第2章天然產(chǎn)物的提取分離和結(jié)構(gòu)鑒定

1、天然產(chǎn)物化學(xué)天然產(chǎn)物化學(xué)第第2章章天然產(chǎn)物的提取分離和結(jié)構(gòu)鑒定一、天然產(chǎn)物化學(xué)成分的預(yù)試驗(yàn)與提取（一）天然產(chǎn)物化學(xué)成分的預(yù)試驗(yàn)（一）天然產(chǎn)物化學(xué)成分的預(yù)試驗(yàn)基本原理：根據(jù)各成分基本原理：根據(jù)各成分極性極性的不同，先系統(tǒng)地分的不同，先系統(tǒng)地分成幾個(gè)不同部分，然后利用顯色反應(yīng)或沉淀反應(yīng)，成幾個(gè)不同部分，然后利用顯色反應(yīng)或沉淀反應(yīng)，或結(jié)合紙色譜、薄層色譜，定性判斷各部分中可或結(jié)合紙色譜、薄層色譜，定性判斷各部分中可能含有的化合物類型。能含有的化合物類型。常用溶劑極性次序：水常用溶劑極性次序：水 甲醇乙醇丙酮甲醇乙醇丙酮 親水性有機(jī)溶劑親水性有機(jī)溶劑乙酸乙酯氯仿乙醚苯己烷（石油醚）乙酸乙酯氯仿乙醚苯己

2、烷（石油醚） 親脂性有機(jī)溶劑親脂性有機(jī)溶劑 實(shí)際工作中：采用石油醚（非極性物質(zhì)）、水（極性實(shí)際工作中：采用石油醚（非極性物質(zhì)）、水（極性物質(zhì)）、物質(zhì)）、95%乙醇（大部分成分）的三段法進(jìn)行粗分，乙醇（大部分成分）的三段法進(jìn)行粗分，提高工作效率。提高工作效率。一、天然產(chǎn)物化學(xué)成分的預(yù)試驗(yàn)與提取一般定性試驗(yàn)初步驗(yàn)證：一般定性試驗(yàn)初步驗(yàn)證：生物堿生物堿 碘化鉍鉀碘化鉍鉀 棕黃色或橘紅色沉淀棕黃色或橘紅色沉淀黃酮黃酮 將乙醇液加將乙醇液加Mg粉，滴入濃鹽酸后振蕩在泡沫處呈桃粉，滴入濃鹽酸后振蕩在泡沫處呈桃 紅色或與紅色或與1% AlCl3乙醇溶液呈有色熒光。乙醇溶液呈有色熒光。氨基酸和肽氨基酸和肽 茚

3、三酮茚三酮 藍(lán)紫色藍(lán)紫色有機(jī)酸有機(jī)酸 溴酚藍(lán)溴酚藍(lán) 黃色黃色酚類酚類 FeCl3 紫色、藍(lán)色紫色、藍(lán)色蛋白質(zhì)蛋白質(zhì) NaOH+CuSO4 紫紅色絡(luò)合物（以雙縮脲反應(yīng)）紫紅色絡(luò)合物（以雙縮脲反應(yīng)）糖和苷糖和苷 與斐林試劑作用有磚紅色與斐林試劑作用有磚紅色Cu2O沉淀。沉淀。 預(yù)試驗(yàn)方法要求簡(jiǎn)便、快速，并要有盡可能的正確性。 試管試驗(yàn)及濾紙片法。 層析方法（PC和TLC）：靈敏度高、成分之間互相干擾小。預(yù)試驗(yàn)往往只能提供初步的線索 例： 生物堿 碘化鉍鉀試劑（Dragendorff試劑），對(duì)香豆素、萜類內(nèi)酯也能反應(yīng)。 另外，植物中的酸性成分往往與植物體內(nèi)的K、Na、Ca、Mg結(jié)合成鹽存在，因此不能

