脾氣虛動(dòng)物模型

1、 中醫(yī)脾氣虛證動(dòng)物模型中醫(yī)脾氣虛證動(dòng)物模型 v中醫(yī)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中醫(yī)動(dòng)物實(shí)驗(yàn) 用用現(xiàn)代實(shí)驗(yàn)的方法和手段現(xiàn)代實(shí)驗(yàn)的方法和手段研究研究中醫(yī)中醫(yī)基礎(chǔ)基礎(chǔ)理論，以驗(yàn)證和發(fā)展中醫(yī)理論。理論，以驗(yàn)證和發(fā)展中醫(yī)理論。 醫(yī)學(xué)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)動(dòng)物模擬模擬生理、病理特征生理、病理特征 觀察觀察 揭示生命和疾病規(guī)律揭示生命和疾病規(guī)律 探索生命奧秘探索生命奧秘 控制疾病控制疾病 延緩衰老延緩衰老 推廣推廣 v醫(yī)學(xué)理論研究醫(yī)學(xué)理論研究,在臨床上受到許多限制在臨床上受到許多限制 如臨床病例數(shù)量有限，所檢查的指標(biāo)不可能如臨床病例數(shù)量有限，所檢查的指標(biāo)不可能很多，人體不宜進(jìn)行損傷性檢查，尤其是組很多，人體不宜進(jìn)行損傷性檢查，尤

2、其是組織形態(tài)學(xué)觀察?？椥螒B(tài)學(xué)觀察。中醫(yī)動(dòng)物模型的研究中醫(yī)動(dòng)物模型的研究 在人為因素的作用下，使實(shí)驗(yàn)動(dòng)物接受一定的損傷，在人為因素的作用下，使實(shí)驗(yàn)動(dòng)物接受一定的損傷，如如機(jī)械機(jī)械、物理物理、化學(xué)化學(xué)、生物生物等因素，造成實(shí)驗(yàn)動(dòng)物組等因素，造成實(shí)驗(yàn)動(dòng)物組織器官或全身一定的損害，出現(xiàn)織器官或全身一定的損害，出現(xiàn)類(lèi)似于人類(lèi)疾病狀態(tài)類(lèi)似于人類(lèi)疾病狀態(tài)下的下的機(jī)能機(jī)能、代謝代謝或或形態(tài)結(jié)構(gòu)形態(tài)結(jié)構(gòu)等方面的變化等方面的變化。人類(lèi)特定病理狀態(tài)的發(fā)生、發(fā)展和結(jié)局等規(guī)律人類(lèi)特定病理狀態(tài)的發(fā)生、發(fā)展和結(jié)局等規(guī)律 模擬動(dòng)物模型是醫(yī)學(xué)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中重要的方法模擬動(dòng)物模型是醫(yī)學(xué)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中重要的方法疾病的疾病的預(yù)防、治療，以及

3、藥物篩選、新藥開(kāi)發(fā)預(yù)防、治療，以及藥物篩選、新藥開(kāi)發(fā)等等 從而觀察從而觀察實(shí)驗(yàn)依據(jù)實(shí)驗(yàn)依據(jù) 為中心為中心包括急性動(dòng)物實(shí)驗(yàn)和慢性動(dòng)物實(shí)驗(yàn)包括急性動(dòng)物實(shí)驗(yàn)和慢性動(dòng)物實(shí)驗(yàn)以以為中心，為中心，包括包括和和現(xiàn)代醫(yī)學(xué)現(xiàn)代醫(yī)學(xué)動(dòng)物模型動(dòng)物模型中醫(yī)中醫(yī)動(dòng)物模動(dòng)物模型型 中醫(yī)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)研究的意義中醫(yī)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)研究的意義標(biāo)志著中醫(yī)學(xué)從經(jīng)驗(yàn)醫(yī)學(xué)步入了實(shí)驗(yàn)醫(yī)學(xué)的新時(shí)代標(biāo)志著中醫(yī)學(xué)從經(jīng)驗(yàn)醫(yī)學(xué)步入了實(shí)驗(yàn)醫(yī)學(xué)的新時(shí)代 克服傳統(tǒng)中醫(yī)學(xué)認(rèn)識(shí)問(wèn)題的籠統(tǒng)性、模糊性和經(jīng)驗(yàn)性克服傳統(tǒng)中醫(yī)學(xué)認(rèn)識(shí)問(wèn)題的籠統(tǒng)性、模糊性和經(jīng)驗(yàn)性 （1）實(shí)驗(yàn)動(dòng)物做人類(lèi)的替身以研究中藥的毒副作用）實(shí)驗(yàn)動(dòng)物做人類(lèi)的替身以研究中藥的毒副作用一日而遇七十毒一日而遇七十毒

