免疫檢驗(yàn)項(xiàng)目標(biāo)準(zhǔn)操作程序概要

1、XXXXXX醫(yī)院檢驗(yàn)項(xiàng)目標(biāo)準(zhǔn)操作程序 ( SOP)責(zé)任部門: 免疫室 文件編號(hào): XXXX-JYK-MY-XM 版本/修訂號(hào): B/1 ,共 25 頁(yè) 編 寫 者: XXX XXX XXX 審 核 者: XXX 批 準(zhǔn) 者: 批準(zhǔn)日期: 2012年09月27日 實(shí)施日期: 2012年10月01日 科 主 任: XXX 目 錄1. 乙肝病毒表面抗原診斷操作規(guī)程 12. 乙肝病毒表面抗體診斷操作規(guī)程 23. 乙肝病毒e抗原診斷操作規(guī)程 34. 乙肝病毒e抗體診斷操作規(guī)程 45. 乙肝病毒核心抗體診斷操作規(guī)程 56. 甲型肝炎病毒IGM抗體診斷操作規(guī)程67. 戊型肝炎病毒IgG抗體診斷操作規(guī)程 78

2、. 人類免疫缺陷病毒抗體檢測(cè)規(guī)程 99. 抗雙鏈DNA檢測(cè)程序 1110.抗核抗體檢測(cè)程序1211.TORCH-IgM四聯(lián)檢測(cè)規(guī)程1312. EB病毒抗體檢測(cè)程序1413.可提取性核抗體原自身抗體操作規(guī)程1514.抗精子抗體檢測(cè)規(guī)程1715.抗子宮內(nèi)膜抗體檢測(cè)規(guī)程1816.HPV抗體檢測(cè)規(guī)程 1917.結(jié)核分支桿菌抗診斷試劑2018.梅毒甲苯胺紅不加熱血清試驗(yàn)2219.流行性出血熱IGM2420. 丙型肝炎病毒抗體診斷 25乙肝病毒表面抗原診斷操作規(guī)程一、操作步驟：1、將試劑盒從冰箱中取出至室溫中平衡30分鐘后使用。2、將標(biāo)本對(duì)應(yīng)微孔按順序編號(hào)。3、每孔加入待測(cè)標(biāo)本50微升，設(shè)陰、陽(yáng)性對(duì)照各兩

3、孔，每孔加入陰性對(duì)照（或陽(yáng)性對(duì)照）各1滴，并設(shè)空白對(duì)照1孔。4、每孔加入酶結(jié)合物1滴，（空白對(duì)照孔除外）充分混勻，封板，置37度孵育30分鐘。5、手工洗板：棄去孔內(nèi)液體，洗滌液注滿各孔，靜置5秒，甩干，重復(fù)5次后拍干。 洗板機(jī)洗板：選擇洗滌5次程序后拍干。6、每孔加顯色劑A液、B液各1滴，充分混勻，封板，置37度孵育15分鐘。7、每孔加終止液1滴，混勻。8、用酶標(biāo)儀讀數(shù)，取波長(zhǎng)450nm（建議使用雙波長(zhǎng)的酶標(biāo)儀比色，參考波長(zhǎng)630nm），先用空白孔校零，然后讀取各孔OD值。二、結(jié)果判斷：樣品OD值/陰性對(duì)照平均OD值大于等于2.1判斷為陽(yáng)性，否則為陰性。陰性對(duì)照OD值低于0.05作0.05計(jì)算

4、，高于0.05按實(shí)際OD值計(jì)算。三、注意事項(xiàng)：1、使用前試劑應(yīng)搖勻，并棄去12滴后垂直滴加。2、封片不能重復(fù)使用。3、結(jié)果判斷須在反映終止后10分鐘內(nèi)完成。4、不同批號(hào)的試劑不可混用。5、待測(cè)標(biāo)本不可用NaN3防腐，如需稀釋標(biāo)本，請(qǐng)用小牛血清稀釋。6、試劑盒應(yīng)視為有傳染性物質(zhì)，請(qǐng)按傳染病實(shí)驗(yàn)室檢查規(guī)程處理。乙肝病毒表面抗體診斷操作規(guī)程一、操作步驟：1、將試劑盒從冰箱中取出至室溫中平衡30分鐘后使用。2、將標(biāo)本對(duì)應(yīng)微孔按順序編號(hào)。3、每孔加入待測(cè)標(biāo)本50微升，設(shè)陰、陽(yáng)性對(duì)照各兩孔，每孔加入陰性對(duì)照（或陽(yáng)性對(duì)照）各1滴，并設(shè)空白對(duì)照1孔。4、每孔加入酶結(jié)合物1滴，（空白對(duì)照孔除外）充分混勻，封板，

5、置37度孵育30分鐘。5、手工洗板：棄去孔內(nèi)液體，洗滌液注滿各孔，靜置5秒，甩干，重復(fù)5次后拍干。 洗板機(jī)洗板：選擇洗滌5次程序后拍干。6、每孔加顯色劑A液、B液各1滴，充分混勻，封板，置37度孵育15分鐘。7、每孔加終止液1滴，混勻。8、用酶標(biāo)儀讀數(shù)，取波長(zhǎng)450nm（建議使用雙波長(zhǎng)的酶標(biāo)儀比色，參考波長(zhǎng)630nm），先用空白孔校零，然后讀取各孔OD值。二、結(jié)果判斷：樣品OD值/陰性對(duì)照平均OD值大于等于2.1判斷為陽(yáng)性，否則為陰性。陰性對(duì)照OD值低于0.05作0.05計(jì)算，高于0.05按實(shí)際OD值計(jì)算。三、注意事項(xiàng)：1、使用前試劑應(yīng)搖勻，并棄去12滴后垂直滴加。2、封片不能重復(fù)使用。3、結(jié)