4、由于水和酒精提取液不呈酸性而否定酸性成分的存在。 咖啡堿屬于生物堿，但對(duì)碘化鉍鉀試劑卻呈陰性反應(yīng)。 有些預(yù)試驗(yàn)方法是該類化學(xué)成分需要先經(jīng)過(guò)一步反應(yīng)，生成的產(chǎn)物再與試劑顯顏色反應(yīng)。如：氰苷的預(yù)試驗(yàn)方法是利用氰苷遇酸水解生成HCN，再與苦味酸NaCO3溶液反應(yīng)顯紅色。 由于植物內(nèi)各種成分的含量很低，尤其是某些生理活性物質(zhì)含量更低，運(yùn)用一般的預(yù)試驗(yàn)方法是很難發(fā)現(xiàn)的。如：美登素（抗腫瘤藥物） 新類型的化學(xué)成分靠目前的預(yù)試驗(yàn)方法無(wú)法檢測(cè)。系統(tǒng)分離是選擇一系列措施，將性質(zhì)相近系統(tǒng)分離是選擇一系列措施，將性質(zhì)相近的組分集中在一起提取出來(lái)，并分別與臨的組分集中在一起提取出來(lái)，并分別與臨床、動(dòng)物實(shí)驗(yàn)相配合，確定

5、該部分是否有床、動(dòng)物實(shí)驗(yàn)相配合，確定該部分是否有效，對(duì)有效部分視具體情況再進(jìn)行分離，效，對(duì)有效部分視具體情況再進(jìn)行分離，找出關(guān)鍵成分，找出關(guān)鍵成分，這是系統(tǒng)分離的目的。這是系統(tǒng)分離的目的。一、天然產(chǎn)物化學(xué)成分的預(yù)試驗(yàn)與提?。ǘ┨烊划a(chǎn)物化學(xué)成分的系統(tǒng)分離（二）天然產(chǎn)物化學(xué)成分的系統(tǒng)分離系統(tǒng)分離包括系統(tǒng)分離包括粗分階段粗分階段和和細(xì)分階段細(xì)分階段： 粗分階段粗分階段又稱作部位分離，又稱作部位分離，大類物質(zhì)的分離大類物質(zhì)的分離，如皂苷、蛋白質(zhì)；如皂苷、蛋白質(zhì)；細(xì)分階段細(xì)分階段稱作組分分離。稱作組分分離。系統(tǒng)分離亦利用溶劑極性的大小對(duì)植物成分進(jìn)系統(tǒng)分離亦利用溶劑極性的大小對(duì)植物成分進(jìn)行分類提取。行分

6、類提取。一、天然產(chǎn)物化學(xué)成分的預(yù)試驗(yàn)與提取1. 溶劑法溶劑法 一、天然產(chǎn)物化學(xué)成分的預(yù)試驗(yàn)與提?。ㄈ┨崛√烊划a(chǎn)物的常用方法（三）提取天然產(chǎn)物的常用方法溶劑提取法溶解規(guī)律溶劑類型提取方法溶劑提取法溶解規(guī)律溶劑提取法溶劑類型溶解規(guī)律溶劑提取法提取方法溶劑類型溶解規(guī)律溶劑提取法提取方法溶劑選擇溶解規(guī)律溶劑提取法 選擇溶劑的原則：對(duì)有效成分溶解度大，選擇溶劑的原則：對(duì)有效成分溶解度大，而對(duì)共存雜質(zhì)的溶解度最小。而對(duì)共存雜質(zhì)的溶解度最小?；衔锏臉O性與其分子結(jié)構(gòu)有關(guān) 親水性基團(tuán)（如含羥基、羧基的基團(tuán)）越多、其極性越大、親水性就越強(qiáng)，親脂性就越弱，溶于水而疏于油；反之，親水性基團(tuán)越少、其極性越小、親水性

7、就越弱，親脂性就越強(qiáng)，溶于油而疏于水。 化學(xué)成分的極性：被提取成分的極性是選擇提取溶劑最重要化學(xué)成分的極性：被提取成分的極性是選擇提取溶劑最重要的依據(jù)。的依據(jù)。 影響化合物極性的因素：影響化合物極性的因素： (1) 化合物分子母核大?。ㄌ紨?shù)多少）：分子大、碳數(shù)多，極化合物分子母核大小（碳數(shù)多少）：分子大、碳數(shù)多，極性??；分子小、碳數(shù)少，極性大。性小；分子小、碳數(shù)少，極性大。 (2) 取代基極性大小：在化合物母核相同或相近情況下，化合取代基極性大?。涸诨衔锬负讼嗤蛳嘟闆r下，化合物極性大小主要取決于取代基極性大小。物極性大小主要取決于取代基極性大小。 常見(jiàn)基團(tuán)極性大小順序如下；酸酚醇胺醛酮酯

