檢驗科生物安全培訓(xùn)材料

1、檢驗科生物安全培訓(xùn)材料一、我科根據(jù)危險度評估結(jié)果將微生物因子歸入二級生物安全水平需要進行二級生物安全水平的設(shè)施、儀器、操作和規(guī)程。實驗室操作時加防護服、生物危害標(biāo)志開放實驗臺匚此外需BSC用于防護可能生成的氣溶膠.生物安全水平對設(shè)施最低要求高壓滅菌器、生物安全柜。二、二級生物安全水平實驗室要求1人員防護1、在實驗室工作時任何時候都必須穿著工作服。2、在進行可能直接或意外接觸到血液、體液以及其他具有潛在感染性的材料或感染性動物的操作時Z3應(yīng)戴上合適的手套手套用完后應(yīng)先消毒再摘除匚隨后必須洗手。3、在處理完感染性實驗材料后以及在離開實驗室工作區(qū)域前都必須洗手.4、為了防止眼睛或面部受到潑濺物、碰撞

2、物或人工紫外線輻射的傷害必須戴安全眼鏡、面罩Z!面具或其他防護設(shè)備。5、嚴(yán)禁穿著實驗室防護服離開實驗室如去餐廳、辦公室、員工休息室和衛(wèi)生間口。6、不得在實驗室內(nèi)穿露腳趾的鞋子。7、禁止在實驗室工作區(qū)域進食、飲水、吸煙、化妝和處理隱形眼鏡.8、禁止在實驗室工作區(qū)域儲存食品和飲料.9、在實驗室內(nèi)用過的防護服不得和日常服裝放在同一柜子內(nèi)。2操作規(guī)范1、嚴(yán)禁用口吸移液管.2、嚴(yán)禁將實驗材料置于口內(nèi)。嚴(yán)禁舔標(biāo)簽。3、所有的技術(shù)操作要按盡量減少氣溶膠和微小液滴形成的方式來進行。4、應(yīng)限制使用皮下注射針頭和注射器。皮下注射針頭和注射器不能用于替代移液管或用作其他用途。5、出現(xiàn)溢出、事故以及明顯或可能暴露于感

3、染性物質(zhì)時必須向?qū)嶒炇抑鞴軋蟾鎸嶒炇覒?yīng)保存這些事件或事故的書面報告。6、必須制訂關(guān)于如何處理溢出物的書面操作程序并予以遵守執(zhí)行.7、污染的液體在排放到生活污水管道以前必須清除污染采用化學(xué)或物理學(xué)方法ZL根據(jù)所處理的微生物因子的危險度評估結(jié)果可能需要準(zhǔn)備污水處理系統(tǒng)。8、需要帶出實驗室的手寫文件必須保證在實驗室內(nèi)沒有受到污染。3基本生物安全設(shè)備1、生物安全柜在以下情況使用口處理感染性物質(zhì)如果使用密封的安全離心杯并在生物安全柜內(nèi)裝樣、取樣則這類材料可在開放實驗室離心空氣傳播感染的危險增大時進行極有可能產(chǎn)生氣溶膠的操作時包括離心、混勻、劇烈搖動、打開內(nèi)部壓力和周圍環(huán)境壓力不同的盛放有感染性物質(zhì)的容器

4、以及采集感染性組織。.3、一次性塑料接種環(huán)口也可在生物安全柜內(nèi)使用電加熱接種環(huán)以減少生成氣溶膠。4、螺口蓋試管及瓶子。5、用于清除感染性材料污染的高壓滅菌器。6、一次性巴斯德塑料移液管盡量避免使用玻璃制品。7、在投入使用前像高壓滅菌器和生物安全柜等設(shè)備必須用正確方法進行驗收。廢棄物處理廢棄物處理的首要原則是所有感染性材料必須在實驗室內(nèi)清除污染、高壓滅菌或焚燒。污染性材料和廢棄物的處理和丟棄程序?qū)Ω腥拘晕镔|(zhì)及其包裝物進行鑒別并分別進行處理相關(guān)工作要遵守國家和國際規(guī)定.廢棄物可以分成以下幾類口1、可重復(fù)或再使用或按普通“家庭"廢棄物丟棄的非污染非感染性匚廢棄物2、污染感染性銳器一皮下注射

