P2微生物實(shí)驗(yàn)室安全操作手冊---安環(huán)中心

1、精選優(yōu)質(zhì)文檔-傾情為你奉上附件三國立臺(tái)北科技大學(xué)P2以上實(shí)驗(yàn)室安全操作手冊範(fàn)本 安環(huán)中心100年12月15日製P2以上實(shí)驗(yàn)室安全操作手冊系所/單位名稱：/實(shí)驗(yàn)室地點(diǎn)：00大樓0000室 實(shí)驗(yàn)室指導(dǎo)教授：000實(shí)驗(yàn)室管理人：000實(shí)驗(yàn)室代理人：000 00年00月00日目 錄1.前言12.生物安全的原則 (Principles of Bio-safety Level)13.生物安全等級2（Bio-safety Level 2）14.人員進(jìn)出管制25.實(shí)驗(yàn)室操作規(guī)範(fàn)及技巧(Laboratory Practices and Techniques)36.安全設(shè)備；初級防護(hù)設(shè)備 (Safety Equi

2、pment; Primary Barriers)47.實(shí)驗(yàn)室設(shè)施；二級防護(hù)設(shè)備 (Laboratory Facilities; Secondary Barriers)58.實(shí)驗(yàn)室防護(hù)等級69.生物性與一般廢棄物之處理910.實(shí)驗(yàn)室之清潔與管理1011.緊急應(yīng)變處理1012.圖表1412.1表一、細(xì)菌清單1412.2圖一、廢棄物清運(yùn)處理路線流程圖1512.3圖二、緊急疏散路線圖1513.附錄1613.1附錄一、生物安全操作臺(tái)及細(xì)菌操作注意事項(xiàng)及應(yīng)變處理方式1613.2附錄二、人員訓(xùn)練記錄1713.3附錄三、每日實(shí)驗(yàn)室例行檢查表1813.4附錄四、高溫高壓滅菌釜標(biāo)準(zhǔn)作業(yè)步驟1913.5附錄五、滅菌

3、釜確效實(shí)驗(yàn)紀(jì)錄表2013.6附錄六、生物安全操作櫃維修保養(yǎng)記錄表2113.7附錄七、高溫高壓滅菌釜使用記錄表2213.7附錄八、Virkon廣效高層次消毒殺菌劑之濃度配置使用說明231 前言000單位000部門位於00院區(qū)00大樓000室的實(shí)驗(yàn)室，屬於生物性第二級危害實(shí)驗(yàn)室(P2實(shí)驗(yàn)室)，目前實(shí)驗(yàn)室內(nèi)部依執(zhí)行相關(guān)計(jì)畫之需求建立P2級微生物實(shí)驗(yàn)室。本實(shí)驗(yàn)室所執(zhí)行之相關(guān)計(jì)畫主要為性能評估。本微生物實(shí)驗(yàn)室主要利用標(biāo)準(zhǔn)方法所指定細(xì)菌進(jìn)行性能分析。目前總計(jì)有00種細(xì)菌正在使用或保存，見表一。本安全操作手冊主要目的為使工作人員熟悉操作與其他相關(guān)第二級生物危害微生物類(含病毒、細(xì)菌等)的潛在危險(xiǎn)性，並且能夠

4、在安全保證的環(huán)境下進(jìn)行技術(shù)研發(fā)的工作。因此每位進(jìn)入本實(shí)驗(yàn)室的工作人員必須熟讀此操作手冊並符合進(jìn)入本實(shí)驗(yàn)室之條件。本手冊包含第二級危害實(shí)驗(yàn)室的簡介，安全操作規(guī)定，生物實(shí)驗(yàn)室的分類及附件，附件包含實(shí)驗(yàn)室內(nèi)進(jìn)行微生物操作、培養(yǎng)，培養(yǎng)箱及生物安全操作臺(tái)的使用規(guī)則，廢棄物處理等，工作人員請確實(shí)遵守相關(guān)安全規(guī)定，以確保工作安全。2 生物安全的原則 (Principles of Bio-safety Level)Containment 這個(gè)字通常被用來描述管理使用感染性物質(zhì)之實(shí)驗(yàn)室的安全。它的目的是為了降低或消除實(shí)驗(yàn)室工作者或外部環(huán)境暴露於潛在危害性物質(zhì)中。Primary containment 是用於保護(hù)

5、實(shí)驗(yàn)室工作者及實(shí)驗(yàn)室內(nèi)部環(huán)境暴露於危害性物質(zhì)中。它藉由良好的實(shí)驗(yàn)室技巧及使用適當(dāng)?shù)陌踩O(shè)備來達(dá)成。 Secondary containment 是用於保護(hù)實(shí)驗(yàn)室外部環(huán)境曝露於危害性物質(zhì)中。它藉由適當(dāng)?shù)膶?shí)驗(yàn)室設(shè)計(jì)及正確的實(shí)驗(yàn)室操作規(guī)範(fàn)來達(dá)成。所以，實(shí)驗(yàn)室操作規(guī)範(fàn)及技巧、安全的設(shè)備和實(shí)驗(yàn)室硬體的設(shè)計(jì)為containment 三要素。生物安全等級1至4的微生物對人的致病性是由最低到最嚴(yán)重；所以其防護(hù)也是從等級1為基礎(chǔ)，再往上逐漸加強(qiáng)，即是說：等級1之防護(hù)再加強(qiáng)成為等級2之防護(hù)，等級2之防護(hù)再加強(qiáng)成為等級3之防護(hù)，等級3之防護(hù)再加強(qiáng)成為等級4之防護(hù)。3 生物安全等級2（Bio-safety Level

6、 2）“生物安全等級2”適用於對實(shí)驗(yàn)室工作人員及環(huán)境具中度的潛在性危險(xiǎn)的特定物質(zhì)時(shí)。需特別注意的有：3.1 實(shí)驗(yàn)室工作人員受過使用致病物質(zhì)的特殊訓(xùn)練，並由適任的生物安全管理人員指導(dǎo)。3.2 特別小心受污染的尖銳物品。3.3 操作步驟可能產(chǎn)生氣霧或?yàn)R灑者，需使用I級或II級生物安全操作櫃或物理性防護(hù)設(shè)備，例如：安全的離心裝置、面罩、臉部保護(hù)等。此類微生物如：Staphylococcus aureus、 Klebsiella pneumoniae、 Trichophyton mentagrophytes等，因?yàn)榭赡艽嬖谖粗腥疚镔|(zhì)，所以依生物安全等級2之操作。進(jìn)入生物安全等級2實(shí)驗(yàn)室工作人員須具