8、常見(jiàn)基團(tuán)極性大小順序如下；酸酚醇胺醛酮酯醚烯烷。醚烯烷。 舉例：判斷下列各組化合物極性大小。舉例：判斷下列各組化合物極性大小。 A B COHOCOCH3O一、天然產(chǎn)物化學(xué)成分的預(yù)試驗(yàn)與提取常用溶劑可分為以下三類：常用溶劑可分為以下三類：水：水：強(qiáng)極性溶劑強(qiáng)極性溶劑 中草藥中親水性的成分，如無(wú)機(jī)鹽、糖類、中草藥中親水性的成分，如無(wú)機(jī)鹽、糖類、分子不太大的多糖類、鞣質(zhì)、氨基酸、蛋白質(zhì)、分子不太大的多糖類、鞣質(zhì)、氨基酸、蛋白質(zhì)、有機(jī)酸鹽、生物堿鹽及苷類等都能被水溶出。有機(jī)酸鹽、生物堿鹽及苷類等都能被水溶出。 為了增加某些成分的溶解度，也常采用為了增加某些成分的溶解度，也常采用酸水酸水及及堿水堿水作

9、為提取溶劑。酸水提取，可使生物堿作為提取溶劑。酸水提取，可使生物堿與酸生成鹽類而溶出，堿水提取可使有機(jī)酸、與酸生成鹽類而溶出，堿水提取可使有機(jī)酸、黃酮、蒽醌、內(nèi)酯、香豆素以及酚類成分溶出。黃酮、蒽醌、內(nèi)酯、香豆素以及酚類成分溶出。 優(yōu)點(diǎn)：取之不盡、用之不竭；價(jià)廉易得；使用安全。 缺點(diǎn)：提取液中雜質(zhì)較多（如無(wú)機(jī)鹽、蛋白質(zhì)、糖類和淀粉等）；水提液易變質(zhì)、發(fā)霉、不易保存；沸點(diǎn)高，蒸發(fā)濃縮時(shí)間長(zhǎng)；沸水提取時(shí)，淀粉被糊化，增加過(guò)濾難度；皂苷及粘液質(zhì)，減壓濃縮時(shí)，產(chǎn)生大量氣泡等。一、天然產(chǎn)物化學(xué)成分的預(yù)試驗(yàn)與提取親水性有機(jī)溶劑：甲醇、親水性有機(jī)溶劑：甲醇、乙醇乙醇、丙酮（與水任、丙酮（與水任意比例混溶意比

10、例混溶 ）：）：苷類、生物堿鹽、鞣質(zhì)等。苷類、生物堿鹽、鞣質(zhì)等。 特點(diǎn)：對(duì)植物細(xì)胞特點(diǎn)：對(duì)植物細(xì)胞穿透能力穿透能力較強(qiáng)較強(qiáng) 對(duì)許多成分的對(duì)許多成分的溶解性能溶解性能好，提取完全好，提取完全 毒性低，價(jià)格便宜，回收方便毒性低，價(jià)格便宜，回收方便 比水用量少，提取時(shí)間短，水溶性雜質(zhì)少比水用量少，提取時(shí)間短，水溶性雜質(zhì)少 乙醇乙醇提取天然產(chǎn)物成分是目前提取天然產(chǎn)物成分是目前最常用最常用的方法。的方法。 根據(jù)被提取物質(zhì)的性質(zhì)，采用不同濃度的乙醇進(jìn)行提取。如：根據(jù)被提取物質(zhì)的性質(zhì)，采用不同濃度的乙醇進(jìn)行提取。如：95%95%乙醇適于提取生物堿、揮發(fā)油、樹(shù)脂、葉綠素等；乙醇適于提取生物堿、揮發(fā)油、樹(shù)脂、葉

