體外受精和早期胚胎培養(yǎng)學習目標：、簡述哺乳動物體外受精

1、體外受精和早期胚胎培養(yǎng)學習目標：1、簡述哺乳動物體外受精技術(shù)的主要操作步驟。2、簡述哺乳動物胚胎的早期培養(yǎng)方法。3、認同體外受精在家畜快速繁殖中的重要意義。學習重點1、體外受精在家畜快速繁殖中的重要意義。2、哺乳動物體外受精技術(shù)的主要操作步驟。學習難點1、卵母細胞的采集和培養(yǎng)。2、精子的采集和獲能。學習過程知識點觀察與思考歸納與結(jié)論試管動物技術(shù)思考：試管動物技術(shù)的概念試管動物技術(shù)是指通過并通過O一、從試管牛說起閱讀P69,思考討論：體外受精在家畜快速繁殖中的重要意義二、體外受精1、卵母細胞的采集和仔細閱讀P70,思考討論：(1)卵母細胞的采集和培養(yǎng)的主要方法是什么？(2)其它方法如何？(1)主

2、要方法是：處理，,然后，從,直接與O(2)第二種方法：從剛;第三種方法是直接從,叫。需借助。采集的,都要在體外經(jīng)后，才能與受精。2、精子的采集和獲能仔細閱讀P71,思考討論：(1)收集精子的方法后幾種？各有什么具體要求？(2)精子的獲能方法通常包括哪幾種？具體操作如何？(1)A:,采用的方法，模仿設計的裝置，它能夠滿足的要求，同時配有相適應的。B:,只適用于豬和犬等體型較小，易于控制的家畜。C:,這種方法多用于野生或經(jīng)濟動物。(2)在體外受精前，要對精子進行獲能處理。對于嚙齒動物、家兔和豬等動物的精子，一般采用,即將取自附睪的精子，放入中，培養(yǎng)一段時間后，精子就可獲能；對于牛、羊等家畜的精子常

3、米用,即將精子放在O3、不仔細閱讀P72圖3-14,思考受精過程簡單繪制“哺乳動物體外受精示意圖”：三、胚胎的早期培養(yǎng)仔細閱讀P72-73,思考討1、精子與卵子在體外受精后，應將受精卵移入中繼續(xù)培養(yǎng),以檢查論：1、哺乳動物胚胎培養(yǎng)液的成分如何？2、牛體外受精胚胎工廠化生產(chǎn)流程圖3、思考討論：比較哺乳動物體內(nèi)胚胎的形成、體外胚胎的發(fā)育各需要完成哪些環(huán)節(jié)？的發(fā)育能力。培養(yǎng)液成分較復雜，除和外，還需添加等營養(yǎng)成分，以及等物質(zhì)。當胚胎發(fā)育到適宜的階段時，可將其取出向移植或。小同動物胚胎移植的時間不同。2、繪制流程圖：3、體內(nèi)胚胎形成需要經(jīng)過：、和;體外胚胎的發(fā)育需要完成：、和。鞏固練習：1 .中科院動

4、物所和福州大熊貓研究中心合作，通過將大熊貓細胞核植入去核后的兔子卵細胞中，在世界上最早克隆出一大批大熊貓早期胚胎，表明我國大熊貓人工繁殖研究再次走在世界前列。下列描述與克隆無關的是（）A.“復制”B.無性繁殖C.組織培養(yǎng)D.人類基因組計劃2 .超數(shù)排卵的做法正確的是（）A.口服促性腺激素B.注射促性腺激素C.口服或注射促性腺激素D.以上方法均不正確3.胚胎早期培養(yǎng)需要用液體培養(yǎng)基，此培養(yǎng)液的成分是（）A.水、無機鹽、維生素、激素、有機鹽、氨基酸、核甘酸、血清等B.蔗糖、水、無機鹽、維生素、激素C.蔗糖、水、無機鹽、氨基酸、核甘酸、血清D.水、無機鹽、維生素、有機鹽、淀粉等4 .下列關于屠宰場和

5、“胚胎工廠”合建的說法正確的是（）可保證屠宰場的肉是鮮肉，防止實驗過長，肉變質(zhì)有利于生產(chǎn)大量的胚胎和胚胎工程所需要的原材料不夠衛(wèi)生，不能合建從屠宰場廢棄的卵巢中可直接獲取卵細胞A.B.C.D.5 .下列關于培育試管嬰兒的敘述，不正確的是（）A.培育試管嬰兒要進行體外受精過程B.試管嬰兒的發(fā)育場所主要在試管內(nèi)C.試管嬰兒的發(fā)育場所主要在母體內(nèi)D.試管嬰兒具有雙親的遺傳特性6 .卵母細胞的采集之前，用處理雌性個體，使其排出更多的卵子，然后，從輸卵管中沖取卵子，又叫。收集精子的方法有法、法和法等。答案：促性腺激素沖卵假陰道手握電刺激7 .在體外受精前，要對精子進行獲能處理。通常采用的方法有、兩種，其