6、果判斷須在反映終止后10分鐘內(nèi)完成。4、不同批號(hào)的試劑不可混用。5、待測(cè)標(biāo)本不可用NaN3防腐，如需稀釋標(biāo)本，請(qǐng)用小牛血清稀釋。6、試劑盒應(yīng)視為有傳染性物質(zhì)，請(qǐng)按傳染病實(shí)驗(yàn)室檢查規(guī)程處理。乙肝病毒e抗原診斷操作規(guī)程一、操作步驟：1、將試劑盒從冰箱中取出至室溫中平衡30分鐘后使用。2、將標(biāo)本對(duì)應(yīng)微孔按順序編號(hào)。3、每孔加入待測(cè)標(biāo)本50微升，設(shè)陰、陽(yáng)性對(duì)照各兩孔，每孔加入陰性對(duì)照（或陽(yáng)性對(duì)照）各1滴，并設(shè)空白對(duì)照1孔。4、每孔加入酶結(jié)合物1滴，（空白對(duì)照孔除外）充分混勻，封板，置37度孵育30分鐘。5、手工洗板：棄去孔內(nèi)液體，洗滌液注滿各孔，靜置5秒，甩干，重復(fù)5次后拍干。 洗板機(jī)洗板：選擇洗滌5

7、次程序后拍干。6、每孔加顯色劑A液、B液各1滴，充分混勻，封板，置37度孵育15分鐘。7、每孔加終止液1滴，混勻。8、用酶標(biāo)儀讀數(shù)，取波長(zhǎng)450nm（建議使用雙波長(zhǎng)的酶標(biāo)儀比色，參考波長(zhǎng)630nm），先用空白孔校零，然后讀取各孔OD值。二、結(jié)果判斷：樣品OD值/陰性對(duì)照平均OD值大于等于2.1判斷為陽(yáng)性，否則為陰性。陰性對(duì)照OD值低于0.05作0.05計(jì)算，高于0.05按實(shí)際OD值計(jì)算。三、注意事項(xiàng)：1、使用前試劑應(yīng)搖勻，并棄去12滴后垂直滴加。2、封片不能重復(fù)使用。3、結(jié)果判斷須在反映終止后10分鐘內(nèi)完成。4、不同批號(hào)的試劑不可混用。5、待測(cè)標(biāo)本不可用NaN3防腐，如需稀釋標(biāo)本，請(qǐng)用小牛血清

8、稀釋。6、試劑盒應(yīng)視為有傳染性物質(zhì)，請(qǐng)按傳染病實(shí)驗(yàn)室檢查規(guī)程處理。乙肝病毒e抗體診斷操作規(guī)程一、操作步驟：1、將試劑盒從冰箱中取出至室溫中平衡30分鐘后使用。2、將標(biāo)本對(duì)應(yīng)微孔按順序編號(hào)。3、每孔加入待測(cè)標(biāo)本50微升，設(shè)陰、陽(yáng)性對(duì)照各兩孔，每孔加入陰性對(duì)照（或陽(yáng)性對(duì)照）各1滴，并設(shè)空白對(duì)照1孔。4、每孔加入酶結(jié)合物1滴，（空白對(duì)照孔除外）充分混勻，封板，置37度孵育30分鐘。5、手工洗板：棄去孔內(nèi)液體，洗滌液注滿各孔，靜置5秒，甩干，重復(fù)5次后拍干。 洗板機(jī)洗板：選擇洗滌5次程序后拍干。6、每孔加顯色劑A、B液各1滴，充分混勻，封板，置37度孵育15分鐘。7、每孔加終止液1滴，混勻。8、用酶標(biāo)

9、儀讀數(shù)，取波長(zhǎng)450nm（建議使用雙波長(zhǎng)的酶標(biāo)儀比色，參考波長(zhǎng)630nm），先用空白孔校零，然后讀取各孔OD值。二、結(jié)果判斷：Cutoff Value計(jì)算：COV=陰性對(duì)照平均OD值+陽(yáng)性對(duì)照平均OD值/2標(biāo)本OD值大于等于COV為陰性，標(biāo)本OD值小于COV為陽(yáng)性。三、注意事項(xiàng)：1、使用前試劑應(yīng)搖勻，并棄去12滴后垂直滴加。2、封片不能重復(fù)使用。3、結(jié)果判斷須在反映終止后10分鐘內(nèi)完成。4、不同批號(hào)的試劑不可混用。5、待測(cè)標(biāo)本不可用NaN3防腐，如需稀釋標(biāo)本，請(qǐng)用小牛血清稀釋。6、試劑盒應(yīng)視為有傳染性物質(zhì)，請(qǐng)按傳染病實(shí)驗(yàn)室檢查規(guī)程處理。乙肝病毒核心抗體診斷操作規(guī)程一、操作步驟：1、將試劑盒從冰

