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文檔簡介
1、預防獸醫(yī)學專業(yè)畢業(yè)論文 精品論文 培養(yǎng)液成分變化對原頭蚴體外培養(yǎng)的影響關(guān)鍵詞:細粒棘球蚴 體外培養(yǎng) 培養(yǎng)液成分 生長發(fā)育摘要:細粒棘球蚴(Echinococcosis Cyst)是以包囊形式在人和其它中間宿主的內(nèi)臟器官中生長,由囊壁和內(nèi)含物(生發(fā)囊、原頭蚴、子囊、孫囊和囊液等)組成。原頭蚴在不同宿主體內(nèi)發(fā)育分化方向不同:在綿羊和人體內(nèi),原頭蚴向無性繁殖方向分化,形成包囊;在犬科動物體內(nèi),原頭蚴向有性繁殖方向分化,形成產(chǎn)卵的成蟲。 本研究分別用三組培養(yǎng)液(I組:含10囊液的RPMI-1640培養(yǎng)液;II組:含10犢牛血清的RPMI-1640培養(yǎng)液;III組:純RPMI-1640培養(yǎng)液)將采集的新
2、鮮原頭蚴,按相同濃度在37、5CO2條件下體外培養(yǎng)15天。在培養(yǎng)后的第3、9和15天觀察原頭蚴生長發(fā)育情況。結(jié)果表明:不同培養(yǎng)時間、不同培養(yǎng)液成分對原頭蚴生長發(fā)育有一定影響。其中,II組原頭蚴形態(tài)變化最明顯,新陳代謝旺盛;I組部分原頭蚴仍處于休眠狀態(tài),但成活率最高;III組原頭蚴發(fā)育狀況介于其他兩組之間。結(jié)論:犢牛血清能促進原頭蚴生長發(fā)育,囊液則抑制原頭蚴的生長發(fā)育。 以未培養(yǎng)原頭蚴為對照、Actin I為內(nèi)參基因,eg143、egTPx和ePC1為檢測基因?qū)ι鲜?組培養(yǎng)15天的原頭蚴進行real-time PCR擴增。結(jié)果表明:egTPx和eg143在II組原頭蚴中表達量最高,ePC1在I組
3、培養(yǎng)的原頭蚴中表達量最高(是對照組的2.1倍)。結(jié)論:egTPx、eg143基因功能與原頭蚴生長發(fā)育有關(guān),而ePC1基因功能與原頭蚴生長發(fā)育的抑制性有關(guān)。 以未培養(yǎng)原頭蚴為對照,用三種高免血清(Eg143血清、EgTPx血清和EPC1血清)對上述3組培養(yǎng)15天的原頭蚴進行Western-blot檢測。結(jié)果表明:EgTPx和Eg143在4組原頭蚴中均獲表達,EPC1僅在II組的原頭蚴中未獲表達,在其余三組中則全部表達。結(jié)論:EgTPx和Eg143蛋白與原頭蚴的生長發(fā)育有關(guān),EPC1蛋白與原頭蚴生長發(fā)育的抑制性相關(guān)。正文內(nèi)容 細粒棘球蚴(Echinococcosis Cyst)是以包囊形式在人和其
4、它中間宿主的內(nèi)臟器官中生長,由囊壁和內(nèi)含物(生發(fā)囊、原頭蚴、子囊、孫囊和囊液等)組成。原頭蚴在不同宿主體內(nèi)發(fā)育分化方向不同:在綿羊和人體內(nèi),原頭蚴向無性繁殖方向分化,形成包囊;在犬科動物體內(nèi),原頭蚴向有性繁殖方向分化,形成產(chǎn)卵的成蟲。 本研究分別用三組培養(yǎng)液(I組:含10囊液的RPMI-1640培養(yǎng)液;II組:含10犢牛血清的RPMI-1640培養(yǎng)液;III組:純RPMI-1640培養(yǎng)液)將采集的新鮮原頭蚴,按相同濃度在37、5CO2條件下體外培養(yǎng)15天。在培養(yǎng)后的第3、9和15天觀察原頭蚴生長發(fā)育情況。結(jié)果表明:不同培養(yǎng)時間、不同培養(yǎng)液成分對原頭蚴生長發(fā)育有一定影響。其中,II組原頭蚴形態(tài)變
