啤酒的質(zhì)量和衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)以及檢驗(yàn)方法_第1頁(yè)
啤酒的質(zhì)量和衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)以及檢驗(yàn)方法_第2頁(yè)
啤酒的質(zhì)量和衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)以及檢驗(yàn)方法_第3頁(yè)
啤酒的質(zhì)量和衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)以及檢驗(yàn)方法_第4頁(yè)
啤酒的質(zhì)量和衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)以及檢驗(yàn)方法_第5頁(yè)
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1、啤酒的質(zhì)量和衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)檢驗(yàn)方法前言:啤酒的原料主要有大麥、啤酒花等。它們里面含的蛋白質(zhì)、碳水化合物、啤酒花苦味物質(zhì)等在釀造過(guò)程中發(fā)生細(xì)微變化后,并作為復(fù)合體存留在啤酒中。這些成分決定著啤酒的香味、醇度和泡沫。也就是說(shuō),這些成分能增加啤酒的表面張力和粘度,使啤酒能生出更白、更細(xì)的泡沫。啤酒里一般含有大約0.5%的碳酸氣體。這些碳酸氣體在發(fā)酵過(guò)程中產(chǎn)生、并融入啤酒,但是融進(jìn)啤酒的這些碳酸氣的量約是在正常壓力下的兩倍,也就是說(shuō)呈超飽和狀態(tài)。所以,當(dāng)打開(kāi)啤酒拴時(shí),里面的啤酒恢復(fù)到正常壓力狀態(tài)下,再加上倒酒時(shí),碳酸氣受到碰撞而恢復(fù)成氣體,這樣許多氣泡浮到啤酒液面上,就形成泡沫。啤酒泡沫之所以呈白色奶油狀,

2、是因?yàn)檫@些泡沫還帶了啤酒成分形成的表面張力和粘度。下面是啤酒的所有成分:1 .谷物(Grains)出芽(Malting)就是把大麥浸泡在水中使其發(fā)芽。這個(gè)過(guò)程一般持續(xù)36-48個(gè)小時(shí),使麥芽中休眠狀態(tài)下的酶發(fā)育。酶在發(fā)酵過(guò)程中是非常關(guān)鍵的,它可以把淀粉轉(zhuǎn)化成糖,而糖在酵母的作用下又分解成二氧化碳和酒精。在出芽過(guò)程中,大麥的味道變得有些甜。大麥在出芽后需要弄干,這個(gè)過(guò)程的不同使大麥麥芽的味道也有所不同。自然風(fēng)干的麥芽色澤只有很小的變化,可以用來(lái)釀造金黃色澤的啤酒;而經(jīng)過(guò)烘烤或煙熏的麥芽顏色變得很深,可以用來(lái)釀造色澤較重的啤酒;很多種啤酒都會(huì)使用不同品種的大麥,這樣就可以使最終產(chǎn)品的味道更加復(fù)雜。

3、有些啤酒廠也使用其它類(lèi)別的谷物來(lái)釀造啤酒或調(diào)味。黑麥可以使啤酒增添一種香辣、雄健的口味;小麥可以使啤酒增添一定的果香,啤酒泡沫更豐富;燕麥可以使啤酒顯得油滑、濃重;水稻:可以使啤酒的色澤比較清淡;玉米大多使用于廉價(jià)啤酒種或作為味道的補(bǔ)充。2 .啤酒花(Hops)啤酒花又叫蛇麻草,英語(yǔ)是Hops。這是一種與*同一品系的植物,啤酒花實(shí)際上就是植物花蕊的一部分,它的調(diào)味屬性體現(xiàn)在啤酒花中的精油和果酸上。啤酒花含有的這些物質(zhì)可以使啤酒有一定的苦澀和芳香,平衡大麥麥芽中的糖分。啤酒花被采摘后需要烘干才能使用。釀造,而有些啤酒卻使用多種啤酒花來(lái)達(dá)到釀酒大師要求的獨(dú)特味道。3 .酵母(Yeast)酵母是一種

4、屬于真菌類(lèi)的非常微小的生物菌,在自然環(huán)境中幾乎到處都有。啤酒在釀造過(guò)程中有三種方法加入酵母菌。啤酒的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)啤酒的檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn),按照國(guó)家頒布的啤酒質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)本標(biāo)準(zhǔn)適用于以麥芽(包括特種麥芽)為主要原料,加酒花,經(jīng)酵母發(fā)酵釀制而成的、含有二氧化碳的、起泡的、低酒精度的各類(lèi)熟、鮮啤酒。1、二氧化碳:指啤酒中溶解的二氧化碳含量,這些二氧化碳是在發(fā)酵過(guò)程中產(chǎn)生的,它有利于啤酒的起泡性,飲后賦予一種舒適的刺激感覺(jué),即所謂的殺口力。特別是在15c左右飲用時(shí),二氧化碳逐步放出,給人以清新、爽快的感覺(jué),還能聞出啤酒特有的酒花香味。2、泡持性:通常,啤酒倒入干凈的杯中即有泡沫升起,泡沫持久的程度即為泡持性。質(zhì)量的啤酒

5、泡沫潔白細(xì)膩,持泡時(shí)間長(zhǎng)、掛杯性好,給人賞心悅目的感覺(jué)。3、濁度:是以EBC濁度單位表示啤酒透明度的外觀指標(biāo),好啤酒的濁度很低,在0.5EBC單位以下。差的啤酒可產(chǎn)生失光,甚至混濁,濁度數(shù)值就高。引起酒液混濁的原因有兩方面,一是細(xì)菌總數(shù)超標(biāo)引起的生物性混濁,這種酒已不能飲用,另一種是由于啤酒在貯存過(guò)程中,酒的蛋白質(zhì)、多酚等物質(zhì)遇冷或氧化產(chǎn)生的混濁,冷混濁在啤酒恢復(fù)到室溫后可自行消失,這種混濁并不影響飲用,因此,建議消費(fèi)者不要將酒冷藏的溫度過(guò)低,一般在10c15c即可。4、酒精度及原麥汁濃度:酒精度指酒液中酒精的百分含量,可用體積百分?jǐn)?shù)或質(zhì)量百分?jǐn)?shù)表示。原麥汁濃度是依據(jù)酒精度及啤酒中的真正濃度按

6、經(jīng)驗(yàn)公式計(jì)算出的數(shù)值,用其來(lái)表述原料麥汁的多少。我們見(jiàn)到的標(biāo)簽標(biāo)注的10?;?1。等均是指酒的原麥汁濃度,它可讀為10度或11度,今年頒布的新國(guó)標(biāo)則標(biāo)記為10°P或11°Po原麥汁濃度與酒精度不是一回事,通常情況下,原麥汁濃度高則酒中含酒精也越多,我們常飲用的11。啤酒其酒精度在4.5%(V/V)左右。雖然啤酒中酒精含量較低,但是由于二氧化碳能促進(jìn)酒精在人體內(nèi)吸收,因此一次大量飲用也會(huì)醉酒傷身。5、總酸:指啤酒發(fā)酵過(guò)程中產(chǎn)生的脂肪酸及其他有機(jī)酸的總量。啤酒中的酸包括揮發(fā)性及不揮發(fā)性的各種酸,如乙酸、低碳脂肪酸及乳酸等。適宜的總酸能賦予啤酒以柔和清爽的口感。如果總酸過(guò)高或酸味