7、有下列條件：3.4 由計(jì)畫主持人講解本操作詳細(xì)內(nèi)容及本校生物操作人員安全訓(xùn)練教材，人員需熟讀與熟悉本操作手冊後，經(jīng)指導(dǎo)教授核定而完成訓(xùn)練(須填寫人員訓(xùn)練記錄)3.5 初次進(jìn)入本實(shí)驗(yàn)室工作，需由具有經(jīng)且熟悉本實(shí)驗(yàn)室之工作人員陪同示範(fàn)一次以上。4 人員進(jìn)出管制4.1 被允許之工作人員，刷卡進(jìn)入P2實(shí)驗(yàn)區(qū)，將一般實(shí)驗(yàn)衣掛置於右面牆壁，鞋子置於右邊之鞋櫃，更換P2細(xì)菌實(shí)驗(yàn)室專用鞋與實(shí)驗(yàn)衣後，於準(zhǔn)備室戴上口罩，刷卡才能進(jìn)入P2實(shí)驗(yàn)室。進(jìn)入實(shí)驗(yàn)室後戴上合適之乳膠手套，依P2實(shí)驗(yàn)室之規(guī)定進(jìn)行實(shí)驗(yàn)操作。在工作完成後，將手套、口罩脫下置於感染性垃圾桶，才離開P2實(shí)驗(yàn)。在準(zhǔn)備室以清潔劑清洗雙手才算完成，更換實(shí)驗(yàn)衣

8、與鞋子後，離開實(shí)驗(yàn)室。4.2 爲(wèi)維持所有實(shí)驗(yàn)區(qū)、準(zhǔn)備室壓力之正常，以維持工作環(huán)境之安全性，請進(jìn)出時(shí)隨手將門關(guān)緊，不同區(qū)域之門不可同時(shí)開啟以避免發(fā)生污染。4.3 進(jìn)入本區(qū)工作之人員，更換實(shí)驗(yàn)區(qū)拖鞋時(shí)，均須穿上個(gè)人之襪子，以為維持公共衛(wèi)生。4.4 乳膠手套使用範(fàn)圍僅在實(shí)驗(yàn)室內(nèi)，若發(fā)現(xiàn)有破損請立即更換，切記不得戴上手套碰觸門把與電話。4.5 實(shí)驗(yàn)結(jié)束且完成整理清潔後，才可脫手套出P2實(shí)驗(yàn)區(qū)。5 實(shí)驗(yàn)室操作規(guī)範(fàn)及技巧(Laboratory Practices and Techniques)實(shí)驗(yàn)室操作規(guī)範(fàn)及技巧為containment 三要素中最重要的。除了工作人員要熟知潛在危險(xiǎn)外，對實(shí)驗(yàn)技巧也必須熟練

9、；實(shí)驗(yàn)室主管必須制定一套訓(xùn)練計(jì)畫並建立生物安全手冊。實(shí)驗(yàn)室主管必需具備相關(guān)之背景及經(jīng)驗(yàn)，確實(shí)能擔(dān)任起該負(fù)責(zé)之實(shí)驗(yàn)室所有事務(wù)。這些關(guān)於生物安全之事項(xiàng)應(yīng)該經(jīng)生物安全或其他健康及安全專家之評估。當(dāng)基本的實(shí)驗(yàn)室規(guī)範(fàn)不足以管制實(shí)驗(yàn)室之安全，必須再加以其他規(guī)範(fàn)以滿足需求。當(dāng)然，實(shí)驗(yàn)室操作規(guī)範(fàn)及技巧還必須配合適當(dāng)?shù)膶?shí)驗(yàn)室設(shè)計(jì)、安全設(shè)備及良好的管理規(guī)範(fàn)。5.1 實(shí)驗(yàn)室入口張貼生物性危害標(biāo)示。5.2 實(shí)驗(yàn)進(jìn)行時(shí)，關(guān)閉實(shí)驗(yàn)室門。只有被核準(zhǔn)之人員方可進(jìn)入實(shí)驗(yàn)。實(shí)驗(yàn)室主管有責(zé)任且具職權(quán)管制進(jìn)出人員，必須建立進(jìn)入實(shí)驗(yàn)室政策或程序中。例如：只有熟知潛在危害方可進(jìn)入實(shí)驗(yàn)室。先天免疫缺乏者、高危險(xiǎn)性後天感染者，或感染後病癥特

10、殊者，禁止進(jìn)入實(shí)驗(yàn)室。5.3 實(shí)驗(yàn)完成後必須洗手。5.4 工作區(qū)禁止：吃、喝、吸煙、儲(chǔ)存食物、施用化妝品等。5.5 禁止以口操作移液管。5.6 任何物質(zhì)禁止放入口中，標(biāo)籤禁止以舌舔。5.7 工作時(shí)穿實(shí)驗(yàn)衣，且此實(shí)驗(yàn)衣不可於非P2工作區(qū)域穿著。受污染之實(shí)驗(yàn)衣以高壓滅菌法進(jìn)行消毒。5.8 實(shí)驗(yàn)室禁止穿涼拖鞋。5.9 實(shí)驗(yàn)衣與自己的衣服必須分開放置。5.10 戴安全眼鏡或面罩。5.11 操作感染性物質(zhì)必須配戴隔離手套，尤其手上皮膚有受傷時(shí)。5.12 小心操作以減少感染物的濺溢或氣霧之產(chǎn)生。5.13 工作桌於每次實(shí)驗(yàn)完成後與一日工作結(jié)束後以70%酒精擦拭消毒。操作中有人接觸或生物危害性物質(zhì)濺溢時(shí)須立即