5、用針頭、手術(shù)刀、刀子及破碎玻璃這些廢棄物應(yīng)收集在帶蓋的不易刺破的容器內(nèi)并按感染性物質(zhì)處理3、通過高壓滅菌和清洗來清除污染后重復(fù)或再使用的污染材料4、高壓滅菌后丟棄的污染材料5、直接焚燒的污染材料。銳器皮下注射針頭用過后不應(yīng)再重復(fù)使用包括不能從注射器上取下、回套針頭護套、截斷等Z應(yīng)將其完整地置于盛放銳器的一次性容器中。單獨使用或帶針頭使用的一次性注射器應(yīng)放在盛放銳器的一次性容器內(nèi)焚燒如需要可先高壓滅菌。盛放銳器的一次性容器必須是不易刺破的口而且不能將容器裝得過滿。當(dāng)達到容量的四分之三時Z3應(yīng)將其放入“感染性廢棄物”的容器中進行焚燒匸如果實驗室規(guī)程需要口可以先進行高壓滅菌處理。盛放銳器的一次性容器

6、絕對不能丟棄于垃圾場。高壓滅菌后重復(fù)使用的污染有潛在感染性材料任何高壓滅菌后重復(fù)使用的污染有潛在感染性匚材料不應(yīng)事先清洗任何必要的清洗、修復(fù)必須在高壓滅菌或消毒后進行。廢棄的污染有潛在感染性口材料除了銳器按上面的方法進行處理以外所有其他污染有潛在感染性口材料在丟棄前應(yīng)放置在防滲漏的容器如有顏色標(biāo)記的可高壓滅菌塑料袋中高壓滅菌。高壓滅菌后口物品可以放在運輸容器中運送至焚燒爐。如果可能口即使在清除污染后衛(wèi)生保健單位的廢棄物也不應(yīng)丟棄到垃圾場。如果實驗室中配有焚燒爐則可以免去高壓滅菌。污染材料應(yīng)放在指定的容器.如有顏色標(biāo)記的袋子。.內(nèi)直接運送到焚燒爐中?？芍貜?fù)使用的運輸容器應(yīng)是防滲漏的。有密閉的蓋子

7、。這些容器在送回實驗室再次使用前應(yīng)進行消毒清潔。應(yīng)在每個工作臺上放置盛放廢棄物的容器、盤子或廣口瓶最好是不易破碎的容器。如塑料制品.當(dāng)使用消毒劑時。應(yīng)使廢棄物充分接觸消毒劑。即不能有氣泡阻隔0.0.并根據(jù)所使用消毒劑的不同保持適當(dāng)接觸時間。盛放廢棄物的容器在重新使用前應(yīng)高壓滅菌并清洗.實驗室中生物安全柜的使用位置最為理想的是生物安全柜應(yīng)位于遠離人員活動、物品流動以及可能會擾亂氣流的地方。在安全柜的后方以及每一個側(cè)面要盡可能留有30cm的空間以利于對安全柜的維護.操作者手和雙臂伸入到生物安全柜中等待大約一分鐘以使安全柜調(diào)整完畢并且讓里面的空氣“掃過”手和雙臂的表面以后才可以開始對物品進行處理。要

8、在開始實驗之前將所有必需的物品置于安全柜內(nèi)以盡可能減少雙臂進岀前面開口的次數(shù)。物品放置II級生物安全柜前面的進氣格柵不能被紙、儀器設(shè)備或其他物品阻擋放入安全柜內(nèi)的物品應(yīng)采用70%酒精來清除表面污染。可以在消毒劑浸濕的毛巾上進行實驗以吸收可能濺出的液滴。所有物品應(yīng)盡可能地放在工作臺后部靠近工作臺后緣的位置并使其在操作中不會阻擋后部格柵?？僧a(chǎn)生氣溶膠的設(shè)備匚例如混勻器、離心機等應(yīng)靠近安全柜的后部放置。像有生物危害性的廢棄物袋、盛放廢棄吸管的盤子以及吸濾瓶等體積較大的物品應(yīng)該放在安全柜內(nèi)的某一側(cè).在工作臺面上的實驗操作應(yīng)該按照從清潔區(qū)到污染區(qū)的方向進行.耐高壓滅菌的生物危害性廢棄物袋以及吸管盛放盤不

