液相進(jìn)樣針數(shù)

1、液相進(jìn)樣針數(shù)一、含量方法學(xué)研究所需圖譜（流動相、檢測限和定量限參照有關(guān)物質(zhì)，如有關(guān)物質(zhì)和含量方法一致，可以只做進(jìn)樣精密度、溶液穩(wěn)定性）1、線性：包含60%、80%、100%、120%、140%,通常是57針，要求r.0.9992、進(jìn)樣精密度：用對照品做，單樣連續(xù)進(jìn)六針，要求RSD<2.0%。3、重復(fù)性試驗：雙樣雙針，一個樣進(jìn)兩針，六個樣，兩個對照，總共16針,要求RSD<2.0%。4、回收率（準(zhǔn)確度）：總共22針，分別做三個80%、三個100%、三個120%,一個樣兩針，兩個對照四針，九個樣18針，要求回收含量在98%102%之間，RSD<2.0%。5、含量測定：總共28針，

2、方法驗證一兩個對照品四針，仿制品兩個樣四針，小試樣品兩個樣四針。中試樣品三批一兩個對照四針，一批雙樣四針，三批六個樣十二針。6、溶液穩(wěn)定性：單樣單針，分另U0h、1h、2h、4h、6h、8h,RSD<2.0%,7、專屬性：空白輔料、空白溶劑、正常樣、熱破壞樣、酸破壞樣、酸液空白樣、堿破壞樣、堿液空白、光破壞樣、氧化破壞樣、雙氧水空白樣。共九針，需達(dá)到降解約20%,該雜質(zhì)峰與其它峰應(yīng)能完全分離，分離度不得小于2.0（已知雜質(zhì)）。8、穩(wěn)定性試驗：包括加速0、1、2、3、6月30、40C,長期3、6、9、12、24月，均做含量測定和有關(guān)物質(zhì)。含量測定雙樣雙針，一樣兩針，一批兩樣，三批六樣十二針

3、，兩個對照四針。有關(guān)物質(zhì)做空白溶劑，單樣單針，100%樣品、1%自身對照，共七針二、有關(guān)物質(zhì)方法學(xué)研究所需圖譜1、波長掃描和流動相的選擇：參照國家標(biāo)準(zhǔn)并根據(jù)歐洲藥典、USP英國藥典以及日本藥典中收載的流動相做，取樣品，配成一定濃度進(jìn)樣，進(jìn)行比較確定，選取其中最合適的。確定流動相后，并驅(qū)樣品、對照品以及國外上市樣品，配成參考文獻(xiàn)中的濃度，進(jìn)樣；要求：分離度達(dá)1.5以上，分析時間通常為主身份保留時間的2-3倍，分析時間長可考慮采用梯度洗脫，共n+3張圖譜系統(tǒng)適用性試驗：配制6份相同濃度的雜質(zhì)溶液進(jìn)行分析，該雜質(zhì)峰峰面積的相對標(biāo)準(zhǔn)差應(yīng)不大于2.0%,保留時間的相對標(biāo)準(zhǔn)差應(yīng)不大于1.0%。另外，雜質(zhì)峰

4、的拖尾因子不得大于2.0,理論塔板數(shù)應(yīng)符合質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的規(guī)定。（已知雜質(zhì)）耐用性：分別考察流動相比例變化土5%、流動相pH值變化±0.2、柱溫變化土5C、檢測波長變化土5nm、流速相對值變化土20%以及采用三根不同批號的色譜柱進(jìn)行測定時，儀器色譜行為的變化，每個條件下各測試兩次?？山邮艿臉?biāo)準(zhǔn)為：各雜質(zhì)峰的拖尾因子不得大于2.0,雜質(zhì)峰與其他成分峰必須達(dá)到基線分離；各條件下的雜質(zhì)含量數(shù)據(jù)（n=6）的相對標(biāo)準(zhǔn)差應(yīng)不大于2.0%,雜質(zhì)含量的絕對值在土0.1%以內(nèi)。2、空白溶劑以及輔料干擾試驗：取溶解樣品用的溶劑，注入液相色譜儀，記錄色譜圖。觀察溶劑圖譜情況。并取樣品、處方量的空白輔料按同樣方法