4、水銀中毒水銀中毒口舌糜爛口舌糜爛 備急千金要方備急千金要方 臣為君嘗藥臣為君嘗藥子為父嘗藥子為父嘗藥春秋時(shí)期春秋時(shí)期 嘗試曼羅花毒性嘗試曼羅花毒性李時(shí)珍李時(shí)珍 近年來(lái)近年來(lái)誤服大青龍湯致死誤服大青龍湯致死誤服大承氣湯致死誤服大承氣湯致死葛根湯、十味敗毒散、葛根湯、十味敗毒散、八味地黃丸、柴胡加龍骨牡蠣湯、八味地黃丸、柴胡加龍骨牡蠣湯、半夏瀉心湯等半夏瀉心湯等36種方劑有副作用種方劑有副作用日本醫(yī)藥品副作用文獻(xiàn)抄錄日本醫(yī)藥品副作用文獻(xiàn)抄錄 蒼耳子中毒致死蒼耳子中毒致死烏頭中毒致死烏頭中毒致死 究竟有毒副作用的藥物安全量是多大？究竟有毒副作用的藥物安全量是多大？中毒致死量是多少？中毒致死量是多少？

5、服用后會(huì)出現(xiàn)哪些不良反應(yīng)？服用后會(huì)出現(xiàn)哪些不良反應(yīng)？哪些藥物在什么情況下有毒副作用？哪些藥物在什么情況下有毒副作用？以及發(fā)生毒副反應(yīng)后如何救治？以及發(fā)生毒副反應(yīng)后如何救治？（2）在嚴(yán)格控制實(shí)驗(yàn)條件下取得可靠的結(jié)論）在嚴(yán)格控制實(shí)驗(yàn)條件下取得可靠的結(jié)論病人服藥時(shí)：病人服藥時(shí)：氣候變化氣候變化地理環(huán)境地理環(huán)境精神情緒精神情緒飲食勞逸飲食勞逸社會(huì)變動(dòng)社會(huì)變動(dòng)“假陽(yáng)性假陽(yáng)性” “假陰性假陰性”（3）為中醫(yī)理論提供實(shí)驗(yàn)科學(xué)依據(jù)）為中醫(yī)理論提供實(shí)驗(yàn)科學(xué)依據(jù)缺乏科學(xué)實(shí)驗(yàn)缺乏科學(xué)實(shí)驗(yàn)和其它科學(xué)手和其它科學(xué)手段段中醫(yī)理論難以深入中醫(yī)理論難以深入揭示更為具體規(guī)揭示更為具體規(guī)律律籠統(tǒng)、抽象、籠統(tǒng)、抽象、模糊的概念模糊