9、應(yīng)放在安全柜的外面否則在使用這些物品時雙臂就必須頻繁進出安全柜這樣會干擾安全柜空氣屏障的完整性從而影響對人員和物品的防護.操作和維護大多數(shù)生物安全柜的設(shè)計允許整天24h工作。研究人員還發(fā)現(xiàn)連續(xù)工作有助于控制實驗室中灰塵和顆粒的水平。A1型及JRA2型生物安全柜在不使用時是可以關(guān)閉的其他如一級B1型和JRB2型生物安全柜是通過硬管安裝的就必須始終保持空氣流動以維持房間空氣的平衡。在開始工作以前以及完成工作以后應(yīng)至少讓安全柜工作5min來完成“凈化”的過程。亦即應(yīng)留岀將污染的空氣排出安全柜的時間。紫外燈生物安全柜中不需要紫外燈。如果使用紫外燈的話應(yīng)該每周進行清潔以除去可能影響其殺菌效果的灰塵和污垢

10、。明火在生物安全柜內(nèi)所形成的幾乎沒有微生物的環(huán)境中應(yīng)避免使用明火。在對接種環(huán)進行滅菌時可以使用微型燃燒器或電爐而不應(yīng)使用明火.溢出一旦在生物安全柜中發(fā)生有生物學(xué)危害的物品溢出時應(yīng)在安全柜處于工作狀態(tài)下立即進行清理。要使用有效的消毒劑并在處理過程中盡可能減少氣溶膠的生成所有接觸溢岀物品的材料都要進行消毒和或高壓滅菌。清潔和消毒在實驗結(jié)束時匚包括儀器設(shè)備在內(nèi)的生物安全柜里的所有物品都應(yīng)清除表面污染并移出安全柜在每次使用前后匚要清除生物安全柜內(nèi)表面的污染。工作臺面和內(nèi)壁要用消毒劑進行擦拭口所用的消毒劑要能夠殺死安全柜里可能發(fā)現(xiàn)的任何微生物。在每天實驗結(jié)束時應(yīng)擦拭生物安全柜的工作臺面、四周以及玻璃的內(nèi)

11、外側(cè)等部位來清除表面的污染。在對目標(biāo)生物體有效時可以采用漂白劑溶液或70%酒精來消毒。在使用如漂白劑等腐蝕性消毒劑后還必須用無菌水再次進行擦拭推薦將安全柜一直維持運行狀態(tài)。如果要關(guān)閉的話ZJ則應(yīng)在關(guān)機前運行5min以凈化內(nèi)部的氣體.清除污染生物安全柜在移動以及更換過濾器之前必須清除污染最常用的方法是采用甲醛蒸氣熏蒸。應(yīng)該由有資質(zhì)的專業(yè)人員來清除生物安全柜的污染。個體防護裝備在使用生物安全柜時應(yīng)穿著個體防護服。手套應(yīng)套在隔離衣的外面Z1可以戴加有松緊帶的套袖來保護研究人員的手腕。有些操作可能還需要戴口罩和安全眼鏡。實驗室技術(shù)實驗室中標(biāo)本的安全操作標(biāo)本容器標(biāo)本容器可以是玻璃的但謚好使用塑料制品。標(biāo)