7、明顯,則是污染了雜菌的標(biāo)志,這樣的酒不宜飲用。6、雙乙酰:是在啤酒主發(fā)酵期間酵母代謝的產(chǎn)物,是啤酒口味不成熟的標(biāo)志。如其含量超過(guò)風(fēng)味閾值,會(huì)給啤酒帶來(lái)不愉快的便飯味,酵母菌種、原料和麥汁組成、發(fā)酵條件等均影響啤酒中雙乙酰的含量。由于其風(fēng)味閾值比較低,對(duì)于優(yōu)質(zhì)淡色啤酒而言,雙乙酰含量在0.10m感官指標(biāo)和理化指標(biāo)表濃、黑國(guó)蛹的出脂標(biāo)應(yīng)符合表皿定項(xiàng)目1)11優(yōu)級(jí)1一綴EU11二轉(zhuǎn)1外現(xiàn)11無(wú)明顯懸浮物和沉淀物111詢(xún)顯沂淀物1泡11形態(tài)1111泡沫細(xì)扇,掛杯1泡沫較細(xì)感,掛杯111范濤較粗1沫1泡持性,S111|孑210|801|孑12。色度1濃色11I15.0_40.0EEC11黑色11|>

8、;40,0香氣和口味1V1具有明顯的麥若香都翅眼的愛(ài)邦1氣,口味純正?X1香氣,口味純正?1口,酒體蒂厚,柔1較爽口,殺口,1夠口,«tII1有麥芽香氣,口1口,1表2漆色啤酒的0!指標(biāo)應(yīng)符合表N的規(guī)定透明度I清亮透明,無(wú)明顯懸浮物和沉淀物尚清,校透明濁度.ERCIW2.0EBC泡持性1哂裝號(hào)I14"210180=1805.011.012010412°I5,0(5.011.0|5.0_14.0香氣和口味8。5.0_1N.OI具有明顯的酒花香1有潮眼的酒花I有酒花香氣,I氣,爽I口IieHEiE,相I口.港體諧調(diào).索【校爽口.諧調(diào).I味I和無(wú)異香.異味I無(wú)異香、異&

9、#174;IHII表3理化要求應(yīng)符合表3砒癥項(xiàng)目1伏級(jí)I一級(jí)I二級(jí)_jt1總歐|18*16。W4.5|14DI<3.0mil00ml:1121F|<2.6|ior|爭(zhēng)化碳%,m/m|>_4|±0.38|>0.35雙ZSH淡色|&0.13|<0-15|<0,20m-L|濃色、黑色|<0,14|<0.16|<0,20I二、啤酒的衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)按照:中華人民共和國(guó)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)GB2758-2012食品安全國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)發(fā)酵酒及其配制酒1.1 原料要求應(yīng)符合相應(yīng)的標(biāo)準(zhǔn)和有關(guān)規(guī)定。1.2 感官要求應(yīng)符合相應(yīng)產(chǎn)品標(biāo)準(zhǔn)的有關(guān)規(guī)定。1.3 理化指標(biāo)理化指

10、標(biāo)應(yīng)符合表1的規(guī)定。表1:項(xiàng)目指標(biāo)檢驗(yàn)方法甲醛/(mg/L)<2.0GB/T5009.491.4污染物和真菌毒素限量1.4.1污染物限量應(yīng)符合GB2762的規(guī)定。表2:項(xiàng)目指標(biāo)檢驗(yàn)方法鉛&mg/Kg0.2GB5009.121.4.2真菌毒素限量應(yīng)符合GB2761的規(guī)定。查閱后發(fā)現(xiàn)在啤酒中無(wú)真菌毒素限量1.5微生物限量微生物限量應(yīng)符合表2的規(guī)定。表2:項(xiàng)目米樣方案及限量檢驗(yàn)方法ncm沙門(mén)氏菌500/25mLGB/T4789.25金黃色葡萄球菌500/25mLa樣品的分析及處理按GB4789.1執(zhí)行。1 食品添加劑食品添加劑的使用應(yīng)符合GB2760的規(guī)定。項(xiàng)目指標(biāo)焦糖色按生產(chǎn)需要適量

11、使用納他霉素g/L0.01三氯蔗糖g/Kg0.65海藻酸內(nèi)一醇酯g/Kg0.3啤酒質(zhì)量指標(biāo)檢測(cè)方法1、啤酒原麥汁濃度的測(cè)定比重瓶法GB4928-91啤酒試驗(yàn)方法中第9條啤酒原麥汁濃度的試驗(yàn)方法1.0 1范圍本方法采用比重瓶法測(cè)定啤酒的真正濃度結(jié)合采用其它方法所測(cè)得的啤酒灑精度通過(guò)計(jì)算獲得啤酒的原麥汁濃度本方法適用于各種類(lèi)型啤酒中原麥汁濃度的測(cè)定以原麥汁含量的質(zhì)量百分?jǐn)?shù)即m/m表示測(cè)定值保留一位小數(shù)(1) 原理啤酒經(jīng)加熱蒸發(fā)蒸去酒精后的殘液用水恢復(fù)至原重然后用比重瓶測(cè)定20時(shí)殘液的比重2020D經(jīng)查比重與浸出物含量對(duì)照表即可得出試樣中浸出物含量的質(zhì)量百分?jǐn)?shù)即為真正濃度啤酒的酒精度可用比重瓶測(cè)定法

12、或其它儀器分析方法測(cè)得原麥汁濃度則通過(guò)計(jì)算獲得(1) 儀器1. 瓷蒸發(fā)皿1. 高精度恒溫水浴20時(shí)精度為0.11. 附溫度計(jì)比重瓶25mL1. 感量為0.1mg的分析天平1. 試樣制備稱(chēng)取100.0g酒樣于已知質(zhì)量的瓷蒸發(fā)皿中于沸水浴上蒸發(fā)至原體積的1/3取下冷卻加水恢復(fù)至殘液原重100.0g混勻備用1. 操作步驟比重瓶空重的測(cè)定將比重瓶洗凈干燥稱(chēng)量反復(fù)操作直至恒量記錄比重瓶空重(m)比重瓶水重的測(cè)定將煮沸并冷卻至15左右的蒸儲(chǔ)水注滿(mǎn)已恒量的比重瓶插上帶溫度計(jì)的瓶塞瓶中應(yīng)無(wú)氣泡立即浸于200.1的高精度恒溫水浴中彳寺內(nèi)容物溫度達(dá)到20,并保持1520min不變后用濾紙吸去溢出支管的水,立即蓋好