5、配成一定的濃度，進(jìn)樣，記錄的譜圖。看輔料是否有干擾。共三張圖譜，輔料吸收峰面積相對于主峰<0.05%視為無干擾雜質(zhì)定位：如有已知雜質(zhì)并且雜質(zhì)對照品可獲得的，配制雜質(zhì)對照溶液，進(jìn)樣，記錄色譜圖。共四張圖譜。3、專屬性：正常樣、熱破壞樣、酸破壞樣、酸液空白樣、堿破壞樣、堿液空白、光破壞樣、氧化破壞樣、雙氧水空白樣。共九針，需達(dá)到降解約20%,該雜質(zhì)峰與其它峰應(yīng)能完全分離，分離度不得小于2.0（已知雜質(zhì)）。4、檢測限與定量限：檢測限用稀釋法一12個樣12針。配制6份最低定量限濃度的溶液，所測6份溶液雜質(zhì)峰保留時間的相對標(biāo)準(zhǔn)差應(yīng)不大于2.0%,峰面積的相對標(biāo)準(zhǔn)差應(yīng)不大于5.0%。檢測限S/N&g

6、t;3,定量限S/N>10。5、回收率（已知雜質(zhì)）：分別做三個80%、三個100%、三個120%,一個樣兩針，兩個對照四針，九個樣18針，要求回收含量在80%120%之間，RSD<2.0%。各濃度下的平均回收率均應(yīng)在80%-120%之間，如雜質(zhì)的濃度為定量限，則該濃度下的平均回收率可放寬至70%-130%,相對標(biāo)準(zhǔn)差應(yīng)不大于10%。6、線性：包含60%、80%、100%、120%、140%,通常是57針，要求r>0.999。截距在100%響應(yīng)值的25%以內(nèi)，響應(yīng)因子的相對標(biāo)準(zhǔn)差應(yīng)不大于10%。7、1%精密度：單樣連續(xù)進(jìn)六針，要求RSD<2.0%。8、重復(fù)性試驗（已知雜質(zhì)

7、）：雙樣雙針，一個樣進(jìn)兩針，六個樣，兩個對照，總共16針，要求RSD<15.0%。9、溶液穩(wěn)定性：單樣單針，分另U0h、1h、2h、4h、6h、8h,RSD<2.0%。按照分析方法分別配置對照品溶液與供試品溶液，平行測定兩次主成分與雜質(zhì)的含量，然后將上述溶液分別貯存在室溫與冰箱冷藏室（4C）中，在1、2、3、5和7天時分別平行測定兩次主成分與雜質(zhì)的含量?？山邮艿臉?biāo)準(zhǔn)為：主成分的含量變化的絕對值應(yīng)不大于2.0%,雜質(zhì)含量的絕對值在士0.1%以內(nèi)，并不得出現(xiàn)新的大于報告限度的雜質(zhì)。10、小試方法驗證及被仿制品：被仿制品1%自身對照，被仿制品100%樣品，小試100%,小試1%自身對照。

8、方法驗證：中試樣品三批，100%樣品和1%自身對照，空白溶劑。11、注明：主峰圖譜要求拖尾因子0.95<r<1.05,分離度最好要求1.5,理論板數(shù)一般不低于3000.（個別品種需根據(jù)實際要求而定）。三、聚合物方法學(xué)研究圖譜1系統(tǒng)適應(yīng)性試驗（水和磷酸鹽緩沖液）：藍(lán)色葡聚糖2000和對照品，理論塔板數(shù)要求不低于700。2、空白輔料3、供試品4、專屬性試驗：供試品，輔料干擾。5、檢測限與定量限：般以信噪比3:1相應(yīng)濃度確定最低檢測限，以檢測限X1000的量或濃度作為測定量（濃度）6、1%進(jìn)樣精密度：單樣連續(xù)進(jìn)六針，要求RSD<2.0%。7、溶液穩(wěn)定性：單樣單針，分另U0h、1h、2h、4h、6h、8h,RSD<2.0%。8、線性：（濃度范圍20%-200%）7個樣。供試品溶液的濃度與聚合物測定結(jié)果的相關(guān)性考察：制備系列的供試品溶液，濃度范圍為規(guī)定濃度的50%200%,共三份樣品，以測得的高聚物峰面積對溶液濃度進(jìn)行線性回歸，相關(guān)系數(shù)r應(yīng)大于0.99。F值測定的重現(xiàn)性考察：F值為對照溶液的濃度（mg）與測得的峰面積的比值，要求日內(nèi)、日間的相對標(biāo)準(zhǔn)偏差在5%以內(nèi)。對照品20%50%80%100%120%150%200%9、聚合物測定（方法驗證）被仿制品供試品被仿制品對照一質(zhì)量研究供試品一