11、消毒。5.14 實(shí)驗(yàn)室應(yīng)該保持整潔，實(shí)驗(yàn)不必用到的物品不應(yīng)該出現(xiàn)。5.15 安全操作尖銳品之政策要求為。5.15.1 並盡可能使用塑膠器材。5.15.2 不可徒手處理破碎玻璃器皿，而須使用機(jī)械式器具，如：掃帚與畚斗、鉗子、鑷子等。裝有感染性針頭、尖銳物品、及破碎玻璃的容器須先經(jīng)消毒，在依據(jù)適當(dāng)?shù)姆钜?guī)定處置。5.16 以防漏容器收集、處理、貯存、傳遞、運(yùn)送培養(yǎng)物、組織或組織液樣本。5.17 所有培養(yǎng)物、貯存物、及其他管制廢棄物，在丟棄前需依認(rèn)可之方法消毒，例如：高溫高壓滅菌法處理。若消毒須於臨近實(shí)驗(yàn)室處進(jìn)行時(shí)，所有物品需置於耐用、防漏密閉的容器中，以利安全運(yùn)送。5.18 除定期消毒外，若發(fā)生有

12、感染性物質(zhì)潑灑或其他污染情形發(fā)生時(shí)，實(shí)驗(yàn)室內(nèi)儀器及工作檯面須以適當(dāng)?shù)臍⒕鷦┫?，受污染的儀器依照政府相關(guān)單位的規(guī)定消毒及包裝後，才得移出維護(hù)修理。5.19 操作細(xì)菌、病毒或是感染性物質(zhì)相關(guān)實(shí)驗(yàn)時(shí)，若需使用微量吸取器進(jìn)行操作微量液體之吸取，需使用含過濾頭之tip以避免發(fā)生污染，當(dāng)使用完後t(yī)ip需置於含10%Virkon消毒殺菌水溶液的瓶內(nèi)浸泡，待瓶內(nèi)空間飽和時(shí)將漂白水移除後再置於廢棄桶以進(jìn)行消毒，此處理步驟由操作病毒人員視情況自行處理廢棄物。5.20 實(shí)驗(yàn)室管理主管或指導(dǎo)教授必須建制該室之生物安全管制規(guī)範(fàn)。實(shí)驗(yàn)室人員必須熟讀且遵守。5.21 實(shí)驗(yàn)室人員必須接受感染性病原的使用防護(hù)措施之訓(xùn)練。此外

13、，若有修訂任何程序步驟須再接受額外的訓(xùn)練。5.22 實(shí)驗(yàn)室有任何意外必須立即向?qū)嶒?yàn)室主管報(bào)告。任何藥物評估、監(jiān)測及處理須紀(jì)錄及保存。6 安全設(shè)備；初級防護(hù)設(shè)備 (Safety Equipment; Primary Barriers) 實(shí)驗(yàn)室管理主管或指導(dǎo)教授必須確認(rèn)提供適當(dāng)?shù)脑O(shè)備，且它們被正確使用。通常這些設(shè)備符合共同之原則：6.1 避免或降低人員和感染性物質(zhì)接觸。6.2 材質(zhì)必須不滲透、抗腐蝕、並符合結(jié)構(gòu)需求。6.3 組合上不要有粗糙的或鋸齒狀的邊。6.4 設(shè)計(jì)上要易於操作、維護(hù)、清潔及去除污染。一般常用之安全設(shè)備有：移液管及移液輔助裝置(pipetting aids )、有栓蓋的試管或瓶子

14、(screw-capped tubes and bottles )、符合P2規(guī)範(fàn)之生物安全操作櫃(biological safety cabinets )、滅菌鍋(autoclaves)，個(gè)人防護(hù)裝置如安全眼鏡、隔離口罩、手套的使用、穿著實(shí)驗(yàn)衣等。其他依實(shí)驗(yàn)性質(zhì)不同所使用之特殊設(shè)備。6.5 處理生物安全等級2所屬的物質(zhì)，必須在I級或II級生物安全操作櫃中操作。6.6 工作時(shí)穿著實(shí)驗(yàn)衣，以免污染外出服。並且不可將這些衣物穿離或帶離實(shí)驗(yàn)室。6.7 戴隔離手套尤其當(dāng)手上皮膚有破皮或出疹情形時(shí)。必要時(shí)甚至可以戴兩層手套。6.8 如果預(yù)期有微生物或其他危險(xiǎn)物質(zhì)濺灑臉部，則須配戴眼部保護(hù)裝置。6.9 其他

15、設(shè)備：如移液管及移液輔助裝置（pipetting aids）、有栓蓋的試管或瓶子（screw-capped tubes and bottles）、有蓋之離心管、其他依實(shí)驗(yàn)性質(zhì)不同所使用之特殊裝備。7 實(shí)驗(yàn)室設(shè)施；二級防護(hù)設(shè)備 (Laboratory Facilities; Secondary Barriers)實(shí)驗(yàn)室設(shè)施主要為保護(hù)實(shí)驗(yàn)室人員，免於受到感染性物質(zhì)之污染。設(shè)計(jì)上的主要考量為：7.1 實(shí)驗(yàn)室位置，例如實(shí)驗(yàn)室工作區(qū)與一般區(qū)分開，甚至採獨(dú)立棟建築，實(shí)驗(yàn)室入口的氣鎖裝置。7.2 去除污染、高溫高壓滅菌廢棄物處理之設(shè)施，例如滅菌鍋、焚化爐。7.3 人員衛(wèi)生及清潔之安全設(shè)施，例如實(shí)驗(yàn)室免接觸型

16、之洗手裝置。7.4 防護(hù)設(shè)備，例如生物安全操作櫃 (Biological Safety Cabinet)，且符合符合P2規(guī)範(fàn)。7.5 特定的空氣循環(huán)系統(tǒng)，以確?？諝饬鲃?dòng)的方向，以及空氣處理設(shè)施對排氣作去除污染之動(dòng)作。準(zhǔn)備室相對於走廊為正壓差(1.5±0.3 mmAq)，P2實(shí)驗(yàn)區(qū)相對於準(zhǔn)備室為負(fù)壓差(-2±0.3 mmAq)。此方面可參考ASHRAE (American Society of Heating, Refrigerating, and Air- Conditioning Engineers) 出版之Applications Handbook for Heatin

