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1、檢測(cè)生物組織中的糖類、脂肪和蛋白質(zhì)檢測(cè)生物組織中的糖類、脂肪和蛋白質(zhì) 1.實(shí)驗(yàn)原理 斐林試劑斐林試劑蘇丹蘇丹橘黃色橘黃色紅色紅色磚紅色沉淀磚紅色沉淀紫色紫色蘇丹蘇丹 雙縮脲試劑雙縮脲試劑鑒定物質(zhì)鑒定物質(zhì)試劑試劑實(shí)驗(yàn)現(xiàn)象實(shí)驗(yàn)現(xiàn)象還原性糖還原性糖脂肪脂肪蛋白質(zhì)蛋白質(zhì)淀粉淀粉 碘碘 藍(lán)色藍(lán)色 必修必修1 1第第18181919頁頁生物組織中可溶性還原糖、脂肪、蛋白質(zhì)的鑒定生物組織中可溶性還原糖、脂肪、蛋白質(zhì)的鑒定l實(shí)驗(yàn)原理實(shí)驗(yàn)原理選材:含糖量較高的選材:含糖量較高的白色或近于白色的植物組織白色或近于白色的植物組織(排除色素對(duì)排除色素對(duì)顯色的干擾顯色的干擾),蘋果、梨最好,蘋果、梨最好 。 l實(shí)驗(yàn)流程
2、實(shí)驗(yàn)流程(步驟步驟)1.可溶性還原糖可溶性還原糖 制備組織樣液:制備組織樣液:制漿:去皮、切塊、研磨,制漿:去皮、切塊、研磨,過濾:(用單層紗布)過濾:(用單層紗布)取液:取液:(mL)顯色反應(yīng)顯色反應(yīng) 現(xiàn)象:現(xiàn)象: (用前混勻用前混勻)5065.C水浴水浴加熱加熱2min還原糖的檢測(cè)和觀察:還原糖的檢測(cè)和觀察:還原糖的檢測(cè)結(jié)果還原糖的檢測(cè)結(jié)果2.脂肪的鑒定脂肪的鑒定 取材:花生種子(浸泡取材:花生種子(浸泡h),去皮,將子葉削成薄片),去皮,將子葉削成薄片 制片:制片:選取最薄的薄片移至載玻片中央選取最薄的薄片移至載玻片中央在薄片上滴加在薄片上滴加蘇丹蘇丹(或蘇丹或蘇丹) 染液染液2 3滴,
3、滴,染色染色min滴加體積分?jǐn)?shù)為滴加體積分?jǐn)?shù)為50%的酒精的酒精溶液溶液12滴,洗滴,洗去浮色去浮色(多余的蘇丹多余的蘇丹 )吸去余液,滴吸去余液,滴1-2滴蒸餾水,蓋上蓋玻片,制成滴蒸餾水,蓋上蓋玻片,制成臨時(shí)裝片臨時(shí)裝片顯微觀察:顯微觀察: 先在低倍鏡下找到已著色的薄片,后用高倍鏡觀察先在低倍鏡下找到已著色的薄片,后用高倍鏡觀察現(xiàn)象:現(xiàn)象:有被染成有被染成橘黃色橘黃色(或紅色或紅色)的脂肪微粒的脂肪微粒脂肪微粒脂肪微粒脂肪的檢測(cè)結(jié)果脂肪的檢測(cè)結(jié)果3.蛋白質(zhì)的鑒定蛋白質(zhì)的鑒定 選材與制備選材與制備組織樣液:組織樣液:黃豆組織樣液(或雞蛋蛋清稀釋液)黃豆組織樣液(或雞蛋蛋清稀釋液)黃豆浸泡黃豆
4、浸泡 去皮去皮切片切片研磨研磨過濾過濾濾液濾液 顯色反應(yīng)顯色反應(yīng)現(xiàn)象:現(xiàn)象:無色無色紫色或紫紅色紫色或紫紅色(創(chuàng)設(shè)堿性條件創(chuàng)設(shè)堿性條件)(提供提供Cu2+)蛋白質(zhì)的檢測(cè)結(jié)果蛋白質(zhì)的檢測(cè)結(jié)果蛋白質(zhì)的鑒定蛋白質(zhì)的鑒定-雙縮脲試劑雙縮脲試劑雞蛋清溶液雞蛋清溶液 NaOH 溶液溶液滴加滴加CuSO2 溶液溶液, 每次滴加均需搖勻每次滴加均需搖勻結(jié)果顯示結(jié)果顯示: 紫色紫色1.你的預(yù)測(cè)與實(shí)驗(yàn)結(jié)果是否一致?2.小組間交流實(shí)驗(yàn)結(jié)果。你有什么發(fā)現(xiàn)?3.全班共檢測(cè)了多少種生物材料?這些生物 材料中有機(jī)化合物的種類、含量一樣嗎? 這對(duì)我們選擇食物有什么啟發(fā)?討論討論4.淀粉的鑒定淀粉的鑒定取材:馬鈴薯勻漿取材:馬
