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1、多酚氧化酶在食品中的研究進(jìn)展摘要:多酚氧化酶(PPO)存在于許多種類(lèi)的食品中,是引起食物褐變的主要因素,酶促褐變嚴(yán)重影響了食品的感官品質(zhì),使得食品的保質(zhì)期縮短和價(jià)值顯著降低,不少新鮮食品的銷(xiāo)售市場(chǎng)因此受到限制1。本文介紹了多酚氧化酶的酶學(xué)性質(zhì)以及相應(yīng)的抑制方法,并對(duì)其應(yīng)用做出論述。關(guān)鍵詞:多酚氧化酶;性質(zhì);抑制方法;應(yīng)用多酚氧化酶(PPO)是自然界中分布十分廣泛的一類(lèi)末端氧化酶,屬于銅金屬酶類(lèi),其化學(xué)性質(zhì)穩(wěn)定,是植物葉子、果實(shí)等發(fā)生褐變的主要作用酶類(lèi)20此外,還會(huì)引起食品的褐變,損害食品的感官風(fēng)味質(zhì)量3-4oPPO普遍存在于植物、昆蟲(chóng)和真菌之中,甚至在腐爛的植物殘?jiān)隙歼€可以檢測(cè)到它的存在。因
2、此該酶與果蔬的加工品質(zhì)密切相關(guān),科學(xué)家們很早就開(kāi)始對(duì)它進(jìn)行深入徹底的研究5-60農(nóng)產(chǎn)品的酶促褐變與多酚氧化酶活性和含量密切相關(guān)。這方面研究很多,酶促褐變不僅影響產(chǎn)品外觀、風(fēng)味、營(yíng)養(yǎng)和加工性能,而且大大降低耐貯性,尤其對(duì)肉色較淺且容易碰傷的水果和蔬菜影響更為嚴(yán)重,產(chǎn)生的經(jīng)濟(jì)損失更大7-90通常PPO與底物被區(qū)域化分開(kāi),PPO在質(zhì)體中以潛伏狀態(tài)存在,而PPO的底物存在于液泡中。只有當(dāng)植物體內(nèi)發(fā)生生理紊亂或組織受損時(shí),PPO與底物的亞細(xì)胞區(qū)域化才被打破,PPO底物被激活產(chǎn)生黑色或褐色的沉積物,這是果蔬等農(nóng)產(chǎn)品酶促褐變的主要原因10。1、多酚氧化酶的酶學(xué)性質(zhì)與多酚氧化酶酶學(xué)性質(zhì)的主要研究?jī)?nèi)容有:酶的分
3、離和純化、測(cè)定酶促反應(yīng)的速度、了解影響酶促反應(yīng)的因素等等110在分離和純化時(shí),一般是進(jìn)行純化,再將純度高的PPO酶液進(jìn)行酶學(xué)的性質(zhì)研究12-13。PPO活性檢測(cè)則一般通過(guò)測(cè)定產(chǎn)物生長(zhǎng)速度(初速度)來(lái)測(cè)定,通過(guò)采用分光光度法,即在一定波長(zhǎng)下測(cè)定從酶生成的色素的吸光度,再根據(jù)吸光度來(lái)定義酶的活性大小14。目前,已知的影響PPO酶促反應(yīng)速度的因素主要有:溫度、同一底物不同濃度、不同的底物、pH值、激活劑、抑制劑等15。2.1 2、抑制多酚氧化酶褐變的常用方法熱處理法PPO的活性在70c以上的短時(shí)間高溫條件下即可被有效鈍化。目前,短時(shí)間高溫處理是最常使用的抑制褐變的方法。但如果不能在極短的時(shí)間內(nèi)達(dá)到鈍
4、化酶的要求,就會(huì)因?yàn)榧訜徇^(guò)度而影響成品質(zhì)量。如果熱處理不徹底,則該法不能起到抑制褐變的作用,因?yàn)樗兄诿负偷孜锏慕佑|16o2.2超高壓處理超高壓又稱(chēng)液態(tài)高靜壓,以水和礦物油作為傳遞壓力的介質(zhì),施加高靜壓(100-1000MP),并維持一定時(shí)間后可以改變食品的物化特性和化學(xué)反應(yīng)速度,達(dá)到殺菌和改變酶活性的一種加工方法。和熱協(xié)同處理可以減少果蔬中熱敏物質(zhì)的流失,低溫?zé)崽幚砑纯蛇_(dá)到顯著性鈍化PPO的效果,但不同的壓力可對(duì)PPO的活性產(chǎn)生抑制或激活作用17-19。2.3 酸處理大多PPO的最適pH都在6.0-74在pH值不斷下降的過(guò)程中,多酚氧化酶的活性也逐漸下降。當(dāng)pH小于3.0時(shí),其活性幾乎完全
