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1、23選修三第一講復(fù)習(xí)練案 討溫端一_=U- XI -LIAM-anffi一、選擇題1 .天然的玫瑰沒有藍(lán)色花,這是由于缺少控制藍(lán)色色素合成的基因B,而開藍(lán)色花的矮牽牛中存在序列已知的基因B。現(xiàn)用基因工程技術(shù)培育藍(lán)玫瑰。下列操作正確的是(A )A .提取矮牽牛藍(lán)色花的 mRNA ,經(jīng)逆轉(zhuǎn)錄獲得互補的 DNA ,再擴(kuò)增基因BB.利用限制性核酸內(nèi)切酶從開藍(lán)色花矮牽牛的基因文庫中獲取基因BC.利用DNA聚合酶將基因B與質(zhì)粒連接后導(dǎo)入玫瑰細(xì)胞D.將基因B直接導(dǎo)入大腸桿菌,然后感染并轉(zhuǎn)入玫瑰細(xì)胞解析提取矮牽牛藍(lán)色花的 mRNA,逆轉(zhuǎn)錄得到 DNA ,然后擴(kuò)增,可獲得大量的基因B, A正確;從基因文庫中獲取
2、目的基因,只要根據(jù)目的基因的相關(guān)信息和基因文庫中的信息進(jìn)行篩選對比即可,不需要用限制酶進(jìn)行切割,B錯誤;目的基因與質(zhì)粒的連接需要用DNA連接酶,而不是 DNA聚合酶,C錯誤;目的基因需要和運載體連接后形成重組質(zhì)粒再導(dǎo)入,而且應(yīng)該用農(nóng)桿菌進(jìn)行感染,而不是大腸桿菌,D錯誤。2. (2017晉中模擬)下圖表示科學(xué)家通過基因工程培育抗蟲棉時,從蘇云金芽抱桿菌中提取抗蟲基因“放入”棉花細(xì)胞中與棉花的DNA分子結(jié)合起來而發(fā)揮作用的過程示意圖。以下說法正確的是A .該技術(shù)的核心內(nèi)容是構(gòu)建基因表達(dá)載體B .目的基因在抗蟲棉中的遺傳要遵循基因的分離定律C.圖中I常直接從大腸桿菌中獲取D.剔除培育成功的抗蟲棉體內(nèi)
3、的四環(huán)素抗性基因會影響抗蟲基因的表達(dá)解析基因工程的核心技術(shù)是基因表達(dá)載體的構(gòu)建,A正確;抗蟲基因如果整合到棉花細(xì)胞細(xì)胞質(zhì)的 DNA上,其遺傳不遵循基因的分離定律,B錯誤;常見的載體有質(zhì)粒、動植物病毒和 入噬菌體的衍生物,C錯誤;基因的表達(dá)具有獨立性,剔除抗蟲棉體內(nèi)的四環(huán)素抗性基因不影響抗蟲基因的表達(dá),D錯誤。3. (2015重慶卷,6)下列有關(guān)人胰島素基因表達(dá)載體的敘述,正確的是(C )A.表達(dá)載體中的胰島素基因可通過人肝細(xì)胞mRNA反轉(zhuǎn)錄獲得B.表達(dá)載體的復(fù)制和胰島素基因的表達(dá)均啟動于復(fù)制原(起)點C .借助抗生素抗性基因可將含胰島素基因的受體細(xì)胞篩選出來D.啟動子和終止密碼子均在胰島素基因
4、的轉(zhuǎn)錄中起作用解析由于人肝細(xì)胞中胰島素基因不能表達(dá),所以無法利用肝細(xì)胞mRNA反轉(zhuǎn)錄獲得胰島素基因,A項錯誤;表達(dá)載體的復(fù)制啟動于復(fù)制原點,胰島素基因的轉(zhuǎn)錄啟動于啟動子,B項錯誤;抗生素基因是標(biāo)記基因,作用是檢測受體細(xì)胞中是否含有目的基因,從而將含有胰島素基因的受體細(xì)胞篩選出來,C項正確;啟動子是 RNA聚合酶識別和結(jié)合的部位,是轉(zhuǎn)錄的起點,而終止密碼子位于mRNA上,在翻譯中起作用,D項錯誤。4. (2017??谀M)利用外源基因在受體細(xì)胞中表達(dá),可生產(chǎn)人類所需要的產(chǎn)品。下列選項中能說明目的基因完成了在受體細(xì)胞中表達(dá)的是(D )A .棉花二倍體細(xì)胞中檢測到細(xì)菌的抗蟲基因B.大腸桿菌中檢測到人