5、鈴薯勻漿檢測(cè):檢測(cè):碘液碘液2滴滴現(xiàn)象:現(xiàn)象: 搖勻后變成藍(lán)色搖勻后變成藍(lán)色問題探討問題探討:1、在做還原糖、蛋白質(zhì)鑒定的實(shí)驗(yàn)時(shí),為什么要留出、在做還原糖、蛋白質(zhì)鑒定的實(shí)驗(yàn)時(shí),為什么要留出一部分樣液?一部分樣液?作對(duì)照作對(duì)照2、使用雙縮脲試劑時(shí)為什么、使用雙縮脲試劑時(shí)為什么B液只能加液只能加34滴而不能滴而不能過量?過量? 過量的雙縮脲試劑過量的雙縮脲試劑B B會(huì)與試劑會(huì)與試劑A A反應(yīng),使溶液呈藍(lán)色,反應(yīng),使溶液呈藍(lán)色,而掩蓋生成的紫色。而掩蓋生成的紫色。3、為什么斐林試劑要現(xiàn)配現(xiàn)用,不能放置太久?為什么斐林試劑要現(xiàn)配現(xiàn)用,不能放置太久? 時(shí)間太長(zhǎng),時(shí)間太長(zhǎng),Cu(OH)Cu(OH)2 2懸
6、濁液就沉淀在試管底部而懸濁液就沉淀在試管底部而無法參與反應(yīng)。無法參與反應(yīng)。l深化深化比較項(xiàng)比較項(xiàng)目目試劑及成試劑及成分分原理原理溶液濃度溶液濃度方法方法加熱加熱與否與否結(jié)結(jié)果果可溶還可溶還原糖的原糖的鑒定鑒定斐林試劑斐林試劑NaOHNaOH和和CuSOCuSO4 4磚磚紅紅色色沉沉淀淀蛋白質(zhì)蛋白質(zhì)的鑒定的鑒定雙縮脲試雙縮脲試劑劑NaOHNaOH和和CuSOCuSO4 4溶溶液液呈呈紫紫色色4、斐林試劑與雙縮脲試劑兩者有何不同?、斐林試劑與雙縮脲試劑兩者有何不同?新配制新配制的的Cu(OH)2溶液溶液在堿性在堿性環(huán)境下環(huán)境下的的Cu2+NaOH濃度為濃度為0.1g/mLCuS04濃度為濃度為0.
7、05g/mLNaOH濃度為濃度為0.1g/mLCuS04濃度為濃度為0.01g/mL先把先把NaOH溶液和溶液和CuSO4溶液溶液混合混合,而后而后立即使用立即使用。先先加入加入Na0H1mL,然,然后后再加再加CuS044滴,搖勻。滴,搖勻。(不能過量不能過量)水浴水浴加熱加熱不不需需要要5、實(shí)驗(yàn)的材料的選擇和處理有什么要求?、實(shí)驗(yàn)的材料的選擇和處理有什么要求?材料的選擇材料的選擇材料的處理材料的處理還原性糖的鑒定還原性糖的鑒定脂肪的鑒定脂肪的鑒定含糖高,顏色為含糖高,顏色為白色的植物組織,白色的植物組織,如蘋果和梨如蘋果和梨富含脂肪的種子富含脂肪的種子,如花生,如花生浸泡浸泡34小時(shí)小時(shí)/
8、蛋白質(zhì)的鑒定蛋白質(zhì)的鑒定富含蛋白質(zhì)的富含蛋白質(zhì)的黃豆或雞蛋清黃豆或雞蛋清黃豆需浸泡黃豆需浸泡1-2天,天,雞蛋清要先稀釋雞蛋清要先稀釋淀粉的鑒定淀粉的鑒定馬鈴薯馬鈴薯/ 各種可供實(shí)驗(yàn)的材料各種可供實(shí)驗(yàn)的材料梨梨 黃桃黃桃 胡蘿卜胡蘿卜 黃豆黃豆 花生種子花生種子 小麥種子小麥種子 其中適合于鑒定其中適合于鑒定可溶性還原糖可溶性還原糖的是的是 ,理由是,理由是梨的組織細(xì)胞梨的組織細(xì)胞 ,你打算用什么試劑鑒定你打算用什么試劑鑒定? 。 小麥種子不如花生種子更適合用來鑒定脂肪,這是小麥種子不如花生種子更適合用來鑒定脂肪,這是因?yàn)橐驗(yàn)?,你打,你打算用什么試劑鑒定算用什么試劑鑒定? . 例例 做生物組織中可溶性還原糖、脂肪、蛋做生物組織中可溶性還原糖、脂肪、蛋白質(zhì)的鑒定實(shí)驗(yàn)時(shí),需要根據(jù)實(shí)驗(yàn)需要選擇不同的白質(zhì)的鑒定實(shí)驗(yàn)時(shí),需要根據(jù)實(shí)驗(yàn)需要選擇不同的實(shí)驗(yàn)材料。請(qǐng)根據(jù)下表所列各種材料回答問題:實(shí)驗(yàn)材料。請(qǐng)根據(jù)下表所列各種材料回答問題:梨梨 顏色為白色,并且糖含量較高顏色為白色,并且糖含量較高 斐林試劑斐林試劑脂肪含量不如花生高,也不容易做切片脂肪含量不如花生高,也不容易做切片 用蘇丹用蘇丹或蘇丹或蘇丹試劑試劑小麥種子中糖類化合物小麥種子中糖類化合物 含量很高,卻不適合用含量很高,卻不適合用來鑒定來鑒定 _,這
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