17、g, Ventilation, and Air- Conditioning。7.6 實(shí)驗(yàn)室門必須有管制系統(tǒng)(如鎖或刷卡自動(dòng)門) 以管制人員進(jìn)出。7.7 實(shí)驗(yàn)室遠(yuǎn)離公共區(qū)域。7.8 實(shí)驗(yàn)室設(shè)計(jì)必須易於清潔。不可使用地毯。7.9 實(shí)驗(yàn)室要耐熱、酸、鹼、有機(jī)溶劑、耐化學(xué)品且不透水。7.10 實(shí)驗(yàn)室空間不可過於擁擠，以利清掃。椅子櫥櫃表面要易於去除污染。7.11 生物安全操作櫃位置要遠(yuǎn)離：門、可開啟之窗戶、人員走動(dòng)頻繁之區(qū)域、使用上要經(jīng)常拆卸之設(shè)備。7.12 照明要適當(dāng)。避免反射、強(qiáng)光、鏡面等妨礙視覺。7.13 室內(nèi)設(shè)置足量之UV滅菌燈7.14 以機(jī)械式之空器循環(huán)系統(tǒng)來提供實(shí)驗(yàn)室之進(jìn)氣；空氣流由外向內(nèi)

18、，排氣不再循環(huán)至建築之任一處。7.15 高溫高壓滅菌鍋不一定要設(shè)定實(shí)驗(yàn)室內(nèi)，但在一個(gè)區(qū)域內(nèi)例如同一層樓或同一棟建築必須至少要設(shè)定一座。8 UCSD實(shí)驗(yàn)室防護(hù)等級（註：本項(xiàng)可置於附錄）生物研究涉及潛在危險(xiǎn)性生物的UCSD實(shí)驗(yàn)室防護(hù)等級生物安全等級(BSL)BSL-1BSL-2BSL-2設(shè)備中BSL-3實(shí)踐BSL-3A.危險(xiǎn)等級危險(xiǎn)的程度低危險(xiǎn)E. coli K-12低中流行性感冒病毒,真菌, 細(xì)菌, 皰診病毒B 型肝炎病毒冠狀病毒 (*SARS除外)中高BSL-3實(shí)驗(yàn)由IBC授權(quán)BSL-2設(shè)備實(shí)踐高結(jié)核病人體免疫缺損病毒愛滋病病毒布魯氏桿菌B.標(biāo)準(zhǔn)的微生物學(xué)實(shí)驗(yàn)1. 當(dāng)實(shí)驗(yàn)中公眾接近不推薦BSL

19、-2實(shí)驗(yàn)中限制公眾接近限制的不允許2. 每日防護(hù)溢出/每日溢出/每日溢出/每日及完成危險(xiǎn)性生物材料的工作時(shí)溢出/每日及完成的工作時(shí)3. 危險(xiǎn)性生物廢物消毒在處置前或者透過UCSD感染性廢棄物合約商BFI在處置前或者透過UCSD感染性廢棄物合約商BFI在處置前或者透過UCSD感染性廢棄物合約商BFI/要點(diǎn)1.在移出建築物前4. 移液管機(jī)械的機(jī)械的機(jī)械的機(jī)械的5. 吃、喝、使用化妝品或隱形眼鏡僅僅在指定的乾淨(jìng)地區(qū)僅僅在指定的乾淨(jìng)地區(qū)任何時(shí)間都不允許任何時(shí)間都不允許6. 洗手設(shè)備必須的必須的必須的（足、肘、電子操作）必須的（足、肘、電子操作）7. 最少空氣傳染程序必須的必須的必須的必須的8. 實(shí)驗(yàn)衣

20、推薦（前扣）需要（前扣）潛在曝露在危險(xiǎn)性生物材料工作人需使用後扣纏繞衣需要使用後扣纏繞衣C. 特殊實(shí)驗(yàn)1. 壓力鍋不需要一定需要一定需要/要點(diǎn)1.先於實(shí)驗(yàn)室需要2. 昆蟲/齧齒目動(dòng)物防治計(jì)畫必須的必須的必須的必須的3. 消毒運(yùn)離實(shí)驗(yàn)室之危險(xiǎn)性生物材料廢物雙層紅色袋子放入耐用、密閉、特定標(biāo)記、防滲漏容器雙層紅色袋子放入耐用、密閉、特定標(biāo)記、防滲漏容器雙層紅色袋子放入耐用、密閉、特定標(biāo)記、防滲漏容器雙層紅色袋子放入耐用、密閉、特定標(biāo)記、防滲漏容器要點(diǎn)1.必須把危險(xiǎn)性生物廢物需由負(fù)責(zé)實(shí)驗(yàn)室工作者以雙層紅色袋子放入耐用、密閉、特定標(biāo)記、防滲漏容器，並放在上鎖的UCSD感染性廢棄物合約廠商BFI廢物處理

21、地區(qū)或壓力鍋中。（廢物允許留在實(shí)驗(yàn)室裡過夜）D. 防護(hù)設(shè)備1. 生物安全工作櫃（BSC）不需要所有產(chǎn)生空氣傳染為程序需要所有危險(xiǎn)性生物介質(zhì)工作需要所有工作需要2. 其他物理防護(hù)設(shè)備使用後必須消毒當(dāng)用危險(xiǎn)性生物材料產(chǎn)生空氣傳染危險(xiǎn)要使用物理防護(hù)（要點(diǎn)2）使用高濃度/大量體積危險(xiǎn)性生物材料，如果使用密封或離心機(jī)的安全杯子則開放實(shí)驗(yàn)室可使用離心機(jī)。唯有在生物安全工作櫃中才能打開杯子使用。設(shè)備使用後必須立刻消毒。當(dāng)用危險(xiǎn)性生物材料產(chǎn)生空氣傳染危險(xiǎn)要使用物理防護(hù)裝置，如：離心機(jī)安全杯子、密封的離心機(jī)轉(zhuǎn)子和動(dòng)物防護(hù)籠子。（要點(diǎn)3）設(shè)備使用後必須立刻消毒當(dāng)用危險(xiǎn)性生物材料產(chǎn)生空氣傳染危險(xiǎn)要使用物理防護(hù)裝置，