5、胰島素基因及其mRNAC.山羊乳腺細(xì)胞中檢測到人生長激素DNA序列D.酵母菌細(xì)胞中提取到人干擾素蛋白解析基因表達(dá)的產(chǎn)物是蛋白質(zhì),因此,只有在受體細(xì)胞中檢測或提取到了相應(yīng)蛋白質(zhì)才能證明目的基因在受體細(xì)胞中完成了表達(dá),A、C項只能說明完成了目的基因的導(dǎo)入,B項只能說明完成了目的基因的導(dǎo)入和目的基因的轉(zhuǎn)錄過程。5. (2016信陽*II擬)關(guān)于蛋白質(zhì)工程的說法,正確的是(B )A .蛋白質(zhì)工程是在分子水平上對蛋白質(zhì)分子直接進(jìn)行操作B.蛋白質(zhì)工程能生產(chǎn)出自然界中不曾存在過的新型蛋白質(zhì)分子C.對蛋白質(zhì)的改造是通過直接改造相應(yīng)的mRNA來實現(xiàn)的D.蛋白質(zhì)工程的流程和天然蛋白質(zhì)合成的過程是相同的解析蛋白質(zhì)工
6、程是指以蛋白質(zhì)分子的結(jié)構(gòu)規(guī)律及其與生物功能的關(guān)系作為基礎(chǔ),通過基因修飾或基因合成,對現(xiàn)有蛋白質(zhì)進(jìn)行改造,或制造一種新的蛋白質(zhì),以滿足人類的生產(chǎn)和生活的需求。由于基因決定蛋白質(zhì),因此,要對蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)進(jìn)行設(shè)計改造,還必須從基因入手。與基因工程不同,蛋白質(zhì)工程能生產(chǎn)出自然界中不曾存在過的新型蛋白質(zhì)分子。6. 下列有關(guān)基因表達(dá)載體的構(gòu)建的說法中,不正確的是 (B )A .需要限制酶和 DNA連接酶參與B.任何基因表達(dá)載體的構(gòu)建都是一樣的,沒有差別C.可用抗生素基因作為標(biāo)記基因D .基因表達(dá)載體的構(gòu)建是基因工程的核心步驟解析構(gòu)建基因表達(dá)載體時需要用同一種限制性核酸內(nèi)切酶切割目的基因和載體,以產(chǎn)生相同的
7、黏性末端,然后用DNA連接酶連接;由于受體細(xì)胞有植物、動物和微生物之分,以及目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞的方法不同,因此,基因表達(dá)載體的構(gòu)建也會有所差別,不可能是千篇一律的;抗生素基因的作用是作為標(biāo)記基因,鑒別受體細(xì)胞中是否導(dǎo)入了目的基因,從而將含有目的基因的細(xì)胞篩選出來;基因表達(dá)載體的構(gòu)建是整個基因工程的核心環(huán)節(jié)。二、非選擇題7. (2016濰坊模擬)胰島素可以用于治療糖尿病,但是胰島素被注射入人體后,會堆積在皮下,要經(jīng)過較長時間才能進(jìn)入血液,而進(jìn)入血液的胰島素又容易分解,治療效果受到影響。如圖是用蛋白質(zhì)工程設(shè)計的速效胰島素的生產(chǎn)過程,請據(jù)圖回答有關(guān)問題:(1)構(gòu)建新的蛋白質(zhì)模型是蛋白質(zhì)工程的關(guān)鍵,
8、圖中構(gòu)建新的胰島素模型的主要依據(jù)是蛋白質(zhì)的預(yù)期功能。(2)圖中從新的胰島素模型到新的胰島素基因的基本思路是根據(jù)新的胰島素中氨基酸的序列,推測出其基因中的脫氧核甘酸序列,然后利用DNA合成儀來合成新的胰島素基因(3)新的胰島素基因與載體(質(zhì)粒)結(jié)合過程中需要限制性核酸內(nèi)切酶和DNA連接酶。已知限制性核酸內(nèi)切酶I的識別序列和切點是 一ggatcc。請畫出質(zhì)粒被限制性核酸內(nèi)切酶I一G GATCC 一切割后所形成的黏性末端:。 DNA連接酶對所連接的 DNA兩CCTAGG端堿基序列是否有專一性要求?_查_(填“是”或“否”)。(4)若將含有新的胰島素基因的表達(dá)載體導(dǎo)入植物細(xì)胞中,最常用的方法是農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)