11、綠素等；6070%6070%乙醇適于提取黃酮苷、三萜皂苷、生物堿、蒽醌苷等成分。乙醇適于提取黃酮苷、三萜皂苷、生物堿、蒽醌苷等成分。一、天然產(chǎn)物化學(xué)成分的預(yù)試驗(yàn)與提取可溶解揮發(fā)油、油脂、葉綠素、樹(shù)脂、內(nèi)酯、可溶解揮發(fā)油、油脂、葉綠素、樹(shù)脂、內(nèi)酯、某些生物堿及一些苷元。某些生物堿及一些苷元。特點(diǎn)：特點(diǎn)：選擇性強(qiáng)，沸點(diǎn)低，濃縮回收方便，易燃，選擇性強(qiáng)，沸點(diǎn)低，濃縮回收方便，易燃，有毒，價(jià)貴，設(shè)備要求較高，穿透藥材組織的能有毒，價(jià)貴，設(shè)備要求較高，穿透藥材組織的能力較差，提取時(shí)間較長(zhǎng)，有局限性。力較差，提取時(shí)間較長(zhǎng)，有局限性。親脂性有機(jī)溶劑：親脂性有機(jī)溶劑：如石油醚、苯、氯仿、乙如石油醚、苯、氯仿、

12、乙醚、乙酸乙酯、二氯甲烷等（與水不能任意混醚、乙酸乙酯、二氯甲烷等（與水不能任意混溶）溶）提取的方法：提取的方法：水、親水性有機(jī)溶劑：水、親水性有機(jī)溶劑：浸漬法、滲漉法、回流法；水為溶劑還可浸漬法、滲漉法、回流法；水為溶劑還可以用煎煮法。以用煎煮法。一、天然產(chǎn)物化學(xué)成分的預(yù)試驗(yàn)與提取 親脂性有機(jī)溶劑：親脂性有機(jī)溶劑： 易揮發(fā)，易揮發(fā)，多以索氏提取器多以索氏提取器采用連續(xù)回流法。采用連續(xù)回流法。 提取方法提取方法 1 1 浸漬法：也叫冷浸法。將藥材粗粉以適當(dāng)溶劑浸漬法：也叫冷浸法。將藥材粗粉以適當(dāng)溶劑在常溫下浸泡。多以水類或稀醇為溶劑。適于成在常溫下浸泡。多以水類或稀醇為溶劑。適于成分遇熱易破壞

13、或含多糖較多的中藥的提取。缺點(diǎn)分遇熱易破壞或含多糖較多的中藥的提取。缺點(diǎn)為浸出效果較差，水提取液易發(fā)霉，提取液體積為浸出效果較差，水提取液易發(fā)霉，提取液體積大，浸出時(shí)間長(zhǎng)。大，浸出時(shí)間長(zhǎng)。 2 2 煎煮法：為中藥水提取最常用的方法。將中藥煎煮法：為中藥水提取最常用的方法。將中藥粗粉用水加熱煮沸，保持一定時(shí)間，成分即可浸粗粉用水加熱煮沸，保持一定時(shí)間，成分即可浸出。煎煮法必須以水為溶劑。此法提取效率高，出。煎煮法必須以水為溶劑。此法提取效率高，但遇熱破壞成分要注意，且含多糖多的成分過(guò)濾但遇熱破壞成分要注意，且含多糖多的成分過(guò)濾困難。困難。3 3 滲漉法滲漉法 將中藥粗粉裝于滲漉筒將中藥粗粉裝于滲

14、漉筒中，不斷添加溶劑滲過(guò)藥中，不斷添加溶劑滲過(guò)藥粉，從滲漉筒下端不斷流粉，從滲漉筒下端不斷流出滲漉液。各類溶劑均可。出滲漉液。各類溶劑均可。此法由于溶液濃度差大，此法由于溶液濃度差大，浸出效果好，且不破壞成浸出效果好，且不破壞成分。但缺點(diǎn)為溶液體積大，分。但缺點(diǎn)為溶液體積大，時(shí)間長(zhǎng)。時(shí)間長(zhǎng)。4 4 回流提取法回流提取法 用于以有機(jī)溶劑加熱提取用于以有機(jī)溶劑加熱提取成分。成分。 優(yōu)點(diǎn)：提取效率高，但受優(yōu)點(diǎn)：提取效率高，但受熱易破壞成分不宜用此法；熱易破壞成分不宜用此法； 缺點(diǎn)：溶劑消耗量大，需缺點(diǎn)：溶劑消耗量大，需回流設(shè)備，需幾次提取方可回流設(shè)備，需幾次提取方可提取完全。提取完全。特點(diǎn)：特點(diǎn)：