22、如：離心機(jī)安全杯子、密封的離心機(jī)轉(zhuǎn)子和動(dòng)物防護(hù)籠子。（要點(diǎn)3）設(shè)備使用後必須立刻消毒3. 冰箱冷凍庫不需要生物危險(xiǎn)性符號(hào)需要生物危險(xiǎn)性符號(hào)需要生物危險(xiǎn)性符號(hào)，並且必須貼標(biāo)籤於容器需要生物危險(xiǎn)性符號(hào)，並且必須貼標(biāo)籤於容器4. BSC檢定每年檢定每年檢定每年檢定每年檢定5. HEPA過濾的真空管線推薦必須的必須的必須的6. BSC工作表面消毒每日及溢出時(shí)在每次使用後需要必須的必須的7. 在防護(hù)室BSC內(nèi)工作時(shí)的個(gè)人保護(hù)設(shè)備當(dāng)處理感染的動(dòng)物、危險(xiǎn)性生物材料需要手套當(dāng)處理感染的動(dòng)物、危險(xiǎn)性生物材料需要手套、保護(hù)衣服（要點(diǎn)4）當(dāng)處理感染的動(dòng)物、危險(xiǎn)性生物材料需要手套、保護(hù)衣服（要點(diǎn)4）當(dāng)處理感染的動(dòng)物、

23、危險(xiǎn)性生物材料需要手套、保護(hù)衣服（要點(diǎn)4）8. 在防護(hù)室BSC外工作時(shí)的個(gè)人保護(hù)設(shè)備當(dāng)處理感染的動(dòng)物、危險(xiǎn)性生物材料需要手套當(dāng)處理感染的動(dòng)物、危險(xiǎn)性生物材料需要手套、保護(hù)衣服，當(dāng)有感染的動(dòng)物應(yīng)加NIOSH N95人工呼吸機(jī)當(dāng)處理感染的動(dòng)物、危險(xiǎn)性生物材料需要手套、保護(hù)衣服，當(dāng)有感染的動(dòng)物應(yīng)加NIOSH N95人工呼吸機(jī)當(dāng)處理感染的動(dòng)物、危險(xiǎn)性生物材料需要手套、保護(hù)衣服，當(dāng)有感染的動(dòng)物應(yīng)加NIOSH N95人工呼吸機(jī)要點(diǎn)2. 危險(xiǎn)性生物材料的程序包括離心力、磨削、混合、強(qiáng)力震動(dòng)、拌合、聲破壞、開容器時(shí)其內(nèi)部壓力不同於環(huán)境壓力。及預(yù)防接種動(dòng)物、從動(dòng)物或雞蛋獲得感染的組織。要點(diǎn)3. 危險(xiǎn)性生物材料空

24、氣傳染來源的程序，包括操縱培養(yǎng)診所或環(huán)境的材料。空器傳染之挑戰(zhàn)，如從實(shí)驗(yàn)動(dòng)物或雞蛋獲得感染的組織、和傳染的動(dòng)物的屍體檢驗(yàn)。要點(diǎn)4. 需要於空氣傳染產(chǎn)生設(shè)備、使用高濃度大量體危險(xiǎn)性生物材料、診所樣品、及人類、傳染的動(dòng)物或雞蛋之體液和組織。人類細(xì)胞培養(yǎng)、傳染的動(dòng)物的屍體檢驗(yàn)。E. 實(shí)驗(yàn)室設(shè)備1. 通風(fēng)負(fù)壓力、空氣沒有再循環(huán)到建築物其他地區(qū)負(fù)壓力、空氣沒有再循環(huán)到建築物其他地區(qū)空氣流動(dòng)從低危險(xiǎn)性到更高的危險(xiǎn)地區(qū)、空氣不可再循環(huán)負(fù)壓力、空氣不可再循環(huán)2. 標(biāo)示危險(xiǎn)性生物材料不需要需要標(biāo)示於儲(chǔ)存BSL-2材料室門。及需要實(shí)驗(yàn)工作的地區(qū)需要標(biāo)示於儲(chǔ)存BSL-3材料室門。及需要實(shí)驗(yàn)工作的地區(qū)需要標(biāo)示於儲(chǔ)存B

25、SL-3材料室門。及需要實(shí)驗(yàn)工作的地區(qū)3. 工作檯工作允許僅允許低危險(xiǎn)程序不允許危險(xiǎn)性生物材料不允許4. 可開窗口用防蒼蠅網(wǎng)時(shí)允許用防蒼蠅網(wǎng)時(shí)允許不允許不允許5. 實(shí)驗(yàn)室與一般公眾場所分離不需要不需要需要，當(dāng)危險(xiǎn)性生物材料工昨時(shí)必須關(guān)閉和鎖門需要，門必須全時(shí)關(guān)閉F. 其他要求1. 技術(shù)訓(xùn)練需要及文件化一年兩次訓(xùn)練及文件化每月訓(xùn)練及文件化每月訓(xùn)練及文件化2. 醫(yī)療檢查（最少血檢）適時(shí)需要適時(shí)需要必須的必須的3. 溢出.意外立即對實(shí)驗(yàn)室主任報(bào)告、適當(dāng)之醫(yī)療評估、檢查、處理，保留原實(shí)驗(yàn)記錄立即對實(shí)驗(yàn)室主任報(bào)告、適當(dāng)之醫(yī)療評估、檢查、處理，保留原實(shí)驗(yàn)記錄立即對實(shí)驗(yàn)室主任報(bào)告、適當(dāng)之醫(yī)療評估、檢查、處理

26、，保留原實(shí)驗(yàn)記錄立即對實(shí)驗(yàn)室主任報(bào)告、適當(dāng)之醫(yī)療評估、檢查、處理，保留原實(shí)驗(yàn)記錄4. 生物安全手冊手冊應(yīng)以準(zhǔn)備或採用，並要求人員對其中策略程序熟悉手冊應(yīng)以準(zhǔn)備或採用，並要求人員對其中策略程序熟悉手冊應(yīng)以準(zhǔn)備或採用，並要求人員對其中策略程序熟悉手冊應(yīng)以準(zhǔn)備或採用，並要求人員對其中策略程序熟悉9 生物性與一般廢棄物之處理 （註：可參考校內(nèi)P2實(shí)驗(yàn)室廢棄物分類處理清運(yùn)流程）本實(shí)驗(yàn)室所產(chǎn)生之廢棄物分為生物性廢棄物與一般廢棄物兩類:9.1 生物性廢棄物指本實(shí)驗(yàn)室所產(chǎn)生之細(xì)菌、細(xì)菌培養(yǎng)液、等生物性物質(zhì)或曾與上述物質(zhì)接觸後所產(chǎn)生之廢棄物，如使用過後之培養(yǎng)瓶、培養(yǎng)皿、玻璃或塑膠吸管、離心管等均屬之。9.1.1