10、箱中取出至室溫中平衡30分鐘后使用。2、將標(biāo)本對(duì)應(yīng)微孔按順序編號(hào)。3、每孔加入待測(cè)標(biāo)本50微升（待測(cè)標(biāo)本用生理鹽水1：30稀釋，檢測(cè)結(jié)果為臨床意義，請(qǐng)用戶自行選擇），設(shè)陰、陽(yáng)性對(duì)照各兩孔，每孔加入陰性對(duì)照（或陽(yáng)性對(duì)照）各1滴，并設(shè)空白對(duì)照1孔。4、每孔加入酶結(jié)合物1滴，（空白對(duì)照孔除外）充分混勻，封板，置37度孵育30分鐘。5、手工洗板：棄去孔內(nèi)液體，洗滌液注滿各孔，靜置5秒，甩干，重復(fù)5次后拍干。 洗板機(jī)洗板：選擇洗滌5次程序后拍干。6、每孔加顯色劑A液、B液各1滴，充分混勻，封板，置37度孵育15分鐘。7、每孔加終止液1滴，混勻。8、用酶標(biāo)儀讀數(shù)，取波長(zhǎng)450nm（建議使用雙波長(zhǎng)的酶標(biāo)儀比

11、色，參考波長(zhǎng)630nm），先用空白孔校零，然后讀取各孔OD值。二、結(jié)果判斷：Cutoff Value計(jì)算：原倍血清COV=陰性對(duì)照平均OD值乘以0.3。1：30稀釋血清COV=陰性對(duì)照平均OD值乘以0.5。標(biāo)本OD值大于等于COV為陰性，標(biāo)本OD值小于COV為陽(yáng)性。三、注意事項(xiàng)：1、使用前試劑應(yīng)搖勻，并棄去12滴后垂直滴加。2、封片不能重復(fù)使用。3、結(jié)果判斷須在反映終止后10分鐘內(nèi)完成。4、不同批號(hào)的試劑不可混用。5、待測(cè)標(biāo)本不可用NaN3防腐，如需稀釋標(biāo)本，請(qǐng)用小牛血清稀釋。6、試劑盒應(yīng)視為有傳染性物質(zhì)，請(qǐng)按傳染病實(shí)驗(yàn)室檢查規(guī)程處理。甲型肝炎病毒IGM抗體診斷操作規(guī)程一、操作步驟：1、將試劑

12、盒從冰箱中取出，至室溫中平衡30分鐘后使用。2、將標(biāo)本對(duì)應(yīng)微孔按順序編號(hào)。3、代待測(cè)標(biāo)本用生理鹽水作1：1000稀釋，每孔加入稀釋標(biāo)本100微升，設(shè)陰，陽(yáng)性對(duì)照各2孔，每孔加入陰性對(duì)照（或陽(yáng)性對(duì)照）各2滴，并設(shè)空白對(duì)照1孔，封板，置37度孵育20分鐘。4、手工洗板：棄去孔內(nèi)液體，洗滌液注滿各孔，靜置5秒，甩干，重復(fù)3次后拍干。 洗板機(jī)洗板：選擇洗滌3次程序后拍干。5、每孔加入HAVAg1滴，酶結(jié)合物1滴（空白對(duì)照孔不加），充分混勻，封板，置37度孵育20分鐘。6、手工洗板：棄去孔內(nèi)液體，洗滌液注滿各孔，靜置5秒，甩干，重復(fù)5次后拍干。 洗板機(jī)洗板：選擇洗滌5次程序后拍干。7、每孔加顯色劑A液、

13、B液各1滴，充分混勻，封板，置37度孵育10分鐘。8、每孔加終止液1滴，混勻。9、用酶標(biāo)儀讀數(shù)，取波長(zhǎng)450nm（建議使用雙波長(zhǎng)的酶標(biāo)儀比色，參考波長(zhǎng)630nm），先用空白孔校零，然后讀取各孔OD值。二、結(jié)果判斷：COV=樣品OD值/陰性對(duì)照平均OD值大于等于2.1判斷為陽(yáng)性，否則為陰性。陰性對(duì)照OD值低于0.05作0.05計(jì)高于0.05按實(shí)際OD值計(jì)。三、注意事項(xiàng)：1、使用前試劑應(yīng)搖勻，并棄去12滴后垂直滴加。2、封片不能重復(fù)使用。3、結(jié)果判斷須在反映終止后10分鐘內(nèi)完成。4、不同批號(hào)的試劑不可混用。5、使用試劑盒應(yīng)視為有傳染性物質(zhì)，請(qǐng)按傳染病實(shí)驗(yàn)室檢查規(guī)程處理。戊型肝炎病毒IGg抗體診斷操