15、節(jié)省溶劑節(jié)省溶劑；新鮮溶劑不斷；新鮮溶劑不斷加入，保持較高的濃度差，加入，保持較高的濃度差，提取效率高；提取效率高； 提取時(shí)間長(zhǎng)，不適合受熱提取時(shí)間長(zhǎng)，不適合受熱破壞成分。破壞成分。一、天然產(chǎn)物化學(xué)成分的預(yù)試驗(yàn)與提取索氏（Soxhlet）提取器5 5 連續(xù)回流提取法連續(xù)回流提取法一、天然產(chǎn)物化學(xué)成分的預(yù)試驗(yàn)與提取溶劑提取法可分為如下幾種情況溶劑提取法可分為如下幾種情況: :（1 1）采用幾種不同極性的溶劑分步提取）采用幾種不同極性的溶劑分步提取一般先采用極性低的、與水不相混溶的有機(jī)溶劑，一般先采用極性低的、與水不相混溶的有機(jī)溶劑，再用能與水相溶的有機(jī)溶劑，最后用水提取。再用能與水相溶的有機(jī)溶劑

16、，最后用水提取。目前常用的兩種系統(tǒng)目前常用的兩種系統(tǒng)： 己烷己烷 乙醚乙醚 甲醇甲醇 水；水； 己烷己烷 二氯甲烷二氯甲烷 甲醇甲醇 水水一、天然產(chǎn)物化學(xué)成分的預(yù)試驗(yàn)與提?。?）單一溶劑提?。﹩我蝗軇┨崛水直接提取水直接提取例：例：小檗堿小檗堿 將三顆針切片或打成粗粉，用水浸泡或?qū)⑷w針切片或打成粗粉，用水浸泡或滲漉，滲漉液用鹽酸酸化至滲漉，滲漉液用鹽酸酸化至pH=3，加食鹽飽和，即析出，加食鹽飽和，即析出小檗堿鹽酸鹽結(jié)晶。小檗堿鹽酸鹽結(jié)晶。 蕓香苷蕓香苷 槐花米用水煎煮，水煎液放冷即析出蕓香苷槐花米用水煎煮，水煎液放冷即析出蕓香苷結(jié)晶。結(jié)晶。缺點(diǎn)：缺點(diǎn)：提取液中雜質(zhì)較多；含有黏液，濃縮會(huì)產(chǎn)

17、生泡沫，提取液中雜質(zhì)較多；含有黏液，濃縮會(huì)產(chǎn)生泡沫，加入少量加入少量戊醇戊醇或或辛醇辛醇來(lái)克服，也可采用薄膜濃縮；如提來(lái)克服，也可采用薄膜濃縮；如提取物容易發(fā)霉發(fā)酵，加少量甲苯、甲醛或氯仿等作防腐取物容易發(fā)霉發(fā)酵，加少量甲苯、甲醛或氯仿等作防腐劑。劑。一、天然產(chǎn)物化學(xué)成分的預(yù)試驗(yàn)與提取l有機(jī)溶劑直接提取有機(jī)溶劑直接提取 當(dāng)所含成分較為簡(jiǎn)單或某一成分含量較高時(shí)。當(dāng)所含成分較為簡(jiǎn)單或某一成分含量較高時(shí)。例：例：橙皮苷橙皮苷 橘皮粗粉置于索氏提取器中，用甲橘皮粗粉置于索氏提取器中，用甲醇或乙醇加熱回流提取，冷卻析出橙皮苷結(jié)晶。醇或乙醇加熱回流提取，冷卻析出橙皮苷結(jié)晶。（3 3）兩種或兩種以上溶劑）兩