5、化最明顯,新陳代謝旺盛;I組部分原頭蚴仍處于休眠狀態(tài),但成活率最高;III組原頭蚴發(fā)育狀況介于其他兩組之間。結(jié)論:犢牛血清能促進原頭蚴生長發(fā)育,囊液則抑制原頭蚴的生長發(fā)育。 以未培養(yǎng)原頭蚴為對照、Actin I為內(nèi)參基因,eg143、egTPx和ePC1為檢測基因?qū)ι鲜?組培養(yǎng)15天的原頭蚴進行real-time PCR擴增。結(jié)果表明:egTPx和eg143在II組原頭蚴中表達量最高,ePC1在I組培養(yǎng)的原頭蚴中表達量最高(是對照組的2.1倍)。結(jié)論:egTPx、eg143基因功能與原頭蚴生長發(fā)育有關(guān),而ePC1基因功能與原頭蚴生長發(fā)育的抑制性有關(guān)。 以未培養(yǎng)原頭蚴為對照,用三種高免血清(Eg
6、143血清、EgTPx血清和EPC1血清)對上述3組培養(yǎng)15天的原頭蚴進行Western-blot檢測。結(jié)果表明:EgTPx和Eg143在4組原頭蚴中均獲表達,EPC1僅在II組的原頭蚴中未獲表達,在其余三組中則全部表達。結(jié)論:EgTPx和Eg143蛋白與原頭蚴的生長發(fā)育有關(guān),EPC1蛋白與原頭蚴生長發(fā)育的抑制性相關(guān)。細粒棘球蚴(Echinococcosis Cyst)是以包囊形式在人和其它中間宿主的內(nèi)臟器官中生長,由囊壁和內(nèi)含物(生發(fā)囊、原頭蚴、子囊、孫囊和囊液等)組成。原頭蚴在不同宿主體內(nèi)發(fā)育分化方向不同:在綿羊和人體內(nèi),原頭蚴向無性繁殖方向分化,形成包囊;在犬科動物體內(nèi),原頭蚴向有性繁殖
7、方向分化,形成產(chǎn)卵的成蟲。 本研究分別用三組培養(yǎng)液(I組:含10囊液的RPMI-1640培養(yǎng)液;II組:含10犢牛血清的RPMI-1640培養(yǎng)液;III組:純RPMI-1640培養(yǎng)液)將采集的新鮮原頭蚴,按相同濃度在37、5CO2條件下體外培養(yǎng)15天。在培養(yǎng)后的第3、9和15天觀察原頭蚴生長發(fā)育情況。結(jié)果表明:不同培養(yǎng)時間、不同培養(yǎng)液成分對原頭蚴生長發(fā)育有一定影響。其中,II組原頭蚴形態(tài)變化最明顯,新陳代謝旺盛;I組部分原頭蚴仍處于休眠狀態(tài),但成活率最高;III組原頭蚴發(fā)育狀況介于其他兩組之間。結(jié)論:犢牛血清能促進原頭蚴生長發(fā)育,囊液則抑制原頭蚴的生長發(fā)育。 以未培養(yǎng)原頭蚴為對照、Actin
8、I為內(nèi)參基因,eg143、egTPx和ePC1為檢測基因?qū)ι鲜?組培養(yǎng)15天的原頭蚴進行real-time PCR擴增。結(jié)果表明:egTPx和eg143在II組原頭蚴中表達量最高,ePC1在I組培養(yǎng)的原頭蚴中表達量最高(是對照組的2.1倍)。結(jié)論:egTPx、eg143基因功能與原頭蚴生長發(fā)育有關(guān),而ePC1基因功能與原頭蚴生長發(fā)育的抑制性有關(guān)。 以未培養(yǎng)原頭蚴為對照,用三種高免血清(Eg143血清、EgTPx血清和EPC1血清)對上述3組培養(yǎng)15天的原頭蚴進行Western-blot檢測。結(jié)果表明:EgTPx和Eg143在4組原頭蚴中均獲表達,EPC1僅在II組的原頭蚴中未獲表達,在其余三組