9、化(5)若要利用大腸桿菌生產(chǎn)速效胰島素,需用到的生物工程有甯白質(zhì)工程_、基因工.和發(fā)酵工程。解析(1)構(gòu)建新的胰島素模型的主要依據(jù)是蛋白質(zhì)的預(yù)期功能。(2)根據(jù)蛋白質(zhì)的預(yù)期功能,推測新的胰島素中氨基酸的序列,進(jìn)而推斷基因中的脫氧核甘酸序列來合成新的胰島素基因。(3)將目的基因?qū)胫参锛?xì)胞中,最常用的轉(zhuǎn)化方法是農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法。(4)限制性核酸內(nèi)切酶識別特定的核甘酸序列,產(chǎn)生特定的黏性末端或平末端,而 DNA連接酶對所連接的DNA兩端堿基序列卻沒有專一性要求。(5)生產(chǎn)自然界中本來沒有的蛋白質(zhì)需要用到蛋白質(zhì)工程、基因工程等技術(shù)。8. (2015海南卷,31)在體內(nèi),人胰島素基因表達(dá)可合成出一條稱為前
10、胰島素原的肽鏈, 此肽鏈在內(nèi)質(zhì)網(wǎng)中經(jīng)酶甲切割掉氨基端一段短肽后成為胰島素原,進(jìn)入高爾基體的胰島素原 經(jīng)酶乙切割去除中間片段 C后,產(chǎn)生A、B兩條肽鏈,再經(jīng)酶丙作用生成由51個氨基酸殘基組成的胰島素。目前,利用基因工程技術(shù)可大量生產(chǎn)胰島素?;卮鹣铝袉栴}:(1)人體內(nèi)合成前胰島素原的細(xì)胞是胰島B細(xì)胞,合成胰高血糖素的細(xì)胞是胰島A細(xì)胞。(2)可根據(jù)胰島素原的氨基酸序列,設(shè)計并合成編碼胰島素原的一DNA(基因)堿基序列_序列,用該序列與質(zhì)粒表達(dá)載體構(gòu)建胰島素原基因重組表達(dá)載體,再經(jīng)過細(xì)菌轉(zhuǎn)化、篩選及 鑒定,即可建立能穩(wěn)定合成胰島素原 的基因工程菌。(3)用胰島素原抗體檢測該工程菌的培養(yǎng)物時,培養(yǎng)液無抗
11、原抗體反應(yīng),菌體有抗原抗體 反應(yīng),則用該工程菌進(jìn)行工業(yè)發(fā)酵時,應(yīng)從 菌體中分離、純化胰島素原。胰島素原經(jīng)酶 處理便可轉(zhuǎn)變?yōu)橐葝u素。解析(1)前胰島素原在細(xì)胞內(nèi)經(jīng)加工后成為胰島素,人體合成胰島素的細(xì)胞是胰島B細(xì)胞,所以合成前胰島素原的細(xì)胞也是胰島B細(xì)胞;合成胰高血糖素的細(xì)胞是胰島A細(xì)胞。(2)根據(jù)胰島素原的氨基酸序列,可設(shè)計并合成編碼胰島素原的DNA序列(即目的基因);用該序列與質(zhì)粒表達(dá)載體構(gòu)建胰島素原基因重組表達(dá)載體,再經(jīng)過細(xì)菌轉(zhuǎn)化、篩選及鑒定,即可建立能穩(wěn)定合成人胰島素原的基因工程菌。(3)培養(yǎng)液無抗原抗體反應(yīng), 菌體有抗原抗體反應(yīng),所以應(yīng)該從菌體中分離、純化胰島素原,經(jīng)酶處理便可轉(zhuǎn)變?yōu)橐葝u