5、喪失,故用調(diào)酸的方法降低pH值也可以有效抑制多酚氧化酶的褐變20o2.4振動(dòng)振動(dòng)脅迫在一定程度上也對(duì)PPO有抑制作用,肖麗娟等研究發(fā)現(xiàn)水蜜桃果實(shí)在貯藏過(guò)程中,振動(dòng)處理組PPO活性始終高于對(duì)照組,并且振動(dòng)時(shí)間越長(zhǎng)PPO活性越高,茶葉初制加工過(guò)程中,經(jīng)振動(dòng)處理的茶鮮葉PPO活性會(huì)迅速降低,振動(dòng)強(qiáng)度越大,下降越快21-2202.5加入適量抑制劑Vc、L-Cys、異Vc鈉都對(duì)PPO表現(xiàn)出極強(qiáng)的抑制效果。因此,加入適量的抑制劑來(lái)抑制PPO的活性是控制酶促褐變的有效途徑之一23-24。2.6 脈沖電場(chǎng)脈沖場(chǎng)通過(guò)電場(chǎng)強(qiáng)度的變化改變PPO的二級(jí)結(jié)構(gòu),影響其構(gòu)象從而使酶滅活,而且酶的殘余活性隨著磁場(chǎng)強(qiáng)度和脈沖數(shù)
6、的增加而逐漸降低,最高滅活率可達(dá)90%以上25-26。2.7 SO2或亞硫酸鹽處理SO2會(huì)抑制多酚氧化酶的活性,將釀還原為酚,此外,SO2與城基會(huì)發(fā)生加成反應(yīng)而防止了染基化合物的進(jìn)一步聚合,但是SO2及亞硫酸鹽必需是在安全合理的范圍內(nèi)使用,否則會(huì)造成對(duì)機(jī)體的傷害27o2.8微波輻照3.1 微波滅酶處理具有熱特性和非熱特性。輻照對(duì)茶葉中PPO活性的抑制程度受劑量影響,低于或高于最佳劑量均不能達(dá)到理想的效果,輻照處理協(xié)同理化因子調(diào)控可提高對(duì)酶活力的抑制程度,研究表明3kCy輻照劑量與適宜pH復(fù)合處理能夠抑制梨汁中92%的PPO活性,微波作用改變酶液中的鍵合作用,從而改變蛋白質(zhì)的構(gòu)象,體系在生物效應(yīng)
7、和熱效應(yīng)的雙重作用下,PPO活性被迅速鈍化28-3103、多酚氧化酶的應(yīng)用在微生物層面的多酚氧化酶一漆酶的應(yīng)用3.2 因?yàn)槠崦笡](méi)有毒副作用,所以可以將它應(yīng)用于食品工業(yè)的研究。漆酶不僅可以改善飲料、啤酒的風(fēng)味和質(zhì)量問(wèn)題,在食用菌研究方面也有很大的價(jià)值,使食用菌的液體培養(yǎng)成為可能320多酚氧化酶在紅茶制作中的重要作用3.3 多酚氧化酶可以催化氧化兒茶素類(lèi)物質(zhì)形成茶黃素類(lèi)色素,茶黃素類(lèi)色素對(duì)紅茶色、香、味等品質(zhì)的形成具有關(guān)鍵作用。止匕外,在制作速溶紅茶時(shí),添加適量的PPO可增加可溶性物質(zhì)的含量,提高紅茶制作率。同時(shí),可以減輕紅茶的苦澀味,提高速溶紅茶的風(fēng)味品質(zhì)33-34o可作為花生是否發(fā)生霉變的評(píng)價(jià)
8、依據(jù)當(dāng)花生的霉變等級(jí)為0級(jí)階段時(shí),其多酚氧化酶的活力最高,隨著花生霉變過(guò)程的進(jìn)行,花生多酚氧化酶的活力也逐漸降低,并出現(xiàn)負(fù)增長(zhǎng)趨勢(shì)。當(dāng)霉變等級(jí)達(dá)到1級(jí)時(shí),酶的活力減少率達(dá)到38.5%,故可以通過(guò)測(cè)定花生中的PPO活力來(lái)判斷花生是否發(fā)生霉變3503.4在煙草農(nóng)業(yè)研究熱點(diǎn)方面可以考慮開(kāi)發(fā)既能適當(dāng)抑制PPO對(duì)酚類(lèi)物質(zhì)的催化氧化,又可增加PPO抗性的抑制劑。目前,全球?qū)煵莶《静〕R?guī)抑制劑的研究進(jìn)展十分緩慢,在次情況下,從PPO這種特殊病程相關(guān)蛋白入手開(kāi)發(fā)新的農(nóng)藥可以為煙草病害的防治提供新的方法36參考文獻(xiàn):1吳紅梅,蕭慧,劉剛,等.多酚氧化酶的研究進(jìn)展J.茶葉通報(bào),2004.26(02):62-64
9、.2賀立紅,賓金華.高等植物中的多酚氧化酶J.植物生理學(xué)通訊,2001.37:340-345.3吳進(jìn)菊,陳紅兵,高金燕,等.多種食用菌中多酚氧化酶活性的初步比較J.食品與機(jī)械.2006.26(2):79-81.4王璋.食品酶學(xué)J.北京:輕工業(yè)出版社,1992:254-278.5李敏,劉磊,郭玉蓉,等.馬鈴薯多酚氧化酶的特性研究J.甘肅農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào),2005,40:189-192.6宋金隆,趙樹(shù)欣,張黎明,等.鮮茶葉、蘋(píng)果及馬鈴薯多酚氧化酶活性的比較J.現(xiàn)代食品科枯.2009.25(11):1258-1261.7趙淑娟,工坤波,傅冬和,等.茶多酚氧化酶酶學(xué)性質(zhì)研究J湖南農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào):自然科學(xué)版.