9、中則全部表達。結(jié)論:EgTPx和Eg143蛋白與原頭蚴的生長發(fā)育有關(guān),EPC1蛋白與原頭蚴生長發(fā)育的抑制性相關(guān)。細粒棘球蚴(Echinococcosis Cyst)是以包囊形式在人和其它中間宿主的內(nèi)臟器官中生長,由囊壁和內(nèi)含物(生發(fā)囊、原頭蚴、子囊、孫囊和囊液等)組成。原頭蚴在不同宿主體內(nèi)發(fā)育分化方向不同:在綿羊和人體內(nèi),原頭蚴向無性繁殖方向分化,形成包囊;在犬科動物體內(nèi),原頭蚴向有性繁殖方向分化,形成產(chǎn)卵的成蟲。 本研究分別用三組培養(yǎng)液(I組:含10囊液的RPMI-1640培養(yǎng)液;II組:含10犢牛血清的RPMI-1640培養(yǎng)液;III組:純RPMI-1640培養(yǎng)液)將采集的新鮮原頭蚴,按相
10、同濃度在37、5CO2條件下體外培養(yǎng)15天。在培養(yǎng)后的第3、9和15天觀察原頭蚴生長發(fā)育情況。結(jié)果表明:不同培養(yǎng)時間、不同培養(yǎng)液成分對原頭蚴生長發(fā)育有一定影響。其中,II組原頭蚴形態(tài)變化最明顯,新陳代謝旺盛;I組部分原頭蚴仍處于休眠狀態(tài),但成活率最高;III組原頭蚴發(fā)育狀況介于其他兩組之間。結(jié)論:犢牛血清能促進原頭蚴生長發(fā)育,囊液則抑制原頭蚴的生長發(fā)育。 以未培養(yǎng)原頭蚴為對照、Actin I為內(nèi)參基因,eg143、egTPx和ePC1為檢測基因?qū)ι鲜?組培養(yǎng)15天的原頭蚴進行real-time PCR擴增。結(jié)果表明:egTPx和eg143在II組原頭蚴中表達量最高,ePC1在I組培養(yǎng)的原頭蚴中
11、表達量最高(是對照組的2.1倍)。結(jié)論:egTPx、eg143基因功能與原頭蚴生長發(fā)育有關(guān),而ePC1基因功能與原頭蚴生長發(fā)育的抑制性有關(guān)。 以未培養(yǎng)原頭蚴為對照,用三種高免血清(Eg143血清、EgTPx血清和EPC1血清)對上述3組培養(yǎng)15天的原頭蚴進行Western-blot檢測。結(jié)果表明:EgTPx和Eg143在4組原頭蚴中均獲表達,EPC1僅在II組的原頭蚴中未獲表達,在其余三組中則全部表達。結(jié)論:EgTPx和Eg143蛋白與原頭蚴的生長發(fā)育有關(guān),EPC1蛋白與原頭蚴生長發(fā)育的抑制性相關(guān)。細粒棘球蚴(Echinococcosis Cyst)是以包囊形式在人和其它中間宿主的內(nèi)臟器官中生
12、長,由囊壁和內(nèi)含物(生發(fā)囊、原頭蚴、子囊、孫囊和囊液等)組成。原頭蚴在不同宿主體內(nèi)發(fā)育分化方向不同:在綿羊和人體內(nèi),原頭蚴向無性繁殖方向分化,形成包囊;在犬科動物體內(nèi),原頭蚴向有性繁殖方向分化,形成產(chǎn)卵的成蟲。 本研究分別用三組培養(yǎng)液(I組:含10囊液的RPMI-1640培養(yǎng)液;II組:含10犢牛血清的RPMI-1640培養(yǎng)液;III組:純RPMI-1640培養(yǎng)液)將采集的新鮮原頭蚴,按相同濃度在37、5CO2條件下體外培養(yǎng)15天。在培養(yǎng)后的第3、9和15天觀察原頭蚴生長發(fā)育情況。結(jié)果表明:不同培養(yǎng)時間、不同培養(yǎng)液成分對原頭蚴生長發(fā)育有一定影響。其中,II組原頭蚴形態(tài)變化最明顯,新陳代謝旺盛;
