頭孢他啶誘導(dǎo)大腸埃希菌內(nèi)毒素釋放及常用中藥注射劑抗內(nèi)毒素作用

1、頭孢他啶誘導(dǎo)大腸埃希菌內(nèi)毒素釋放及常用中藥注射劑抗內(nèi)毒素作用         作者：司文秀 趙華 張征 楊繼章，王業(yè) 【摘要】 目的 探討頭孢他啶對(duì)不同濃度大腸埃希菌內(nèi)毒素釋放的影響及常用清熱解毒中藥注射劑體外抗內(nèi)毒素活性。方法 采用二倍稀釋法測(cè)定頭孢他啶對(duì)大腸埃希菌的MIC，并確定清開(kāi)靈、雙黃連和喜炎平注射劑臨床常用劑量對(duì)MIC的影響；               

2、                 作者：司文秀 趙華 張征 楊繼章，王業(yè) 【摘要】  目的 探討頭孢他啶對(duì)不同濃度大腸埃希菌內(nèi)毒素釋放的影響及常用清熱解毒中藥注射劑體外抗內(nèi)毒素活性。方法 采用二倍稀釋法測(cè)定頭孢他啶對(duì)大腸埃希菌的MIC，并確定清開(kāi)靈、雙黃連和喜炎平注射劑臨床常用劑量對(duì)MIC的影響；50×MIC頭孢他啶對(duì)處于對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期不同濃度大腸埃希菌內(nèi)毒素產(chǎn)生的影響；清開(kāi)靈、雙黃連和喜炎平注射劑與頭孢他啶聯(lián)

3、合應(yīng)用時(shí)抗內(nèi)毒素作用的研究。結(jié)果 頭孢他啶對(duì)大腸埃希菌的MIC為0.125g/ml，清開(kāi)靈、喜炎平注射劑對(duì)頭孢他啶的MIC無(wú)影響，雙黃連注射劑可顯著提高頭孢他啶MIC；頭孢他啶于高菌液濃度時(shí)可誘導(dǎo)內(nèi)毒素釋放，在低菌液濃度時(shí)抑制內(nèi)毒素釋放；中藥注射劑與頭孢他啶聯(lián)合應(yīng)用時(shí)，加藥順序?qū)?nèi)毒素的產(chǎn)生有一定影響，當(dāng)清開(kāi)靈、喜炎平注射劑在頭孢他啶之后應(yīng)用時(shí)，可顯著降低內(nèi)毒素含量，喜炎平的效果優(yōu)于清開(kāi)靈注射液。結(jié)論 頭孢他啶對(duì)大腸埃希菌內(nèi)毒素釋放的影響與菌液濃度有關(guān)。清開(kāi)靈、喜炎平注射劑具有抗內(nèi)毒素作用，與頭孢他啶聯(lián)用時(shí)，用藥順序?qū)?nèi)毒素的消除有一定影響。 【關(guān)鍵詞】  中藥注射劑； 頭孢他啶；

4、內(nèi)毒素； 大腸埃希菌    ABSTRACT  Objective  To study the factors that influence the endotoxin release induced by ceftazidime in different Escherichia coli concentrations, and to explore the antiendotoxin effects of 3 kinds of Chinese medicine injections, namely Qingkailing injection,

5、 Shuanghuanglian injection and Xiyanping injection in vitro.  Methods  Twofold dilution to determine the MIC of ceftazidime, and determine if the MIC could be altered by 3 kinds of injections when used in routine dosages; to study if ceftazidime (at 50×MIC) could affect the production

6、 of endotoxin while added to different concentrations of Escherichia coli which in logarithm phase; to determine the antiendotoxin activity of the three injections when used concomitantly with ceftazidime. ResultsThe MIC of ceftazidime was 0.125 g/ml, Qingkailing injection and Xiyanping injection ha

7、d no effect on it, but Shuanghuanglian injection could lead it to increased; at high Escherichia coli concentrations (2.5×1042.5×105 CFU/ml), ceftazidime induced a great deal of endotoxin release, but at low concentrations (2.5×102.5×103 CFU/ml), ceftazidime inhibited endotoxin r

8、elease; the using sequence of Chinese medicine injections and ceftazidime could affect endotoxin release. When Qingkailing injection and Xiyanping injection used after giving ceftazidime, they showed antiendotoxin effect, and Xiyanping injection was the better.  Conclusion  The endotoxin r

