劑。長(zhǎng)期 臨床 觀察此方有抗衰老功能，但從未看到抗衰老實(shí)驗(yàn)室對(duì)小鼠生殖器官細(xì)胞、形態(tài)結(jié)構(gòu)研究的報(bào)道。本研究通過把六味地黃湯用于實(shí)驗(yàn)小鼠活體內(nèi)對(duì)卵巢、子宮 組織 細(xì)胞、形態(tài)結(jié)構(gòu)觀察，從而為六味地黃湯對(duì)卵巢早衰分子生物學(xué)研究提供較可靠的實(shí)驗(yàn)依據(jù)。    卵巢早衰(premature ovarian fail

5、ure, POF)是指卵巢功能提前衰退，表現(xiàn)為婦女40歲之前非生理性的月經(jīng)停止，伴有潮熱、原發(fā)及繼發(fā)不孕、全身和生殖器萎縮，卵泡刺激素(follicular stimulating homone,FSH)升高(FSH>40IU/L)及E2下降。目前病理機(jī)制不甚清楚，而建立POF動(dòng)物模型對(duì)其病因的基礎(chǔ)研究以及指導(dǎo)臨床的診斷和治療有重要意義。由于半乳糖血癥患者常表現(xiàn)為原發(fā)性閉經(jīng)或卵巢早衰，且有報(bào)道動(dòng)物體內(nèi)的半乳糖增多可引起類似與卵巢早衰的改變，故本課題組采用D -半乳糖建立小鼠卵巢早衰動(dòng)物模型1，通過觀察LW對(duì)小鼠下丘腦垂體卵巢軸（HPO）的調(diào)節(jié)作用及對(duì)小鼠生殖器官形態(tài)學(xué)影響，探討LW對(duì)PO

6、F的治療機(jī)制，指導(dǎo)臨床診斷和治療。 1  材料與儀器 1.1   動(dòng)物 雌性昆明種小鼠60只，812周齡，體質(zhì)量25 30 g，由河南省南陽醫(yī)專實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供。飼養(yǎng) 環(huán)境 安靜，溫度2535，相對(duì)濕度為5060，自由進(jìn)食、水。1.2 藥品與試劑六味地黃湯草藥藥材購于河南省南陽市醫(yī)藥公司，由南陽 醫(yī)學(xué) 高等專 科學(xué) 校藥理教研室按比例組方 ，經(jīng)煎制、過濾、濃縮為1 g/ml (以生藥汁) 六味地黃湯口服液，高壓滅菌，O冰箱保存?zhèn)溆?。D - 半乳糖為上海恒信制藥廠產(chǎn)品，批號(hào)為20010218。 用滅菌生理鹽水配制成50 g/L,0冰箱保存?zhèn)溆?。乙烯雌酚由?/p>

7、海衡山藥業(yè)有限公司生產(chǎn)，批號(hào)為000201。雌二醇（E2）放射免疫藥盒購自天津德普公司；孕醇（P）放射免疫藥盒購自 中國(guó) 醫(yī)學(xué)科學(xué)院和醫(yī)學(xué)技術(shù)中心；-內(nèi)啡肽（-EP）放射免疫藥盒購自海軍放免技術(shù)中心。其他制劑均為國(guó)產(chǎn)分析純。1.3 儀器和設(shè)備 (2/2)VI普通類B型脫水機(jī)，孝感宏業(yè)TS-12L；日本原裝進(jìn)口（1/2）JVCTK-C921EC顯微鏡攝像機(jī)；日本原裝進(jìn)口OLYMPUSCX31顯微鏡；德國(guó)原裝進(jìn)口mICROMGMBH Hm200切片機(jī)；CS攤片機(jī)。 電子 體溫計(jì)，DT一ITB型;電子天平，JD2000 - 2 ;Y計(jì)數(shù)器，GAMMA -C120。 2 方法 2.1  衰老動(dòng)物模型的建立 采用D-半乳糖亞急性衰老模型建立法。D -半乳糖按每只小鼠經(jīng)背部皮下注射D - 半乳糖0.3 ml/（kg·d），注射42 d。2.2 實(shí)驗(yàn)分組  將60只小鼠隨機(jī)分成正常對(duì)照組（A）、衰老模型組(B)、六味地黃湯治療1組(C)，六味地黃湯治療2組(D)，乙烯雌酚組(E)，每組12只。A組、B組各鼠每天灌胃生理鹽水20 g·kg-1，同時(shí)B組，C組，D組，E組各鼠每天經(jīng)背部皮下注射D-半乳糖0.3 ml·kg-1，連續(xù)給藥42 d。從11天開始，C組，D組分別灌服六味地黃湯（原汁1 g/ml濃度）2