滅菌與無菌制劑

1、 第三章第三章 滅菌制劑與無菌制劑滅菌制劑與無菌制劑 （注射劑、眼用制劑）（注射劑、眼用制劑）（p47） 第一節(jié)第一節(jié) 概述概述一、基本概念一、基本概念： 滅菌滅菌：采用采用物理物理或或化學(xué)方法化學(xué)方法，殺滅或除去所有殺滅或除去所有 致病和非致病微生物繁殖體和芽孢。致病和非致病微生物繁殖體和芽孢。 無菌無菌：不存在任何活的微生物的狀態(tài)。：不存在任何活的微生物的狀態(tài)。 防腐（防腐（抑抑菌菌）：抑制微生物生長與繁殖的手段。：抑制微生物生長與繁殖的手段。 消毒消毒：殺滅或除去所有：殺滅或除去所有微生物。微生物。第一節(jié)第一節(jié) 概述概述滅菌制劑：滅菌制劑： 采用某種采用某種物理物理或或化學(xué)方法化學(xué)方法，

2、或或所所有活的微生物繁殖體和芽孢的一類藥物制劑。有活的微生物繁殖體和芽孢的一類藥物制劑。無菌制劑：無菌制劑：采用采用無菌操作無菌操作技術(shù)，技術(shù)，制備的不含制備的不含任何活的任何活的微生物微生物繁殖體和芽孢的一類藥物制劑。繁殖體和芽孢的一類藥物制劑。限制活限制活菌種類和數(shù)量菌種類和數(shù)量。第一節(jié)概述第一節(jié)概述二、滅菌與無菌技術(shù)二、滅菌與無菌技術(shù) 干熱滅菌法干熱滅菌法 物理滅菌法物理滅菌法 濕熱滅菌法濕熱滅菌法 過濾滅菌法過濾滅菌法 滅菌法滅菌法 射線滅菌法射線滅菌法 化學(xué)滅菌法化學(xué)滅菌法 無菌操作法無菌操作法 蛋白質(zhì)、核酸破壞蛋白質(zhì)、核酸破壞第一節(jié)第一節(jié) 概述概述二、滅菌與無菌技術(shù)二、滅菌與無菌技

3、術(shù) （一）物理滅菌法（一）物理滅菌法 利用微生物蛋白質(zhì)、核酸遇熱、射線不利用微生物蛋白質(zhì)、核酸遇熱、射線不穩(wěn)定，采用熱、射線、濾過等穩(wěn)定，采用熱、射線、濾過等物理手段物理手段達(dá)到達(dá)到滅菌目的。滅菌目的。 （一）物理滅菌法（一）物理滅菌法 1.1.干熱滅菌法干熱滅菌法 （熱穿透力較差）（熱穿透力較差） 火火 焰焰 物品與用具物品與用具 干熱空氣干熱空氣 耐高溫玻耐高溫玻 璃與金屬制璃與金屬制 品及藥品品及藥品 熱空氣滅菌柜-烤箱控制面板 滅菌柜門 搬運(yùn)車 滅菌柜外殼 活動格車 第一節(jié)第一節(jié) 概述概述 2.2.濕熱滅菌法濕熱滅菌法 流通蒸汽滅菌流通蒸汽滅菌 消毒、不耐熱制劑消毒、不耐熱制劑 煮沸滅

4、菌煮沸滅菌 消毒消毒 低溫間歇式滅菌低溫間歇式滅菌( (巴氏巴氏) ) 對熱敏感制劑對熱敏感制劑 耐高溫高壓耐高溫高壓 影響熱壓滅菌的因素：影響熱壓滅菌的因素： 微生物的數(shù)量和種類微生物的數(shù)量和種類 芽胞芽胞 繁殖體繁殖體 衰老體衰老體 蒸氣性質(zhì)蒸氣性質(zhì) 飽和蒸氣飽和蒸氣( (濕、過濕、過) ) 除去空氣除去空氣 藥品穩(wěn)定性和滅菌時間藥品穩(wěn)定性和滅菌時間 其他其他 pHpH環(huán)境、介質(zhì)營養(yǎng)成分環(huán)境、介質(zhì)營養(yǎng)成分高壓滅高壓滅菌鍋菌鍋（一）物理滅菌法（一）物理滅菌法 3.3.射線滅菌法射線滅菌法 輻射滅菌輻射滅菌 不耐熱不耐熱 紫外線滅菌（紫外線和臭氧）：空氣滅菌紫外線滅菌（紫外線和臭氧）：空氣滅菌