13、I組部分原頭蚴仍處于休眠狀態(tài),但成活率最高;III組原頭蚴發(fā)育狀況介于其他兩組之間。結(jié)論:犢牛血清能促進原頭蚴生長發(fā)育,囊液則抑制原頭蚴的生長發(fā)育。 以未培養(yǎng)原頭蚴為對照、Actin I為內(nèi)參基因,eg143、egTPx和ePC1為檢測基因?qū)ι鲜?組培養(yǎng)15天的原頭蚴進行real-time PCR擴增。結(jié)果表明:egTPx和eg143在II組原頭蚴中表達量最高,ePC1在I組培養(yǎng)的原頭蚴中表達量最高(是對照組的2.1倍)。結(jié)論:egTPx、eg143基因功能與原頭蚴生長發(fā)育有關(guān),而ePC1基因功能與原頭蚴生長發(fā)育的抑制性有關(guān)。 以未培養(yǎng)原頭蚴為對照,用三種高免血清(Eg143血清、EgTPx血
14、清和EPC1血清)對上述3組培養(yǎng)15天的原頭蚴進行Western-blot檢測。結(jié)果表明:EgTPx和Eg143在4組原頭蚴中均獲表達,EPC1僅在II組的原頭蚴中未獲表達,在其余三組中則全部表達。結(jié)論:EgTPx和Eg143蛋白與原頭蚴的生長發(fā)育有關(guān),EPC1蛋白與原頭蚴生長發(fā)育的抑制性相關(guān)。細粒棘球蚴(Echinococcosis Cyst)是以包囊形式在人和其它中間宿主的內(nèi)臟器官中生長,由囊壁和內(nèi)含物(生發(fā)囊、原頭蚴、子囊、孫囊和囊液等)組成。原頭蚴在不同宿主體內(nèi)發(fā)育分化方向不同:在綿羊和人體內(nèi),原頭蚴向無性繁殖方向分化,形成包囊;在犬科動物體內(nèi),原頭蚴向有性繁殖方向分化,形成產(chǎn)卵的成蟲
15、。 本研究分別用三組培養(yǎng)液(I組:含10囊液的RPMI-1640培養(yǎng)液;II組:含10犢牛血清的RPMI-1640培養(yǎng)液;III組:純RPMI-1640培養(yǎng)液)將采集的新鮮原頭蚴,按相同濃度在37、5CO2條件下體外培養(yǎng)15天。在培養(yǎng)后的第3、9和15天觀察原頭蚴生長發(fā)育情況。結(jié)果表明:不同培養(yǎng)時間、不同培養(yǎng)液成分對原頭蚴生長發(fā)育有一定影響。其中,II組原頭蚴形態(tài)變化最明顯,新陳代謝旺盛;I組部分原頭蚴仍處于休眠狀態(tài),但成活率最高;III組原頭蚴發(fā)育狀況介于其他兩組之間。結(jié)論:犢牛血清能促進原頭蚴生長發(fā)育,囊液則抑制原頭蚴的生長發(fā)育。 以未培養(yǎng)原頭蚴為對照、Actin I為內(nèi)參基因,eg143
16、、egTPx和ePC1為檢測基因?qū)ι鲜?組培養(yǎng)15天的原頭蚴進行real-time PCR擴增。結(jié)果表明:egTPx和eg143在II組原頭蚴中表達量最高,ePC1在I組培養(yǎng)的原頭蚴中表達量最高(是對照組的2.1倍)。結(jié)論:egTPx、eg143基因功能與原頭蚴生長發(fā)育有關(guān),而ePC1基因功能與原頭蚴生長發(fā)育的抑制性有關(guān)。 以未培養(yǎng)原頭蚴為對照,用三種高免血清(Eg143血清、EgTPx血清和EPC1血清)對上述3組培養(yǎng)15天的原頭蚴進行Western-blot檢測。結(jié)果表明:EgTPx和Eg143在4組原頭蚴中均獲表達,EPC1僅在II組的原頭蚴中未獲表達,在其余三組中則全部表達。結(jié)論:Eg