13、小帽取出比重瓶迅速擦干后稱(chēng)量記錄比重瓶和水的質(zhì)量(m1)酒樣殘液比重的測(cè)定用酒樣殘液沖洗比重瓶23次然后裝滿(mǎn)此樣品按5.2同樣操作記錄比重瓶和酒樣殘液的質(zhì)量并計(jì)算酒樣殘液的比重2020D經(jīng)查比重與浸出物含量對(duì)照表即可得出試樣中浸出物含量的質(zhì)量百分?jǐn)?shù)即真正濃度n結(jié)果計(jì)算1004-.4x1.0665式中X原麥汁濃度%m/mA酒精含量%m/mn真正濃度%m/m7精密度同一樣品的兩次測(cè)定值之差不得超過(guò)0.1%m/m2、啤酒酒精度的測(cè)定實(shí)驗(yàn)原理:用小火將啤酒中的酒精蒸儲(chǔ)出來(lái),收集儲(chǔ)出液。用密度瓶測(cè)定儲(chǔ)出液的密度,密度以相同溫度下,同體積的溶液和純水之間的質(zhì)量比來(lái)表示。根據(jù)密度-酒精度對(duì)照表,可查得酒精含

14、量。實(shí)驗(yàn)儀器:電爐,調(diào)壓變壓器,鐵架臺(tái),500mL園底燒瓶(錐形瓶),冷凝管,100mL容量瓶,規(guī)格為25mL附有溫度計(jì)并具有磨口帽小支管的密度瓶(見(jiàn)圖)。實(shí)驗(yàn)步驟:.樣品處理(1)在已精確稱(chēng)重至0.05g的500mL三角燒瓶中,稱(chēng)取100.0g除氣啤酒,再加50mL水,(2)按上冷凝器,冷凝器下端用一已知重量的100mL容量瓶或量筒接收儲(chǔ)出液。若室溫較高,為了防止酒精蒸發(fā),可將容量瓶浸于冷水或冰水中。(3)開(kāi)始蒸儲(chǔ)時(shí)用文火加熱,沸騰后可加強(qiáng)火力,蒸儲(chǔ)至儲(chǔ)出液接近100mL時(shí)停止加熱。(4)取下容量瓶,于普通天平上加蒸儲(chǔ)水至儲(chǔ)出液重100.0g,混勻。.儲(chǔ)出液密度的測(cè)定(1)空瓶稱(chēng)重:將密度瓶

15、洗干凈后,吹干或低溫烘干(可用少量酒精或乙醛洗滌),冷卻至室溫,精確稱(chēng)重至0.1mg。(2)稱(chēng)水重:將煮沸30分鐘并冷卻至1518c的蒸儲(chǔ)水裝滿(mǎn)密度瓶(注意瓶?jī)?nèi)不要有氣飽)。裝上溫度計(jì)。立即浸入20±0.1C的恒溫水浴中,讓瓶?jī)?nèi)溫度計(jì)在20c下保持20分鐘,取出密度瓶用濾紙吸去溢出支管外的水,立即蓋上小帽,室溫下平衡溫度后,擦干瓶壁上的水,精確稱(chēng)重。(3)儲(chǔ)出液稱(chēng)重:倒出蒸儲(chǔ)水,用少量?jī)?chǔ)出液洗滌后,加入冷卻至1519c的微出液,按(2)測(cè)得微出液重量。(4)密度計(jì)算:密度瓶和儲(chǔ)出液重一空瓶重儲(chǔ)出液密度=密度瓶和蒸儲(chǔ)水重一空瓶重.查密度和酒精對(duì)照表,求得酒精含量。3、啤酒濁度的檢測(cè)原理

16、:EBC濁度計(jì)是利用光學(xué)原理測(cè)定啤酒,由于老化或受冷而引起的混濁,可直接測(cè)定出樣品的濁度以EBC濁度單位表示。檢驗(yàn)方法儀器濁度計(jì)濁度管操作按濁度計(jì)的儀器說(shuō)明書(shū),取除氣但未經(jīng)過(guò)過(guò)濾的酒樣(發(fā)酵液和冷麥汁須要過(guò)濾)倒入玻璃管中,用EBC蟲(chóng)度計(jì)進(jìn)行測(cè)定。直接讀取結(jié)果。所得結(jié)果應(yīng)表示至一位小數(shù)4、啤酒總酸的測(cè)定實(shí)驗(yàn)原理:根據(jù)酸堿中和原理。用氫氧化鈉標(biāo)準(zhǔn)溶液直接滴定啤酒中的總酸,以pH=8.2為電位滴定終點(diǎn),根據(jù)消耗氫氧化鈉標(biāo)準(zhǔn)溶液的體積計(jì)算出啤酒中總酸的含量。實(shí)驗(yàn)試劑0.1mol/LNaOH標(biāo)準(zhǔn)溶液實(shí)驗(yàn)儀器酸度計(jì)、恒溫水浴鍋實(shí)驗(yàn)步驟校正儀器:用標(biāo)準(zhǔn)緩沖溶液校正儀器,用水清洗儀器,并用濾紙吸干附著在電極

17、上的液珠。測(cè)量樣品:吸取除氣的樣品溶液50.0ml,于燒杯中。插入電極,開(kāi)啟電磁攪拌器,用0.1mol/LNaOH標(biāo)準(zhǔn)溶液滴定至pH=8.2為其終點(diǎn),記錄消耗NaOH準(zhǔn)溶液的體積。消耗的NaOH標(biāo)準(zhǔn)溶液的體積記為VO困5、實(shí)驗(yàn)計(jì)算樣品中的總酸量=2-C-VOh上式中:2一換算成100.0ml樣品的系數(shù)C一標(biāo)準(zhǔn)NaOH溶液的濃度ol消耗標(biāo)準(zhǔn)NaOH溶液的體積5、啤酒中雙乙酰的測(cè)定實(shí)驗(yàn)原理雙乙酰(丁二酮)是賦予啤酒風(fēng)味的重要物質(zhì)。但含量過(guò)大,能使啤酒有一種便飯味。輕工部部頒標(biāo)推規(guī)定成品啤酒中雙乙酰含量v0.2Ppm。雙乙酰的測(cè)定方法有氣相色譜法、極譜法和比色法等等。鄰苯二胺比色法是連二酮類(lèi)都能發(fā)生

18、顯色反應(yīng)的方法,所以,此法測(cè)得之值為雙乙酰與戊二酮的總量,結(jié)果偏高。但此法快速簡(jiǎn)便,是輕工部部頒標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定的方法。用蒸汽將雙乙酰從樣品中蒸儲(chǔ)出來(lái),加鄰苯二胺,形成2,3一二甲基唾喔琳,其鹽酸鹽在335nm波長(zhǎng)下有一最大吸收峰,可進(jìn)行定量測(cè)定。實(shí)驗(yàn)儀器與試劑(1)紫外分光光度計(jì)。(2)雙乙酰蒸儲(chǔ)裝置雙乙酰蒸儲(chǔ)裝置示意圖1、夾套蒸儲(chǔ)器2、蒸汽發(fā)生器3、冷凝器4、25mL容量瓶(或量筒)5、加樣口6、電爐(1)4N鹽酸(2)1%鄰苯二胺精密稱(chēng)取分析Z鄰苯二胺250.0mg,溶于4N鹽酸中,并定容至25mL,貯于棕色瓶中,限當(dāng)日使用。(3)消泡劑有機(jī)硅消泡劑或甘油聚醛。實(shí)驗(yàn)步驟(1)按上圖把雙乙酰蒸儲(chǔ)器

