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1、第一章 緒論一、術(shù)語(yǔ)或名詞 1微生物(microorganism) 因太小,一般用肉眼看不清楚的生物。這些微小生物包括:無(wú)細(xì)胞結(jié)構(gòu)不能獨(dú)立生活的病毒、亞病毒(類(lèi)病毒、擬病毒、朊病毒);具原核細(xì)胞結(jié)構(gòu)的真細(xì)菌、古生菌以及具真核細(xì)胞結(jié)構(gòu)的真菌(酵母、霉菌、蕈菌等)、單細(xì)胞藻類(lèi)、原生動(dòng)物等。但其中也有少數(shù)成員是肉眼可見(jiàn)的。2微生物學(xué)(microbiology) 研究肉眼難以看清的稱之為微生物的生命活動(dòng)的科學(xué),分離和培養(yǎng)這些微小生物需要特殊技術(shù)。3分子微生物學(xué)(molecularmicrobiology) 在分子水平上研究
2、微生物生命活動(dòng)規(guī)律的科學(xué)。4細(xì)胞微生物學(xué)(cellularmicrobiology) 重點(diǎn)研究微生物與寄主細(xì)胞相互關(guān)系的科學(xué)。5微生物基因組學(xué)(microbic genomics) 研究微生物基因組的分子結(jié)構(gòu)、信息含量及其編碼的基因產(chǎn)物的科學(xué)。6自生說(shuō)(spontaneousgeneration) 一個(gè)古老的學(xué)說(shuō),認(rèn)為一切生命有機(jī)體能夠從無(wú)生命的物質(zhì)自然發(fā)生的。7安東·列文虎克(AntonyvanLeeuwenhoek,16321723) 荷蘭商人,他是真正看見(jiàn)并描述微生物的第一人,他利用自制放大倍數(shù)為50300倍的顯微鏡發(fā)現(xiàn)了微生物世
3、界(當(dāng)時(shí)被稱之為微小動(dòng)物),首次揭示了一個(gè)嶄新的生物世界微生物界。8路易斯·巴斯德(LouisPasteur,18221895) 法國(guó)人,原為化學(xué)家,后來(lái)轉(zhuǎn)向微生物學(xué)研究領(lǐng)域,為微生物學(xué)的建立和發(fā)展做出了卓越的貢獻(xiàn),成為微生物學(xué)的奠基人。主要貢獻(xiàn):用曲頸瓶實(shí)驗(yàn)徹底否定了“自生說(shuō)”,從此建立了病原學(xué)說(shuō),推動(dòng)了微生物學(xué)的發(fā)展;研究了雞霍亂,發(fā)現(xiàn)將病原菌減毒可誘發(fā)免疫性,以預(yù)防雞霍亂??;其后他又研究了牛、羊炭疽病和狂犬病,并首次制成狂犬疫苗,證實(shí)其免疫學(xué)說(shuō),為人類(lèi)防病、治病做出了重大貢獻(xiàn);分離到了許多引起發(fā)酵的微生物,并證實(shí)酒精發(fā)酵是由酵母菌引起的,也發(fā)現(xiàn)乳酸發(fā)酵、醋酸發(fā)酵和丁
4、酸發(fā)酵都是不同細(xì)菌所引起的,為進(jìn)一步研究微生物的生理生化和工業(yè)微生物學(xué)奠定了基礎(chǔ)。9羅伯特柯赫(Robert Koch,18431910) 德國(guó)人,著名的細(xì)菌學(xué)家,曾經(jīng)是一名醫(yī)生,對(duì)病原細(xì)菌的研究做出了突出的貢獻(xiàn):A具體證實(shí)了炭疽病菌是炭疽病的病原菌;B分離、培養(yǎng)了肺結(jié)核病的病原菌,這是當(dāng)時(shí)死亡率極高的傳染性疾病,因此柯赫獲得了諾貝爾獎(jiǎng);C提出了證明某種微生物是否為某種疾病病原體的基本原則柯赫氏定律。他也是微生物學(xué)的奠基人。10伍連德(18791960) 我國(guó)廣東香山人,著名公共衛(wèi)生學(xué)家,我國(guó)海港檢疫創(chuàng)始人。他用微生物學(xué)理論和技術(shù)對(duì)鼠疫和霍亂的病原進(jìn)行研究和防治,在中國(guó)
5、最早建立起衛(wèi)生防疫機(jī)構(gòu),培養(yǎng)了第一支預(yù)防鼠疫的專(zhuān)業(yè)隊(duì)伍,在他的領(lǐng)導(dǎo)和組織下,有效地戰(zhàn)勝了19101911和19201921年間我國(guó)東北各地鼠疫的大流行,被國(guó)際上譽(yù)為著名的防疫專(zhuān)家,世界鼠疫會(huì)議1911年4月在我國(guó)沈陽(yáng)舉行時(shí),他任大會(huì)主席和中國(guó)首席代表。著有“論肺型鼠疫”、“鼠疫概論”和“中國(guó)醫(yī)史”等。11湯飛凡(18791958) 我國(guó)湖南醴陵人,著名的醫(yī)學(xué)微生物學(xué)家,在醫(yī)學(xué)細(xì)菌學(xué)、病毒學(xué)和免疫學(xué)等方面的某些領(lǐng)域做出·了顯著的貢獻(xiàn),特別是首次應(yīng)用雞胚卵黃囊接種法從病人的眼結(jié)膜刮屑物中分離、培養(yǎng)沙眼衣原體的成功,確證了沙眼衣原體的存在,為世界上首創(chuàng),成為醫(yī)學(xué)微生物學(xué)方面的重
6、大成果。12SARS Severe Acute Respiratory Syndrome的簡(jiǎn)稱,嚴(yán)重急性呼吸道綜合征,即我國(guó)稱為的非典型肺炎,也簡(jiǎn)稱為非典。二、習(xí) 題 填空題1微生物與人類(lèi)關(guān)系的重要性,你怎么強(qiáng)調(diào)都不過(guò)分,微生物是一把十分鋒利的雙刃劍,它們?cè)诮o人類(lèi)帶來(lái) 的同時(shí)也帶來(lái) 。21347年的一場(chǎng)由 引起的瘟疫幾乎摧毀了整個(gè)歐洲,有13的人(約2 500萬(wàn)人)死于這場(chǎng)災(zāi)難。32003年SARS在我國(guó)一些地區(qū)迅速蔓延,正常的生活和工作節(jié)奏嚴(yán)重地被打亂,這是因?yàn)镾ARS
7、有很強(qiáng)的傳染性,它是由一種新型的 所引起。4微生物包括: 細(xì)胞結(jié)構(gòu)不能獨(dú)立生活的病毒、亞病毒(類(lèi)病毒、擬病毒、朊病毒);具細(xì)胞結(jié)構(gòu)的真細(xì)菌、古生菌;具 細(xì)胞結(jié)構(gòu)的真菌(酵母、霉菌、蕈菌等)、單細(xì)胞藻類(lèi)、原生動(dòng)物等。5著名微生物學(xué)家Roger Stranier提出,確定微生物領(lǐng)域不應(yīng)只是根據(jù)微生物的大小,而且也應(yīng)該根據(jù)有別于動(dòng)、植物的 。6重點(diǎn)研究微生物與寄主細(xì)胞相互關(guān)系的新型學(xué)科領(lǐng)域,稱為 。7公元6世紀(jì)(北魏時(shí)期),我國(guó)賈思