12、素。9. (2016常州質(zhì)檢)如圖是從酵母菌中獲取棉株需要的某種酶基因的流程,結(jié)合所學(xué)知識及相關(guān)信息回答下列問題。圖中cDNA文庫小王_(填“大于”、“等于”或者“小于”)基因組文庫。(2)過程提取的DNA需要限制酶_的切割,B是反轉(zhuǎn)錄過程。(3)為在短時間內(nèi)大量獲得目的基因,可用PCR技術(shù)擴(kuò)增的方法,其原理是DNA雙鏈復(fù)制 。(4)農(nóng)桿菌中的Ti質(zhì)粒上的T DNA具有 可轉(zhuǎn)移至受體細(xì)胞并且整合到受體細(xì)胞染色體 的DNA上 的特點。目的基因能否在棉株體內(nèi)穩(wěn)定遺傳的關(guān)鍵是目的基因是否整合到植物細(xì)胞染色體的 DNA上_,可以用_DNA分子雜交技術(shù)進(jìn)行檢測。(5)如果要想使該酶活性更高或具有更強(qiáng)的耐
13、受性,需要對現(xiàn)有蛋白質(zhì)進(jìn)行改造,這要利 用基因工程的延伸 蛋白質(zhì)工程。首先要設(shè)計預(yù)期的蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu),再推測應(yīng)有的氨基酸序列,找到相對應(yīng)的脫氧核甘酸序列。解析(1)一個基因組文庫中包含了一種生物所有的基因,而一個 cDNA文庫中只包含了一種生物的一部分基因,故cDNA文庫小于基因組文庫。(2)從酵母菌中提取目的基因,需用限制性核酸內(nèi)切酶;以 mRNA為模板合成cDNA的過程屬于反轉(zhuǎn)錄。(3)PCR技術(shù)是一項在生物體外復(fù)制特定 DNA片段的核酸合成技術(shù), 其依據(jù)的原理是 DNA雙鏈復(fù)制。(4)農(nóng)桿菌中的Ti質(zhì)粒上T-DNA具有可轉(zhuǎn)移至受體細(xì)胞并且整合到受體細(xì)胞染色體的DNA上的特點。目的基因能否在棉
14、株體內(nèi)穩(wěn)定遺傳的關(guān)鍵是目的基因是否整合到植物細(xì)胞染色體的DNA上,可以用DNA分子雜交技術(shù)進(jìn)行檢測。(5)蛋白質(zhì)工程是指以蛋白質(zhì)分子的結(jié)構(gòu)規(guī)律及其與生物功能的關(guān)系作為基礎(chǔ),通過基因修飾或基因合成,對現(xiàn)有蛋白質(zhì)進(jìn)行改造,或制造一種新 的蛋白質(zhì),以滿足人類的生產(chǎn)和生活的需求。10. .許多大腸桿菌的質(zhì)粒上含有l(wèi)acZ基因,其編碼的產(chǎn)物 3半乳糖昔酶在 X al和IPTG存在下,可以產(chǎn)生藍(lán)色沉淀,使菌落呈現(xiàn)藍(lán)色,否則菌落呈現(xiàn)白色?;蚬こ讨谐@迷撛韽膶?dǎo)入質(zhì)粒的受體細(xì)胞中篩選出真正導(dǎo)入重組質(zhì)粒的細(xì)胞,過程如下圖所示。請據(jù)圖回答:大贏桿菌I培養(yǎng)基中加入I X-paln IPTC菌落大腸桿菌大膈桿菌培
15、養(yǎng)基中加入培養(yǎng)基中加入X-四.IPTCX-靜I、IPTG菌落前落使目的基因在受體細(xì)胞中穩(wěn)鋁存在:能潰(1)基因工程中,構(gòu)建基因表達(dá)載體的目的是傳給后代,并表達(dá)和發(fā)揮作用。(2)限制酶EcoR I的識別序列和切割位點是-G AATTC - Sma I的識別序列和切割位點是pccggg-。圖中目的基因被切割下來和質(zhì)粒連接之前,需在目的基因的右側(cè)連接相應(yīng)的末端,連接的末端序列是 一口TAA_ ,連接過程中需要的基本工具是 _DNA連接酶_。(3)轉(zhuǎn)化過程中,大腸桿菌應(yīng)先用Ca2+處理,使其處于能吸收周圍DNA的狀態(tài)。(4)菌落顏色為白色的是菌落,原因是 lacZ標(biāo)記基因區(qū)插入外源基因后被破壞,不能表達(dá)出 3半乳糖昔酶,故菌落為白色 _(5)菌落中的目的基因是否表達(dá),可采用的檢測辦法是抗原一抗體雜交。解析(1)基因工程中,構(gòu)建基因表達(dá)載體的目的是使目的基因在受體細(xì)胞中穩(wěn)定存在,能遺
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