5、 微波滅菌微波滅菌 不耐熱不耐熱 4.4.濾過除菌法濾過除菌法（機(jī)械除菌）（機(jī)械除菌） 0.22m0.22m或或0.3m0.3m的微孔濾膜濾器；的微孔濾膜濾器； G6G6號垂熔玻璃漏斗（芽胞號垂熔玻璃漏斗（芽胞0.5m0.5m）內(nèi)裝微孔濾膜 進(jìn)液口出液口微孔濾膜濾器微孔濾膜濾器鈦濾器鈦濾器垂熔玻璃濾器第一節(jié)第一節(jié) 概述概述（二）化學(xué)滅菌法（二）化學(xué)滅菌法 . .氣體滅菌法：用化學(xué)消毒劑形成的氣體殺氣體滅菌法：用化學(xué)消毒劑形成的氣體殺 滅微生物的方法。環(huán)氧乙烷、滅微生物的方法。環(huán)氧乙烷、 甲醛、臭氧等。甲醛、臭氧等。 2.2.藥物滅菌法：適用于皮膚，設(shè)備的消毒。藥物滅菌法：適用于皮膚，設(shè)備的消毒

6、。 75%75%乙醇、乙醇、0.1-0.2%0.1-0.2%新潔爾滅等。新潔爾滅等。（三）滅菌操作法（三）滅菌操作法定義定義 整個過程在無菌條件整個過程在無菌條件條件條件 在無菌操作室或無菌柜內(nèi)在無菌操作室或無菌柜內(nèi) 一切用具、材料以及環(huán)境一切用具、材料以及環(huán)境 滅菌法滅菌法 采用層流潔凈工作臺采用層流潔凈工作臺適用物質(zhì)適用物質(zhì) 不耐熱的藥物注不耐熱的藥物注射射劑、劑、 眼用溶液、眼用軟膏眼用溶液、眼用軟膏 或皮試液等。或皮試液等。層流潔凈工作臺第一節(jié)概述第一節(jié)概述（四）滅菌參數(shù)：（四）滅菌參數(shù)：D、Z、F、F0值（值（p53 了解）了解） 1. D值值： 在一定溫度下，在一定溫度下，微生物（

7、即殘存微生物（即殘存10） 所需的滅菌所需的滅菌。 研究表明微生物受高溫殺滅時，在一定溫度范圍研究表明微生物受高溫殺滅時，在一定溫度范圍 內(nèi)其死亡速度屬一級過程內(nèi)其死亡速度屬一級過程 D值隨微生物的種類、環(huán)境和滅菌溫度變化而異。值隨微生物的種類、環(huán)境和滅菌溫度變化而異。第一節(jié)概述第一節(jié)概述2. Z值值： 降低一個降低一個lgDlgD值所需升高的值所需升高的。即滅菌時間減少到原來即滅菌時間減少到原來1/101/10所需升高的所需升高的或在相同滅菌時間內(nèi)，殺滅或在相同滅菌時間內(nèi)，殺滅99%99%微生物所需提高微生物所需提高的的。第一節(jié)概述第一節(jié)概述3.3.F F值與值與F0F0值值： F F值值為