14、作規(guī)程一、測(cè)定步驟：1、將試劑盒從冰箱中取出，至室溫中平衡30分鐘后使用。2、將標(biāo)本對(duì)應(yīng)微孔按順序編號(hào)。3、每次實(shí)驗(yàn)均需設(shè)立空白對(duì)照2孔，陽(yáng)性對(duì)照2孔，陰性對(duì)照2孔。4、每孔加樣品稀釋液100微升。（陽(yáng)性對(duì)照孔、陰性對(duì)照孔除外）空白對(duì)照直接加入樣品稀釋液100微升。5、加待測(cè)標(biāo)本，每孔10微升。陽(yáng)性對(duì)照、陰性對(duì)照不需稀釋，直接加入100微升于各相應(yīng)孔內(nèi)。震蕩混勻，封板，置37度孵育30分鐘。6、手工洗板：棄去孔內(nèi)液體，洗滌液注滿各孔，靜置5秒，甩干，重復(fù)5次后拍干。 洗板機(jī)洗板：選擇洗滌5次程序后拍干。7、每孔加入酶結(jié)合物100微升（或兩滴），封板，置37度孵育30分鐘。8、手工洗板：棄去孔內(nèi)

15、液體，洗滌液注滿各孔，靜置5秒，甩干，重復(fù)5次后拍干。 洗板機(jī)洗板：選擇洗滌5次程序后拍干。9、每孔加顯色劑A液、B液各50微升（或一滴），充分混勻，封板，置37度孵育10分鐘。10、每孔加終止液1滴，混勻。11、用酶標(biāo)儀讀數(shù)，取波長(zhǎng)450nm（建議使用雙波長(zhǎng)的酶標(biāo)儀比色，參考波長(zhǎng)630nm），先用空白孔校零，然后讀取各孔OD值。二、結(jié)果判斷：Cutoff Value的計(jì)算：COV=陰性對(duì)照平均OD值+0.22標(biāo)本OD值大于等于Cut off Value為陽(yáng)性標(biāo)本OD值小于Cut off Value為陰性陰性對(duì)照平均OD值小于0.05，按實(shí)際計(jì)，若陰性對(duì)照平均OD大于等于0.05，按0.05計(jì)

16、。三、注意事項(xiàng)：1、使用前試劑應(yīng)搖勻。2、封片不能重復(fù)使用。3、結(jié)果判斷須在反映終止后10分鐘內(nèi)完成。4、若試驗(yàn)結(jié)果陰陽(yáng)性對(duì)照有疑問(wèn)，該試驗(yàn)視為無(wú)效，需重做。5、洗滌液用前需25倍稀釋，若洗滌液出現(xiàn)結(jié)晶，可置37度使之溶解。6、不同批號(hào)的試劑不可混用。7、使用試劑盒應(yīng)視為有傳染性物質(zhì)，請(qǐng)按傳染病實(shí)驗(yàn)室檢查規(guī)程處理。人類免疫缺陷病毒抗體檢測(cè)規(guī)程一、操作步驟：1、將試劑盒從冰箱中取出，至室溫中平衡30分鐘后使用。2、將標(biāo)本對(duì)應(yīng)微孔按順序編號(hào)。3、配液：將50ml濃縮洗滌液用蒸餾水或去離子水20倍稀釋至1000ml備用。4、編號(hào)：將樣品對(duì)應(yīng)微孔按序編號(hào)，每板應(yīng)設(shè)陰性對(duì)照3孔，陽(yáng)性對(duì)照一型、二型各一孔

17、，空白對(duì)照一孔。5、加樣：分別在相應(yīng)孔中加入待測(cè)樣品或陰、陽(yáng)性對(duì)照100ul。6、溫育：覆蓋黏膠紙，置37度孵育30分鐘。7、取出已孵育完畢的反應(yīng)板，棄去粘膠紙，吸干板內(nèi)液體，將洗滌液注滿各孔（約300微升/孔），吸干，反復(fù)5次，在干凈紗布上將板拍干。8、每孔加酶結(jié)合物100微升，取新粘膠紙覆蓋放映板，置37度孵育30分鐘。9、取出已孵育完畢的反應(yīng)板，棄去粘膠紙，吸干板內(nèi)液體，將洗滌液注滿各孔（約300微升/孔），吸干，反復(fù)5次，在干凈紗布上將板拍干。10、每孔加入底物緩沖液50微升，TMB50微升，混勻，置37度顯色10分鐘。11、加終止液50微升震蕩反應(yīng)板5秒鐘，使之充分混勻。12、在酶標(biāo)

18、度數(shù)儀上，取波長(zhǎng)450nm（建議使用雙波長(zhǎng)酶標(biāo)儀比色，參考波長(zhǎng)630nm），儀空白對(duì)照孔校零，讀取每孔吸收值（加終止液后，務(wù)必在15分鐘內(nèi)讀數(shù)完畢）二、結(jié)果判斷：抗HIV陽(yáng)性對(duì)照OD值大于0.8，抗HIV陰性對(duì)照OD值小于0.08。Cutoff Value=陽(yáng)性對(duì)照值乘以10%（若陽(yáng)性對(duì)照OD值大于2.5按2.5計(jì)算）標(biāo)本OD值小于等于Cutoff Value為陰性。標(biāo)本OD值大于Cutoff Value為陽(yáng)性。三、注意事項(xiàng)：1、在試劑的使用單位必須使當(dāng)?shù)匦l(wèi)生行政部門標(biāo)準(zhǔn)的HIV初篩試驗(yàn)室。2、整個(gè)檢測(cè)工作必須符合HIV試驗(yàn)室管理范圍和生物安全守則規(guī)定，嚴(yán)格防止交叉感染。操作時(shí)必須帶手套，穿工