19、安裝好,把夾套蒸儲(chǔ)器下端的排氣夾子打開(kāi)。(2)將內(nèi)裝2.5mL蒸儲(chǔ)水的容量瓶(或量筒)放于冷凝器下,使出口尖端浸沒(méi)在水面下,外加冰水冷卻。(3)加熱蒸汽發(fā)生器至沸,通汽加熱夾套,備用。(4)于100mL量筒中加入24滴消泡劑,再注入5c左右未除氣啤酒100mL。(5)待夾套蒸儲(chǔ)器下端冒大汽時(shí),打開(kāi)進(jìn)樣口瓶塞,將啤酒迅速注入蒸儲(chǔ)器內(nèi),再用約10mL蒸儲(chǔ)水沖洗量筒,同時(shí)倒入,迅速蓋好進(jìn)樣口塞子,用水封口。(6)待夾套蒸儲(chǔ)器下端再次冒大汽時(shí),將排氣夾子夾住,開(kāi)始蒸儲(chǔ),到儲(chǔ)出液接近25mL時(shí)取下容量瓶,用水定容至25mL,搖勻(蒸儲(chǔ)應(yīng)在3分鐘內(nèi)完成)。(7)分別吸取儲(chǔ)出液10mL于兩支比色管中。一管作

20、為樣品管加入0.5mL鄰苯二胺溶液,另一管不加作空白,充分搖勻后,同時(shí)置于暗處放置2030分鐘,然后于樣品管中加2mL4N鹽酸溶液,于空白管中加2.5mL4N鹽酸溶掖,混勻。(8)在335nm波長(zhǎng)處,用2cm比色皿以空白作對(duì)照測(cè)定樣品吸光度。(9)計(jì)算:雙乙酰(mg/L)=A335X1.2注意事項(xiàng)蒸儲(chǔ)時(shí)加入試樣要迅速,勿使雙乙酰損失。蒸儲(chǔ)要求在3分鐘內(nèi)完成。嚴(yán)格控制蒸汽量,勿使泡沫過(guò)高,被蒸汽帶走而導(dǎo)致蒸儲(chǔ)失敗。顯色反應(yīng)在暗處進(jìn)行,否則導(dǎo)致結(jié)果偏高。三、食品的衛(wèi)生指標(biāo)檢測(cè)方法GB/T5009.49甲醛的測(cè)定1、甲醛的測(cè)定方法4.4甲醛原理中醛在過(guò)量乙酸鐵的存在下,與乙酰內(nèi)酮和氨離生成黃色的2.

21、6-二甲基-35二乙戢基】,4二氫毗咤化合物,在波長(zhǎng)415nm處有蛉大吸收,在一定濃度范圍,其吸光度值與甲姓含量成正比,與標(biāo)準(zhǔn)系列比較定量.試劑<4.2.1乙酰丙酮(GH,O”),分析純.4.4.2.2乙酸餃GHyNO力:分析純.4.4.2.3乙酸(GH,COQ:分析純4.4.2.4甲醍(CH,O):分析純4.4.2.5硫代硫般鈉(Na,工。5乩0):基準(zhǔn)物質(zhì)。442.6碘(Hi分析鈍4.4.2.7淀粉(C.T053指示劑4.4.2.8硫酸(H“SOJ:分析純.4.4.2.9氫氧化鈉(NaOH),分析純.4.4.2.10磷酸(HjPOJ,分析純。4.4.2.11乙酰丙能溶液:稱(chēng)取新蒸慵乙

22、帙丙胴04g和乙酸鍍252乙酸3mL溶于水中,定容至200mL備用,用時(shí)配制.4.4.2.12甲酹:36%38%.4.4.2.13硫代硫酸鈉標(biāo)準(zhǔn)溶液(0.1000mol/L),見(jiàn)GB/T5009.12003的第B.15章.4.4.2.14碘標(biāo)準(zhǔn)溶液(0.1mol/L3見(jiàn)GB/T5009.1-2003的第B.13章.<4.2.15淀粉指示劑(5g/L):稱(chēng)取0.5N可溶性淀粉,加入5mL水,攪勻后緩緩攸入100mL沸水中,隨加麗攪拌,底沸2min放冷,備用.此指示劑應(yīng)臨用時(shí)現(xiàn)配.4.4.2.16硫酸溶液Qmd/L),量取30mL硫酸,緩緩注入適量水中,冷卻至室溫后用水稀釋至1000mL,搖

23、勻.44.2.17氫氧化結(jié)溶液(Imol/L):吸取56mL澄清的氫氣化的飽和溶液,加適尿斯煮沸過(guò)的冷水至1000mL.輜&1_4.4.2.18硝酸溶液(200g/L):稱(chēng)取20g磷酸,加水稀群至100mL,混勾.4.4.2.19甲酹標(biāo)準(zhǔn)溶液的配制和標(biāo)定.吸取36%38%甲酸溶液7.0mL,加入1n0.5mL,用水稀釋至250mL.此液為標(biāo)準(zhǔn)溶液.吸取上述標(biāo)準(zhǔn)溶液10.0mL于100mL若水桶稀定容再吸10.0mL稀釋溶液于250mL硬量瓶中,加水90mL.O.1mol/L碘溶/1mcl/L氫氧化的15mL,插勻,放置15min.再加入1mol/L硫酸溶液20mL酸化,用0.1硫代破酸

24、的標(biāo)準(zhǔn)溶液滴定至淡黃色,然后加約5g/L淀粉指示劑1mL,繼續(xù)滴定至藍(lán)色捷2同時(shí)做試劑空白試驗(yàn)甲醛標(biāo)疵溶液的濃度按式(3)計(jì)算.X=(匕一匕)XcX15式中,X甲醍標(biāo)準(zhǔn)溶液的濃度,單位為亳克短塞開(kāi)(mg/mL>sVi空白試驗(yàn)所消耗的硫代硫酸的標(biāo)準(zhǔn)溶液的體積,單位為至升(mL八V,滴定甲醛溶液所消耗的硫代硫酸鈉標(biāo)準(zhǔn)溶液的體積,單位為亳升(eL),硫代硫酸鈉標(biāo)準(zhǔn)溶液的濃度,單位為摩爾每升(mol/L),15與1.000mol/L硫代硫酸鈉標(biāo)準(zhǔn)溶液1.0mL相當(dāng)?shù)募兹┑馁|(zhì)融,單位為亳克(n用上述已標(biāo)定甲酹濃度的溶液,用水配制成含甲解1XR/mL的甲酹標(biāo)準(zhǔn)使用液。4.4.3儀器<4.3.1