18、種或兩種以上溶劑 利用植物中所含成分在某種溶劑中溶解度的差利用植物中所含成分在某種溶劑中溶解度的差異而達(dá)到分離的目的。異而達(dá)到分離的目的。一、天然產(chǎn)物化學(xué)成分的預(yù)試驗(yàn)與提?。? 4）液）液- -液分配萃取液分配萃取 利用混合物中的各成分在利用混合物中的各成分在兩種互不相溶兩種互不相溶的的溶劑中，由于溶劑中，由于分配系數(shù)分配系數(shù)不同而達(dá)到分離的目的。不同而達(dá)到分離的目的。各成分在兩相溶劑中分配系數(shù)相差越大，則分各成分在兩相溶劑中分配系數(shù)相差越大，則分離效率越高。離效率越高。 例如：所需成分是脂溶性，可用有機(jī)溶劑如例如：所需成分是脂溶性，可用有機(jī)溶劑如苯、氯仿或乙醚與水進(jìn)行液苯、氯仿或乙醚與水進(jìn)行

19、液- -液萃取。液萃取。一、天然產(chǎn)物化學(xué)成分的預(yù)試驗(yàn)與提?。? 5）反應(yīng)溶劑萃取）反應(yīng)溶劑萃取通常內(nèi)酯類化合物不溶于水，其內(nèi)酯環(huán)遇堿通常內(nèi)酯類化合物不溶于水，其內(nèi)酯環(huán)遇堿水解水解成成為羧酸鹽而為羧酸鹽而溶于水溶于水，再加酸酸化，可重新形成內(nèi)酯，再加酸酸化，可重新形成內(nèi)酯環(huán)，回復(fù)原物環(huán)，回復(fù)原物不溶于水不溶于水，從而與其他雜質(zhì)分開(kāi)。，從而與其他雜質(zhì)分開(kāi)。例例如從蛔蒿中提取山道年如從蛔蒿中提取山道年（驅(qū)蛔有效成分）：（驅(qū)蛔有效成分）：將蛔蒿粉用石灰乳調(diào)勻，加熱水提取，山道年成為將蛔蒿粉用石灰乳調(diào)勻，加熱水提取，山道年成為山道年酸鈣被水提出，水提取液過(guò)濾濃縮后，加酸山道年酸鈣被水提出，水提取液過(guò)濾濃

20、縮后，加酸酸化，山道年沉淀析出，濾集，用乙醇重結(jié)晶可得酸化，山道年沉淀析出，濾集，用乙醇重結(jié)晶可得純品。純品。 -山道年OOOCH3CH3CH3一、天然產(chǎn)物化學(xué)成分的預(yù)試驗(yàn)與提取2. 2. 水蒸氣蒸餾法水蒸氣蒸餾法適用范圍：適用于能隨水蒸氣蒸餾而不被破壞適用范圍：適用于能隨水蒸氣蒸餾而不被破壞的成分提取，這些化合物與水不相混溶或僅微的成分提取，這些化合物與水不相混溶或僅微溶，且在約溶，且在約100100時(shí)有一定的蒸汽壓，當(dāng)水加熱時(shí)有一定的蒸汽壓，當(dāng)水加熱沸騰時(shí)，能將該物質(zhì)一并隨水蒸氣帶出。沸騰時(shí)，能將該物質(zhì)一并隨水蒸氣帶出。例如：揮發(fā)油、小分子生物堿，如麻黃堿、煙堿等。例如：揮發(fā)油、小分子生物

21、堿，如麻黃堿、煙堿等。 小分子的酸性物質(zhì)，如丹皮酚小分子的酸性物質(zhì)，如丹皮酚一、天然產(chǎn)物化學(xué)成分的預(yù)試驗(yàn)與提取一、天然產(chǎn)物化學(xué)成分的預(yù)試驗(yàn)與提取3. 3. 分餾法分餾法利用沸點(diǎn)不同進(jìn)行分餾（分餾柱，利用熱交換利用沸點(diǎn)不同進(jìn)行分餾（分餾柱，利用熱交換及柱外空氣的冷凝作用），然后精制純化。及柱外空氣的冷凝作用），然后精制純化。4. 4. 吸附法吸附法吸附的目的：一種是吸附除去雜質(zhì)，常指鞣質(zhì)吸附的目的：一種是吸附除去雜質(zhì)，常指鞣質(zhì)色素；一種是吸附所需物質(zhì)。常用的吸附劑有色素；一種是吸附所需物質(zhì)。常用的吸附劑有氧化鋁、氧化鎂，酸性白土和活性炭等。例如氧化鋁、氧化鎂，酸性白土和活性炭等。例如毛莨苷毛莨苷