19、作服，嚴(yán)格健全和執(zhí)行消毒隔離制度。3、HIV檢測(cè)結(jié)果的判定不許以酶標(biāo)儀的讀數(shù)為準(zhǔn)。4、標(biāo)本和酶結(jié)合物均應(yīng)用加樣器加注，并經(jīng)常校對(duì)其準(zhǔn)確性。5、所有樣品、洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理。6、洗滌液若出現(xiàn)結(jié)晶，可置37度溶解。7、粘膠紙不能反復(fù)使用。8、微孔條從冷藏環(huán)境中取出時(shí)，應(yīng)在室溫平衡至無(wú)潮氣方可使用，未用完的須放入有干燥劑的密封袋中保存?？闺p鏈DNA檢測(cè)程序一、操作步驟：1、將試劑盒從冰箱中取出，至室溫中平衡30分鐘后使用。2、將標(biāo)本對(duì)應(yīng)微孔按順序編號(hào)。3、滴入2滴試劑一（洗滌液）于反應(yīng)板中央孔中，待完全滲入。4、滴入100ul血清于反應(yīng)板孔中待完全滲入。5、滴加3滴試劑二（金標(biāo)液）于

20、反應(yīng)板孔中，待完全滲入。6、滴入三滴試劑一于反應(yīng)板孔中，待完全滲入。二、結(jié)果判斷陽(yáng)性：反應(yīng)板孔中央出現(xiàn)2個(gè)紅色圓斑，為陽(yáng)性。陰性：反應(yīng)板孔中央出現(xiàn)1個(gè)紅色圓斑，為陰性。三、注意事項(xiàng)：1、若遇冬天室內(nèi)溫度較低時(shí)（16度左右），可在37度水浴箱內(nèi)操作。2、陳舊血清盒高脂血癥血清一般不宜使用。3、如果質(zhì)控斑點(diǎn)太淺請(qǐng)多加2滴市集二。若膜的背景較深，可多滴幾滴試劑二。若膜的背景較深，可多滴加幾滴試劑一充分洗滌。陽(yáng)性斑點(diǎn)較弱時(shí)，可延長(zhǎng)至20分鐘觀察結(jié)果。4、檢測(cè)一旦開(kāi)始操作，應(yīng)按操作步驟連續(xù)進(jìn)行，直至結(jié)束?？购丝贵w檢測(cè)程序一、操作步驟：1、將試劑盒從冰箱中取出，至室溫中平衡30分鐘后使用。2、將標(biāo)本對(duì)應(yīng)微

21、孔按順序編號(hào)。3、滴入2滴試劑一（洗滌液）于反應(yīng)板中央孔中，待完全滲入。4、滴入100ul血清于反應(yīng)板孔中待完全滲入。5、滴加3滴試劑二（金標(biāo)液）于反應(yīng)板孔中，待完全滲入。6、滴入三滴試劑一于反應(yīng)板孔中，待完全滲入。二、結(jié)果判斷陽(yáng)性：反應(yīng)板孔中央出現(xiàn)2個(gè)紅色圓斑，為陽(yáng)性。陰性：反應(yīng)板孔中央出現(xiàn)1個(gè)紅色圓斑，為陰性。三、注意事項(xiàng)：1、若遇冬天室內(nèi)溫度較低時(shí)（16度左右），可在37度水浴箱內(nèi)操作。2、陳舊血清盒高脂血癥血清一般不宜使用。3、如果質(zhì)控斑點(diǎn)太淺請(qǐng)多加2滴試劑2。若膜的背景較深，可多滴幾滴試劑2。若膜的背景較深，可多滴加幾滴試劑1充分洗滌。陽(yáng)性斑點(diǎn)較弱時(shí)，可延長(zhǎng)至20分鐘觀察結(jié)果。4、檢

22、測(cè)一旦開(kāi)始操作，應(yīng)按操作步驟連續(xù)進(jìn)行，直至結(jié)束。TORCH-IgM四聯(lián)檢測(cè)規(guī)程一、操作步驟：1、取出試劑盒，室溫放置510分鐘。2、取出檢測(cè)板，在中央孔加A液200ul（四滴），待滲入。3、加待測(cè)血清200ul（四滴），待滲入。4、加A液洗滌液100ul（2滴），待滲入。5、加B液檢測(cè)液200ul（四滴），待滲入。6、在加A液150ul（3滴），然后直接觀察結(jié)果。二、結(jié)果判斷：陰性：僅質(zhì)控點(diǎn)出現(xiàn)紅色斑點(diǎn)為陰性反應(yīng)。陽(yáng)性：除質(zhì)控點(diǎn)出現(xiàn)紅色斑點(diǎn)外，四角的檢測(cè)點(diǎn)也有紅色或淺紅色斑點(diǎn)出現(xiàn)。哪一個(gè)檢測(cè)點(diǎn)出現(xiàn)紅色斑點(diǎn)即為相應(yīng)的IgM抗體陽(yáng)性。如左上角檢測(cè)點(diǎn)TOX出現(xiàn)紅色斑點(diǎn)即為弓形體IgM抗體陽(yáng)性；左上角