8、勰的巨著“ ”詳細(xì)地記載了制曲、釀酒、制醬和釀醋等工藝。8,19世紀(jì)中期,以法國(guó)的 和德國(guó)的 為代表的科學(xué)家,揭露了微生物是造成腐敗發(fā)酵和人畜疾病的原因,并建立了分離、培養(yǎng)、接種和滅菌等一系列獨(dú)特的微生物技術(shù),從而奠定了微生物學(xué)的基礎(chǔ),同時(shí)開(kāi)辟了醫(yī)學(xué)和工業(yè)微生物學(xué)等分支學(xué)科。 和 是微生物學(xué)的奠基人。920世紀(jì)中后期,由于微生物學(xué)的 、 等技術(shù)的滲透和應(yīng)用的拓
9、寬及發(fā)展,動(dòng)、植物細(xì)胞也可以像微生物一樣在乎板或三角瓶中分離、培養(yǎng)和在發(fā)酵罐中進(jìn)行生產(chǎn)。10目前已經(jīng)完成基因組測(cè)序的3大類(lèi)微生物主要是 、 及 。而隨著基因組作圖測(cè)序方法的不斷進(jìn)步與完善,基因組研究將成為一種常規(guī)的研究方法,為從本質(zhì)上認(rèn)識(shí)微生物自身以及利用和改造微生物將產(chǎn)生質(zhì)的飛躍。11微生物從發(fā)現(xiàn)到現(xiàn)在的短短的300年間,特別是20世紀(jì)中期以后,已在人類(lèi)的生活和生產(chǎn)實(shí)踐中得到廣泛的應(yīng)用,并形成了繼動(dòng)、植物兩大生物產(chǎn)業(yè)后的 。 選擇題(4個(gè)答案選1)1當(dāng)今,一種新的瘟疫正在
10、全球蔓延,它是由病毒引起的( )。 A 鼠疫 B 天花 C 艾滋病(AIDS) D 霍亂2微生物在整個(gè)生物界的分類(lèi)地位,無(wú)論是五界系統(tǒng),還是三域(domain)系統(tǒng),微生物都占據(jù)了( )的“席位”。 A 少數(shù) B 非常少數(shù) C 不太多 D
11、絕大多數(shù)3微生物學(xué)的不斷發(fā)展,已形成了基礎(chǔ)微生物學(xué)和應(yīng)用微生物學(xué),它又可分為( )的分支學(xué)科。 A 幾個(gè)不同 B 少數(shù)有差別 C許多不同 D4個(gè)不同4公元9世紀(jì)到10世紀(jì)我國(guó)已發(fā)明( )。 A曲蘗釀酒 B用鼻苗法種痘 C烘制面包 D釀制果酒5安東·列文虎克
12、制造的顯微鏡放大倍數(shù)為( )倍,利用這種顯微鏡,他清楚地看見(jiàn)了細(xì)菌和原生動(dòng)物。 A50300 B10左右 C220 D5001 0006據(jù)有關(guān)統(tǒng)計(jì)表明,20世紀(jì)諾貝爾獎(jiǎng)的生理學(xué)或醫(yī)學(xué)獎(jiǎng)獲得者中,從事微生物問(wèn)題研究的就占了( ) 。 A110 B23 C120
13、60; D137巴斯德為了否定“自生說(shuō)”,他在前人工作的基礎(chǔ)上,進(jìn)行了許多試驗(yàn),其中著名的( )無(wú)可辯駁地證實(shí):空氣中確實(shí)含有微生物,它們引起有機(jī)質(zhì)的腐敗。 A厭氧試驗(yàn) B滅菌試驗(yàn) C曲頸瓶試驗(yàn) D菌種分離試驗(yàn)8柯赫提出了證明某種微生物是否為某種疾病病原體的基本原則( )。 A巴斯德原則 B柯赫原則 C 菌種原則
14、; D 免疫原理9微生物基因組序列分析表明,在某些微生物中存在一些與人類(lèi)某些遺傳疾病相類(lèi)似的基因,因此可以利用這些微生物作為( )來(lái)研究這些基因的功能,為認(rèn)識(shí)龐大的人類(lèi)基因組及其功能做出重要貢獻(xiàn)。 A 模式生物 B 受體 C 供體 D 突變材料10我國(guó)學(xué)者湯飛凡教授的( )分離和確證的研究成果,是一項(xiàng)具有國(guó)際領(lǐng)先水平的開(kāi)創(chuàng)性成果。 A
15、 鼠疫桿菌 B 沙眼病原體 C 結(jié)核桿菌 D天花病毒 是非題1微生物是人類(lèi)生存環(huán)境中必不可少的成員,有了它們才使得地球上的物質(zhì)進(jìn)行循環(huán),否則地球上的所有生命將無(wú)法繁衍下去。2由于現(xiàn)代生物技術(shù)的應(yīng)用,尤其是基因治療和基因工程藥物的產(chǎn)生,許多已被征服的傳染病,例如:肺結(jié)核、瘧疾、霍亂、天花等,不可能有“卷土重來(lái)”之勢(shì)。3當(dāng)今研究表明:所有的細(xì)菌都是肉眼看不見(jiàn)的。4微生物學(xué)家要獲得微生物的純種,通常要首先從微生物群體中分離出所需的純種,然后還要進(jìn)行培養(yǎng),因此研究微生物一般要使用特殊的
16、技術(shù),例如:消毒滅菌和培養(yǎng)基的應(yīng)用等,這也是微生物學(xué)有別于動(dòng)、植物學(xué)的。5巴斯德不僅用曲頸瓶實(shí)驗(yàn)證明微生物非自然發(fā)生,推翻了爭(zhēng)論已久的“自生說(shuō)”,而且做了許多其他重大貢獻(xiàn),例如:證明乳酸發(fā)酵是由微生物引起的,首次制成狂犬疫苗,建立了巴氏消毒法等。 6細(xì)菌學(xué)、真菌學(xué)、病毒學(xué)、原生動(dòng)物學(xué)、微生物分類(lèi)學(xué)、發(fā)酵工程、細(xì)胞工程、遺傳工程、基因工 程、工業(yè)微生物學(xué)、土壤微生物學(xué)、植物病理學(xué)、醫(yī)學(xué)微生物學(xué)及免疫學(xué)等,都是微生物學(xué)的分支學(xué)科。7微生物學(xué)的建立雖然比高等動(dòng)、植物學(xué)晚,但發(fā)展卻十分迅速,其重要原因之一,動(dòng)、植物結(jié)構(gòu)的復(fù)雜性及技術(shù)方法的限制而相對(duì)發(fā)展緩慢,特別是人類(lèi)遺傳學(xué)的限制大。
17、60; 8微生物學(xué)與迅速發(fā)展起來(lái)的分子生物學(xué)理論和技術(shù)以及其他學(xué)科匯合,使微生物學(xué)全面進(jìn)入分子研究水平,并產(chǎn)生了其分支學(xué)科“分子微生物學(xué)”。9在基因工程的帶動(dòng)下,傳統(tǒng)的微生物發(fā)酵工業(yè)已從多方面發(fā)生了質(zhì)的變化,成為現(xiàn)代生物技術(shù)的重要組成部分。10DNA重組技術(shù)和遺傳工程的出現(xiàn),才導(dǎo)致了微生物學(xué)的許多重大發(fā)現(xiàn),包括質(zhì)粒載體,限制性內(nèi)切酶、連接酶、反轉(zhuǎn)錄酶等。11微生物個(gè)體小、結(jié)構(gòu)簡(jiǎn)單、生長(zhǎng)周期短,易大量繁殖,易變異等特性,因而與動(dòng)、植相比,十分難于實(shí)驗(yàn)操作。12現(xiàn)在,微生物學(xué)研究的不可替代性,并將更加蓬勃發(fā)展,這是因?yàn)槲⑸锞哂衅渌锊痪邆涞纳飳W(xué)特性;又具有其他生物共有的基本生物學(xué)
18、特性,及其廣泛的應(yīng)用性。 問(wèn)答題 1用具體事例說(shuō)明人類(lèi)與微生物的關(guān)系。 2為什么說(shuō)巴斯德和柯赫是微生物學(xué)的奠基人? 3為什么微生物學(xué)比動(dòng)、植物學(xué)起步晚,但卻發(fā)展非常迅速? 4簡(jiǎn)述微生物學(xué)在生命科學(xué)發(fā)展中的地位。5試述微生物學(xué)的發(fā)展前景三、習(xí)題解答填空題 1巨大利益 “殘忍”的破壞 2鼠疫桿菌 3病毒 4無(wú) 原核 真核 5研究技術(shù) 6細(xì)胞微生物學(xué) 7齊民要術(shù) 8巴