8、在一定溫度（為在一定溫度（T T）下給定）下給定Z Z值所產(chǎn)生的滅菌效力值所產(chǎn)生的滅菌效力與與T To o給定給定Z Z值所產(chǎn)生的滅菌效率相同時所相當(dāng)?shù)臅r間，值所產(chǎn)生的滅菌效率相同時所相當(dāng)?shù)臅r間，以以minmin為單位。為單位。F F值常用于值常用于干熱滅菌干熱滅菌。F F0 0值值為一定滅菌溫度（為一定滅菌溫度（T T）下）下Z Z值為值為10 10 所產(chǎn)生的滅所產(chǎn)生的滅菌效率與菌效率與121121、Z Z值為值為10 10 所產(chǎn)生的滅菌效率相同所產(chǎn)生的滅菌效率相同時所相當(dāng)?shù)臅r間（時所相當(dāng)?shù)臅r間（minmin）。也就是說）。也就是說F F0 0是將各種滅菌是將各種滅菌溫度的滅菌效果轉(zhuǎn)換為溫度

9、的滅菌效果轉(zhuǎn)換為121121滅菌的等效值。目前滅菌的等效值。目前F F0 0用于用于熱壓滅菌熱壓滅菌。一般要求一個滅菌程序（加熱及冷卻。一般要求一個滅菌程序（加熱及冷卻過程）的過程）的。 第一節(jié)第一節(jié) 概述概述三三. .空氣凈化技術(shù)空氣凈化技術(shù) 一般采用空氣過濾法。多孔過濾介質(zhì)，一般采用空氣過濾法。多孔過濾介質(zhì)，除除去空氣中的塵埃、微生物去空氣中的塵埃、微生物 1.1.空氣凈化標(biāo)準(zhǔn)：空氣凈化標(biāo)準(zhǔn)：級（粒級（粒/ /英尺英尺3 3） 100100 10000 10000 100000 100000 100000 100000第一節(jié)第一節(jié) 概述概述100100級級潔凈度級別潔凈度級別塵粒最大允許數(shù)

10、塵粒最大允許數(shù)/L/L微生物最大允許數(shù)微生物最大允許數(shù) 0.50.5 m m 5 5 m m浮游菌浮游菌/ / m m3 3沉降菌沉降菌/ / m m3 33 .53 .5 5 51 110 00010 000級級350 350 1001003 3100 000100 000級級3 500 3 500 5005001010100 000100 000級級3500035000 1 0001 0001515新新GMPGMP潔凈度標(biāo)準(zhǔn)潔凈度標(biāo)準(zhǔn) 5Pa,10Pa,18-26,40-60%5Pa,10Pa,18-26,40-60%第一節(jié)第一節(jié) 概述概述 2.2.浮塵濃度測定法和無菌檢查法（浮塵濃度測定

11、法和無菌檢查法（p57p57） （1 1）浮塵濃度測定法）浮塵濃度測定法 （2 2）無菌檢查法）無菌檢查法 應(yīng)該在環(huán)境潔凈度應(yīng)該在環(huán)境潔凈度10000 or 10000 or 局部局部100100級級 的層流區(qū)的層流區(qū) 或或隔離系統(tǒng)隔離系統(tǒng)進(jìn)行進(jìn)行 潔凈室的設(shè)計(jì)（視頻）潔凈室的設(shè)計(jì)（視頻）布置盡量緊湊布置盡量緊湊 單高層、全密閉、無窗、全部空調(diào)單高層、全密閉、無窗、全部空調(diào)外部外部設(shè)有廁所、洗澡室、更衣室、緩沖室、風(fēng)淋室等設(shè)有廁所、洗澡室、更衣室、緩沖室、風(fēng)淋室等潔凈室的潔凈度從潔凈室的潔凈度從低到高低到高 緩沖間潔凈度高的在中緩沖間潔凈度高的在中 心位置心位置明確人流、物流和空氣流向明確人流