23、TOX和左下角CMV出現(xiàn)紅色斑點(diǎn)為弓形蟲和巨細(xì)胞病毒檢測(cè)雙陽(yáng)性；左上角TOX和左下角CMV，和右上角RUV出現(xiàn)紅色斑點(diǎn)為弓形蟲、巨細(xì)胞病毒和風(fēng)疹病毒三項(xiàng)陽(yáng)性；左上角TOX，左下角CMV、右上角RUV、和右下角HSV二出現(xiàn)紅色斑點(diǎn)即為弓形蟲、巨細(xì)胞病毒、風(fēng)疹病毒和單純皰疹病毒二型檢測(cè)陽(yáng)性。EB病毒抗體檢測(cè)程序一、操作步驟：1、將試劑盒從冰箱中取出，至室溫中平衡30分鐘后使用。2、將標(biāo)本對(duì)應(yīng)微孔按順序編號(hào)。3、滴入2滴試劑一（洗滌液）于反應(yīng)板中央孔中，待完全滲入。4、滴入100ul血清于反應(yīng)板孔中待完全滲入。5、滴加3滴試劑二（金標(biāo)液）于反應(yīng)板孔中，待完全滲入。6、滴入三滴試劑一于反應(yīng)板孔中，待完

24、全滲入。二、結(jié)果判斷陽(yáng)性：反應(yīng)板孔中央出現(xiàn)2個(gè)紅色圓斑，為陽(yáng)性。陰性：反應(yīng)板孔中央出現(xiàn)1個(gè)紅色圓斑，為陰性。三、注意事項(xiàng)：1、若遇冬天室內(nèi)溫度較低時(shí)（16度左右），可在37度水浴箱內(nèi)操作。2、陳舊血清盒高脂血癥血清一般不宜使用。3、如果質(zhì)控斑點(diǎn)太淺請(qǐng)多加2滴試劑2。若膜的背景較深，可多滴幾滴試劑2。若膜的背景較深，可多滴加幾滴試劑1充分洗滌。陽(yáng)性斑點(diǎn)較弱時(shí)，可延長(zhǎng)至20分鐘觀察結(jié)果。4、檢測(cè)一旦開(kāi)始操作，應(yīng)按操作步驟連續(xù)進(jìn)行，直至結(jié)束?？商崛⌒院丝贵w原自身抗體操作規(guī)程一、操作步驟：1、將試劑盒從冰箱中取出，至室溫中平衡30分鐘后使用。2、將標(biāo)本對(duì)應(yīng)微孔按順序編號(hào)。3、按所需量將濃縮洗滌液用蒸餾

25、水1：10稀釋。4、取出反應(yīng)槽，每槽加入0.5ml洗滌液然后加入待檢血清10ul，充分混勻，緩慢搖動(dòng)于37度孵育30分鐘。5、棄去槽內(nèi)液體，再吸水紙上拍干，用洗滌液洗滌4次，每次每槽1ml洗滌一分鐘。6、每槽加入洗滌液0.5ml，酶標(biāo)抗體20ul，混勻，緩慢搖動(dòng)于37度孵育30分鐘。7、棄去槽內(nèi)液體，再吸水紙上拍干，用洗滌液洗滌4次，每次每槽1ml洗滌一分鐘。8、加入顯色液A液B液各0.5ml，室溫反應(yīng)10分鐘。9、每槽加入0.5ml終止液，終止反應(yīng)，1分鐘后棄去液體，用自來(lái)水洗滌數(shù)次，取出膜條，用吸水紙吸干后即可進(jìn)行結(jié)果判斷。二、結(jié)果判斷：1、結(jié)果判斷請(qǐng)參看標(biāo)準(zhǔn)譜帶圖，零位線下約2mm出的第

26、一條顯色帶為試劑質(zhì)控線，此顯色帶若不出現(xiàn)，說(shuō)明試劑失效。2、判斷結(jié)果時(shí)，要注意將譜帶定位與帶型結(jié)合起來(lái)。帶型指一種抗體有多條區(qū)帶時(shí)，區(qū)帶間相對(duì)不變的位置關(guān)系構(gòu)成的圖形。如抗Scl-70常出現(xiàn)2-3條；抗DE（抗Liu）常出現(xiàn)5-6條等等。譜帶定位時(shí)與標(biāo)準(zhǔn)帶相差1mm內(nèi)屬允許范圍。3、本試劑盒也可做DM-53、抗RA-54檢測(cè)，類風(fēng)關(guān)病人除有54KD抗體外。也可出現(xiàn)36KD。三、注意事項(xiàng)：1、濃縮洗滌液需臨用前稀釋，整個(gè)操作中，洗滌液用量大約為每人份10ml，可參照此量稀釋。未用完的洗滌液棄之，不可留作下次用。2、全部操作最好再生化平臺(tái)上擺動(dòng)進(jìn)行，改用手工間隙晃動(dòng)也可檢測(cè)，但敏感性會(huì)有所下降。3