19、斯德 柯赫 巴斯德 柯赫9消毒滅菌分離培養(yǎng)10模式微生物 特殊微生物 醫(yī)用微生物 11第三大產(chǎn)業(yè)擇題 1 C 2 D 3 C 4 D 5 A 6 D 7 C 8 B
20、60; 9 A 10 B是非題對(duì)錯(cuò)錯(cuò)對(duì)對(duì) 錯(cuò)對(duì)對(duì)對(duì)錯(cuò) 錯(cuò)對(duì)問(wèn)答題1微生物與人類(lèi)關(guān)系的重要性,可以從它們?cè)诮o人類(lèi)帶來(lái)巨大利益的同時(shí)也可能帶來(lái)極大的危害兩方面進(jìn)行分析。能夠例舉:面包、奶酪、啤酒、抗生素、疫苗、維生素及酶等重要產(chǎn)品的生產(chǎn);微生物使得地球上的物質(zhì)進(jìn)行循環(huán),是人類(lèi)生存環(huán)境中必不可少的成員;過(guò)去瘟疫的流行,現(xiàn)在一些病原體正在全球蔓延,許多已被征服的傳染病也有“卷土重來(lái)”之勢(shì);食品的腐敗等等具體事例說(shuō)明。2這是由于巴斯德和柯赫為微生物學(xué)的建立和發(fā)展做出了卓越的貢獻(xiàn),使微生物學(xué)作為一門(mén)獨(dú)立 的學(xué)科開(kāi)始形成。巴
21、斯德徹底否定了“自然發(fā)生”學(xué)說(shuō);發(fā)現(xiàn)將病原菌減毒可誘發(fā)免疫性,首次制成狂犬疫苗,進(jìn)行預(yù)防接種;證實(shí)發(fā)酵是由微生物引起的;創(chuàng)立巴斯德消毒法等。柯赫對(duì)病原細(xì)菌的研究做出了突出的成就:證實(shí)了炭疽病菌是炭疽病的病原菌,發(fā)現(xiàn)了肺結(jié)核病的病原菌,提出了證明某種微生物是否為某種疾病病原體的基本原則柯赫原則,創(chuàng)建了分離、純化微生物的技術(shù)等。3其原因從下列幾方面分析:微生物具有其他生物不具備的生物學(xué)特性;微生物具有其他生物共有的基本生物學(xué)特性;微生物個(gè)體小、結(jié)構(gòu)簡(jiǎn)單、生長(zhǎng)周期短,易大量培養(yǎng),易變異,重復(fù)性強(qiáng)等優(yōu)勢(shì),十分易于操作。動(dòng)、植物由于結(jié)構(gòu)的復(fù)雜性及技術(shù)方法的限制而相對(duì)發(fā)展緩慢。微生物的廣泛的應(yīng)用性,能迅速
22、地符合現(xiàn)代學(xué)科、社會(huì)和經(jīng)濟(jì)發(fā)展的需求。420世紀(jì)40年代,隨著生物學(xué)的發(fā)展,許多生物學(xué)難以解決的理論和技術(shù)問(wèn)題十分突出,特別是 遺傳學(xué)上的爭(zhēng)論問(wèn)題,使得微生物這樣一種簡(jiǎn)單而又具完整生命活動(dòng)的小生物成了生物學(xué)研究的“明星”。微生物學(xué)很快與生物學(xué)主流匯合,并被推到了整個(gè)生命科學(xué)發(fā)展的前沿,獲得了迅 速的發(fā)展,為整個(gè)生命科學(xué)的發(fā)展做出了巨大的貢獻(xiàn)(可舉例說(shuō)明),在生命科學(xué)的發(fā)展中占有重要的地位。5可從以下幾方面論述微生物學(xué)的發(fā)展前量景:微生物基因組學(xué)研究將全面展開(kāi);以了解微生物之間、微生物與其他生物、微生物與環(huán)境的相互作用為研究?jī)?nèi)容的微生物生態(tài)學(xué)、環(huán)境微生物學(xué)、細(xì)胞微生物學(xué)等,將在基因組信息的基礎(chǔ)上
23、獲得長(zhǎng)足發(fā)展,為人類(lèi)的生存和健康發(fā)揮積極的作用;微生物生命現(xiàn)象的特性和共性將更加受到重視;與其他學(xué)科實(shí)現(xiàn)更廣泛的交叉,獲得新的發(fā)展;微生物產(chǎn)業(yè)將呈現(xiàn)全新的局面。培養(yǎng)物能較好地被研究、利用和重復(fù)結(jié)果。第二章微生物的純培養(yǎng)和顯微鏡技術(shù)一、術(shù)語(yǔ)或名詞1菌落(c010ny) 單個(gè)微生物細(xì)胞在適宜的固體培養(yǎng)基表面或內(nèi)部生長(zhǎng)、繁殖到定程度形成的肉眼可見(jiàn)的、有一定形態(tài)結(jié)構(gòu)的子細(xì)胞生長(zhǎng)群體。2菌苔(lawn) 固體培養(yǎng)基表面眾多菌落連成一片時(shí)所形成的微生物生長(zhǎng)群體。 3平皿(Petri dish) 由玻璃或透明塑料制成的圓形皿底和皿蓋組成
24、,皿蓋可覆蓋于皿底之 上,防止空氣中微生物的污染。其英文名稱是為紀(jì)念其發(fā)明者Richard Petri。 4純培養(yǎng)物(pureculture) 由一種微生物組成的細(xì)胞群體,通常是由一個(gè)單細(xì)胞生長(zhǎng)、繁殖所形成。 5培養(yǎng)基(culturemedium) 供微生物生長(zhǎng)、繁殖的營(yíng)養(yǎng)基質(zhì),根據(jù)其中固化劑含量的不同可分為固體、半固體、液體3種。 6無(wú)菌技術(shù)(aseptic technique) 在分離、轉(zhuǎn)接及培養(yǎng)純種微生物時(shí),防止其被環(huán)境中微生物污染或
25、其自身污染環(huán)境的技術(shù)。 7培養(yǎng)平板(cultureplate) 常簡(jiǎn)稱為平板,指固體培養(yǎng)基倒人無(wú)菌平皿,冷卻凝固后所形成的培養(yǎng)基平面。 8稀釋倒平板法(pour plate method) 將待分離的材料稀釋后與已熔化并冷卻至50左右的瓊脂培養(yǎng)基混合,搖勻后制成可能含菌的培養(yǎng)平板,保溫培養(yǎng)后分離得到的微生物菌落生長(zhǎng)在固體培養(yǎng)基表面和里面。 9涂布平板法(spread plate method) 在培養(yǎng)平板表面均勻涂布經(jīng)過(guò)稀釋的微生物懸液后,保溫培養(yǎng),在
26、固體培養(yǎng)基表面得到生長(zhǎng)分離的微生物菌落。 10平板劃線法(streakplatemethod) 用接種環(huán)在培養(yǎng)平板表面劃線接種微生物,使微生物細(xì)胞數(shù)量隨著劃線次數(shù)的增加而減少,并逐步分開(kāi)。保溫培養(yǎng)后,在固體培養(yǎng)基表面得到生長(zhǎng)分離的微生物菌落。 11稀釋搖管法(dilutionshakeculturemethod) 將待分離的材料稀釋后與已熔化并冷卻至 50C左右的瓊脂培養(yǎng)基混合,搖勻后用石蠟封蓋,保溫培養(yǎng)后分離得到的微生物菌落生長(zhǎng)在瓊脂柱中間。 12單