12、、物流和空氣流向 人流、物流分開人流、物流分開與相鄰空間與相鄰空間 相對正壓相對正壓第一節(jié)第一節(jié) 概述概述3.3.凈化室的設(shè)計(jì)（凈化室的設(shè)計(jì)（p59p59） （1 1）凈化系統(tǒng)設(shè)計(jì)）凈化系統(tǒng)設(shè)計(jì)- - 初、中、高三級過濾，正壓狀態(tài)初、中、高三級過濾，正壓狀態(tài) （2 2）潔凈區(qū)的氣流要求）潔凈區(qū)的氣流要求 層流層流 100100級級 亂流亂流 -10000-10000級級 （3 3）潔凈區(qū)的基本布局）潔凈區(qū)的基本布局 為滿足制劑要求，生產(chǎn)廠區(qū)被分為為滿足制劑要求，生產(chǎn)廠區(qū)被分為一般生產(chǎn)區(qū)、一般生產(chǎn)區(qū)、控制區(qū)、潔凈區(qū)、無菌區(qū)?？刂茀^(qū)、潔凈區(qū)、無菌區(qū)。一般生產(chǎn)區(qū)無潔凈度要求，一般生產(chǎn)區(qū)無潔凈度要求，

13、控制區(qū)要求達(dá)到控制區(qū)要求達(dá)到1010萬級，潔凈區(qū)要求達(dá)到萬級，潔凈區(qū)要求達(dá)到1000010000級，無級，無菌區(qū)達(dá)到菌區(qū)達(dá)到100100級。為消除人為污染，降低成本，可在級。為消除人為污染，降低成本，可在1000010000級潔凈室內(nèi)放置級潔凈室內(nèi)放置100100級超凈工作臺。級超凈工作臺。超凈工作臺超凈工作臺空氣潔凈技術(shù)與潔凈室的標(biāo)準(zhǔn)空氣潔凈技術(shù)與潔凈室的標(biāo)準(zhǔn) 潔凈室（區(qū)域）空氣潔凈度級別潔凈室（區(qū)域）空氣潔凈度級別塵粒最大允許數(shù)/立方米 微生物最大允許數(shù)0.5m 5m 浮游菌/立方米 沉降菌/皿100級 3500 0 5 110,000級 350000 2000 100 3100,000級

14、 3500000 20000 500 10300,000級 10500000 60000 1000 15 潔凈區(qū)的管理潔凈區(qū)的管理n人員數(shù)量應(yīng)嚴(yán)格控制。人員數(shù)量應(yīng)嚴(yán)格控制。 n潔凈室（區(qū)）與非潔凈室（區(qū)）之間必須設(shè)置緩沖設(shè)施，潔凈室（區(qū)）與非潔凈室（區(qū)）之間必須設(shè)置緩沖設(shè)施，人、物流走向合理。人、物流走向合理。n100100級級 不得設(shè)置地漏，操作人員不應(yīng)裸手操作，當(dāng)不不得設(shè)置地漏，操作人員不應(yīng)裸手操作，當(dāng)不可避免時，手部應(yīng)及時消毒?？杀苊鈺r，手部應(yīng)及時消毒。n10,00010,000級級 使用的傳輸設(shè)備不得穿越較低級別區(qū)域。使用的傳輸設(shè)備不得穿越較低級別區(qū)域。n100,000100,000級

15、以上級以上 工作服應(yīng)在潔凈室（區(qū)）內(nèi)洗滌、干工作服應(yīng)在潔凈室（區(qū)）內(nèi)洗滌、干燥、整理，必要時應(yīng)按要求滅菌。燥、整理，必要時應(yīng)按要求滅菌。第一節(jié)第一節(jié) 概述概述 4.4.冷凍干燥技術(shù)（冷凍干燥技術(shù)（p62p62） 在低溫與真空下使冰直接升華，以水蒸氣形式除在低溫與真空下使冰直接升華，以水蒸氣形式除去水的干燥技術(shù)。去水的干燥技術(shù)。 4.1 4.1 干燥原理干燥原理/ /曲線曲線 4.2 4.2 干燥設(shè)備干燥設(shè)備 由制冷、真空、加熱、控制系統(tǒng)四個主要部分由制冷、真空、加熱、控制系統(tǒng)四個主要部分組成。組成。冷凍干燥機(jī)凍干箱凍干箱擱板控制面板 箱體 (內(nèi)有冷凝器、冷凍機(jī)、熱交換器、真空泵和閥門、電器控制