25、分光光度計(jì)。<4.3.2水蒸氣蒸餌裝置.4.<3.3500mL蒸飾瓶試樣業(yè)理銀取已除去二氧化碳的啤酒25eL移入500ibL塞蟠瓶中,加200f?/L硝酸溶液2。mL于蒸譚接水蒸氣蒸慵鍛置中蒸恒,收集慵出液于100mL容最瓶中(駒100mL)冷卻后加水稀弗至刻度.4.4.4.?測(cè)定精密吸取1M«/mL的甲醛標(biāo)準(zhǔn)溶液各0.00mL、650mL.1.00mL.2.00mL,3.00n4,00mL.8h00mL于25mL比色管中,加水至10eL.吸取樣品愉出液lamL移入25mL比色管中.標(biāo)選系列和樣跖的比色管中,各加入乙瓶丙雨/2O1L,搖勻后在沸水浴中加熱10m括,取出冷卻

26、,于分光卷度計(jì)被長(zhǎng)415nni處第定唳光度,繪制標(biāo)P線.從標(biāo)準(zhǔn)曲線上交出試樣的含址.果計(jì)算試擇中甲戢的含量按式(外計(jì)算.vm,XosV(式中:X成樣中甲醛的含量,隼位為毫克每升(mWL).游一從標(biāo)準(zhǔn)曲線上查出的相當(dāng)?shù)募柞母顾?單位為微克印外;V測(cè)定樣液中相當(dāng)?shù)脑嚇芋w模,單位為毫升(mU.計(jì)算結(jié)果保留兩5有效數(shù)字.2、鉛的測(cè)定方法GB5009.12-2010食品中鉛的測(cè)定:石墨爐原子吸收光譜法.1原理試樣經(jīng)灰化或酸消解后,注入原子吸收分光光度計(jì)石墨爐中,電熱原子化后吸收283.3nm共振線,在一定濃度范圍,其吸收值與鉛含量成正比,與標(biāo)準(zhǔn)系列比較定量。2試劑和材料除非另有規(guī)定,本方法所使用試劑均

27、為分析純,水為GB/T6682規(guī)定的一級(jí)水。硝酸:優(yōu)級(jí)純。過(guò)硫酸俊。過(guò)氧化氫(30%)。高氯酸:優(yōu)級(jí)純。硝酸(1+1):取50mL硝酸慢慢加入50mL水中。硝酸(0.5mol/L):取3.2mL硝酸加入50mL水中,稀釋至100mL。硝酸(lmo1/L):取6.4mL硝酸加入50mL水中,稀釋至100mL。磷酸二氫錢(qián)溶液(20g/L):稱(chēng)取2.0g磷酸二氫錢(qián),以水溶解稀釋至100mL?;旌纤幔合跛崾呗人幔?+1)。取9份硝酸與1份高氯酸混合。鉛標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液:準(zhǔn)確稱(chēng)取1.000g金屬鉛(99.99%),分次加少量硝酸(4.5),加熱溶解,總量不超過(guò)37mL,移入1000mL容量瓶,加水至刻度。混

28、勻。此溶液每毫升含1.0mg鉛。鉛標(biāo)準(zhǔn)使用液:每次吸取鉛標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液1.0mL于100mL容量瓶中,加硝酸(4.6)至刻度。如此經(jīng)多次稀釋成每毫升含10.0ng,20.0ng,40.0ng,60.0ng,80.0ng鉛的標(biāo)準(zhǔn)使用液。3儀器和設(shè)備原子吸收光譜儀,附石墨爐及鉛空心陰極燈。馬弗爐。天平:感量為1mg。干燥恒溫箱。瓷塔蝸。壓力消解器、壓力消解罐或壓力溶彈。可調(diào)式電熱板、可調(diào)式電爐。.4分析步驟A試樣預(yù)處理在采樣和制備過(guò)程中,應(yīng)注意不使試樣污染。糧食、豆類(lèi)去雜物后,磨碎,過(guò)20目篩,儲(chǔ)于塑料瓶中,保存?zhèn)溆谩J卟?、水果、魚(yú)類(lèi)、肉類(lèi)及蛋類(lèi)等水分含量高的鮮樣,用食品加工機(jī)或勻漿機(jī)打成勻漿,儲(chǔ)于塑

29、料瓶中,保存?zhèn)溆?。B試樣消解(可根據(jù)實(shí)驗(yàn)室條件選用以下任何一種方法消解)壓力消解罐消解法:稱(chēng)取1g2g試樣(精確到0.001g,干樣、含脂肪高白試樣v1g,鮮樣v2g或按壓力消解罐使用說(shuō)明書(shū)稱(chēng)取試樣)于聚四氟乙烯內(nèi)罐,加硝酸2mlr-4mL浸泡過(guò)夜。再加過(guò)氧化氫2mL3mL(總量不能超過(guò)罐容積的1/3)。蓋好內(nèi)蓋,旋緊不銹鋼外套,放入恒溫干燥箱,120C140C保持3h4h,在箱內(nèi)自然冷卻至室溫,用滴管將消化液洗入或過(guò)濾入(視消化后試樣的鹽分而定)10mL25mL容量瓶中,用水少量多次洗滌罐,洗液合并于容量瓶中并定容至刻度,混勻備用;同時(shí)作試劑空白。干法灰化:稱(chēng)取1g5g試樣(精確到0.001

30、g,根據(jù)鉛含量而定)于瓷塔期中,先小火在可調(diào)式電熱板上炭化至無(wú)煙,移入馬弗爐500c±25C灰化6h8h,冷卻。若個(gè)別試樣灰化不徹底,則加1mL混合酸在可調(diào)式電爐上小火加熱,反復(fù)多次直到消化完全,放冷,用硝酸將灰分溶解,用滴管將試樣消化液洗入或過(guò)濾入(視消化后試樣的鹽分而定)10mL-25mL容量瓶中,用水少量多次洗滌瓷塔期,洗液合并于容量瓶中并定容至刻度,混勻備用;同時(shí)作試劑空白。過(guò)硫酸鏤灰化法:稱(chēng)取1g5g試樣(精確到0.001g)于瓷塔期中,加2mL4mL硝酸浸泡1h以上,先小火炭化,冷卻后加2.00g3.00g過(guò)硫酸鏤蓋于上面,繼續(xù)炭化至不冒煙,轉(zhuǎn)入馬弗爐,500C±

31、;25C恒溫2h,再升至800C,保持20min,冷卻,加2mL3mL硝酸,用滴管將試樣消化液洗入或過(guò)濾入(視消化后試樣的鹽分而定)10mL25mL容量瓶中,用水少量多次洗滌瓷塔期,洗液合并于容量瓶中并定容至刻度,混勻備用;同時(shí)作試劑空白。濕式消解法:稱(chēng)取試樣1g5g(精確到0.001g)于錐形瓶或高腳燒杯中,放數(shù)粒玻璃珠,加10mL混合酸,加蓋浸泡過(guò)夜,加一小漏斗于電爐上消解,若變棕黑色,再加混合酸,直至冒白煙,消化液呈無(wú)色透明或略帶黃色,放冷,用滴管將試樣消化液洗入或過(guò)濾入(視消化后試樣的鹽分而定)10mL25mL容量瓶中,用水少量多次洗滌錐形瓶或高腳燒杯,洗液合并于容量瓶中并定容至刻度,