6、的概念內(nèi)部更深層次、微觀內(nèi)部更深層次、微觀動(dòng)物實(shí)驗(yàn)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)具體、確切規(guī)律具體、確切規(guī)律（4）縮短研究周期，加快中醫(yī)發(fā)展步伐）縮短研究周期，加快中醫(yī)發(fā)展步伐漫長(zhǎng)的經(jīng)驗(yàn)積累漫長(zhǎng)的經(jīng)驗(yàn)積累 如：十八反中有幾對(duì)相反藥如：十八反中有幾對(duì)相反藥 恪守？修改？恪守？修改？?jī)煞N藥物用量不同產(chǎn)生的毒性大小不同兩種藥物用量不同產(chǎn)生的毒性大小不同動(dòng)物實(shí)驗(yàn)動(dòng)物實(shí)驗(yàn) 僅幾個(gè)月僅幾個(gè)月證明證明簡(jiǎn)單挪用簡(jiǎn)單挪用西醫(yī)病理模型西醫(yī)病理模型（高血壓（高血壓 癡呆癡呆 四氯化碳四氯化碳 胃潰瘍胃潰瘍 哮喘哮喘 腎上腺）腎上腺）中醫(yī)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)研究的思路中醫(yī)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)研究的思路1復(fù)制中醫(yī)動(dòng)物模型的指導(dǎo)思想復(fù)制中醫(yī)動(dòng)物模型的指導(dǎo)思想（1）以

7、辨證論治為基礎(chǔ)，復(fù)制中醫(yī)）以辨證論治為基礎(chǔ)，復(fù)制中醫(yī)“證證”的動(dòng)物的動(dòng)物模模型型實(shí)驗(yàn)結(jié)果實(shí)驗(yàn)結(jié)果臨床療效臨床療效差距差距不能全面闡明中醫(yī)藥作用機(jī)理不能全面闡明中醫(yī)藥作用機(jī)理臟腑辨證臟腑辨證病因辨證病因辨證創(chuàng)造建立創(chuàng)造建立證候模型證候模型寒涼藥寒涼藥寒證寒證溫?zé)崴帨責(zé)崴師嶙C熱證傷陰藥傷陰藥陰虛證陰虛證傷陽(yáng)藥傷陽(yáng)藥陽(yáng)虛證陽(yáng)虛證（2）根據(jù)臟象學(xué)說(shuō)理論模擬病機(jī)模型）根據(jù)臟象學(xué)說(shuō)理論模擬病機(jī)模型根據(jù)根據(jù)“飲食勞倦則傷脾飲食勞倦則傷脾”的理論，的理論，采用勞倦過(guò)度、饑飽失常模擬大鼠采用勞倦過(guò)度、饑飽失常模擬大鼠“脾氣虛脾氣虛”證模型。證模型。根據(jù)根據(jù)苦寒泄下苦寒泄下藥藥“誤下誤下”可致脾失健運(yùn)，可致脾失健

8、運(yùn)，中藥中藥大黃大黃、或、或番瀉葉、番瀉葉、或或厚樸三物湯厚樸三物湯水浸劑造成水浸劑造成“脾虛脾虛”證模證模型型并用并用四君子湯四君子湯反證模型成功反證模型成功 本研究組用復(fù)合因素：本研究組用復(fù)合因素： 傷脾的理論模擬出傷脾的理論模擬出動(dòng)物模型動(dòng)物模型 并在脾氣虛的基礎(chǔ)上，加用并在脾氣虛的基礎(chǔ)上，加用復(fù)制出復(fù)制出模型模型 用用復(fù)制出復(fù)制出模型模型 用小量多次放血造成用小量多次放血造成模型，以至模型，以至模型模型根據(jù)氣血津液學(xué)說(shuō)理論模擬病機(jī)模型：根據(jù)氣血津液學(xué)說(shuō)理論模擬病機(jī)模型：根據(jù)根據(jù)的病機(jī)理論，可使大鼠或小鼠游泳至的病機(jī)理論，可使大鼠或小鼠游泳至耐力極限，造成耐力極限，造成動(dòng)物模型。動(dòng)物模型