9、eleasing activities of ceftazidime were not only related to the bacterial concentrations but also influenced by the sequence usage of Qinakailing or Xiyanpang injections.    KEY WORDS  Chinese medicine injections;  Ceftazidime;  Endotoxin;  Escherichia coli  內(nèi)

10、毒素是眾多細(xì)胞因子誘導(dǎo)劑，可觸發(fā)炎癥級(jí)聯(lián)反應(yīng)，其成分為革蘭陰性菌細(xì)胞壁外膜的脂多糖成分。有人認(rèn)為1，革蘭陰性細(xì)菌所致的膿毒血癥至今死亡率居高不下，是由于抗菌藥物在殺滅細(xì)菌的同時(shí)伴隨著內(nèi)毒素的釋放，產(chǎn)生高內(nèi)毒素血癥所致。我們據(jù)此設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)，探討頭孢他啶在臨床用量下對(duì)細(xì)菌內(nèi)毒素產(chǎn)生的影響。尋找有效、低毒的抗內(nèi)毒素藥物一直是多年來(lái)的研究熱點(diǎn)，據(jù)文獻(xiàn)報(bào)道2，3，具有清熱解毒作用的中藥及其注射劑有抗內(nèi)毒素作用，本文模擬臨床用藥劑量、順序及間隔時(shí)間，體外實(shí)驗(yàn)考察了我院常用清熱解毒中藥注射劑清開(kāi)靈、雙黃連和喜炎平分別與頭孢他啶聯(lián)合應(yīng)用時(shí)對(duì)大腸埃希菌產(chǎn)生內(nèi)毒素的影響，旨為臨床內(nèi)毒素血癥的治療提供參考。 

11、;   1  材料與方法    1.1  材料    (1)菌種  大腸埃希菌ATCC25922，由河北醫(yī)科大學(xué)第一醫(yī)院檢驗(yàn)科提供。    (2)培養(yǎng)基  改良型RPMI 1640(?？寺∩锘瘜W(xué)制品有限公司，批號(hào)NSG0059)。    (3)試劑  頭孢他啶(每支0.5g，石藥集團(tuán)中諾藥業(yè)有限公司，批號(hào)07043001)；清開(kāi)靈注射液(每支10ml，河北神威藥業(yè)有限公司，批號(hào)07032622)；雙黃連粉

12、針劑(每支600mg，哈藥集團(tuán)中藥二廠(chǎng)，批號(hào)0611235)；喜炎平注射液(每支50mg，江西青峰藥業(yè)有限公司，批號(hào)0080313)；細(xì)菌內(nèi)毒素工作標(biāo)準(zhǔn)品(每支140Eu，中國(guó)藥品生物制品檢定所，批號(hào)150601200758)；內(nèi)毒素測(cè)定試劑盒(湛江安度斯生物公司，批號(hào)0609271)。    (4)儀器  B600A型低速離心機(jī)(白洋離心機(jī)廠(chǎng))；BET32B細(xì)菌內(nèi)毒素測(cè)定儀(天津大學(xué)無(wú)線(xiàn)電廠(chǎng))。    1.2  方法4    (1)菌液配制  細(xì)菌接種于無(wú)抗生素的RPMI

13、1640培養(yǎng)液中，于37水浴中培養(yǎng)16h，作為細(xì)菌母液。    (2)頭孢他啶MIC的測(cè)定  采用2倍稀釋法于96孔板中測(cè)定頭孢他啶在空白液、清開(kāi)靈(500倍稀釋液)、雙黃連(0.36mg/ml)及喜炎平(0.01mg/ml)中對(duì)大腸埃希菌的MIC。終菌量為5×106CFU/ml左右，37保溫箱培養(yǎng)20h。    (3)頭孢他啶對(duì)大腸埃希菌內(nèi)毒素含量測(cè)定  細(xì)菌母液臨用前配成約1×108CFU/ml，再分別以RPMI1640培養(yǎng)液稀釋成所需濃度備用。取5ml離心管若干，各加入2ml RPMI 1640培養(yǎng)液，37水浴預(yù)熱10min，加入備用菌液50l，使菌濃度分別為2.5×105、2.5×104、