12、本容器應(yīng)當(dāng)堅固正確地用蓋子或塞子蓋好后應(yīng)無泄漏。在容器外部不能有殘留物容器上應(yīng)當(dāng)正確地粘貼標(biāo)簽以便于識別。標(biāo)本的要求或說明書不能夠卷在容器外面而是要分開放置二最好放置在防水的袋子里。標(biāo)本在設(shè)施內(nèi)的傳遞為了避免意外泄漏或溢出應(yīng)當(dāng)使用盒子等二級容器并將其固定在架子上使裝有標(biāo)本的容器保持直立。二級容器可以是金屬或塑料制品應(yīng)該可以耐高壓滅菌或耐受化學(xué)消毒劑的作用.密封口最好有一個墊圈要定期清除污染。標(biāo)本接收需要接收大量標(biāo)本的實驗室應(yīng)當(dāng)安排專門的房間或空間。打開包裝接收和打開標(biāo)本的人員應(yīng)當(dāng)了解標(biāo)本對身體健康的潛在危害并接受過如何采用標(biāo)準(zhǔn)防護方法的培訓(xùn)尤其是處理破碎或泄漏的容器時更應(yīng)如此。標(biāo)本的內(nèi)層容器要

13、在生物安全柜內(nèi)打開并準(zhǔn)備好消毒劑.血清的分離1、只有經(jīng)過嚴(yán)格培訓(xùn)的人員才能進行這項工作。2、操作時應(yīng)戴手套以及眼睛和黏膜的保護裝置。3、規(guī)范的實驗操作技術(shù)可以避免或盡量減少噴濺和氣溶膠的產(chǎn)生。血液和血清應(yīng)當(dāng)小心吸取Z!而不能傾倒.嚴(yán)禁用口吸液。4、移液管使用后應(yīng)完全浸入適當(dāng)?shù)南疽褐?。移液管?yīng)在消毒液中浸泡適當(dāng)?shù)臅r間然后再丟棄或滅菌清洗后重復(fù)使用.5、帶有血凝塊等的廢棄標(biāo)本管在加蓋后應(yīng)當(dāng)放在適當(dāng)?shù)姆缆┤萜鲀?nèi)高壓滅菌和匚或焚燒。6、應(yīng)備有適當(dāng)?shù)南緞﹣砬逑磭姙R和溢出標(biāo)本離心機的使用1、離心機放置的高度應(yīng)當(dāng)使小個子工作人員也能夠看到離心機內(nèi)部以正確放置十字軸和離心桶.2、離心管和盛放離心標(biāo)本的容器

14、應(yīng)當(dāng)由厚壁玻璃制成或最好為塑料制品并且在使用前應(yīng)檢查是否破損。3、用于離心的試管和標(biāo)本容器應(yīng)當(dāng)始終牢固蓋緊Z3最好使用螺旋蓋口。4、離心桶的裝載、平衡、密封和打開必須在生物安全柜內(nèi)進行。5、離心桶和十字軸應(yīng)按重量配對并在裝載離心管后正確平衡。6、操作指南中應(yīng)給岀液面距離心管管口需要留岀的空間大小。7、空離心桶應(yīng)當(dāng)用蒸館水或乙醇異丙醇Z170口來平衡。鹽溶液或次氯酸鹽溶液對金屬具有腐蝕作用因此不能使用。冰箱與冰柜的維護和使用1、冰箱、低溫冰箱和干冰柜應(yīng)當(dāng)定期除霜和清潔應(yīng)清理出所有在儲存過程中破碎的安甑和試管等物品清理時應(yīng)戴厚橡膠手套并進行面部防護清理后要對內(nèi)表面進行消毒。2、儲存在冰箱內(nèi)的所有容

15、器應(yīng)當(dāng)清楚地標(biāo)明內(nèi)裝物品的科學(xué)名稱、儲存日期和儲存者的姓名。未標(biāo)明的或廢舊物品應(yīng)當(dāng)高壓滅菌并丟棄。3、應(yīng)當(dāng)保存一份凍存物品的清單。4、除非有防爆措施口否則冰箱內(nèi)不能放置易燃溶液。冰箱門上應(yīng)注明這一點。對血液和其他體液、組織及排泄物的標(biāo)準(zhǔn)防護方法標(biāo)本的收集、標(biāo)記和運輸1、所有操作均要戴手套.2、在靜脈抽血時Z應(yīng)當(dāng)使用一次性的安全真空采血管取代傳統(tǒng)的針頭和注射器Z因為這樣可以使血液直接采集到帶塞的運輸管和或培養(yǎng)管中。用完后自動廢棄針頭。3、裝有標(biāo)本的試管應(yīng)置于適當(dāng)容器中運至實驗室。檢驗申請單應(yīng)當(dāng)分開放置在防水袋或信封內(nèi)。4、接收人員不應(yīng)打開這些袋子。打開標(biāo)本管和取樣1、應(yīng)當(dāng)在生物安全柜內(nèi)打開標(biāo)本管