9、。根據(jù)根據(jù)“氣為血之帥，血為氣之母氣為血之帥，血為氣之母”以及以及“氣隨血脫氣隨血脫”的理論的理論跌打損傷跌打損傷血瘀證：采用外傷法造成血瘀證：采用外傷法造成，可出現(xiàn)血液流變學(xué)等的改變可出現(xiàn)血液流變學(xué)等的改變病因病因證候的基礎(chǔ)證候的基礎(chǔ)（3）以病因病機(jī)理論為準(zhǔn)則，采用多種方法）以病因病機(jī)理論為準(zhǔn)則，采用多種方法復(fù)制動(dòng)物模型復(fù)制動(dòng)物模型增加濕度、增加濕度、浸水、浸水、淋水淋水墊料潮濕墊料潮濕六淫六淫 癘氣癘氣 七情七情飲食不節(jié)飲食不節(jié)勞逸過(guò)度勞逸過(guò)度 “辨證求因辨證求因”“審因論治審因論治” 濕邪濕邪過(guò)食酸味過(guò)食酸味激怒激怒 痹證痹證肝氣郁結(jié)證肝氣郁結(jié)證 風(fēng)、寒、濕風(fēng)、寒、濕七情致病模型：七情致

10、病模型：五志過(guò)極，損傷相應(yīng)的臟腑。五志過(guò)極，損傷相應(yīng)的臟腑。根據(jù)根據(jù)大怒傷肝，過(guò)喜傷心，過(guò)度悲哀傷肺，大怒傷肝，過(guò)喜傷心，過(guò)度悲哀傷肺，極度思慮傷脾，過(guò)度驚恐傷腎極度思慮傷脾，過(guò)度驚恐傷腎的理論的理論用激怒大鼠的方法用激怒大鼠的方法“怒傷肝怒傷肝”大鼠模型大鼠模型用用“貓嚇鼠貓嚇鼠”或或“人嚇貓人嚇貓”或或“爆竹嚇狗爆竹嚇狗”“恐傷恐傷腎腎”模型模型用紗布包裹尖端止血鉗夾鼠尾用紗布包裹尖端止血鉗夾鼠尾 電刺激加噪音干擾電刺激加噪音干擾繃帶細(xì)條束縛四肢繃帶細(xì)條束縛四肢 “肝氣郁肝氣郁”“肝氣逆肝氣逆” 思考：實(shí)驗(yàn)用什么方法可造思考：實(shí)驗(yàn)用什么方法可造“過(guò)思傷脾過(guò)思傷脾”模型？模型？七情致病模型：

11、七情致病模型：五志過(guò)極，損傷相應(yīng)的臟腑。五志過(guò)極，損傷相應(yīng)的臟腑。根據(jù)根據(jù)大怒傷肝，過(guò)喜傷心，過(guò)度悲哀傷肺，大怒傷肝，過(guò)喜傷心，過(guò)度悲哀傷肺，極度思慮傷脾，過(guò)度驚恐傷腎極度思慮傷脾，過(guò)度驚恐傷腎的理論的理論用激怒大鼠的方法用激怒大鼠的方法“怒傷肝怒傷肝”大鼠模型大鼠模型用用“貓嚇鼠貓嚇鼠”或或“人嚇貓人嚇貓”或或“爆竹嚇狗爆竹嚇狗”“恐傷恐傷腎腎”模型模型心心（4）以整體觀念為指導(dǎo)，完善動(dòng)物模型）以整體觀念為指導(dǎo)，完善動(dòng)物模型合小腸、合小腸、主血脈、主血脈、開(kāi)竅于舌開(kāi)竅于舌 肺肺與大腸相表里與大腸相表里 脾脾主運(yùn)化五谷、水濕主運(yùn)化五谷、水濕主生血統(tǒng)血主生血統(tǒng)血主升清主升清病病-疾病單元疾病單元