27、. 固態(tài)生物性廢棄物:手套、口罩和固體廢棄物皆須置於2層大型滅菌袋內(nèi)(有紅色生物性為害標(biāo)示圖案)，需加以密閉以避免污染，並將密封好之廢棄物，依院內(nèi)廢棄物清運(yùn)系統(tǒng)申請?zhí)幚?。為利高壓滅菌之進(jìn)行，清運(yùn)過程中需要兩位人員協(xié)同進(jìn)行，帶有手套人員負(fù)責(zé)清運(yùn)廢棄物，另一位未帶手套人員則是協(xié)助開啟各區(qū)之門以利運(yùn)送。固態(tài)生物性廢棄物處理(在滅菌袋外貼上滅菌標(biāo)示膠帶)以高溫高壓滅菌釜於121°C，1.1kg/cm2下滅菌30分鐘後，依院內(nèi)廢棄物申報(bào)處理程序處理。9.1.2. 液態(tài)生物性廢棄物:放置在不銹鋼提籃，以高溫高壓滅菌釜於121°C，1.1kg/cm2下滅菌30分鐘後，依院內(nèi)廢棄物申報(bào)處理

28、程序處理。玻璃試管和血清瓶再依一般實(shí)驗(yàn)器皿清洗。9.2 一般廢棄物指非第1點(diǎn)所述之物，而無危害性者，一般性廢棄物則由清潔人員依一般事業(yè)廢棄物處理。9.3 實(shí)驗(yàn)進(jìn)行有時(shí)間的延續(xù)性，當(dāng)天實(shí)驗(yàn)其液態(tài)和固態(tài)生物性廢棄物產(chǎn)出後，液態(tài)廢棄物進(jìn)行高溫高壓滅菌；固態(tài)廢棄物依9.1.1步驟，並噴灑消毒劑封口。待隔天實(shí)驗(yàn)結(jié)束後，進(jìn)行高溫高壓滅菌的廢棄物清運(yùn)處理程序處理之。常用生物實(shí)驗(yàn)室廢棄物清運(yùn)代碼法規(guī)代碼中文名稱 廢棄之微生物培養(yǎng)物、菌株及相關(guān)生物製品 血液廢棄物 廢棄物之尖銳器具 受污染之動(dòng)物屍體、殘肢、用具 實(shí)驗(yàn)室廢棄物 感染性事業(yè)廢棄物混合物 其他類別請至廢棄物申請系統(tǒng)查詢清運(yùn)代碼P2生物實(shí)驗(yàn)室廢棄物分類

29、處理清運(yùn)流程P2實(shí)驗(yàn)室廢棄物一般實(shí)驗(yàn)廢棄物（無沾染生物材料）生物實(shí)驗(yàn)廢棄物滅菌或消毒感染性廢棄物包含：P2實(shí)驗(yàn)室產(chǎn)出廢棄之微生物培養(yǎng)物、菌株及相關(guān)生物製品、人體血液或血液製品、檢體、沾染生物材料之廢棄物等。1. 固體廢棄物：培養(yǎng)基、檢體不需自培養(yǎng)皿/瓶中取出，裝於貼有生物性危害標(biāo)籤之容器或塑膠袋中，密封良好，進(jìn)行高溫高壓滅菌，貼上滅菌指示帶以區(qū)別滅菌。2. 液態(tài)培養(yǎng)基：需依操作生物菌種加入合適消毒劑，如漂白水、virkon等。3. 針頭、解剖刀片等尖銳物品：(1)收集在硬質(zhì)、不易穿透的可密封之堅(jiān)固容器，容器外部明顯位置標(biāo)示生物醫(yī)療廢棄物圖示及廢尖銳器具，如收集容器非於一次收集完畢即滅菌清運(yùn)，建

30、議加入適當(dāng)之化學(xué)藥劑滅菌，以確保長期收集時(shí)預(yù)防環(huán)境污染。(2)一體成形附有針頭的注射器，不可將針頭拆除、剪斷後分開處理，以防異常之傷害及接觸。(3)申請清運(yùn)前以化學(xué)方法滅菌或高溫高壓滅菌（需貼上滅菌指示帶以區(qū)別是否已經(jīng)滅菌）。4. 會(huì)腐壞、產(chǎn)生惡臭或造成感染之廢棄物應(yīng)放入冷藏櫃保存。動(dòng)物屍體本校目前無動(dòng)物實(shí)驗(yàn)，無清運(yùn)處理動(dòng)物屍體感染性廢棄物本校安環(huán)中心清運(yùn)處理可燃性固體廢棄物一般可燃固體類（D-1801）塑膠類（D-0299）不可燃性固體廢棄物手套、擦手紙、紙墊、無法回收之紙類、鋁箔紙等，以透明塑膠袋裝。以透明塑膠袋裝。玻璃、陶瓷（D-0499）分別以堅(jiān)固容器盛裝。如有疑問，請洽安環(huán)中心10

31、實(shí)驗(yàn)室之清潔與管理10.1 每天定期安全檢查並記錄。10.2 生物安全操作臺(tái)之初級濾網(wǎng)應(yīng)每三個(gè)月進(jìn)行定期更換，替換掉之初級濾網(wǎng)需經(jīng)滅菌袋封裝後，噴灑70%酒精或1%Virkon消毒水溶液處理後，才能依廢棄物申報(bào)，依校內(nèi)廢棄物清運(yùn)系統(tǒng)申請?zhí)幚?。生物安全操作臺(tái)每年委外校驗(yàn)公司進(jìn)行檢測風(fēng)速與落塵數(shù)校正。10.3 空調(diào)系統(tǒng)濾網(wǎng)之更換: 委外校驗(yàn)公司進(jìn)行初級、中級與高級濾網(wǎng)之定期更換並填寫更換記錄，以維護(hù)本實(shí)驗(yàn)室內(nèi)環(huán)境之安全品質(zhì)。10.4 進(jìn)行細(xì)菌或感染性物質(zhì)相關(guān)實(shí)驗(yàn)時(shí)，操作用具若直接接觸細(xì)菌液時(shí)，需以1%Virkon消毒殺菌水溶液，進(jìn)行浸潤1824hr消毒才可置於廢棄桶內(nèi)。11 緊急應(yīng)變處理11.1