6、中后者是將精子放在一定濃度的中，用化學藥物誘導精子獲能。答案：培養(yǎng)化學誘導肝素或鈣離子載體A23187溶液8 .胚胎發(fā)育到適宜的階段時，將其取出向或。答案：受體移植冷凍保存拓展題9 .以下是制定并研究設計的“試管?！惫S化生產(chǎn)技術(shù)流程，其中正確的順序是（）卵母細胞的采集和培養(yǎng)精子的采集和獲能畫出“試管?！惫S化生產(chǎn)技術(shù)流程受精胚胎的早期培養(yǎng)A.B.C.D.10 .哺乳動物胚胎的早期培養(yǎng)所用培養(yǎng)液成分一般都比較復雜，除一些無機鹽和有機鹽類外，還需添加、等營養(yǎng)成分，以及等物質(zhì)。答案：維生素激素氨基酸核甘酸血清知識拓展：何謂試管嬰兒技術(shù)“試管嬰兒”是指分別將卵子與精子取出后，在體外（培養(yǎng)皿中）使其受

7、精，并發(fā)育成胚胎后，再植回母體子宮內(nèi)。因此，胚胎在體外培養(yǎng)的時間只有幾天，最重要的目的是確定精卵能結(jié)合成功，并篩選好的胚胎植回母體，以增加懷孕成功的機會?！霸嚬軏雰骸奔夹g(shù)主要包括：1.超排卵2.卵泡監(jiān)測3.取卵手術(shù)4.精卵體外處理5.體外受精6.胚胎的體外培養(yǎng)7.胚胎移植“試管嬰兒”技術(shù)是一項高、精、尖技術(shù)，需要具備一組有經(jīng)驗及專門技術(shù)的人員，一定的儀器，必需的藥品?！霸嚬軏雰骸辟M用包括藥物費用及手術(shù)費用，由于促排卵的藥品費用較高，卵子受精、胚胎發(fā)育所需外界條件高，所以做一例“試管嬰兒”的費用也較高。因為每一名患者所用的藥物劑量不同，所以每個做IVF的患者所需的費用也有所不同，一般來講，年齡輕

8、、卵巢反應性好的患者需要的費用較低，具體費用應向生殖醫(yī)學中心的醫(yī)生咨詢?！霸嚬軏雰骸钡某晒β适谴蠹曳浅ｊP心的一個問題，一般情況下，一對正常育齡夫妻每月的自然妊娠機率不超過27%通俗一點，就是說每對夫婦不是每個月想要小寶寶都能得到的。同樣“試管嬰兒”也不是每個治療周期都會成功，我所目前“試管嬰兒”的成功率為37%這一比例在國內(nèi)居領先水平。國外好的輔助生殖中心“試管嬰兒”的成功率一般為3040%目前“試管嬰兒”技術(shù)可幫助幾乎所有類型的不孕癥患者，但由于其費用較高，尚難以在國內(nèi)普及，但我們認為如果存在需要進行“試管嬰兒”技術(shù)助孕的特征，應及早來輔助生殖中心診治，以提高其成功率。胚胎冷凍保存胚胎冷凍保存：要建立胚胎庫和長途運送胚胎，就需要解決胚胎冷凍保存問題。冷凍保存的方法大體可分為緩慢冷凍、快速冷凍、玻璃化冷凍三類?？焖倮鋬龅闹饕僮鬟^程如下：1 .冷凍液：一般用加有10%20%的胎犢血清（FCS）的杜氏磷酸鹽緩沖液（PBS）來配制，防凍劑可采用甘油或二甲亞楓（DMSO殍。也可用1摩爾濃度的甘油作為冷凍液。2 .冷凍：將胚胎洗凈后置于1摩爾濃度的甘油溶液中，在室溫下平衡10分鐘，用O.25毫升細管包裝胚胎，用聚乙醇粉末封口。細管放人0c冷凍儀，以1C/分鐘速度降溫，7C誘發(fā)結(jié)晶（用在液氮中冷卻的鐐子夾細管含胚段上端1/3處）。隨后將冷凍儀以0.