27、、顯色液A、B需恢復(fù)至室溫放可使用。顯色液有棕色顆粒時(shí)。不影響檢測(cè)結(jié)果。4、標(biāo)準(zhǔn)帶譜為根據(jù)相應(yīng)標(biāo)準(zhǔn)血清定位后，用電腦制作，每個(gè)試劑盒對(duì)應(yīng)一張標(biāo)準(zhǔn)帶譜，進(jìn)行結(jié)果判斷時(shí)，不同試劑盒間的標(biāo)準(zhǔn)帶譜不能混用，要注意膜條鋁塑帶上批號(hào)與標(biāo)準(zhǔn)帶譜下方批號(hào)一致。5、不同血清標(biāo)本，不同帶型，顯色強(qiáng)度會(huì)不一致。遇到弱陽(yáng)性結(jié)果時(shí)，請(qǐng)仔細(xì)觀察。6、診斷不應(yīng)該只建立在單個(gè)檢測(cè)基礎(chǔ)上，所有檢測(cè)結(jié)果必須考慮病人的臨床病史和（或）其他檢測(cè)結(jié)果?？咕涌贵w檢測(cè)規(guī)程一、操作步驟：1、將試劑盒從冰箱中取出，至室溫中平衡30分鐘后使用。2、將標(biāo)本對(duì)應(yīng)微孔按順序編號(hào)。3、滴加2滴標(biāo)本稀釋液于各標(biāo)本得反應(yīng)孔中（空白及陰、陽(yáng)對(duì)照孔不加）4、

28、取5ul血清加于反應(yīng)孔內(nèi)，用移液器反復(fù)吹打幾次，直至孔內(nèi)液體由綠色變?yōu)樘m色，陰性、陽(yáng)性對(duì)照孔各加一滴陰性陽(yáng)性對(duì)照。5、將反應(yīng)板震蕩使樣品充分混允（震蕩30秒）后，置37度水浴20分鐘。6、先用蒸餾水將40倍得濃縮洗滌液稀釋，（1）手洗：甩去孔內(nèi)液體用洗滌液注滿各孔，放置20秒后用力甩去，重復(fù)5次后拍干。（2）機(jī)洗：5次，每孔注滿洗滌液，停留20秒后盡力拍干。7、每孔加酶結(jié)合物1滴，置37度水浴10分鐘。8、每孔加底物A液、B液各一滴，置37度水浴10分鐘。9、自水浴箱取出后馬上自測(cè)或立即加一滴終止液，混勻后用酶標(biāo)儀讀取結(jié)果。二、結(jié)果判斷：1、目測(cè)法：無(wú)色為陰性，蘭色為陽(yáng)性。2、比色法：在450

29、nm波長(zhǎng)下用空白孔調(diào)零讀取各孔OD值。標(biāo)本孔OD值大于等于0.3為陽(yáng)性。標(biāo)本孔OD值小于0.3為陰性。三、注意事項(xiàng)：1、不同批號(hào)的試劑請(qǐng)勿混用，操作時(shí)反應(yīng)板置把白色背景下加樣變色更明顯。2、洗滌時(shí)各孔須加滿，防止孔中有游歷酶不能洗凈。3、試劑憑用前應(yīng)搖勻。標(biāo)本不可反復(fù)凍融，避免用溶血渾濁標(biāo)本。4、請(qǐng)將拆封后未用完的板條，放入自封口袋內(nèi)封緊保存?？棺訉m內(nèi)膜抗體檢測(cè)規(guī)程一、操作步驟：1、將試劑盒從冰箱中取出，至室溫中平衡30分鐘后使用。2、將標(biāo)本對(duì)應(yīng)微孔按順序編號(hào)。3、滴加2滴標(biāo)本稀釋液于各標(biāo)本得反應(yīng)孔中（空白及陰、陽(yáng)對(duì)照孔不加）4、取5ul血清加于反應(yīng)孔內(nèi)，用移液器反復(fù)吹打幾次，直至孔內(nèi)液體由綠

30、色變?yōu)樘m色，陰性、陽(yáng)性對(duì)照孔各加一滴陰性陽(yáng)性對(duì)照。5、將反應(yīng)板震蕩使樣品充分混允（震蕩30秒）后，置37度水浴20分鐘。6、先用蒸餾水將40倍得濃縮洗滌液稀釋，（1）手洗：甩去孔內(nèi)液體用洗滌液注滿各孔，放置20秒后用力甩去，重復(fù)5次后拍干。（2）機(jī)洗：5次，每孔注滿洗滌液，停留20秒后盡力拍干。7、每孔加酶結(jié)合物1滴，置37度水浴10分鐘。8、每孔加底物A液、B液各一滴，置37度水浴10分鐘。9、自水浴箱取出后馬上自測(cè)或立即加一滴終止液，混勻后用酶標(biāo)儀讀取結(jié)果。二、結(jié)果判斷：1、目測(cè)法：無(wú)色為陰性，蘭色為陽(yáng)性。2、比色法：在450nm波長(zhǎng)下用空白孔調(diào)零讀取各孔OD值。標(biāo)本孔OD值大于等于0.3

31、為陽(yáng)性。標(biāo)本孔OD值小于0.3為陰性。三、注意事項(xiàng)：1、不同批號(hào)的試劑請(qǐng)勿混用，操作時(shí)反應(yīng)板置把白色背景下加樣變色更明顯。2、洗滌時(shí)各孔須加滿，防止孔中有游歷酶不能洗凈。3、試劑憑用前應(yīng)搖勻。標(biāo)本不可反復(fù)凍融，避免用溶血渾濁標(biāo)本。4、請(qǐng)將拆封后未用完的板條，放入自封口袋內(nèi)封緊保存。HPV抗體檢測(cè)規(guī)程一、操作步驟：1、將試劑盒從冰箱中取出，至室溫中平衡30分鐘后使用。2、將標(biāo)本對(duì)應(yīng)微孔按順序編號(hào)。3、將10×樣本稀釋液和20×洗滌液用蒸餾水分別稀釋成1×應(yīng)用液。4、樣本血清按1：100稀釋。5、陽(yáng)性對(duì)照、陰性對(duì)照、標(biāo)準(zhǔn)血清孔，每孔先加100ul生理鹽水，再分別取相應(yīng)