16、元件等) 第二節(jié)第二節(jié) 注射劑注射劑（injectionsinjections）一一. .概述概述 1.1.定義：定義：注射劑注射劑( (injectionsinjections) )系指藥物制成系指藥物制成的供注入體內(nèi)的的供注入體內(nèi)的滅菌滅菌溶液溶液、乳狀液乳狀液、混懸液混懸液，以及供臨用前配成溶液或混懸液的以及供臨用前配成溶液或混懸液的無菌粉末無菌粉末或濃溶液或濃溶液。 粉針劑粉針劑 安瓿注射劑安瓿注射劑 第二節(jié)第二節(jié) 注射劑注射劑（injectionsinjections）2.2.分類分類 按分散系統(tǒng)分按分散系統(tǒng)分 溶液型溶液型( (油、水油、水) ) 混懸型混懸型 乳劑型乳劑型 無菌粉

17、末無菌粉末 ( ( 注意油溶液與混懸型只能做肌肉注射注意油溶液與混懸型只能做肌肉注射 ) ) 按體積分按體積分 注射液注射液 輸液輸液 新型注射給藥系統(tǒng)（脂質(zhì)體、微囊、微球等生物技術(shù)藥物）新型注射給藥系統(tǒng)（脂質(zhì)體、微囊、微球等生物技術(shù)藥物）第二節(jié)第二節(jié) 注射劑注射劑（injectionsinjections） 3.3. 給藥途徑給藥途徑 皮內(nèi)皮內(nèi)id id i intrantrad dermalermal 皮試診斷皮試診斷 0.2ml0.2ml 皮下皮下sc sc s sububc cutaneous utaneous 1-2ml 1-2ml 吸收慢吸收慢, ,疫苗疫苗 肌內(nèi)肌內(nèi)imim i

18、intrantram muscularuscular 5ml5ml，各類注射劑，各類注射劑 靜脈靜脈iv iv i intrantrav venous enous 應(yīng)用廣泛應(yīng)用廣泛 脊椎腔脊椎腔iviv 易發(fā)生滲透壓紊亂易發(fā)生滲透壓紊亂 10ml5050 m m的微粒的微粒 ) )應(yīng)應(yīng)澄明度澄明度檢檢查的規(guī)定外，藥典還規(guī)定了查的規(guī)定外，藥典還規(guī)定了100 ml100 ml以上注射液應(yīng)做以上注射液應(yīng)做不溶不溶性微粒檢查性微粒檢查。 每每1 ml1 ml輸液中含輸液中含10 10 m m 以上的微粒不得超過以上的微粒不得超過2020粒，粒，含含25 25 m m 的微粒不得超過的微粒不得超過2 2

19、粒。粒。 檢查方法檢查方法 顯微計(jì)數(shù)法微及粒度分析儀顯微計(jì)數(shù)法微及粒度分析儀 其它項(xiàng)目與注射劑相似（其它項(xiàng)目與注射劑相似（如熱原、無菌檢查、含量、如熱原、無菌檢查、含量、PHPH、滲透壓等）、滲透壓等）四、輸液存在的問題及解決辦法四、輸液存在的問題及解決辦法 1.1.澄明度與微粒澄明度與微粒 -原料與附加劑原料與附加劑 雜質(zhì)的存在產(chǎn)生乳光、小白點(diǎn)、雜質(zhì)的存在產(chǎn)生乳光、小白點(diǎn)、 渾濁渾濁 -輸液容器與附件輸液容器與附件 -生產(chǎn)工藝及操作生產(chǎn)工藝及操作 -使用過程使用過程 2.2.染菌染菌 生產(chǎn)過程污染嚴(yán)重、滅菌不徹底、瓶塞松動不嚴(yán)生產(chǎn)過程污染嚴(yán)重、滅菌不徹底、瓶塞松動不嚴(yán) 3.3.熱原反應(yīng)熱原反