16、。2、必須戴手套并建議對眼睛和黏膜進行保護護目鏡或面罩.3、在防護衣外面要再穿上塑料圍裙。4、打開標(biāo)本管時Z應(yīng)用紙或紗布抓住塞子以防止噴濺.玻璃器皿和“銳器”1、盡可能用塑料制品代替玻璃制品只能用實驗室級別硼硅酸鹽口的玻璃任何破碎或有裂痕的玻璃制品均應(yīng)丟棄.2、不能將皮下注射針作為移液管使用.用于顯微鏡觀察的蓋玻片和涂片用于顯微鏡觀察的血液、唾液和糞便標(biāo)本在固定和染色時口不必殺死涂片上的所有微生物和病毒。應(yīng)當(dāng)用鑲子拿取這些東西妥善儲存并經(jīng)清除污染和口或高壓滅菌后再丟棄。清除污染建議使用次氯酸鹽和高級別的消毒劑來清除污染一般情況可使用新鮮配制的含有效氯1g/L的次氯酸鹽溶液處理溢出的血液時口有效

17、氯濃度應(yīng)達到5g/L°戊二醛可以用于清除表面污染實驗室應(yīng)急程序刺傷、切割傷或擦傷受傷人員應(yīng)當(dāng)脫下防護服清洗雙手和受傷部位匚使用適當(dāng)?shù)钠つw消毒劑必要時進行醫(yī)學(xué)處理。要記錄受傷原因和相關(guān)的微生物Z并應(yīng)保留完整適當(dāng)?shù)尼t(yī)療記錄.潛在感染性物質(zhì)的食入應(yīng)脫下受害人的防護服并進行醫(yī)學(xué)處理。要報告食入材料的鑒定和事故發(fā)生的細節(jié)ZJ并保留應(yīng)完整適當(dāng)?shù)尼t(yī)療記錄。潛在危害性氣溶膠的釋放匚在生物安全柜以外口所有人員必須立即撤離相關(guān)區(qū)域任何暴露人員都應(yīng)接受醫(yī)學(xué)咨詢。應(yīng)當(dāng)立即通知實驗室負責(zé)人和生物安全官員。為了使氣溶膠排出和使較大的粒子沉降匚在一定時間內(nèi)Z!例如1h內(nèi)嚴(yán)禁人員入內(nèi)如果實驗室沒有中央通風(fēng)系統(tǒng)Z!則

18、應(yīng)推遲進入實驗室例如24ha.應(yīng)張貼“禁止進入”的標(biāo)志。過了相應(yīng)時間后匚在生物安全官員的指導(dǎo)下來清除污染。應(yīng)穿戴適當(dāng)?shù)姆雷o服和呼吸保護裝備.容器破碎及感染性物質(zhì)的溢出應(yīng)當(dāng)立即用布或紙巾覆蓋受感染性物質(zhì)污染或受感染性物質(zhì)溢灑的破碎物品.然后在上面倒上消毒劑匚并使其作用適當(dāng)時間。然后將布、紙巾以及破碎物品清理掉玻璃碎片應(yīng)用輾子清理然后再用消毒劑擦拭污染區(qū)域如果用簸箕清理破碎物o應(yīng)當(dāng)對他們進行高壓滅菌或放在有效的消毒液內(nèi)浸泡。用于清理的布、紙巾和抹布等應(yīng)當(dāng)放在盛放污染性廢棄物的容器內(nèi)。在所有這些操作過程中都應(yīng)戴手套。如果實驗表格或其他打E卩或手寫材料被污染。應(yīng)將這些信息復(fù)制。并將原件置于盛放污染性廢