17、TPx和Eg143蛋白與原頭蚴的生長發(fā)育有關(guān),EPC1蛋白與原頭蚴生長發(fā)育的抑制性相關(guān)。細粒棘球蚴(Echinococcosis Cyst)是以包囊形式在人和其它中間宿主的內(nèi)臟器官中生長,由囊壁和內(nèi)含物(生發(fā)囊、原頭蚴、子囊、孫囊和囊液等)組成。原頭蚴在不同宿主體內(nèi)發(fā)育分化方向不同:在綿羊和人體內(nèi),原頭蚴向無性繁殖方向分化,形成包囊;在犬科動物體內(nèi),原頭蚴向有性繁殖方向分化,形成產(chǎn)卵的成蟲。 本研究分別用三組培養(yǎng)液(I組:含10囊液的RPMI-1640培養(yǎng)液;II組:含10犢牛血清的RPMI-1640培養(yǎng)液;III組:純RPMI-1640培養(yǎng)液)將采集的新鮮原頭蚴,按相同濃度在37、5CO2條
18、件下體外培養(yǎng)15天。在培養(yǎng)后的第3、9和15天觀察原頭蚴生長發(fā)育情況。結(jié)果表明:不同培養(yǎng)時間、不同培養(yǎng)液成分對原頭蚴生長發(fā)育有一定影響。其中,II組原頭蚴形態(tài)變化最明顯,新陳代謝旺盛;I組部分原頭蚴仍處于休眠狀態(tài),但成活率最高;III組原頭蚴發(fā)育狀況介于其他兩組之間。結(jié)論:犢牛血清能促進原頭蚴生長發(fā)育,囊液則抑制原頭蚴的生長發(fā)育。 以未培養(yǎng)原頭蚴為對照、Actin I為內(nèi)參基因,eg143、egTPx和ePC1為檢測基因?qū)ι鲜?組培養(yǎng)15天的原頭蚴進行real-time PCR擴增。結(jié)果表明:egTPx和eg143在II組原頭蚴中表達量最高,ePC1在I組培養(yǎng)的原頭蚴中表達量最高(是對照組的2
19、.1倍)。結(jié)論:egTPx、eg143基因功能與原頭蚴生長發(fā)育有關(guān),而ePC1基因功能與原頭蚴生長發(fā)育的抑制性有關(guān)。 以未培養(yǎng)原頭蚴為對照,用三種高免血清(Eg143血清、EgTPx血清和EPC1血清)對上述3組培養(yǎng)15天的原頭蚴進行Western-blot檢測。結(jié)果表明:EgTPx和Eg143在4組原頭蚴中均獲表達,EPC1僅在II組的原頭蚴中未獲表達,在其余三組中則全部表達。結(jié)論:EgTPx和Eg143蛋白與原頭蚴的生長發(fā)育有關(guān),EPC1蛋白與原頭蚴生長發(fā)育的抑制性相關(guān)。細粒棘球蚴(Echinococcosis Cyst)是以包囊形式在人和其它中間宿主的內(nèi)臟器官中生長,由囊壁和內(nèi)含物(生發(fā)
20、囊、原頭蚴、子囊、孫囊和囊液等)組成。原頭蚴在不同宿主體內(nèi)發(fā)育分化方向不同:在綿羊和人體內(nèi),原頭蚴向無性繁殖方向分化,形成包囊;在犬科動物體內(nèi),原頭蚴向有性繁殖方向分化,形成產(chǎn)卵的成蟲。 本研究分別用三組培養(yǎng)液(I組:含10囊液的RPMI-1640培養(yǎng)液;II組:含10犢牛血清的RPMI-1640培養(yǎng)液;III組:純RPMI-1640培養(yǎng)液)將采集的新鮮原頭蚴,按相同濃度在37、5CO2條件下體外培養(yǎng)15天。在培養(yǎng)后的第3、9和15天觀察原頭蚴生長發(fā)育情況。結(jié)果表明:不同培養(yǎng)時間、不同培養(yǎng)液成分對原頭蚴生長發(fā)育有一定影響。其中,II組原頭蚴形態(tài)變化最明顯,新陳代謝旺盛;I組部分原頭蚴仍處于休眠