12、證證-癥狀群類(lèi)型癥狀群類(lèi)型 （5）制做中醫(yī)病證結(jié)合動(dòng)物模型）制做中醫(yī)病證結(jié)合動(dòng)物模型不同點(diǎn)不同點(diǎn)-辨病依據(jù)辨病依據(jù)脾虛證脾虛證 幾乎所有疾病某一病理階段幾乎所有疾病某一病理階段 共同點(diǎn)共同點(diǎn)-脾虛證實(shí)質(zhì)脾虛證實(shí)質(zhì)尋找異同點(diǎn)尋找異同點(diǎn)脾氣虛證動(dòng)物模型脾氣虛證動(dòng)物模型v脾主運(yùn)化，為后天之本。在脾臟證脾主運(yùn)化，為后天之本。在脾臟證候中，多以脾氣虛為病理基礎(chǔ)，脾候中，多以脾氣虛為病理基礎(chǔ)，脾氣虛證模型在中醫(yī)證候模型中占有氣虛證模型在中醫(yī)證候模型中占有重要地位。重要地位。v目前脾氣虛證模型生物學(xué)特性與臨目前脾氣虛證模型生物學(xué)特性與臨床的差異床的差異,包括功能和精氣奪包括功能和精氣奪(能量能量)兩個(gè)方面，

13、主要表現(xiàn)在兩個(gè)方面，主要表現(xiàn)在“精氣奪精氣奪”。脾氣虛模型診斷標(biāo)準(zhǔn)脾氣虛模型診斷標(biāo)準(zhǔn)1.慢性形成。慢性形成。2.癥狀體征癥狀體征:精神倦怠。嗜臥精神倦怠。嗜臥,懶動(dòng)懶動(dòng),拱背拱背,扎堆扎堆,眼咪。眼咪。毛色枯黃毛色枯黃,甚至稀少。耳尾色白。嚴(yán)重時(shí)出現(xiàn)受驚動(dòng)時(shí)甚至稀少。耳尾色白。嚴(yán)重時(shí)出現(xiàn)受驚動(dòng)時(shí)無(wú)神無(wú)神,抓取時(shí)掙扎無(wú)力抓取時(shí)掙扎無(wú)力,腹面被毛憔悴。軟便、便溏、泄腹面被毛憔悴。軟便、便溏、泄瀉。受激排便率增高。舌淡苔少。體重增長(zhǎng)減慢或體重瀉。受激排便率增高。舌淡苔少。體重增長(zhǎng)減慢或體重下降。造模時(shí)間較長(zhǎng)體長(zhǎng)可減少下降。造模時(shí)間較長(zhǎng)體長(zhǎng)可減少(參考參考)。體溫不變或略。體溫不變或略有降低有降低(如

14、體溫明顯降低則為脾陽(yáng)虛證如體溫明顯降低則為脾陽(yáng)虛證)。食量減少。游。食量減少。游泳時(shí)間縮短。泳時(shí)間縮短。3.部分指標(biāo)在負(fù)荷條件下檢測(cè)。部分指標(biāo)在負(fù)荷條件下檢測(cè)。4.自然恢復(fù)期長(zhǎng)。自然恢復(fù)期長(zhǎng)。1.體質(zhì)篩選法體質(zhì)篩選法根據(jù)中醫(yī)證候和體質(zhì)的聯(lián)系根據(jù)中醫(yī)證候和體質(zhì)的聯(lián)系,在體質(zhì)選擇的在體質(zhì)選擇的基礎(chǔ)上建立脾氣虛證模型是值得考慮的方法基礎(chǔ)上建立脾氣虛證模型是值得考慮的方法根據(jù)其游泳時(shí)間的長(zhǎng)短根據(jù)其游泳時(shí)間的長(zhǎng)短,將游泳時(shí)間較短、具將游泳時(shí)間較短、具有有(脾脾)氣虛潛質(zhì)的動(dòng)物分在脾氣虛模型組。氣虛潛質(zhì)的動(dòng)物分在脾氣虛模型組。2.服用苦寒藥模型服用苦寒藥模型生大黃生大黃: :厚樸厚樸: :積實(shí)按積實(shí)按2:

15、l:l2:l:l比例比例, 200%, 200%濃度煎劑。濃度煎劑。煎藥法煎藥法: :厚樸、積實(shí)先浸泡厚樸、積實(shí)先浸泡4040分鐘分鐘, ,生大黃浸泡生大黃浸泡2020分鐘。然后厚樸、積實(shí)先煎沸分鐘。然后厚樸、積實(shí)先煎沸1010分鐘分鐘, ,再下大再下大黃共煎黃共煎1010分鐘分鐘, ,煎液二層紗布過(guò)濾。二煎煎沸煎液二層紗布過(guò)濾。二煎煎沸1010分鐘分鐘, ,過(guò)濾方法同上。合并二次煎液過(guò)濾方法同上。合并二次煎液, ,于于6060水浴濃縮成水浴濃縮成200%200%濃度煎液濃度煎液,4,4保存。保存。給藥方法：灌胃給藥方法：灌胃,4ml/,4ml/只只/ /次次, , 造模前造模前1818天天3

16、 3次次/ /天天, ,后后1212天天4 4次次/ /天，每?jī)纱喂辔搁g隔天，每?jī)纱喂辔搁g隔3.53.5小時(shí)。小時(shí)。3.在耗氣破在耗氣破法的基礎(chǔ)上運(yùn)用降氣法法的基礎(chǔ)上運(yùn)用降氣法v厚樸厚樸:積實(shí)積實(shí):生大黃按生大黃按3:3:2比例比例,200%濃度煎劑。濃度煎劑。v煎藥法煎藥法:生大黃、厚樸、積實(shí)先浸泡生大黃、厚樸、積實(shí)先浸泡40分鐘分鐘,然后煎沸然后煎沸20分鐘分鐘,煎液兩層紗布過(guò)濾。二煎煎煎液兩層紗布過(guò)濾。二煎煎沸沸10分鐘分鐘,過(guò)濾方法同上。合并二次煎液過(guò)濾方法同上。合并二次煎液,于于60水浴濃縮成水浴濃縮成200%濃度煎液濃度煎液,4保存。保存。v給藥方法給藥方法:室溫下灌胃室溫下灌胃,

17、6ml/只只/天天,每天灌胃每天灌胃1次，造模次，造模12天。天。4.飲食失節(jié)飲食失節(jié)模型模型傷濕法 根據(jù)脾喜燥惡濕根據(jù)脾喜燥惡濕,將鋪設(shè)潮濕碎創(chuàng)花的鼠籠置將鋪設(shè)潮濕碎創(chuàng)花的鼠籠置于造型箱的隔板上于造型箱的隔板上,箱底部的磁盤(pán)中盛滿水箱底部的磁盤(pán)中盛滿水,箱箱頂部有通氣孔頂部有通氣孔,隔板周邊放置冰塊隔板周邊放置冰塊,頂部?jī)蛇呌许敳績(jī)蛇呌型獯皯?。造型箱溫度為通氣窗戶。造型箱溫度?161) ,濕度是濕度是(953)%,持續(xù)持續(xù)9天。天。4.飲食失節(jié)飲食失節(jié)模型模型 實(shí)驗(yàn)結(jié)果：模型組小鼠不同程度出現(xiàn)體實(shí)驗(yàn)結(jié)果：模型組小鼠不同程度出現(xiàn)體重減輕，體溫下降，納呆、泄瀉、脫肛、重減輕，體溫下降，納呆、泄瀉、脫肛、消瘦，畏寒蜷縮、四肢不收、萎靡不振、消瘦，畏寒蜷縮、四肢不收、萎靡不振、毛色枯稿、耐寒力低現(xiàn)象。毛色枯稿、耐寒力低現(xiàn)象。v飲食偏嗜法 造模方法：日齡為造模方法：日齡為20日左右造模組小鼠日左右造模組小鼠20只只,在在1822室溫下喂養(yǎng)室溫下喂養(yǎng), 給與喂飼給與喂飼甘蘭甘蘭,每二天加喂豬脂一次每二天加喂豬脂一次,數(shù)量不限數(shù)量不限,每每批喂養(yǎng)九天。批喂養(yǎng)九天。5.勞倦過(guò)度模型勞倦過(guò)度模型v勞倦饑飽法勞倦饑飽法 勞倦法是用勞倦法是用托盤(pán)將實(shí)驗(yàn)組鼠籠固定一托盤(pán)將實(shí)驗(yàn)組鼠籠