27、細(xì)胞分離法(singlecellpickupmethod) 采用顯微操作技術(shù)直接挑取微生物的單細(xì)胞(孢子),培養(yǎng)后獲得純培養(yǎng)物。 13富集培養(yǎng)(enrichmentculture) 利用不同微生物間生命活動(dòng)特點(diǎn)的不同,制定特定的環(huán)境條件,使僅適應(yīng)于該條件的微生物旺盛生長(zhǎng),從而使其在群落中的數(shù)量大大增加,從自然界中分離到所需的特定微生物。 14二元培養(yǎng)物(twocomponentculture) 由兩種具有特定關(guān)系(例如寄生或捕食)的微生 物組成的混合培養(yǎng)物。
28、60; 15原子力顯微鏡(atomicforcemicroscope) 掃描探針顯微鏡的一種,利用細(xì)小的探針對(duì)樣品表面進(jìn)行恒定高度的掃描,同時(shí)通過(guò)一個(gè)激光裝置來(lái)監(jiān)測(cè)探針隨樣品表面的升降變化來(lái)獲取樣品表面形貌的信息。 16明視野顯微鏡(brightfield microscope) 這種顯微鏡的照明方式為透射照明,即光線直接進(jìn)入視野,在一個(gè)相對(duì)明亮的背景中形成一個(gè)暗的物像。 17聚焦掃描激光顯微鏡(confocal scanning laser microscope,CSLM)
29、 這種顯微鏡采用激光作為光源,每次僅對(duì)一個(gè)點(diǎn)進(jìn)行照射,從而大大減少樣品其他部分發(fā)出的雜散光的干擾。觀察時(shí)通過(guò)激光器或載物臺(tái)掃描,計(jì)算機(jī)處理,最終獲得反差鮮明、高分辨率的三維立體數(shù)字圖像。 18熒光顯微鏡(fluorescence microscope) 這種顯微鏡用紫外線或藍(lán)紫光照射經(jīng)過(guò)熒光染料染色的樣品,然后觀察激發(fā)出的熒光所形成的物像。19數(shù)值孔徑(numerical aperture) 決定顯微鏡物鏡分辨率性能物理指標(biāo),取決于物鏡的鏡口角和玻片與鏡頭間介質(zhì)的折射率。20相差顯微鏡(phasecontrast microscope
30、) 這種光學(xué)顯微鏡通過(guò)特殊的裝置把樣品不同部位間折射率和細(xì)胞密度的微弱差異轉(zhuǎn)變?yōu)槿搜劭梢圆煊X(jué)的明暗差,可在不染色的情況下對(duì)透明的活細(xì)胞及其內(nèi)部結(jié)構(gòu)進(jìn)行直接觀察。21分辨率(resolution) 能辨析兩點(diǎn)之間最小距離的能力,距離越小,分辨率越高。22掃描電子顯微鏡(scanning electron microscope,SEM) 這種電子顯微鏡用電子束掃描樣品表面,收集從表面發(fā)出的二次電子形成樣品的表面圖像。23掃描探針顯微鏡(scanning probe microscope) 通過(guò)在物體表面移動(dòng)一種敏銳的探針來(lái)研究表面特征的顯微鏡(如掃描
31、隧道顯微鏡)。24掃描隧道顯微鏡(scanning tunnelingmicroscope) 掃描探針顯微鏡的一種,用細(xì)小的探針在樣品表面進(jìn)行掃描,通過(guò)檢測(cè)針尖和樣品間隧道效應(yīng)電流的變化形成物像。25透射電子顯微鏡(transmissionelectronmicroscope) 這種顯微鏡用電子束透射樣品,用磁透鏡使散射的電子聚焦成像。26反差(contrast) 被觀察物區(qū)別于背景的程度。27暗視野顯微鏡(darkfield microscope) 這種顯微鏡利用特殊的聚光器進(jìn)行斜射照明,經(jīng)樣品反射或折射的光線進(jìn)入物鏡成像。28固定(fixat
32、ion) 制樣過(guò)程中使整個(gè)機(jī)體及其細(xì)胞的內(nèi)、外結(jié)構(gòu)被保存并固定在適當(dāng)位置的過(guò)程。29負(fù)染色(negative staining) 染料使背景顏色加深而樣品沒(méi)有著色的染色法。30菌絲體(mycelium) 聚成一團(tuán)的分支菌絲,見(jiàn)于真菌和某些細(xì)菌。31菌絲(hypha) 大多數(shù)霉菌和某些細(xì)菌的結(jié)構(gòu)單位,管形絲狀體。32雙球菌(diplococcus) 分裂后成對(duì)排列的球菌。33球菌(COCCUS) 細(xì)胞大致呈球狀的細(xì)菌。34螺菌(spirillum) 剛性的螺旋狀細(xì)菌。35螺旋體(spirochete)
33、 柔韌的螺旋狀細(xì)菌,具有周質(zhì)鞭毛。36桿菌(rod) 細(xì)胞呈桿狀的細(xì)菌。37柄細(xì)菌(prosthecate bacteria) 細(xì)胞上有柄、菌絲、附器等細(xì)胞質(zhì)伸出物,細(xì)胞呈桿狀或梭狀,并有特征性細(xì)柄的細(xì)菌。38霉菌(mold) 以多細(xì)胞絲狀群體形式生存的真菌。39真菌(fungi) 有線粒體,無(wú)葉綠體,沒(méi)有根、莖、葉分化,以無(wú)性和有性孢子進(jìn)行繁殖的真核微生物。40酵母菌(yeast) 單細(xì)胞真菌。41藻類(lèi)(algae) 能進(jìn)行光合作用的真核微生物。42原生動(dòng)物(prokaryote) 缺少真正細(xì)胞壁,具有運(yùn)動(dòng)能
34、力,進(jìn)行吞噬營(yíng)養(yǎng)的單細(xì)胞真核微生物。二、習(xí) 題填空題1動(dòng)植物的研究能以 體為單位進(jìn)行,而對(duì)微生物的研究一般用體。2在微生物學(xué)中,在人為規(guī)定的條件下培養(yǎng)、繁殖得到的微生物群體稱為培養(yǎng)物,其中只有 3一般情況下,培養(yǎng)微生物的器具,在使用前必須先行 ,使容器中不含 。 4用培養(yǎng)平板進(jìn)行微生物純培養(yǎng)分離的方法包括: 、 和 。
35、0; 5微生物在特定培養(yǎng)基上生長(zhǎng)形成的菌落或菌苔一般都具有穩(wěn)定的特征,可以成為對(duì)該微生物進(jìn)行 、 的重要依據(jù)。 6微生物保藏的目標(biāo)就是要使所保藏菌株在一段時(shí)間不 、不 和不 。 7一般說(shuō)來(lái),采用冷凍法時(shí),保藏溫度越 ,保藏效果越 。
36、; 8, 、 和 是影響顯微鏡觀察效果的3個(gè)重要因素。9光學(xué)顯微鏡能達(dá)到的最大有效放大倍數(shù)是 ,這時(shí)一般使用 X的目鏡,和 x的物鏡,并應(yīng)在物鏡鏡頭和玻片之間加 。10采用明視野顯微鏡觀察未經(jīng)染色的標(biāo)本(如活的細(xì)胞)時(shí), 光的 和 都沒(méi)有明顯的變化,因此,其形態(tài)和內(nèi)部結(jié)構(gòu)往往難以分辨
37、。11在 的照射下,發(fā)熒光的物體會(huì)在黑暗的背景下表現(xiàn)為光亮的有色物體,這就是熒光顯微技術(shù)的原理。12透射電子顯微鏡用電子作為 ,因此其分辨率較光學(xué)顯微鏡有很大提高,但鏡筒必須是 環(huán)境,形成的影像也只能通過(guò) 或 進(jìn)行觀察、記錄。13在顯微鏡下不同細(xì)菌的形態(tài)可以說(shuō)是千差萬(wàn)別,豐富多彩,但就單個(gè)有機(jī)體而言,其基本形態(tài)可分為 、 與