21、狀態(tài),但成活率最高;III組原頭蚴發(fā)育狀況介于其他兩組之間。結(jié)論:犢牛血清能促進原頭蚴生長發(fā)育,囊液則抑制原頭蚴的生長發(fā)育。 以未培養(yǎng)原頭蚴為對照、Actin I為內(nèi)參基因,eg143、egTPx和ePC1為檢測基因?qū)ι鲜?組培養(yǎng)15天的原頭蚴進行real-time PCR擴增。結(jié)果表明:egTPx和eg143在II組原頭蚴中表達量最高,ePC1在I組培養(yǎng)的原頭蚴中表達量最高(是對照組的2.1倍)。結(jié)論:egTPx、eg143基因功能與原頭蚴生長發(fā)育有關(guān),而ePC1基因功能與原頭蚴生長發(fā)育的抑制性有關(guān)。 以未培養(yǎng)原頭蚴為對照,用三種高免血清(Eg143血清、EgTPx血清和EPC1血清)對上述
22、3組培養(yǎng)15天的原頭蚴進行Western-blot檢測。結(jié)果表明:EgTPx和Eg143在4組原頭蚴中均獲表達,EPC1僅在II組的原頭蚴中未獲表達,在其余三組中則全部表達。結(jié)論:EgTPx和Eg143蛋白與原頭蚴的生長發(fā)育有關(guān),EPC1蛋白與原頭蚴生長發(fā)育的抑制性相關(guān)。細粒棘球蚴(Echinococcosis Cyst)是以包囊形式在人和其它中間宿主的內(nèi)臟器官中生長,由囊壁和內(nèi)含物(生發(fā)囊、原頭蚴、子囊、孫囊和囊液等)組成。原頭蚴在不同宿主體內(nèi)發(fā)育分化方向不同:在綿羊和人體內(nèi),原頭蚴向無性繁殖方向分化,形成包囊;在犬科動物體內(nèi),原頭蚴向有性繁殖方向分化,形成產(chǎn)卵的成蟲。 本研究分別用三組培養(yǎng)
23、液(I組:含10囊液的RPMI-1640培養(yǎng)液;II組:含10犢牛血清的RPMI-1640培養(yǎng)液;III組:純RPMI-1640培養(yǎng)液)將采集的新鮮原頭蚴,按相同濃度在37、5CO2條件下體外培養(yǎng)15天。在培養(yǎng)后的第3、9和15天觀察原頭蚴生長發(fā)育情況。結(jié)果表明:不同培養(yǎng)時間、不同培養(yǎng)液成分對原頭蚴生長發(fā)育有一定影響。其中,II組原頭蚴形態(tài)變化最明顯,新陳代謝旺盛;I組部分原頭蚴仍處于休眠狀態(tài),但成活率最高;III組原頭蚴發(fā)育狀況介于其他兩組之間。結(jié)論:犢牛血清能促進原頭蚴生長發(fā)育,囊液則抑制原頭蚴的生長發(fā)育。 以未培養(yǎng)原頭蚴為對照、Actin I為內(nèi)參基因,eg143、egTPx和ePC1為
24、檢測基因?qū)ι鲜?組培養(yǎng)15天的原頭蚴進行real-time PCR擴增。結(jié)果表明:egTPx和eg143在II組原頭蚴中表達量最高,ePC1在I組培養(yǎng)的原頭蚴中表達量最高(是對照組的2.1倍)。結(jié)論:egTPx、eg143基因功能與原頭蚴生長發(fā)育有關(guān),而ePC1基因功能與原頭蚴生長發(fā)育的抑制性有關(guān)。 以未培養(yǎng)原頭蚴為對照,用三種高免血清(Eg143血清、EgTPx血清和EPC1血清)對上述3組培養(yǎng)15天的原頭蚴進行Western-blot檢測。結(jié)果表明:EgTPx和Eg143在4組原頭蚴中均獲表達,EPC1僅在II組的原頭蚴中未獲表達,在其余三組中則全部表達。結(jié)論:EgTPx和Eg143蛋白與