10、2008,34:84-86.8李敏,劉磊,郭玉蓉,等.馬鈴薯多酚氧化酶的特性研究J甘肅農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào),2005,40:189-192.9王曼玲,胡中立,周明全,等.植物多酚氧化酶的研究進(jìn)展J.植物學(xué)通報(bào),2005,22(2):215-222.10雷東峰,馮怡,梅建生.煙草中多酚氧化酶(PPO)的特征J.西北植物學(xué)報(bào),2004,24(1):161-166.11肖卓炳,陳上,麻明友,等.楊梅霉變及其多酚氧化酶特性與動(dòng)力學(xué)研究J.食品科學(xué),2009,30,(23):306-308.12鄭校先,戚曉玉,周培根,等.烏賊墨中多酚氧化酶的分離與純化J.上海水產(chǎn)大學(xué)學(xué)報(bào),2001,10(2):154-157.
11、13夏棟,卞疆龍蝦多酚氧化酶的純化及其部分生化特性J.江蘇食品與發(fā)酵,2000(1):16-19.14陳乃富.蕨菜多酚氧化酶的酶學(xué)性質(zhì)J.云南植物研究,2003,25(6):705-710.15黃建韶,張洪,田宏現(xiàn).蘋(píng)果中多酚氧化酶的性質(zhì)J.食品與機(jī)械,2001,3,21-22.16田金輝,許時(shí)嬰,王璋.熱湯處理對(duì)黑莓果汁營(yíng)養(yǎng)成分和多酚氧化酶活力的影響J.食品與發(fā)酵工業(yè),2006,32(4):134-137.17趙光遠(yuǎn),李娜,縱偉.超高壓處理對(duì)梨汁中多酚氧化酶活性的影響J.食品與藥品,2007,9(1):15-17.18譚俊峰.超高壓對(duì)茶葉主要品質(zhì)成分含量的影響D.杭州:中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院,200
12、8.19譚俊峰,林智,郭麗,等超高壓對(duì)茶鮮葉的細(xì)胞結(jié)構(gòu)、多酚氧化酶活性及主要化學(xué)成分的影響J.食品科學(xué),2007,28,(9):78-82.20喬勇進(jìn),徐芹,方強(qiáng),等.溫度、pH值對(duì)梨汁非酶褐變影響的研究J.上海農(nóng)業(yè)學(xué)報(bào),2008,24(3):6-9.21劉波.振動(dòng)脅迫對(duì)茶葉生理變化及品質(zhì)的影響D.重慶:西南大學(xué),2008.22肖麗娟,曹凱芳,曹凡坤.震動(dòng)迫害對(duì)水蜜桃采后生理的影響J.保鮮與加工,2006,6(1):2122.23邱龍新,黃浩,陳清西.半胱氨酸對(duì)馬鈴薯多酚氧化酶的抑制作用J.食品科學(xué),2006,27(4):37-40.24韓永斌,劉桂林,馮莉,等.超高壓和抑制劑對(duì)山藥泥中多酚氧
13、化酶活性的影響J.食品科學(xué),2005,26(5):111-115.25羅煒,張若兵,陳杰,等.脈沖電場(chǎng)對(duì)脂肪氧化酶及多酚氧化酶構(gòu)象影響的光譜分析J.光譜學(xué)與光譜分析,2009,(8):2122-2125.26馬海樂(lè),黃六容,朱春梅.多酚氧化酶高強(qiáng)度脈沖磁場(chǎng)滅活及動(dòng)力學(xué)模型J.農(nóng)業(yè)工程學(xué)報(bào),2010,S1:325-328.27張勇,池建偉,溫其標(biāo),等.香蕉多酚氧化酶褐變性質(zhì)的研究J.食品與發(fā)酵工業(yè),2004(5):53-57.28朱佳廷,劉春泉,趙永富,等.輻照對(duì)茶葉中茶多酚及相關(guān)酶活性的影響J.江蘇農(nóng)業(yè)科學(xué),2005,5:103-105.29池建偉,張勇,魏振承.微波處理對(duì)香蕉多酚氧化酶活性的影響J.核農(nóng)學(xué)報(bào),2006,20(4):331-332.30勵(lì)建榮,陸海霞,于平.綠茶的微波殺青J.食品與發(fā)酵工業(yè),2003,29(12):54-57.31潘科,鄭文佳,何平.綠茶彳波-遠(yuǎn)紅外輔助殺青技術(shù)研究J.山地農(nóng)業(yè)生物學(xué)報(bào),2009,28(6):522-525.32郭凱玲,趙君,車(chē)暢.多酚氧化酶在食品和中藥領(lǐng)域中的應(yīng)用J.黑龍江醫(yī)藥,2013,26(
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