38、3種。14霉菌菌體均由分支或不分支的菌絲構(gòu)成。許多菌絲交織在一起,稱為 。在固體培養(yǎng)基上,部分菌絲伸入培養(yǎng)基內(nèi)吸收養(yǎng)料,稱為 ;另一部分則向空中生長(zhǎng),稱為 。有的氣生菌絲發(fā)育到一定階段,分化成 。15 是一類(lèi)缺少真正細(xì)胞壁,細(xì)胞通常無(wú)色,具有運(yùn)動(dòng)能力,并進(jìn)行吞噬營(yíng)養(yǎng)的單細(xì)胞真核生物。它們個(gè)體微小,大多數(shù)都需要顯微鏡才能看見(jiàn)。選擇題(4個(gè)答案選1) 1培養(yǎng)微生物的常用器具中,(
39、160; )是專(zhuān)為培養(yǎng)微生物設(shè)計(jì)的。 A平皿 B試管 C燒瓶 D燒杯 2( )可用來(lái)分離培養(yǎng)出由科學(xué)家設(shè)計(jì)的特定環(huán)境中能生長(zhǎng)的微生物,盡管我們并不知道什么微生物能在這種特定的環(huán)境中生長(zhǎng)。 A選擇平板 B富集培養(yǎng) C稀釋涂布 D單
40、細(xì)胞顯微分離 3下面哪一項(xiàng)不屬于稀釋倒平板法的缺點(diǎn)?( )A菌落有時(shí)分布不夠均勻B熱敏感菌易被燙死 C嚴(yán)格好氧菌因被固定在培養(yǎng)基中生長(zhǎng)受到影響 D環(huán)境溫度低時(shí)不易操作 4下面哪一種方法一般不被用作傳代保藏?( ) A瓊脂斜面 B半固體瓊脂柱 C培養(yǎng)平板 D搖瓶發(fā)酵 &
41、#160;5冷凍真空干燥法可以長(zhǎng)期保藏微生物的原因是微生物處于( )的環(huán)境,代謝水平大大降低。 A干燥、缺氧、寡營(yíng)養(yǎng) B低溫、干燥、缺氧 C低溫、缺氧、寡營(yíng)養(yǎng) D低溫、干燥、寡營(yíng)養(yǎng)6對(duì)光學(xué)顯微鏡觀察效果影響最大的是( )。 A目鏡 B物鏡 C聚光器 D
42、總放大倍數(shù)7暗視野顯微鏡和明視野顯微鏡的區(qū)別在于( )。A目鏡 B物鏡 C聚光器 D樣品制備8相差顯微鏡使人們能在不染色的情況下,比較清楚地觀察到在普通光學(xué)顯微鏡和暗視野顯微鏡下都看不到或看不清的活細(xì)胞及細(xì)胞內(nèi)的某些細(xì)微結(jié)構(gòu),是因?yàn)樗淖兞藰悠凡煌课婚g光的( ),使人眼可以察覺(jué)。 A波長(zhǎng) B顏色 C相位
43、60; D振幅9( )不是鑒別染色。A抗酸性染色 B革蘭氏染色 C活菌染色 D芽孢染色10細(xì)菌的下列哪項(xiàng)特性一般不用作對(duì)細(xì)菌進(jìn)行分類(lèi)、鑒定?( ) A球菌的直徑 B球菌的分裂及排列 C桿菌的直徑 D桿菌的分裂及排列是非題1為了防止雜菌,特別是空氣中的雜菌污染,試管及玻璃燒瓶都需采用適宜的塞子塞口,通常采用棉花塞,也可采用各
44、種金屬、塑料及硅膠帽,并在使用前進(jìn)行高溫干熱滅菌。2,所有的微生物都能在固體培養(yǎng)基上生長(zhǎng),因此,用固體培養(yǎng)基分離微生物的純培養(yǎng)是最重要的微生物學(xué)實(shí)驗(yàn)技術(shù)。3所有的培養(yǎng)基都是選擇性培養(yǎng)基。4直接挑取在平板上形成的單菌落就可以獲得微生物的純培養(yǎng)。5用稀釋搖管法分離獲得的微生物均為厭氧微生物。6冷凍真空干燥保藏、液氮保藏法是目前使用最普遍、最重要的微生物保藏方法,大多數(shù)專(zhuān)業(yè)的菌種保藏機(jī)構(gòu)均采用這兩種方法作為主要的微生物保存手段。7光學(xué)顯微鏡的分辨率與介質(zhì)折射率有關(guān),由于香柏油的介質(zhì)折射率(約15)高于空氣(10), 因此,使用油鏡的觀察效果好于高倍鏡,目前科學(xué)家正在尋找折射率比香柏油更高
45、的介質(zhì)以進(jìn)一步改善光學(xué)顯微鏡的觀察效果。8與其他電子顯微鏡相比,掃描隧道顯微鏡在技術(shù)上的最大突破是能對(duì)活樣品進(jìn)行觀察。9與光學(xué)顯微鏡相比,電子顯微鏡的分辨率雖然有很大的提高,但卻無(wú)法拍攝彩色照片。10和動(dòng)植物一樣,細(xì)菌細(xì)胞也會(huì)經(jīng)歷由小長(zhǎng)大的過(guò)程,因此,在相同情況下應(yīng)選擇成熟的細(xì)菌而非幼齡細(xì)菌進(jìn)行顯微鏡觀察,這樣可以看得更清楚。11霉菌、酵母菌均是沒(méi)有分類(lèi)學(xué)意義的普通名稱。問(wèn)答題1一般說(shuō)來(lái),嚴(yán)格的無(wú)菌操作是一切微生物工作的基本要求,但在分離與培養(yǎng)極端嗜鹽菌時(shí)常在沒(méi)有點(diǎn)酒精燈的普通實(shí)驗(yàn)臺(tái)上傾倒培養(yǎng)平板、在日常環(huán)境中直接打開(kāi)皿蓋觀察和挑取菌落,而其研究結(jié)果并沒(méi)有因此受到影響,你知道這是為什么嗎?2如
46、果希望從環(huán)境中分離得到厭氧固氮菌,你該如何設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)?3為什么光學(xué)顯微鏡的目鏡通常都是15X?是否可以采用更大放大倍率的目鏡(如30x)來(lái)進(jìn) 一步提高顯微鏡的總放大倍數(shù)?4為什么透射電鏡和掃描電鏡對(duì)樣品厚度與大小的要求有如此大的差異?能否用掃描電鏡來(lái)觀察樣品的內(nèi)部結(jié)構(gòu),而用透射電鏡來(lái)觀察樣品的表面結(jié)構(gòu)? 5試論電子顯微鏡在進(jìn)行生物樣品制備與觀察時(shí)應(yīng)注意的問(wèn)題。6對(duì)細(xì)菌的細(xì)胞形態(tài)進(jìn)行觀察和描述時(shí)應(yīng)注意哪些方面?你是否能很快地在顯微鏡下區(qū)分同為單細(xì)胞的細(xì)菌、酵母菌和原生動(dòng)物?三、習(xí)題解答填空題 1個(gè) 群 2
47、純 3。滅菌 任何生物 4稀釋倒平板法 涂布平板法 平板劃線法 5分類(lèi) 鑒定 6死亡 污染 變異 7低(高) 好(差) 8放大 反差 分辨率 91 0001 500x 10或15 90或100 香柏油
48、160; 10波長(zhǎng) 振幅 11紫外線 12光源 真空 熒光屏 照片 13球狀 桿狀 螺旋狀 14菌絲體 營(yíng)養(yǎng)菌絲 氣生菌絲 繁殖菌絲 15原生動(dòng)物選擇題 1 A 2 B &
49、#160; 3 A 4 D 5 B 6 B 7 C 8 D 9 C 10 D是非題 錯(cuò)錯(cuò)對(duì)錯(cuò)錯(cuò) 對(duì)錯(cuò)對(duì)對(duì)錯(cuò) 對(duì)問(wèn)答題 1培養(yǎng)極端嗜鹽菌的培養(yǎng)平板需要添加很高濃度的氯化鈉(25),實(shí)驗(yàn)室環(huán)境中的一