22、（活性炭吸附，（活性炭吸附，50%乙醇脫吸附）。乙醇脫吸附）。一、天然產(chǎn)物化學(xué)成分的預(yù)試驗(yàn)與提取5. 5. 沉淀法沉淀法利用某些植物成分與某些試劑產(chǎn)生沉淀的性質(zhì)利用某些植物成分與某些試劑產(chǎn)生沉淀的性質(zhì)而得到分離或除去而得到分離或除去“雜質(zhì)雜質(zhì)”的方法即為沉淀法。的方法即為沉淀法。注：注：對(duì)于所需成分來(lái)講，這種沉淀反應(yīng)是對(duì)于所需成分來(lái)講，這種沉淀反應(yīng)是可逆可逆的的；最常用的是；最常用的是鉛鹽法鉛鹽法，利用中性乙酸鉛或堿，利用中性乙酸鉛或堿式乙酸鉛；式乙酸鉛；脫鉛方法脫鉛方法通常用硫化氫氣體，使分通常用硫化氫氣體，使分解并轉(zhuǎn)為不溶性硫化鉛沉淀而除去。解并轉(zhuǎn)為不溶性硫化鉛沉淀而除去。實(shí)驗(yàn)室實(shí)驗(yàn)室常常

23、采用硫酸、磷酸、硫酸鈉等物質(zhì)脫鉛。采用硫酸、磷酸、硫酸鈉等物質(zhì)脫鉛。一、天然產(chǎn)物化學(xué)成分的預(yù)試驗(yàn)與提取中性乙酸鉛：中性乙酸鉛：酸性、鄰位酚羥基化合物，有機(jī)酸性、鄰位酚羥基化合物，有機(jī)酸、蛋白質(zhì)、黏液質(zhì)、鞣質(zhì)、樹(shù)脂、酸性皂苷、酸、蛋白質(zhì)、黏液質(zhì)、鞣質(zhì)、樹(shù)脂、酸性皂苷、部分黃酮苷。部分黃酮苷。堿式乙酸鉛：堿式乙酸鉛：除上述物質(zhì)外，還可沉淀某些苷除上述物質(zhì)外，還可沉淀某些苷類、生物堿等堿性物質(zhì)。類、生物堿等堿性物質(zhì)。6. 6. 鹽析法鹽析法水提液中，加入無(wú)機(jī)鹽至飽和，水提液中，加入無(wú)機(jī)鹽至飽和，可使某些可使某些成分在水中的溶解度降低沉淀析出，而與水溶性成分在水中的溶解度降低沉淀析出，而與水溶性大的雜

24、質(zhì)分離。大的雜質(zhì)分離。常用無(wú)機(jī)鹽：氯化鈉、硫酸鈉、硫酸鎂、硫酸銨等常用無(wú)機(jī)鹽：氯化鈉、硫酸鈉、硫酸鎂、硫酸銨等 一、天然產(chǎn)物化學(xué)成分的預(yù)試驗(yàn)與提取7. 7. 透析法透析法利用小分子物質(zhì)在溶液中可通過(guò)利用小分子物質(zhì)在溶液中可通過(guò)半透膜半透膜，而大分子物質(zhì)不能通過(guò)，而大分子物質(zhì)不能通過(guò)半透膜的性質(zhì)而達(dá)到分離的方法。常用于純化皂苷、蛋白質(zhì)、多半透膜的性質(zhì)而達(dá)到分離的方法。常用于純化皂苷、蛋白質(zhì)、多肽和多糖等化合物（除去無(wú)機(jī)鹽、單糖、二糖等雜質(zhì)）。反之也肽和多糖等化合物（除去無(wú)機(jī)鹽、單糖、二糖等雜質(zhì)）。反之也可將大分子雜質(zhì)留在半透膜內(nèi)，而將小分子物質(zhì)通過(guò)半透膜進(jìn)入可將大分子雜質(zhì)留在半透膜內(nèi)，而將小分子