32、生物試劑洩漏緊急應(yīng)變處理11.1.1 櫥櫃內(nèi)(生物安全櫃)洩漏處理：11.1.1.1 保持生物安全櫃功能之運(yùn)作。(增設(shè)不斷電系統(tǒng)之110V和220V電源插座)11.1.1.2 穿著個(gè)人防護(hù)器材：手套、安全眼鏡、實(shí)驗(yàn)衣等。11.1.1.3 將擦拭紙放置於洩漏區(qū)上。11.1.1.4 使用殺菌劑（如1%Virkon消毒水溶液）清潔櫥壁、工作面及凹槽。使用殺菌劑時(shí)應(yīng)避免噴濺。11.1.1.5 讓殺菌劑停滯污染面1020分鐘。11.1.1.6 以擦拭紙擦拭或吸收所有的殺菌劑，將吸收棉紙放入標(biāo)示有生物性危害紅色袋中，以生物性廢棄物處理。11.1.1.7 再以殺菌清潔劑清洗所有暴露面。11.1.1.8 以殺

33、菌劑清潔生物安全櫃內(nèi)部，包括更換初級濾網(wǎng)，替換掉之初級濾網(wǎng)放入標(biāo)示有生物性危害紅色袋中，需經(jīng)高壓滅菌處理後，依醫(yī)療廢棄物處理，若有紙製物或其他會(huì)吸收液體之物質(zhì)則直接當(dāng)生物性廢棄物處理。11.1.1.9 清潔與更換濾網(wǎng)完畢後，將UV(紫外光燈)開啟，至少3小時(shí)至隔夜。11.1.1.10 於生物安全櫃玻璃門張貼消毒中，禁止開啟相關(guān)字樣。11.1.1.11 如果櫥櫃有大量樣本洩漏，需立即停止所有作業(yè)立即投入緊急應(yīng)變處理，並聯(lián)繫專職工安人員協(xié)助處理。11.1.2 實(shí)驗(yàn)室內(nèi)洩漏處理11.1.2.1 穿著個(gè)人防護(hù)器材：手套、安全眼鏡、實(shí)驗(yàn)衣等。11.1.2.2 確定這間實(shí)驗(yàn)室所有人員皆已疏散、清點(diǎn)人數(shù)並將

34、房間門關(guān)閉。11.1.2.3 進(jìn)入房間，以吸收棉索將洩漏範(fàn)圍圍住，再以吸收棉紙覆蓋在洩漏區(qū)。11.1.2.4 小心傾倒殺菌劑（如2%Virkon消毒水溶液）在洩漏區(qū)外周圍，然後再往洩漏區(qū)傾倒，過程中避免產(chǎn)生噴濺及氣膠現(xiàn)象。11.1.2.5 讓殺菌劑靜置20分鐘以上。11.1.2.6 使用更多的吸收棉材料將殺菌劑完全的擦拭掉。11.1.2.7 將所有吸收棉材料放入標(biāo)示有生物性危害紅色滅菌袋中, 以生物性廢棄物處理。11.1.2.8 先使用殺菌劑清理後才可脫掉防護(hù)具，並將防護(hù)具丟棄於標(biāo)示有生物性危害紅色滅菌袋中, 以生物性廢棄物處理或以殺菌劑噴灑或浸泡殺菌完全後清洗。11.1.2.9 在實(shí)驗(yàn)室門口

35、張貼消毒中，實(shí)驗(yàn)人員禁止進(jìn)入相關(guān)字樣，避免不知情人員進(jìn)入。11.1.2.10 離開後立即以殺菌劑清洗雙手及各身體可能之開放面。11.1.2.11 如洩漏無法控制，通知專職工安人員協(xié)助處理，工安管理人員需立即通知鄰近區(qū)域進(jìn)行人員疏散。11.2 發(fā)生火災(zāi)緊急應(yīng)變處理11.2.1 發(fā)生火災(zāi)之事故發(fā)生者或發(fā)現(xiàn)者，依事故內(nèi)容通報(bào)主管及緊急通報(bào)專線00000處理11.2.2 作業(yè)流程：11.2.2.1 狀況判別: 11.2.2.1.1 引起火災(zāi)的原因(明火、電氣走火、靜電火花等引燃易燃物)11.2.2.1.2火災(zāi)現(xiàn)場是否有特殊的危險(xiǎn)(害)狀況( 爆炸性氣體洩漏或毒性氣體(蒸氣)溢散或禁水性化學(xué)品或爆炸性、

36、不穩(wěn)定性化學(xué)品)11.2.2.2 危害性判別：是否已有人員傷亡，如是，則應(yīng)通報(bào)緊急通報(bào)專線(分機(jī)0000)請求救援，並迅速將人員移至安全區(qū)域予以急救。是否有立即的危險(xiǎn)：有無發(fā)生爆炸或有爆炸的可能性?？諝庵?，有害(險(xiǎn))性物質(zhì)濃度，是否已達(dá)致死濃度或介於爆炸界限濃度範(fàn)圍。有立即危險(xiǎn)，請盡速依照逃生路線(如圖二)離開火災(zāi)現(xiàn)場，並緊急通報(bào)專線0000處理。11.2.2.3 火災(zāi)處理適用最初起火時(shí)，且能在三分鐘以內(nèi)滅火之火源。本P2級實(shí)驗(yàn)室000室在門口外側(cè)有配置CO2滅火器及代海龍F(tuán)M200滅火器各一支，可直接使用手提滅火器滅火。11.2.2.4 發(fā)生火災(zāi)非個(gè)人能立即處理應(yīng)依本校緊急通報(bào)系統(tǒng)通知主管及

37、緊急通報(bào)專線0000處理。11.3 發(fā)生地震緊急應(yīng)變處理11.3.1 發(fā)生地震時(shí)人員安全注意事項(xiàng)11.3.1.1 室內(nèi)人員應(yīng)停止手邊工作，關(guān)閉開啟之火源，立即尋找堅(jiān)固牢靠之樑柱邊或桌子櫃子邊掩護(hù)。11.3.1.2 應(yīng)立即儘可能去關(guān)閉火源電源及危險(xiǎn)、危害氣體源，以免發(fā)生火災(zāi)、爆炸及氣體洩漏。11.3.1.3 於地震搖晃間斷或停止時(shí)，依照緊急逃生路線(如圖二)往室外空曠處疏散，並且不可搭乘電梯。11.3.1.4 因地震而引發(fā)各項(xiàng)事故(人員受傷、化學(xué)品洩漏、火災(zāi)等)時(shí)，發(fā)現(xiàn)同仁應(yīng)立即採取相關(guān)處理措施及通報(bào)同仁支援；利用院內(nèi)緊急通報(bào)專線0000或按火災(zāi)手按報(bào)知機(jī)(利用火警鈴聲示警通報(bào))。11.3.1.