50、般微生物都不能在這種選擇培養(yǎng)基上生長(zhǎng),因此在實(shí)驗(yàn)過(guò)程中即使不采取無(wú)菌操作技術(shù),實(shí)驗(yàn)結(jié)果仍不會(huì)受到影響。 2(1)根據(jù)選擇分離的原理設(shè)計(jì)不含氮的培養(yǎng)基,在這種培養(yǎng)基上生長(zhǎng)的細(xì)菌,其氮素應(yīng)來(lái)自固氮作用。(2)將環(huán)境樣品(例如土樣)稀釋涂布到選擇平板上,放置于厭氧罐中。對(duì)厭氧罐采用物理、化學(xué)方法除去氧氣,保留氮?dú)?。培養(yǎng)后在乎板上生長(zhǎng)出來(lái)的細(xì)菌應(yīng)是厭氧固氮菌或兼性厭氧固氮菌。(3)挑取一定數(shù)量的菌落,對(duì)應(yīng)點(diǎn)種到兩塊缺氮的選擇平板上,分別放置于厭氧罐內(nèi)、外保溫培養(yǎng)。在厭氧罐內(nèi)外均能生長(zhǎng)的為兼性厭氧固氮菌,而在厭氧罐外的平板上不生長(zhǎng),在厭氧罐內(nèi)的平板上生長(zhǎng)的即為可能的厭
51、氧固氮菌。(4)對(duì)分離得到的厭氧固氮菌菌落樣品進(jìn)行系列稀釋?zhuān)坎加谙鄳?yīng)的選擇平板,重復(fù)上述步驟直到獲得厭氧固氮菌的純培養(yǎng)。3光學(xué)顯微鏡的分辨率受到光源波長(zhǎng)及物鏡性能的限制,在使用最短波長(zhǎng)的可見(jiàn)光(450nnl)作為光源時(shí)在油鏡下可以達(dá)到的最大分辨率為018 m。由于肉眼的正常分辨能力一般為 025mm左右,因此光學(xué)顯微鏡有效的最高總放大倍數(shù)只能達(dá)到1 0001 500倍。油鏡的放大倍數(shù)是100x,因此顯微鏡配置的目鏡通常都是15 x,選用更大放大倍數(shù)的目鏡(如30 x)進(jìn)一步提高顯微鏡的放大能力對(duì)觀察效果的改善并無(wú)幫助。
52、4(1)透射電子顯微鏡的成像原理類(lèi)似于普通光學(xué)顯微鏡,作為光源的電子束在成像時(shí)要穿透樣品。由于電子束的穿透力有限,因此在進(jìn)行透射電鏡觀察時(shí)要求樣品一定要薄。而掃描電鏡的成像原理類(lèi)似于電視或電傳真照片,圖像是通過(guò)收集樣品表面被激發(fā)的二次電子形成的,因此對(duì)樣品的厚度并無(wú)特別的要求。(2)掃描電鏡一般被用于觀察樣品的表面結(jié)構(gòu),但通過(guò)樣品制備過(guò)程中的冰凍蝕刻技術(shù),用掃描電鏡也可觀察到樣品的內(nèi)部結(jié)構(gòu),獲得立體的圖像。(3)透射電鏡一般通過(guò)超薄切片技術(shù)觀察樣品的內(nèi)部結(jié)構(gòu),但通過(guò)樣品制備過(guò)程中的復(fù)型技術(shù),用透射電鏡也可對(duì)樣品的表面結(jié)構(gòu)進(jìn)行觀察。5(1)電子束的穿透能力:電子束的穿透能力是十分有限的,超薄切片
53、是基本的透射電鏡實(shí)驗(yàn)技術(shù)。相比之下,掃描電鏡對(duì)樣品的大小和厚度沒(méi)有嚴(yán)格的要求。(2)生物組織的特點(diǎn):生物組織的主要成分之一是水,若生物樣品不經(jīng)處理直接放進(jìn)電鏡,鏡筒中的高真空必然會(huì)使樣品發(fā)生嚴(yán)重的脫水現(xiàn)象,失去樣品原有的空間構(gòu)型,所以一般都不能用電鏡進(jìn)行生物樣品的活體觀察。而且,由于生物樣品很容易遭到破壞,在對(duì)樣品進(jìn)行固定、干燥、染色及其他一些處理過(guò)程中,也必須隨時(shí)注意使樣品盡量保持生活狀態(tài)下的精細(xì)結(jié)構(gòu),而不嚴(yán)重失真。另外,在掃描電鏡的使用中,除要求樣品干燥外,還需要樣品具一定的導(dǎo)電能力,以減少樣品表面電荷的堆積并得到良好的二次電子信號(hào)。而生物樣品一般都是不導(dǎo)電的,所以在制備掃描電鏡生物樣品時(shí)
54、,一般需在其表面鍍上一層金屬薄膜。(3)增加樣品的反差:顯微觀察時(shí),只有樣品具有一定的反差,才能得到清晰的圖像。光學(xué)顯微鏡可以通過(guò)各種染色技術(shù)來(lái)增加樣品的反差,并得到彩色的樣品圖像。而在電鏡的使用中,彩色染料是不采用的,因?yàn)閮煞N不同的顏色在電鏡中是不能區(qū)別的。電鏡中生物樣品不同結(jié)構(gòu)之間反差的取得一般是用重金屬鹽染色或噴鍍,凡是嗜金屬的結(jié)構(gòu),對(duì)電子的散射與吸收的能力增強(qiáng),易于形成明暗清晰的電子圖像。而且,由于電子圖像是靠不同電子密度形成的亮度差異而構(gòu)成,所以,電鏡得到的電視或照相圖像都是黑白的。6(1)首先應(yīng)使用稀釋涂布等方法對(duì)待檢菌株的純度、群落形態(tài)、生理特性等進(jìn)行檢查、確認(rèn)。(2)選用正常的
55、新鮮培養(yǎng)基和新鮮培養(yǎng)物進(jìn)行培養(yǎng)和觀察,避免培養(yǎng)過(guò)程中一些物理、化學(xué)條件的改變或培養(yǎng)時(shí)間過(guò)長(zhǎng)等因素對(duì)細(xì)胞形態(tài)的影響。(3)報(bào)告細(xì)胞大小時(shí)應(yīng)選用多個(gè)細(xì)胞檢測(cè)的平均數(shù),并記錄所用的實(shí)驗(yàn)方法,包括培養(yǎng)條件、培養(yǎng)時(shí)間、樣品制備方法和染色方法等。(4)可從大小和形態(tài)上對(duì)細(xì)菌、酵母菌和原生動(dòng)物進(jìn)行區(qū)分。酵母菌、原生動(dòng)物個(gè)體較大,一般可用低倍鏡觀察,酵母菌細(xì)胞一般呈卵圓形、圓形、圓柱形或檸檬形,不具運(yùn)動(dòng)性,原生動(dòng)物細(xì)胞形態(tài)多變,能夠運(yùn)動(dòng)。相比較而言,細(xì)菌細(xì)胞一般較小,需用高倍鏡或油鏡才能看清。 附:顯微鏡種類(lèi)比較顯微鏡類(lèi)型基本原理及特點(diǎn)應(yīng) 用光學(xué)顯微鏡明視野顯微鏡
56、光線透射照明,物像處于亮背景中。為光學(xué)顯微鏡的最基本配置,價(jià)格便宜、容易使用各種情況下染色樣品或活細(xì)胞個(gè)體形態(tài)的觀察暗視野顯微鏡 通過(guò)特殊的聚光器實(shí)現(xiàn)斜射照明,亮物像形成于暗背景中明視野顯微鏡下不易看清的活細(xì)胞的觀察;不易被染色或易被染色過(guò)程破壞的細(xì)胞的觀察(例如對(duì)梅毒密螺旋體的檢測(cè));觀察活細(xì)胞的運(yùn)動(dòng)性相差顯微鏡通過(guò)特殊的聚光器和物鏡提高樣品不同部位間的反差(明暗差異) 活細(xì)胞及其內(nèi)部結(jié)構(gòu)的觀察熒光顯微鏡經(jīng)熒光染料染色或熒光抗體處理的樣品在紫外線照射下激發(fā)出各種波長(zhǎng)的可見(jiàn)光,在黑暗的背景中形成明亮的彩色物像環(huán)境微生物的直接觀察;病灶或醫(yī)學(xué)樣品中特定病原微生物的直接檢測(cè)(使