32、混勻備用;同時(shí)作試劑空白。5測(cè)定A儀器條件根據(jù)各自?xún)x器性能調(diào)至最佳狀態(tài)。參考條件為波長(zhǎng)283.3nm,狹縫0.2nm1.0nm,燈電流5mA-7mA干燥溫度120C,20s;灰化溫度450C,持續(xù)15s20s,原子化溫度:1700C2300C,持續(xù)4s5s,背景校正為笊燈或塞曼效應(yīng)。B標(biāo)準(zhǔn)曲線繪制吸取上面配制的鉛標(biāo)準(zhǔn)使用液10.0ng/mL(或科g/L),20.0ng/mL(或科g/L),40.0ng/mL(或g/L),60.0ng/mL(或科g/L),80.0ng/mL(或g/L)各10科L,注入石墨爐,測(cè)得其吸光值并求得吸光值與濃度關(guān)系的一元線性回歸方程。C試樣測(cè)定分別吸取樣液和試劑空白液

33、各10L,注入石墨爐,測(cè)得其吸光值,代入標(biāo)準(zhǔn)系列的一元線性回歸方程中求得樣液中鉛含量。D基體改進(jìn)劑的使用對(duì)有干擾試樣,則注入適量的基體改進(jìn)劑磷酸二氫錢(qián)溶液(一般為5科L或與試樣同量)消除干擾。繪制鉛標(biāo)準(zhǔn)曲線時(shí)也要加入與試樣測(cè)定時(shí)等量的基體改進(jìn)劑磷酸二氫錢(qián)溶液。6分析結(jié)果的表述試樣中鉛含量按式進(jìn)行計(jì)算:X=(C1-C0)V1000m10001000式中:X試樣中鉛含量,單位為毫克每千克或毫克每升(mg/kg或mg/L);c1測(cè)定樣液中鉛含量,單位為納克每毫升(ng/mL);C0空白液中鉛含量,單位為納克每毫升(ng/mL);V試樣消化液定量總體積,單位為毫升(mD;m試樣質(zhì)量或體積,單位為克或毫

34、升(g或mD。以重復(fù)性條件下獲得的兩次獨(dú)立測(cè)定結(jié)果的算術(shù)平均值表示,結(jié)果保留兩位有效數(shù)字。3、沙門(mén)氏菌的檢驗(yàn)GB/T4789.25沙門(mén)氏菌檢驗(yàn)。A前增菌稱(chēng)取25g(ml.)樣品放入盛有225mLBPW的無(wú)菌均質(zhì)杯中,以8000r/min10000r/min均質(zhì)1min2min,或置于盛有225mLBPW的無(wú)菌均質(zhì)袋中,用拍擊式均質(zhì)器拍打1min2min。若樣品為液態(tài),不需要均質(zhì),振蕩混勻。如需測(cè)定pH值,用1mol/mL無(wú)菌NaOH或HCl調(diào)pH至6.8±0.2。無(wú)菌操作將樣品轉(zhuǎn)至500mL錐形瓶中,如使用均質(zhì)袋,可直接進(jìn)行培養(yǎng),于36±1C培養(yǎng)8h18h。如為冷凍產(chǎn)品,應(yīng)

35、在45C以下不超過(guò)15min,或2C5C不超過(guò)18h解凍。B增菌輕輕搖動(dòng)培養(yǎng)過(guò)的樣品混合物,移取1mL,轉(zhuǎn)種于10mLTTB內(nèi),于42C±1C培養(yǎng)18h24h。同時(shí),另取1mL,轉(zhuǎn)種于10mLSC內(nèi),于36±1C培養(yǎng)18h24h。C分離分別用接種環(huán)取增菌液1環(huán),劃線接種于一個(gè)BS瓊脂平板和一個(gè)XLD瓊脂平板(或HE瓊脂平板或沙門(mén)氏菌屬顯色培養(yǎng)基平板)。于36c±1C分別培養(yǎng)18h24h(XLD瓊脂平板、HE瓊脂平板、沙門(mén)氏菌屬顯色培養(yǎng)基平板)或40h48h(BS瓊脂平板),觀察各個(gè)平板上生長(zhǎng)的菌落,各個(gè)平板上的菌落特征見(jiàn)表5。表5沙門(mén)氏菌屬在不同選擇性瓊脂平板上的

36、菌落特征選擇性瓊脂平板沙門(mén)氏菌BS瓊脂菌落為黑色有金屬光澤、棕褐色或灰色,菌落周?chē)囵B(yǎng)基可呈黑色或棕色;有些菌株形成灰綠色的菌落,周?chē)囵B(yǎng)基不變。HE瓊脂藍(lán)綠色或藍(lán)色,多數(shù)菌落中心黑色或幾乎全黑色;有些菌株為黃色,中心黑色或幾乎全黑色.XLD瓊脂菌落呈粉紅色,帶或不帶黑色中心,有些菌株可呈現(xiàn)大的帶光澤的黑色中心,或呈現(xiàn)全部黑色的菌落;后些菌株為黃色菌落,帶或不帶黑色中心。沙門(mén)氏菌屬顯色培加基按照顯色培養(yǎng)基的說(shuō)明進(jìn)行判定D生化試驗(yàn)自選擇性瓊脂平板上分別挑取2個(gè)以上典型或可疑菌落,接種三糖鐵瓊脂,先在斜面劃線,再于底層穿刺;接種針不要滅菌,直接接種賴(lài)氨酸脫竣酶試驗(yàn)培養(yǎng)基和營(yíng)養(yǎng)瓊脂平板,于36C&#

37、177;1C培養(yǎng)18h24h,必要時(shí)可延長(zhǎng)至48h。在三糖鐵瓊脂和賴(lài)氨酸脫竣酶試驗(yàn)培養(yǎng)基內(nèi),沙門(mén)氏菌屬的反應(yīng)結(jié)果見(jiàn)表6。表6沙門(mén)氏菌屬在三糖鐵瓊脂和賴(lài)氨酸脫竣酶試驗(yàn)培養(yǎng)基內(nèi)的反應(yīng)結(jié)果三糖鐵瓊脂賴(lài)氨酸脫竣酶試驗(yàn)培養(yǎng)基初步判斷斜面底層產(chǎn)氣硫化氫KA十(一)十(一)十可疑沙門(mén)氏菌屬KA十(一)十(一)一可疑沙門(mén)氏菌屬AA十(一)十(一)十可疑沙門(mén)氏菌屬AA+/一+/一一非沙門(mén)氏菌KK+/一+/一+/一非沙門(mén)氏菌注:K:產(chǎn)堿,A產(chǎn)酸;+:陽(yáng)性,一:陰性;+(一):多數(shù)陽(yáng)性,少數(shù)陰性;+/:陽(yáng)性或陰性。接種三糖鐵瓊脂和賴(lài)氨酸脫竣酶試驗(yàn)培養(yǎng)基的同時(shí),可直接接種蛋白月東水(供做靛基質(zhì)試驗(yàn))、尿素瓊脂(pH7