32、血清10ul加入孔中。6、將已稀釋的樣本血清分別加入到酶標(biāo)板中，每孔100ul。放置37度，20分鐘后棄去孔內(nèi)液體。7、洗板：酶標(biāo)板每孔加入洗滌液250ul、30秒后棄去孔中液體，重復(fù)洗板3次，拍干。8、加酶結(jié)合物：每孔兩滴，37度20分鐘后棄去孔中液體，洗板4次，拍干。9、顯色與終止：分別加底物A、底物B各一滴，室溫避光顯色，見(jiàn)標(biāo)準(zhǔn)血清出現(xiàn)淺蘭色時(shí)（約十分鐘），目測(cè)判定結(jié)果；或每孔加終止液1滴，測(cè)OD值。二、結(jié)果判斷：1、目測(cè)：顏色深于或等于標(biāo)準(zhǔn)血清者為陽(yáng)性，否則為陰性。2、以酶標(biāo)儀450nm波長(zhǎng)測(cè)定各孔OD值，樣品OD值大于或等于標(biāo)準(zhǔn)血清為陽(yáng)性，否則為陰性。三、注意事項(xiàng)：1、不同批試劑不得

33、混用。2、再有效期內(nèi)使用。結(jié)核分支桿菌抗診斷試劑 本品采用純化的結(jié)核分支桿菌特異性外膜抗原，利用斑點(diǎn)免疫金滲濾試驗(yàn)原理，檢測(cè)人血清中結(jié)核分支桿菌抗體，用于結(jié)核病的輔助診斷。試劑盒組成1.反應(yīng)板 20人份 4.金標(biāo)液 1x3.0ml2.封閉液 1x4.0ml 5.陰性對(duì)照 1x0.1ml3.洗滌液 2x7.0ml 6.陽(yáng)性對(duì)照 1x0.1ml使用方法1.在檢測(cè)板的反應(yīng)孔中間，加入兩滴封閉液，等待薄膜吸入；2.取40微生新鮮的血清標(biāo)本，加入反應(yīng)孔中間，等待薄膜吸入；3.在反應(yīng)孔中間加入6滴洗滌液，等待薄膜吸入；4.在反應(yīng)孔中間加入2滴金標(biāo)液，等待薄膜吸入；5.在反應(yīng)孔中間加入6滴洗滌液，等待薄膜吸

34、入，目測(cè)結(jié)果。結(jié)果判定陽(yáng)性質(zhì)控點(diǎn)顯示紅色，反應(yīng)孔中間有色斑點(diǎn)出現(xiàn)。陰性質(zhì)控點(diǎn)顯示紅色，反應(yīng)孔中間無(wú)有色斑點(diǎn)出現(xiàn)或僅為痕跡。注意事項(xiàng)1.必須使用新鮮血清標(biāo)本。血漿標(biāo)本必須用玻璃棒剝離纖維蛋白，保證血清無(wú)混濁沉淀，以免吸取導(dǎo)致反應(yīng)膜孔阻塞。2.必須以單人份操作，嚴(yán)禁多標(biāo)本同時(shí)檢測(cè)，每個(gè)標(biāo)本的操作步驟需要連續(xù)進(jìn)行，不宜停頓過(guò)長(zhǎng)。3.質(zhì)控點(diǎn)顯示紅色表明藥盒有效；陰陽(yáng)性對(duì)照僅供系統(tǒng)顯色反應(yīng)檢定，臨床陽(yáng)性標(biāo)本顯色深淺可以與陽(yáng)性對(duì)照不同。4.少數(shù)標(biāo)本（急性感染.高血脂.溶血等）可出現(xiàn)背景偏紅，一般不影響結(jié)果判斷。可通過(guò)將標(biāo)本用封閉液1：3稀釋，加樣80微生背景將獲得改善。5.各滴瓶溶液，使用后應(yīng)立即旋緊瓶蓋

35、，盡量避免與外界空氣接觸，以保證溶液免受污染，影響檢測(cè)質(zhì)量。6.特殊情況下，因標(biāo)本無(wú)法及時(shí)檢測(cè)，應(yīng)放置于-20攝適度以下保存，臨用前溶解，離心去除沉淀。保存于2-8干燥處保存梅毒甲苯胺紅不加熱血清試驗(yàn) 本試劑采用VDRL抗原重懸于含有特制的甲苯胺紅溶液中制成。僅在白色卡片上進(jìn)行實(shí)驗(yàn)，以檢測(cè)血清或血漿中反應(yīng)素用。可作為梅毒病人的診斷和療效之參考。試劑盒的組成1.TRUST抗原懸液 2.5mlx1瓶 10mlx1瓶2.陽(yáng)性對(duì)照血清 1mx1支 1mx1支 3.陰性對(duì)照血清 1mx1支 1mx1支4.試驗(yàn)專用卡片 120人份 480人份5.專用滴管及針頭 1套 1套使用方法一.定性試驗(yàn)1.分別吸取50微生梅