類風濕性關節(jié)炎的實驗室進展

1、 前言 1858年 英國 加羅德1940年 瓦勒 類風濕因子1941年 美國 類風濕性關節(jié)炎 中、英、美 類風濕性關節(jié)炎定義病因尚未明了以關節(jié)滑膜炎為特征慢性全身性自身免疫性疾病慢性.對稱性.多滑膜關節(jié)炎、關節(jié)外病變好發(fā)年齡為3060歲區(qū)別：風濕性關節(jié)炎 風濕熱（A組溶血性鏈球菌感染后引起的一種全身性、變態(tài)反應性、炎癥性疾?。?發(fā)病年齡多在515歲 關節(jié)炎急性期患者可伴發(fā)熱、咽痛，心慌、血沉增快及C-反應蛋白增高等表現(xiàn) 病情好轉后可恢復至正常，該病在我國關節(jié)炎患者中占的比例已顯著下降 好發(fā)于手.腕.足等小關節(jié),反復發(fā)作,呈對稱分布 早期有關節(jié)紅腫熱痛和功能障礙 晚期關節(jié)僵硬畸形,并伴有骨和骨骼

2、肌的萎縮 主要累及關節(jié)滑膜,其次為漿膜、心、肺及眼等結締組織的廣泛性炎癥性疾病 晨僵、發(fā)熱、疲乏無力、心包炎、皮下結節(jié)、胸膜炎、動脈炎、周圍神經病變等 臨床表現(xiàn)臨床表現(xiàn)實驗室常規(guī) (一) 輕度至中度貧血 白細胞數(shù)大多正常，在活動期可略有增高，偶見嗜酸性粒細胞和血小板增多 多數(shù)病例的紅細胞沉降率在活動性病變中常增高 血清鐵、鐵結合蛋白的水平常減低 實驗室常規(guī) (二) 血清白蛋白降低，球蛋白增高 免疫蛋白電泳顯示IgG、IgA及IgM增多 C反應蛋白活動期可升高 實驗室常規(guī) (三) 類風濕因子RF：診斷RA的重要輔助方法 目前臨床多限于檢測IgM-RF，目前國內應用比較廣泛的是聚苯乙烯微粒乳膠凝集

3、試驗（LAT）和羊紅細胞凝集試驗（SCAT） 類風濕因子陰性不能排除本病的可能，須結合臨床。 RF為自身抗體，可見于多種自身免疫性疾病及一些與免疫有關的慢性感染；故RF陽性，不一定就是類風濕性關節(jié)炎實驗室常規(guī) (四) 抗核抗體在類風濕性關節(jié)炎的陽性率約10%20%。 血清補體C3、C4等水平多數(shù)正?；蜉p度升高，重癥者及伴關節(jié)外病變者可下降 關節(jié)腔穿刺液：不透明草黃色滲出液，其中中性粒細胞可達1萬5萬/mm3或更高，細菌培養(yǎng)陰性。疾病活動可見白細胞漿中含有類風濕因子和IgG補體復合物形成包涵體吞噬細胞，稱類風濕細胞診斷標準 1晨僵至少1小時(6周)。 23個或3個以上關節(jié)腫(6周)。 3腕、掌指

4、關節(jié)或近端指間關節(jié)腫(6周)。 4對稱性關節(jié)腫(6周)。 5皮下結節(jié)。 6手X光片改變。 7類風濕因子陽性(滴度1:32)。 需具備4條或4條以上標準，確診為類風濕性關節(jié)炎晚期類風濕病人，因多已出現(xiàn)多關節(jié)病變及典型畸形，所以診斷多無困難在早期，僅少數(shù)關節(jié)受累時，診斷常比較困難。尤以單關節(jié)類風濕性關節(jié)炎，僅靠病史和臨床表現(xiàn)決不能確診早期診斷、早期治療是阻止RA病情 發(fā)展和減少致殘率的關鍵。 實驗室進展 （一）自身抗體的檢測 類風濕因子（RF） RA相關的自身抗體 RA特異性自身抗體 免疫球蛋白結合蛋白(BiP)為靶分子的抗體 自身抗體聯(lián)合檢測Saraux：IgM RF(ELISA)、IgG-AK

5、A、RF(乳膠凝集試驗)聯(lián)合檢測是診斷RA的最佳實驗室檢測方法，敏感性33%，特異性99% Vencovsky：抗CCP、APF、AKA、RF的個別亞型(IgM RF)等自身抗體是早期RA侵蝕性疾病診斷標志李小峰：APF、AKA、RF 3種抗體聯(lián)合檢測時，1種以上任何抗體出現(xiàn)對RA診斷敏感性69.83%，2種以上抗體同時出現(xiàn)特異性為98.19%，3種抗體同時出現(xiàn)特異性99.86%李鴻斌：APF、AKA、抗Sa抗體和抗RA33抗體4種聯(lián)合檢測實驗室進展 （二） 血管內皮生長因子(VEGF)在RA滑膜血管翳的形成過程中起關鍵作用，它直接促進滑膜組織新血管形成，增強血管通透性，不同病期RA患者血清及

6、關節(jié)滑液中VEGF水平可直接反映疾病的活動程度。 淋巴細胞活性及其信息傳遞異常與RA發(fā)生密切相關。RA患者淋巴細胞協(xié)同刺激分子異常表達，淋巴細胞的CD25，HLA-DR表達明顯增多。實驗室進展 （三）免疫球蛋白糖基化的改變 血清中IgG分子分為IgG2、IgG1和IgG0三種糖形。Watson等對風濕病患者血清中IgG分子糖鏈結構進行分析，發(fā)現(xiàn)不同類型患者糖鏈結構不同。RA患者具有顯著的去半乳糖結構，即IgG0型。實驗室進展 （四）基質金屬蛋白酶的檢測 基質金屬蛋白酶(MMPs):可導致軟骨降解，其水平與RA患者受累關節(jié)數(shù)目、X線分期嚴重程度及ESR呈正相關，而且 MMP-3不僅可反映病情活動