19、棄物的容器內(nèi)。脫下受害人的防護服并進行醫(yī)學(xué)處理。未裝可封閉離心桶的離心機內(nèi)盛有潛在感染性物質(zhì)的離心管發(fā)生破裂如果機器正在運行時發(fā)生破裂或懷疑發(fā)生破裂應(yīng)關(guān)閉機器電源Z1讓機器密閉例如30minD使氣溶膠沉積。如果機器停止后發(fā)現(xiàn)破裂Z1應(yīng)立即將蓋子蓋上并密閉例如30minE。發(fā)生這兩種情況時都應(yīng)通知生物安全官員。隨后的所有操作都應(yīng)戴結(jié)實的手套如厚橡膠手套Z必要時可在外面戴適當(dāng)?shù)囊淮涡允痔?。?dāng)清理玻璃碎片時應(yīng)當(dāng)使用輾子或用輾子夾著的棉花來進行.所有破碎的離心管、玻璃碎片、離心桶、十字軸和轉(zhuǎn)子都應(yīng)放在無腐蝕性的、已知對相關(guān)微生物具有殺滅活性的消毒劑內(nèi)未破損的帶蓋離心管應(yīng)放在另一個有消毒劑的容器中匚然后

20、回收。離心機內(nèi)腔應(yīng)用適當(dāng)濃度的同種消毒劑擦拭并再次擦拭口然后用水沖洗并干燥清理時所使用的全部材料都應(yīng)按感染性廢棄物處理。在可封閉的離心桶安全杯口內(nèi)離心管發(fā)生破裂所有密封離心桶都應(yīng)在生物安全柜內(nèi)裝卸。如果懷疑在安全杯內(nèi)發(fā)生破損應(yīng)該松開安全杯蓋子并將離心桶高壓滅菌。另一種方法是安全杯可以采用化學(xué)消毒。實驗室材料的清潔氯Z）次氯酸鈉口氯屬于快速作用的氧化劑是一種可廣泛應(yīng)用的廣譜化學(xué)殺菌劑。它一般以次氯酸鈉NaOClD溶液來作為漂白劑銷售使用時可以用水稀釋成各種不同的有效氯濃度。氯Z尤其用作漂白劑時口是強堿性的能夠腐蝕金屬。有機物蛋白質(zhì)匚會顯著減弱其活性。如果在開口容器中儲藏高濃度的或使用濃度的漂白劑

21、尤其在高溫條件下會釋放氯氣而減弱其殺菌能力。要根據(jù)漂白劑工作液的初始濃度、容器的類型如有無蓋子和大小、使用的頻率和特性以及室內(nèi)條件匚來確定它們的更換頻率.一般而言對于那些需要一天多次浸泡處理含有高濃度有機物的材料的漂白劑溶液應(yīng)當(dāng)至少每天更換一次而那些使用頻率較低的漂白劑溶液口則可以維持一周時間。常規(guī)實驗室消毒劑的有效氯濃度應(yīng)為1g/L.推薦使用含有5g/L有效氯的更強作用的溶液來處理生物危害性物質(zhì)的溢出以及含有大量有機物的情況。作為家用漂白劑的次氯酸鈉溶液含有50g/L的有效氯Z因此分別需要進行1口50或1口10的稀釋來達到終濃度1g/L和5g/L工業(yè)用漂白劑的次氯酸鈉溶液含有近120g/L的有效氯口必須進行相應(yīng)的稀釋來達到上述濃度。清除局部環(huán)境的污染需要聯(lián)合應(yīng)用液體和氣體消毒劑來清除實驗室空間、用具和設(shè)備的污染。清除表面污染時可以使用次氯酸鈉DNaOCI溶液匚含有1有效氯的溶液適于普通的環(huán)境衛(wèi)生設(shè)備但是當(dāng)處理高危環(huán)境時建議使用高濃度口5g/L溶液。用于清除環(huán)境污染時含有3過氧化氫的溶液也可以作為漂白劑的代用品.可以通過加熱多聚甲醛或煮沸福爾馬林所產(chǎn)生的甲醛