57、用特定的熒光抗體)共聚焦顯微鏡激光作為光源,每次照明樣品的一個(gè)點(diǎn),連續(xù)掃描后經(jīng)計(jì)算機(jī)處理獲得樣品的二維或三維圖像。顯微鏡價(jià)格昂貴 對(duì)完整細(xì)胞的細(xì)微立體結(jié)構(gòu)進(jìn)行觀察和分析電子顯微鏡透射電鏡用電子束作為“光源”聚焦成像,分辨率較光學(xué)顯微鏡大大提高。儀器龐大、昂貴、對(duì)工作環(huán)境和操作技術(shù)有較高要求 對(duì)病毒顆?;虺∑幚砗髮?duì)細(xì)胞的內(nèi)部結(jié)構(gòu)進(jìn)行觀察掃描電鏡電子束在樣品表面掃描,收集形成的二次電子形成物像。分辨率遠(yuǎn)高于光學(xué)顯微鏡。儀器龐大、昂貴、對(duì)工作環(huán)境和操作技術(shù)有較高要求一般用于觀察樣品的表面立體結(jié)構(gòu)探針掃描顯微鏡隧道掃描顯微鏡用細(xì)小的探針在樣品表面進(jìn)行掃描,通過(guò)檢測(cè)針尖和樣品間隧
58、道效應(yīng)電流的變化形成物像 與電子顯微鏡相比,這類(lèi)顯微鏡能提供原子力顯微鏡利用細(xì)小的探針對(duì)樣品表面進(jìn)行恒定高度的掃描,同時(shí)通過(guò)一個(gè)激光裝置來(lái)監(jiān)測(cè)探針隨樣品表面的升降變化來(lái)獲取樣品表面形貌的信息更高的分辨率,可在生理狀態(tài)下對(duì)生物大分子或細(xì)胞結(jié)構(gòu)進(jìn)行觀察。同時(shí)儀器體積較小,價(jià)格也相對(duì)便宜 項(xiàng) 目 形 態(tài) 構(gòu) 造 數(shù) 量 功 能 內(nèi)質(zhì)網(wǎng)囊腔,細(xì)管形有膜。分兩種:糙面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)的膜上有核糖體粒,光面內(nèi)質(zhì)
59、網(wǎng)的膜上無(wú)核糖體粒 數(shù)量少 糙面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)合成、運(yùn)送蛋白質(zhì),光面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)合成磷脂 核糖體小顆粒狀 無(wú)膜。表層為蛋白質(zhì),內(nèi)芯為RNA數(shù)量極多,變化大合成蛋白質(zhì) 高爾基體扁平膜囊和小囊泡有膜。由數(shù)個(gè)扁平膜囊和大小不等的囊泡組成 數(shù)量少濃縮蛋白質(zhì),合成糖蛋白和脂蛋白,協(xié)調(diào)細(xì)胞內(nèi)環(huán)境 溶酶體 球形小·囊泡有膜。小囊泡內(nèi)含數(shù)十種酸性水解酶數(shù)量較多,但變化大 執(zhí)行細(xì)胞內(nèi)的消化功能 微體 球形小囊泡有膜。小囊泡內(nèi)含氧化酶和過(guò)氧化氫酶等數(shù)量較多,但變化大 對(duì)脂肪酸進(jìn)行氧化 線粒
60、體 桿菌狀或囊狀有內(nèi)外兩層膜。內(nèi)膜可形成嵴,其上有大量的基粒(ATP酶復(fù)合體)?;|(zhì)內(nèi)含TCA酶系、70S核糖體和雙鏈環(huán)狀DNA 數(shù)量多,但變化大 對(duì)底物進(jìn)行氧化磷酸化以產(chǎn)生ATP 葉綠體 扁球狀或扁橢圓狀由內(nèi)、外兩層膜以及類(lèi)囊體和基質(zhì)構(gòu)成?;|(zhì)內(nèi)含70 S核糖體和雙鏈環(huán)狀DNA等。類(lèi)囊體數(shù)量多,常疊成基粒僅存在于光合生物中。不同細(xì)胞中數(shù)量變化很大利用CO:和H:O進(jìn)行光合作用,以合成葡萄糖和釋放氧第三章微生物細(xì)胞的結(jié)構(gòu)與功能一、術(shù)語(yǔ)或名詞1原核生物(proksryotes) 一大類(lèi)細(xì)胞微小、只有稱作核區(qū)(無(wú)細(xì)胞膜包裹的裸露DNA)
61、的原核單細(xì)胞生物。所有原核生物都是微生物,包括真細(xì)菌和古生菌兩大類(lèi)群。原核生物與真核生物的主要區(qū)別是:基因組由無(wú)核膜包裹的雙鏈DNA環(huán)組成。缺少單位膜分隔而成的細(xì)胞器。核糖體為70S型。2細(xì)菌細(xì)胞壁(ceUWaU ofbacteris) 位于細(xì)菌細(xì)胞最外面的一層厚實(shí)、堅(jiān)韌的外被,主要由肽聚糖組成,有固定細(xì)胞外形和保護(hù)細(xì)胞免受損傷等多種功能。革蘭氏陽(yáng)性細(xì)菌細(xì)胞壁的特點(diǎn)是厚度大(2080rim)和化學(xué)組分簡(jiǎn)單,一般只含90肽聚糖和10磷壁酸。革蘭氏陰性細(xì)菌的細(xì)胞壁由外膜(含脂多糖、磷脂和外膜蛋白)和一薄層肽聚糖(23am)組成。3肽聚糖(peptidoglycan) 真細(xì)菌
62、細(xì)胞壁的特有成分,由無(wú)數(shù)肽聚糖單體以網(wǎng)狀形式交聯(lián)而成。肽聚糖單體由肽與聚糖兩部分構(gòu)成,其中的肽由四肽尾和肽橋構(gòu)成,聚糖則由N乙酰葡糖胺和V乙酰胞壁酸以"1,4糖苷鍵相互間隔交聯(lián)而成,呈長(zhǎng)鏈骨架狀。C細(xì)菌的四肽尾一般由LAla、DGlu、LLys和DAla 4個(gè)氨基酸構(gòu)成,肽橋則由5個(gè)Gly殘基構(gòu)成;C細(xì)菌的四肽尾一般由LAla、DGlu、mDAP和DAla構(gòu)成,且無(wú)肽橋。4磷壁酸(teichoicacid) G細(xì)菌細(xì)胞壁上的一種酸性多糖,主要成分為甘油磷酸或核糖醇磷酸??煞直诹妆谒岷湍ち妆谒醿煞N,前者是與肽聚糖分子間進(jìn)行共價(jià)結(jié)合的磷壁酸,后者則是跨越肽聚糖層并與細(xì)胞膜相交
63、聯(lián)的磷壁酸。5外膜(outer membrane) 位于G細(xì)菌細(xì)胞壁最外層的一層由脂多糖(LPS)、磷脂、脂蛋白和其他蛋白組成的厚膜。6脂多糖(1ipopolysaccharide,LPS) 位于C細(xì)菌細(xì)胞壁最外層的一層較厚(810nm)的類(lèi)脂多糖類(lèi)物質(zhì),由類(lèi)脂A、核心多糖和O特異側(cè)鏈3部分構(gòu)成,是C細(xì)菌致病物質(zhì)內(nèi)毒素的成分。7外膜蛋白(outer membrane protein)嵌合在C細(xì)菌細(xì)胞壁外膜上的多種蛋白質(zhì)成分,如脂蛋白和孔蛋白等。8周質(zhì)空間(periplasmicspace) 一般指位于C細(xì)菌細(xì)胞壁外膜與細(xì)胞膜之間的狹窄空間,呈膠狀,內(nèi)含各種周
64、質(zhì)蛋白,包括各種酶類(lèi)和受體蛋白等。9假肽聚糖(pseudopeptidoglycan) 甲烷桿菌屬(Methanobacterium)等部分古生菌細(xì)胞壁的主要成分。其多糖骨架由N乙酰葡糖胺和N乙酰塔羅糖胺糖醛酸以"1,3糖苷鍵交替連接而成,連在后一氨基糖上的肽尾由LGlu、LAla和LLys 3個(gè)L型氨基酸組成,肽橋則由LGin一個(gè)氨基酸組成。10缺壁細(xì)菌(cellwalldeficientbacteria) 細(xì)胞壁缺乏或缺損的各種細(xì)菌的統(tǒng)稱,包括支原體、L型細(xì)菌、原生質(zhì)體和球狀體等。11L型細(xì)菌(1 form ofbacteria) 指在實(shí)驗(yàn)室或