38、.2)、氧化鉀(KCN培養(yǎng)基,也可在初步判斷結(jié)果后從營(yíng)養(yǎng)瓊脂平板上挑取可疑菌落接種。于36c±1C培養(yǎng)18h24h,必要時(shí)可延長(zhǎng)至48h,按表7判定結(jié)果。將已挑菌落的平板儲(chǔ)存于2c5C或室溫至少保留24h,以備必要時(shí)復(fù)查。表7沙門(mén)氏菌屬生化反應(yīng)初步鑒別表反應(yīng)序號(hào)硫化氫(H2S)靛基質(zhì)pH7.2尿素氧化鉀賴(lài)氨酸脫竣酶A1十一一一十A2+十一一十A3一一一一+/一注:+陽(yáng)性;一陰性;+/陽(yáng)性或陰性。反應(yīng)序號(hào)A1:典型反應(yīng)判定為沙門(mén)氏菌屬。如尿素、KCN和賴(lài)氨酸脫竣酶3項(xiàng)中有1項(xiàng)異常,按表8可判定為沙門(mén)氏菌。如有2項(xiàng)異常為非沙門(mén)氏菌。表8沙門(mén)氏菌屬生化反應(yīng)初步鑒別表pH7.2尿素氧化鉀(K

39、CN賴(lài)氨酸脫竣酶判定結(jié)果一一一甲型副傷寒沙門(mén)氏菌(要求血清學(xué)鑒定結(jié)果)一十十沙門(mén)氏菌IV或V(要求符合本群生化特性)十一十沙門(mén)氏菌個(gè)別變體(要求血清學(xué)鑒定結(jié)果)注:+表示陽(yáng)性;+表示陰性。反應(yīng)序號(hào)A2:補(bǔ)做甘露醇和山梨醇試驗(yàn),沙門(mén)氏菌靛基質(zhì)陽(yáng)性變體兩項(xiàng)試驗(yàn)結(jié)果均為陽(yáng)性,但需要結(jié)合血清學(xué)鑒定結(jié)果進(jìn)行判定。反應(yīng)序號(hào)A3:補(bǔ)做ONPGONPG陰性為沙門(mén)氏菌,同時(shí)賴(lài)氨酸脫竣酶陽(yáng)性,甲型副傷寒沙門(mén)氏菌為賴(lài)氨酸脫竣酶陰性。如選擇生化鑒定試劑盒或全自動(dòng)微生物生化鑒定系統(tǒng),可根據(jù)初步判斷結(jié)果,從營(yíng)養(yǎng)瓊脂平板上挑取可疑菌落,用生理鹽水制備成濁度適當(dāng)?shù)木鷳乙?,使用生化鑒定試劑盒或全自動(dòng)微生物生化鑒定系統(tǒng)進(jìn)行鑒定。

40、E血清學(xué)鑒定抗原的準(zhǔn)備:一般采用1.2%1.5%瓊脂培養(yǎng)物作為玻片凝集試驗(yàn)用的抗原。O血清不凝集時(shí),將菌株接種在瓊脂量較高的(如2%3%)培養(yǎng)基上再檢查;如果是由于Vi抗原的存在而阻止了O凝集反應(yīng)時(shí),可挑取菌苔于1mL生理鹽水中做成濃菌液,于酒精燈火焰上煮沸后再檢查。H抗原發(fā)育不良時(shí),將菌株接種在0.55%-0.65%半固體瓊脂平板的中央,俟菌落蔓延生長(zhǎng)時(shí),在其邊緣部分取菌檢查;或?qū)⒕晖ㄟ^(guò)裝有0.3%0.4%半固體瓊脂的小玻管1次2次,自遠(yuǎn)端取菌培養(yǎng)后再檢查。多價(jià)菌體抗原(O)鑒定:在玻片上劃出2個(gè)約1cmX2cm的區(qū)域,挑取1環(huán)待測(cè)菌,各放1/2環(huán)于玻片上的每一區(qū)域上部,在其中一個(gè)區(qū)域下部

41、加1滴多價(jià)菌體(O)抗血清,在另一區(qū)域下部加入1滴生理鹽水,作為對(duì)照。再用無(wú)菌的接種環(huán)或針?lè)謩e將兩個(gè)區(qū)域內(nèi)的菌落研成乳狀液。將玻片傾斜搖動(dòng)混合1min,并對(duì)著黑暗背景進(jìn)行觀察,任何程度的凝集現(xiàn)象皆為陽(yáng)性反應(yīng)。多價(jià)鞭毛抗原(H)鑒定:同多價(jià)菌體抗原(。鑒定。F結(jié)果與報(bào)告綜合以上生化試驗(yàn)和血清學(xué)鑒定的結(jié)果,報(bào)告25g(mD樣品中檢出或未檢出沙門(mén)氏菌4、金黃色葡萄球菌的檢驗(yàn)GB/T4789.10金黃色葡萄球菌檢驗(yàn)。A樣品的處理稱(chēng)取25g樣品至盛有225mL7.5%氯化鈉肉湯或10%氯化鈉胰酪月東大豆肉湯的無(wú)菌均質(zhì)杯內(nèi),8000r/min10000r/min均質(zhì)1min2min,或放入盛有225mL7

42、.5%氯化鈉肉湯或10%氯化鈉胰酪月東大豆肉湯的無(wú)菌均質(zhì)袋中,用拍擊式均質(zhì)器拍打1min2min。若樣品為液態(tài),吸取25mL樣品至盛有225mL7.5%氯化鈉肉湯或10%氯化鈉胰酪月東大豆肉湯的無(wú)菌錐形瓶(瓶?jī)?nèi)可預(yù)置適當(dāng)數(shù)量的無(wú)菌玻璃珠)中,振蕩混勻。B增菌和分離培養(yǎng)將上述樣品勻液于36C±1C培養(yǎng)18h24h。金黃色葡萄球菌在7.5%氯化鈉肉湯中呈混濁生長(zhǎng),污染嚴(yán)重時(shí)在10%氯化鈉胰酪月東大豆肉湯內(nèi)呈混濁生長(zhǎng)。將上述培養(yǎng)物,分別劃線接種到Baird-Parker平板和血平板,血平板36±1C培養(yǎng)18h24h。Baird-Parker平板36C±1C培養(yǎng)18h24

43、h或45h48h。金黃色葡萄球菌在Baird-Parker平板上,菌落直徑為2mm-3mm,顏色呈灰色到黑色,邊緣為淡色,周?chē)鸀橐换鞚釒В谄渫鈱佑幸煌该魅?。用接種針接觸菌落有似奶油至樹(shù)膠樣的硬度,偶然會(huì)遇到非脂肪溶解的類(lèi)似菌落;但無(wú)混濁帶及透明圈。長(zhǎng)期保存的冷凍或干燥食品中所分離的菌落比典型菌落所產(chǎn)生的黑色較淡些,外觀可能粗糙并干燥。在血平板上,形成菌落較大,圓形、光滑凸起、濕潤(rùn)、金黃色(有時(shí)為白色),菌落周?chē)梢?jiàn)完全透明溶血圈。挑取上述菌落進(jìn)行革蘭氏染色鏡檢及血漿凝固酶試驗(yàn)。C鑒定染色鏡檢:金黃色葡萄球菌為革蘭氏陽(yáng)性球菌,排列呈葡萄球狀,無(wú)芽胞,無(wú)莢膜,直徑約為0.5m-1ni血漿凝固酶試