20、應(yīng) 使用過程的污染占使用過程的污染占84%84%一、概述一、概述 注射用無菌粉末，又稱注射用無菌粉末，又稱粉針粉針，通常是凍干粉針，臨，通常是凍干粉針，臨用前用滅菌注射用水溶解后注射，較常用的注射劑型。用前用滅菌注射用水溶解后注射，較常用的注射劑型。 用于在水中不穩(wěn)定的藥物，特別是對濕、熱敏感的用于在水中不穩(wěn)定的藥物，特別是對濕、熱敏感的抗生素抗生素及及生物技術(shù)藥物生物技術(shù)藥物。 冷凍干燥的優(yōu)點(diǎn)：冷凍干燥的優(yōu)點(diǎn)： 1 1、避免藥物熱分解、避免藥物熱分解 2 2、產(chǎn)品質(zhì)地疏松、產(chǎn)品質(zhì)地疏松 3 3、含水量低，減少藥物水解、含水量低，減少藥物水解 4 4、污染少、污染少 5 5、劑量準(zhǔn)確、劑量準(zhǔn)確

21、1.1.注射用無菌粉末的分類注射用無菌粉末的分類 注射用冷凍干燥制品注射用冷凍干燥制品- - 生物制品生物制品 注射用無菌分裝產(chǎn)品注射用無菌分裝產(chǎn)品- - 抗生素抗生素2.2.注射用無菌粉末的質(zhì)量要求注射用無菌粉末的質(zhì)量要求 粉末無異物粉末無異物 粉末細(xì)度或結(jié)晶度適宜粉末細(xì)度或結(jié)晶度適宜 無菌、無熱原無菌、無熱原一、一、概述概述 眼用制劑（眼用制劑（eye preparationseye preparations）系指直接）系指直接用于眼部發(fā)揮局部治療作用或經(jīng)眼部吸收進(jìn)入體用于眼部發(fā)揮局部治療作用或經(jīng)眼部吸收進(jìn)入體循環(huán)，發(fā)揮全身治療作用的藥物制劑。循環(huán)，發(fā)揮全身治療作用的藥物制劑。 滴眼劑、眼

22、膏劑。滴眼劑、眼膏劑。 藥物在眼部的吸收分為藥物在眼部的吸收分為吸收兩個吸收兩個途徑。通過角膜至前房再進(jìn)入虹膜；通過結(jié)膜對途徑。通過角膜至前房再進(jìn)入虹膜；通過結(jié)膜對鞏膜可達(dá)眼球后部。鞏膜可達(dá)眼球后部。水溶性太大的藥物不易透過水溶性太大的藥物不易透過角膜屏障，脂溶性大的藥物比較容易透過角膜，角膜屏障，脂溶性大的藥物比較容易透過角膜，但卻不易從角膜向眼的深層組織透過。所以在水但卻不易從角膜向眼的深層組織透過。所以在水和脂溶性介質(zhì)中均有一定的溶解度的化合物，最和脂溶性介質(zhì)中均有一定的溶解度的化合物，最利于在眼角膜的轉(zhuǎn)運(yùn)。利于在眼角膜的轉(zhuǎn)運(yùn)。 全身作用途徑全身作用途徑：藥物在角膜藥物在角膜結(jié)膜緣被局部結(jié)膜緣被局部毛細(xì)血管吸收進(jìn)入體循環(huán)。角膜透過性差的藥物毛細(xì)血管吸收進(jìn)入體循環(huán)。角膜透過性差的藥物有明顯的非角膜吸收。有明顯的非角膜吸收。眼粘膜吸收的優(yōu)點(diǎn)眼粘膜吸收的優(yōu)點(diǎn)： a a）眼部給藥比注射給藥方便、簡單、經(jīng)濟(jì)。）眼部給藥比注射給藥方便、簡單、經(jīng)濟(jì)。 b b）可避免肝臟的首過效應(yīng)。）可避免肝臟的首過效應(yīng)。 c c）與其他組織或器官相比，對于免疫反應(yīng)不敏感。）與其他組織或器官相比，對于免疫反應(yīng)不敏感。 適用于蛋白質(zhì)類、肽類藥物，而這些藥物往往適用于蛋白質(zhì)類、肽類藥物，而這些藥物往往 口