25、原頭蚴的生長發(fā)育有關(guān),EPC1蛋白與原頭蚴生長發(fā)育的抑制性相關(guān)。細粒棘球蚴(Echinococcosis Cyst)是以包囊形式在人和其它中間宿主的內(nèi)臟器官中生長,由囊壁和內(nèi)含物(生發(fā)囊、原頭蚴、子囊、孫囊和囊液等)組成。原頭蚴在不同宿主體內(nèi)發(fā)育分化方向不同:在綿羊和人體內(nèi),原頭蚴向無性繁殖方向分化,形成包囊;在犬科動物體內(nèi),原頭蚴向有性繁殖方向分化,形成產(chǎn)卵的成蟲。 本研究分別用三組培養(yǎng)液(I組:含10囊液的RPMI-1640培養(yǎng)液;II組:含10犢牛血清的RPMI-1640培養(yǎng)液;III組:純RPMI-1640培養(yǎng)液)將采集的新鮮原頭蚴,按相同濃度在37、5CO2條件下體外培養(yǎng)15天。在培
26、養(yǎng)后的第3、9和15天觀察原頭蚴生長發(fā)育情況。結(jié)果表明:不同培養(yǎng)時間、不同培養(yǎng)液成分對原頭蚴生長發(fā)育有一定影響。其中,II組原頭蚴形態(tài)變化最明顯,新陳代謝旺盛;I組部分原頭蚴仍處于休眠狀態(tài),但成活率最高;III組原頭蚴發(fā)育狀況介于其他兩組之間。結(jié)論:犢牛血清能促進原頭蚴生長發(fā)育,囊液則抑制原頭蚴的生長發(fā)育。 以未培養(yǎng)原頭蚴為對照、Actin I為內(nèi)參基因,eg143、egTPx和ePC1為檢測基因?qū)ι鲜?組培養(yǎng)15天的原頭蚴進行real-time PCR擴增。結(jié)果表明:egTPx和eg143在II組原頭蚴中表達量最高,ePC1在I組培養(yǎng)的原頭蚴中表達量最高(是對照組的2.1倍)。結(jié)論:egTP
27、x、eg143基因功能與原頭蚴生長發(fā)育有關(guān),而ePC1基因功能與原頭蚴生長發(fā)育的抑制性有關(guān)。 以未培養(yǎng)原頭蚴為對照,用三種高免血清(Eg143血清、EgTPx血清和EPC1血清)對上述3組培養(yǎng)15天的原頭蚴進行Western-blot檢測。結(jié)果表明:EgTPx和Eg143在4組原頭蚴中均獲表達,EPC1僅在II組的原頭蚴中未獲表達,在其余三組中則全部表達。結(jié)論:EgTPx和Eg143蛋白與原頭蚴的生長發(fā)育有關(guān),EPC1蛋白與原頭蚴生長發(fā)育的抑制性相關(guān)。細粒棘球蚴(Echinococcosis Cyst)是以包囊形式在人和其它中間宿主的內(nèi)臟器官中生長,由囊壁和內(nèi)含物(生發(fā)囊、原頭蚴、子囊、孫囊和
28、囊液等)組成。原頭蚴在不同宿主體內(nèi)發(fā)育分化方向不同:在綿羊和人體內(nèi),原頭蚴向無性繁殖方向分化,形成包囊;在犬科動物體內(nèi),原頭蚴向有性繁殖方向分化,形成產(chǎn)卵的成蟲。 本研究分別用三組培養(yǎng)液(I組:含10囊液的RPMI-1640培養(yǎng)液;II組:含10犢牛血清的RPMI-1640培養(yǎng)液;III組:純RPMI-1640培養(yǎng)液)將采集的新鮮原頭蚴,按相同濃度在37、5CO2條件下體外培養(yǎng)15天。在培養(yǎng)后的第3、9和15天觀察原頭蚴生長發(fā)育情況。結(jié)果表明:不同培養(yǎng)時間、不同培養(yǎng)液成分對原頭蚴生長發(fā)育有一定影響。其中,II組原頭蚴形態(tài)變化最明顯,新陳代謝旺盛;I組部分原頭蚴仍處于休眠狀態(tài),但成活率最高;III組原頭蚴發(fā)育狀況介于其他兩組之間。結(jié)論:犢牛血清能促進原頭
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