44、驗(yàn):挑取、Baird-Parker平板或血平板上可疑菌落1個(gè)或以上,分別接種到5mLBHI和營(yíng)養(yǎng)瓊脂小斜面,36±1C培養(yǎng)18h24h。取新鮮配置兔血漿0.5mL,放入小試管中,再加入BHI培養(yǎng)物0.2mL0.3mL,振蕩搖勻,置36C±1C溫箱或水浴箱內(nèi),每半小時(shí)觀察一次,觀察6h,如呈現(xiàn)凝固(即將試管傾斜或倒置時(shí),呈現(xiàn)凝塊)或凝固體積大于原體積的一半,被判定為陽(yáng)性結(jié)果。同時(shí)以血漿凝固酶試驗(yàn)陽(yáng)性和陰性葡萄球菌菌株的肉湯培養(yǎng)物作為對(duì)照。也可用商品化的試劑,按說(shuō)明書(shū)操作,進(jìn)行血漿凝固酶試驗(yàn)。結(jié)果如可疑,挑取營(yíng)養(yǎng)瓊脂小斜面的菌落到5mLBHI,36C±1C培養(yǎng)18h4

45、8h,重復(fù)試驗(yàn)。D葡萄球菌腸毒素的檢驗(yàn)可疑食物中毒樣品或產(chǎn)生葡萄球菌腸毒素的金黃色葡萄球菌菌株的鑒定,應(yīng)按附錄B僉測(cè)葡萄球菌腸毒素。E結(jié)果與報(bào)告結(jié)果判定:符合上述鑒定,可判定為金黃色葡萄球菌。結(jié)果報(bào)告:在25g(ml.)樣品中檢出或未檢出金黃色葡萄球菌。5、納他霉素的測(cè)定GBT21915-2008食品中納他霉素的測(cè)定液相色譜法本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了食品中納他霉素的液相色譜測(cè)定方法.本標(biāo)準(zhǔn)適用于食品中納他霄素的測(cè)定.本標(biāo)準(zhǔn)定量檢出限為0.5mg/kg(固體和半固體樣品),0.5mg/L(液體樣品).2原理樣品經(jīng)甲醇提取,采用加水冷凍去除樣品中的脂肪成分或離心的方式凈化,反相液相色譜-紫外檢測(cè)器測(cè)定,外標(biāo)法

46、定量.3試劑和材料水去離子水或相當(dāng)純度的水.甲靜:分析純、色譜純.3納他霉索(natamycin)1純度295%.標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液:準(zhǔn)確稱(chēng)取適量的納他霍素標(biāo)準(zhǔn)品(精確至0.1mg),用甲醇溶解,配成濃度為100Rg/mL的標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液.冰乙酸:優(yōu)級(jí)純.0.45Dm、0.22'm針頭式過(guò)濾器(水性).4儀舞高效液相色譜儀:配紫外檢測(cè)器.超聲波清洗器.電子天平:感量0.1mg.注射器,一次性,10mL.漏斗:直徑大約7cm.冰箱:-20C-15,C.<7離心機(jī).5樣品制備s2果汗飲料棒品掂地量取果汁飲料祥晶】0.匚mL,加入30mL用尊招料崔取30;而提取液依次過(guò)0,45um和5*re升頭式

47、近湮器.收集濾液妁2nL上機(jī)副定.柳汁祥晶回收率圖參見(jiàn)圖A.6.5色調(diào)規(guī)定61色翳柱iC,”柱凈Mn3tSmmXlSQmm(或相當(dāng)暨號(hào)色港柱兀6.2海勃相r甲辭一水+乙酸/G+E+5).6.3漉速工0niL/min.6.4根靄眨袋:制5f.5,5薩祥信JQ產(chǎn)L.><安式口)開(kāi)算而體、于|噌購(gòu)(乳酪、我點(diǎn)、火褪J14國(guó)2申納他海素電量,按式(2)計(jì)算液體樣品中型他霜素的含XVXI000式中rX一就祥中£由吊準(zhǔn)y一樣品麻Q%體積,單力為毒#向二、二弟:|m_祥品為克計(jì)算結(jié)果保&則用效數(shù)字.l3V.jx試樣中解套黑的含置:?jiǎn)挝粸槲⒖四瓴Gq-6g/mL);:/£

48、市桁花曲線時(shí)圖產(chǎn)品溶步中納他毒素的含再,單位為微克每型開(kāi)4.nlj;%樣品溶液上賽長(zhǎng),單傍!為享手/稼!/匕一樣品量取悔奘卷曾某mLJ.,/計(jì)算結(jié)果保留三位癡炊家/6、焦糖色的測(cè)定GB8817-2001食品添加劑-焦糖色的測(cè)定4試峽方法法驗(yàn)中所用試劑和儀器設(shè)備除特別注明外,均采用分析純?cè)噭?、蒸憎水或去離干水及實(shí)驗(yàn)室常用儀器設(shè)備.4.1感官檢腺4JJ色澤和外觀形態(tài)將樣品(液狀、.粉狀)分別吸入或倒入無(wú)色玻璃燒杯中,觀察其色澤和外觀形狀。4L2氣味泗樣品腌釋成5g/L-20口/L的水溶液,嗔其氣味"4.1.3澄明度將樣品稀釋成2r/L-4e/L的水搟液,普人50aL比色管中,在明亮處由上

49、到下觀痕&42吸光度的測(cè)定稱(chēng)取樣品0.3孤精確至。,O02g),用水定容于500mL容鼠根中,用1cm出色UL,在610nm處用分光光度計(jì)測(cè)定其吸光度.4.3干廉失章的測(cè)定43.1測(cè)定方詼用已恒重過(guò)的歙量瓶稱(chēng)取樣品2妙準(zhǔn)確至&0002g),于1加C干爆2人冷卻,稱(chēng)重°4.32分析結(jié)果的表述式中:出干蝶失重,%:此一“拱干前稱(chēng)童版和樣品的質(zhì)量,J的1一雄干后稱(chēng)2瓶和樣品的質(zhì)置噌;M樣品版量日7、三氯蔗糖的測(cè)定GBT22255-2008食品中三氯蔗糖(蔗糖素)的測(cè)定試樣的制備'-低曲,無(wú)謂及非青色類(lèi)試樣的制備1.11準(zhǔn)確稱(chēng)取均勻試樣】其精】。.0。1g),置于5QmL的離心管中,加入5mL蒸愉水.漩濟(jì)振蕩器上振蕩3min后加入15mL甲薛,繼續(xù)振蕩30的超聲波提取2。min后,以3000r/min離心5而n,仔期將上清液移入50mL玻璃蒸發(fā)皿內(nèi).

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