7、，其在血清中濃度的增高常提示已有關節(jié)軟骨破壞。實驗室進展 （五） 尿激酶型纖溶酶原激活物(uPA)及其受體： 在RA滑膜組織中的表達水平明顯高于骨關節(jié)炎OA，其中RA滑膜襯里細胞呈明顯的強陽性表達；滑膜組織中uPA與其受體的表達具有良好的協(xié)同性，其可增強滑膜細胞對軟骨的破壞。RA滑液和血漿中uPA及其受體的表達水平可作為反映患者病情活動的有效指標。相關問題及進展類風濕性關節(jié)炎是一類異質性疾病，疾病的不同亞型以及患者的病程、治療情況、臟器受累范圍和程度等類風濕性關節(jié)炎是一類異質性疾病，疾病的不同亞型以及患者的病程、治療情況、臟器受累范圍和程度等均可影響檢測結果均可影響檢測結果分子診斷學技術、功能

8、基因組學和蛋白組學研究的深入，免疫學技術水平的成熟和完善，計算機網(wǎng)絡技術分子診斷學技術、功能基因組學和蛋白組學研究的深入，免疫學技術水平的成熟和完善，計算機網(wǎng)絡技術的廣泛應用以及實驗室質量保證系統(tǒng)的全面實施的廣泛應用以及實驗室質量保證系統(tǒng)的全面實施RA相關的自身抗體 抗型膠原抗體抗鈣蛋白酶抑素(calpastain)抗體抗葡萄糖-6-磷酸異構酶(GPI)抗體抗磷脂抗體RA特異性自身抗體 抗Sa抗體抗RA33 （異質性胞核核糖核蛋白）抗體抗核周因子抗體(APF)抗角蛋白抗體(AKA)抗聚絲蛋白抗體(AFA)抗環(huán)瓜氨酸肽抗體(抗CCP抗體) 抗環(huán)瓜氨酸肽抗體(抗CCP抗體) 國內外均有報道抗CCP

9、抗體在早期RA時即可出現(xiàn)，它將成為診斷RA的標記抗體。 其敏感性為46.6%，特異性為96.6%；已建立了以人工合成CCP為抗原的ELISA檢測方法，檢測RA患者血清中抗CCP抗體。 異質性胞核核糖核蛋白（RA3336） RA33/36可以出現(xiàn)在疾病的起病階段，所以有早期診斷價值。RA33/36抗原的制備及其抗體的檢測：用Ehrlich腹水癌細胞提取的抗原檢測抗RA33/36抗體。 抗核周因子（APF） APF是1964年Nienhuis在RA血清中發(fā)現(xiàn)的一種抗人頰黏膜細胞漿內角質蛋白顆粒的抗體，熒光顯微鏡下在胞漿內呈一個或多個大小不等的圓形或橢圓形顆粒，其對RA的特異性隨血清稀釋倍數(shù)的增加而

10、增加。抗Sa抗體 從人胎盤提取Sa抗原，用免疫印跡或ELISA法檢測抗Sa抗體?？筍a抗體對RA的敏感性為43%，特異性為98%。由于該抗體在RA的早期可以測出，且其滴度隨疾病活動性消長。因此，除作為早期診斷外，還可以作為RA活動的監(jiān)測指標?？菇琴|蛋白抗體（AKA） 以Wistar大鼠的食管中段角質層為底物，用間接免疫熒光法檢測，角質層有板層狀或線狀熒光沉積為陽性。AKA對早期RA的診斷特異性為90%，敏感性為32%。抗聚絲蛋白抗體(AFA) 近來發(fā)現(xiàn)AKA 與APF的真正靶抗原是聚角蛋白微絲蛋白（filaggrin）?，F(xiàn)可用基因技術合成抗原聚角蛋白微絲蛋白，并通過免疫印跡或酶聯(lián)免疫吸附法檢測

11、AFA。證明AFA對RA診斷的敏感性為36.3%，特異性為93.4%。 定義病因尚未明了以關節(jié)滑膜炎為特征慢性全身性自身免疫性疾病慢性.對稱性.多滑膜關節(jié)炎、關節(jié)外病變好發(fā)年齡為3060歲 好發(fā)于手.腕.足等小關節(jié),反復發(fā)作,呈對稱分布 早期有關節(jié)紅腫熱痛和功能障礙 晚期關節(jié)僵硬畸形,并伴有骨和骨骼肌的萎縮 主要累及關節(jié)滑膜,其次為漿膜、心、肺及眼等結締組織的廣泛性炎癥性疾病 晨僵、發(fā)熱、疲乏無力、心包炎、皮下結節(jié)、胸膜炎、動脈炎、周圍神經病變等 臨床表現(xiàn)臨床表現(xiàn)診斷標準 1晨僵至少1小時(6周)。 23個或3個以上關節(jié)腫(6周)。 3腕、掌指關節(jié)或近端指間關節(jié)腫(6周)。 4對稱性關節(jié)腫(6周)。 5皮下結節(jié)。 6手X光片改變。 7類風濕因子陽性(滴度1:32)。 需具備4條或4條以上標準，確診為類風濕性關節(jié)炎晚期類風濕病人，因多已出現(xiàn)多關節(jié)病變及典型畸形，所以診斷多無困難在早期，僅少數(shù)關節(jié)受累時，診斷常