65、宿主體內(nèi)通過(guò)自發(fā)突變而形成的遺傳性穩(wěn)定的細(xì)胞壁缺陷菌株。因最初發(fā)現(xiàn)的念珠狀鏈桿菌(Streptobacillus monil扣rmis)是在英國(guó)Lister研究所發(fā)現(xiàn),故稱L型細(xì)菌。12原生質(zhì)體(protoplast) 在人為條件下,用溶菌酶除盡細(xì)菌等微生物原有細(xì)胞壁或用青霉素抑制新生細(xì)胞壁合成后,所得到的僅有一層細(xì)胞膜包裹著的圓球狀細(xì)胞,一般由C細(xì)菌形成。原生質(zhì)體對(duì)滲透壓敏感,無(wú)繁殖能力,在合適條件下,細(xì)胞壁可再生,并恢復(fù)其繁殖能力。13球狀體(sphaeroplast) 又稱原生質(zhì)球,指還殘留有部分細(xì)胞壁的原生質(zhì)體。G細(xì)菌一般只形成球狀體。14細(xì)菌細(xì)胞質(zhì)膜(cyto
66、plasmic membrane Ofbacteria) 又稱細(xì)菌細(xì)胞膜。是緊貼在細(xì)菌細(xì)胞壁內(nèi)側(cè)、包圍著細(xì)胞質(zhì)的一層柔軟、脆弱、富有彈性的半透性薄膜,厚約?8nm,由磷脂(占20-30)和蛋白質(zhì)(占5070)組成。細(xì)胞質(zhì)膜的主要功能是選擇性的控制細(xì)胞內(nèi)外的物質(zhì)交流。15間體(mesosome) 細(xì)菌細(xì)胞中的一種由細(xì)胞質(zhì)膜內(nèi)褶而形成的囊狀構(gòu)造,其中充滿著層狀或管狀的泡囊。多見(jiàn)于G細(xì)菌。每個(gè)細(xì)胞含一至幾個(gè)。其功能與DNA的復(fù)制、分配,細(xì)胞分裂和酶的分泌有關(guān)。 16. 細(xì)菌的細(xì)胞質(zhì)(cytoplasm ofbacteria) 細(xì)菌細(xì)胞質(zhì)膜包圍的除核區(qū)以外的一切半透
67、明 膠狀、顆粒狀物質(zhì)的總稱。主要成分為顆粒狀內(nèi)含物,核糖體、酶類(lèi)、中間代謝物、質(zhì)粒、各種營(yíng)養(yǎng)牧和大分子的單體等。17細(xì)菌的內(nèi)含物(inclusionbody ofbacteria) 細(xì)胞質(zhì)內(nèi)形狀較大的顆粒和泡囊狀構(gòu)造,包括各種貯藏物、羧酶體、氣泡或磁小體等。18聚羥丁酸(poly hydroxybutyrate,PHB) 存在于某些細(xì)菌細(xì)胞質(zhì)內(nèi)的顆粒狀內(nèi)含物,由許多羥基丁酸分子聚合而成,具貯藏能量、碳源和降低細(xì)胞內(nèi)滲透壓的作用。19異染粒(metachromaticgranules) 又稱迂回體或捩轉(zhuǎn)菌素,是無(wú)機(jī)偏磷酸鹽的聚合物,具有貯藏磷元素和
68、能量的功能。在白喉棒桿菌和結(jié)核分枝桿菌中易見(jiàn)到異染粒。20羧酶體(carboxysome) 存在于一些自養(yǎng)細(xì)菌細(xì)胞內(nèi)的多角形或六角形內(nèi)含物,內(nèi)含1,5二磷酸核酮糖羧化酶,在自養(yǎng)細(xì)菌的CO2:固定中起著關(guān)鍵作用。21核區(qū)(nuclear region) 又稱核質(zhì)體,指原核生物所特有的無(wú)核膜結(jié)構(gòu)、無(wú)固定形態(tài)的原始細(xì)胞核。其成分是一個(gè)大型環(huán)狀雙鏈DNA分子,它是細(xì)菌負(fù)載遺傳信息的主要物質(zhì)基礎(chǔ)。22芽孢(endospore) 某些細(xì)菌在其生長(zhǎng)發(fā)育后期,在細(xì)胞內(nèi)形成的一個(gè)圓形或橢圓形、厚壁、含水量極低、抗逆性(抗熱、化學(xué)藥物、輻射等)極強(qiáng)的休眠體。產(chǎn)芽孢的細(xì)菌主要有芽
69、孢桿菌屬(Bacillus)和梭菌屬(Clostridium)兩屬。23滲透調(diào)節(jié)皮層膨脹學(xué)說(shuō)(osmoregulatory expanded cortex theory) 解釋芽孢耐熱機(jī)制的一個(gè)較新的學(xué)說(shuō)。它認(rèn)為芽孢的耐熱性在于芽孢衣對(duì)多價(jià)陽(yáng)離子和水分的透性很差,以及皮層的離子強(qiáng)度很高,從而使皮層產(chǎn)生極高的滲透壓去奪取芽孢核心中的水分,其結(jié)果導(dǎo)致皮層的充分膨脹,而作為芽孢的生命部分芽孢核心的細(xì)胞質(zhì)卻發(fā)生高度失水,并由此變得高度耐熱了。24伴孢晶體(parasporalcrystal) 蘇云金芽孢桿菌等少數(shù)芽孢桿菌在其形成芽孢的同時(shí),會(huì)在芽孢旁形成一顆菱形或雙錐形的堿溶性
70、蛋白晶體(6內(nèi)毒素),稱為伴孢晶體。它對(duì)約200種昆蟲(chóng)尤其是鱗翅目的幼蟲(chóng)有毒殺作用,故可制成細(xì)菌殺蟲(chóng)劑。25糖被(glycocalyx) 指包被于某些細(xì)菌細(xì)胞壁外的一層厚度不定的膠狀物質(zhì)。糖被有數(shù)種:形態(tài)固定、層次厚的為莢膜。形態(tài)固定、層次薄的為微莢膜。形態(tài)不固定、結(jié)構(gòu)松散的為黏液層。包裹在細(xì)胞群體上有一定形態(tài)的糖被稱菌膠團(tuán)。糖被的主要功能是保護(hù)菌體免受干旱損傷或被宿主免疫活性細(xì)胞吞噬。26細(xì)菌鞭毛(flagella ofbacteria) 生長(zhǎng)在某些細(xì)菌體表的長(zhǎng)絲狀、波曲、可旋轉(zhuǎn)的蛋白質(zhì)附屬物,其數(shù)目一至數(shù)十條,具有運(yùn)動(dòng)功能。鞭毛由基體、鉤形鞘和鞭毛絲3部分組成。鞭毛在細(xì)菌表面的著生方式有一端生、兩端生、周生和側(cè)生等數(shù)種,它是細(xì)菌鑒定中的重要指標(biāo)。27菌毛(fimbriae) 一種長(zhǎng)在細(xì)菌體表的纖細(xì)、中空、短直、數(shù)量較多的蛋白質(zhì)附屬物,具有使菌體附著于物體表面的功能。有菌毛者多屬C致病細(xì)菌。菌毛的功能是使細(xì)菌可牢固地黏附于寄主的呼吸道、消化道或泌尿生殖道等的黏膜細(xì)胞上,以利定植和致病。 28性毛(pili,sex pili) 又稱性菌毛。構(gòu)造和成分與菌毛相同,但比菌毛長(zhǎng)、粗。每個(gè)細(xì)菌一般僅著生一至少數(shù)幾條性毛。多見(jiàn)于G細(xì)菌的雄性菌株上,其主要功能是向雌性菌株傳遞遺傳物質(zhì)。29真核微生物(eukaryoticmicro
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