38、5 如事故擴(kuò)展為緊急事件(大型火災(zāi)、化學(xué)品洩漏、環(huán)境污染等)則立即以緊急通報(bào)專線0000聯(lián)繫，利用具有不斷電之廣播系統(tǒng)動(dòng)員全單位緊急應(yīng)變編組人員處理。11.3.1.6 如地震引起重大工安傷害事故或重大環(huán)境污染事故時(shí)，應(yīng)參照“意外事故處理作業(yè)程序”之規(guī)定向主管機(jī)關(guān)通報(bào)之。11.4 發(fā)生停電緊急應(yīng)變處理11.4.1 停電時(shí)立即停止手邊工作，關(guān)閉火源與電器電源開關(guān)，確認(rèn)備用電源系統(tǒng)是否正常啟動(dòng)(不斷電系統(tǒng)包含110V、220V、P2實(shí)驗(yàn)區(qū)之空調(diào)和門禁)，若有安全疑慮，立即依照緊急逃生路線(如圖二)離開。11.4.2 停電狀況發(fā)現(xiàn)者，依事故內(nèi)容通報(bào)實(shí)驗(yàn)室負(fù)責(zé)人與主管，若停電引發(fā)各項(xiàng)事故(人員受傷、化學(xué)

39、品洩漏、火災(zāi)等)時(shí)，發(fā)現(xiàn)同仁應(yīng)立即採取相關(guān)處理措施及通報(bào)同仁支援；並依本所通報(bào)系統(tǒng)通知主管及緊急通報(bào)專線0000處理。11.4.3 在實(shí)驗(yàn)進(jìn)行中，因無法啟動(dòng)緊急電源時(shí)，首先將實(shí)驗(yàn)器具密封蓋好，產(chǎn)出的廢棄物密封完整再放置廢棄物收集筒中並噴灑消毒劑，拉下生物操作臺(tái)的門並關(guān)好，拔除不必要使用之插頭，確定跳電或復(fù)電時(shí)對於儀器不會(huì)造成損傷。依緊急照明燈指示逃生路線出實(shí)驗(yàn)室。11.4.4 確認(rèn)復(fù)電後各儀器運(yùn)作功能正常，若有異常則依各儀器標(biāo)準(zhǔn)操作流程進(jìn)行檢修或報(bào)請維修處理。12 與本實(shí)驗(yàn)室合作進(jìn)行相關(guān)實(shí)驗(yàn)者，一併適用本手冊相關(guān)注意事項(xiàng)及規(guī)範(fàn)。13 圖表13.1 表一、生物材料清單項(xiàng)次中文名稱生物材料編號(hào)生物

40、安全等級英文名稱操作同仁12345678913.2 圖一、廢棄物清運(yùn)處理路線流程圖註：生物廢棄物清運(yùn)路線分成，第1段先將廢棄物收於廢棄桶內(nèi)，搬運(yùn)至高溫高壓滅菌釜進(jìn)行滅菌。第2段將滅菌後廢棄物暫存於待清運(yùn)暫存區(qū)，上網(wǎng)申請清運(yùn)確認(rèn)後，再將廢棄物移至走道。13.3 圖二、緊急疏散路線圖註：為確保各實(shí)驗(yàn)區(qū)的壓差，設(shè)置電鎖和門弓器，只能單獨(dú)使用開啟一扇門，並增設(shè)P2實(shí)驗(yàn)區(qū)刷卡門禁。14 附錄14.1 附錄一、生物安全操作臺(tái)及細(xì)菌操作注意事項(xiàng)及應(yīng)變處理方式13.2.1 工作人員必須穿著P2細(xì)菌培養(yǎng)室專用實(shí)驗(yàn)衣、室內(nèi)鞋、乳膠手套，必要時(shí)需配戴安全眼鏡，始得使用此操作臺(tái)。13.2.2 使用操作臺(tái)前，需打開風(fēng)扇

41、及UV燈至少20分鐘以上始得使用。13.2.3 使用操作臺(tái)前，檯面需以70%酒精擦拭。13.2.4 操作時(shí)，操作臺(tái)之安全玻璃窗需拉下，頭部距離玻璃底部至少30公分以上。13.2.5 本操作臺(tái)不得使用銳利之工具。13.2.6 操作人員手部有傷口時(shí)停止操作細(xì)菌及感染性物質(zhì)。13.2.7 所有使用細(xì)菌培養(yǎng)後及沾有菌液之廢棄物均需經(jīng)高溫高壓滅菌處理。13.2.8 含細(xì)菌之培養(yǎng)容器之進(jìn)出操作臺(tái)，需確定容器為緊閉或蓋上。13.2.9 含細(xì)菌之培養(yǎng)容器之移進(jìn)移出需小心操作，避免溢濺，若不小心溢濺，應(yīng)立即使用2%Virkon消毒水溶液擦拭消毒。若培養(yǎng)液沾到工作實(shí)驗(yàn)衣或護(hù)具，請先更換工作護(hù)具，再進(jìn)行現(xiàn)場消毒處理。13.2.10 含細(xì)菌之容器之移進(jìn)與移出後，以70%酒精擦拭培養(yǎng)箱門與門縫處進(jìn)行消毒。13.2.11 安全操作臺(tái)使用後以70%酒精噴灑檯面，並以UV燈照射30分鐘以上。13.2.12 每天下班前，以70%酒精擦拭安全玻璃窗與門縫處進(jìn)行消毒。14.2 附錄二、人員訓(xùn)練記錄日期訓(xùn)練人員訓(xùn)練內(nèi)容簽名專心-專注-專業(yè)14.3 附錄三、每日實(shí)驗(yàn)室例行檢查表每日下班前實(shí)驗(yàn)室安全衛(wèi)生例行檢查表（註：下表為參考用，可以用本校實(shí)驗(yàn)室每日安全衛(wèi)生檢查表修改）檢查日期: 年 月單位/部門/系所: 0000 實(shí)驗(yàn)室編號(hào): 0000大樓000 室 檢查結(jié)果標(biāo)示