25、物質(zhì)通過(guò)半透膜進(jìn)入膜外溶液中，而加以分離精制膜外溶液中，而加以分離精制. . 如：如：三顆針根粉三顆針根粉用稀硫酸浸泡，稀酸液加氯化用稀硫酸浸泡，稀酸液加氯化鈉近飽和即析出鈉近飽和即析出小檗堿鹽酸鹽小檗堿鹽酸鹽；從從三七三七水提取液水提取液中加中加硫酸鎂硫酸鎂至飽和，三七皂苷乙即可沉淀析出。至飽和，三七皂苷乙即可沉淀析出。 透析膜有動(dòng)物性膜透析膜有動(dòng)物性膜（豬、牛的膀胱）豬、牛的膀胱） 、火棉膠膜、羊皮紙膜、蛋白膠膜、玻璃火棉膠膜、羊皮紙膜、蛋白膠膜、玻璃紙膜等紙膜等 多用市售的玻璃紙或動(dòng)物性半透膜扎成多用市售的玻璃紙或動(dòng)物性半透膜扎成袋狀，外面用尼龍網(wǎng)袋加以保護(hù)，小心袋狀，外面用尼龍網(wǎng)袋加以

26、保護(hù)，小心加入欲透析的樣品溶液，懸掛在清水容加入欲透析的樣品溶液，懸掛在清水容器中。經(jīng)常更換清水使透析膜內(nèi)外溶液器中。經(jīng)常更換清水使透析膜內(nèi)外溶液的的濃度差加大濃度差加大，必要時(shí)適當(dāng)加熱，并加，必要時(shí)適當(dāng)加熱，并加以攪拌，以利透析速度加快。以攪拌，以利透析速度加快。 一、天然產(chǎn)物化學(xué)成分的預(yù)試驗(yàn)與提取8. 8. 升華法升華法 適用于有升華性質(zhì)的成分。適用于有升華性質(zhì)的成分。升華法提取咖啡堿升華法提取咖啡堿如：樟木中的樟腦（如：樟木中的樟腦（camphorcamphor）、茶）、茶葉中的咖啡堿在葉中的咖啡堿在178178以上就能升華以上就能升華而不被分解。游離羥基蒽醌類成分，而不被分解。游離羥基

27、蒽醌類成分，一些香豆素類，有機(jī)酸類成分，有些一些香豆素類，有機(jī)酸類成分，有些也具有升華的性質(zhì)。也具有升華的性質(zhì)。缺點(diǎn)：升華法雖然簡(jiǎn)單易行，但中缺點(diǎn)：升華法雖然簡(jiǎn)單易行，但中草藥炭化后，往往產(chǎn)生揮發(fā)性的焦草藥炭化后，往往產(chǎn)生揮發(fā)性的焦油狀物，粘附在升華物上，不易精油狀物，粘附在升華物上，不易精制除去；其次，升華不完全，產(chǎn)率制除去；其次，升華不完全，產(chǎn)率低，有時(shí)還伴隨有分解現(xiàn)象。低，有時(shí)還伴隨有分解現(xiàn)象。 一、天然產(chǎn)物化學(xué)成分的預(yù)試驗(yàn)與提?。ㄋ模┨烊划a(chǎn)物的分離與精制（四）天然產(chǎn)物的分離與精制 根據(jù)物質(zhì)根據(jù)物質(zhì)溶解度差別溶解度差別進(jìn)行分離進(jìn)行分離 結(jié)晶與沉淀法結(jié)晶與沉淀法 （1 1）結(jié)晶及重結(jié)晶）結(jié)

28、晶及重結(jié)晶結(jié)晶法結(jié)晶法: : 利用混合物中各成分在溶劑中因利用混合物中各成分在溶劑中因溫度不溫度不同同引起引起溶解度的改變?nèi)芙舛鹊母淖?，使部分成分析出結(jié)晶。，使部分成分析出結(jié)晶。重結(jié)晶重結(jié)晶：選擇適當(dāng)?shù)娜軇┳尳Y(jié)晶再一次溶解和析：選擇適當(dāng)?shù)娜軇┳尳Y(jié)晶再一次溶解和析出的過(guò)程。出的過(guò)程。一、天然產(chǎn)物化學(xué)成分的預(yù)試驗(yàn)與提取l結(jié)晶的條件結(jié)晶的條件呈過(guò)飽和狀態(tài)；呈過(guò)飽和狀態(tài)；放置放置；最合適的溫度為；最合適的溫度為510左右（或室溫）。左右（或室溫）。l結(jié)晶溶劑的選擇（結(jié)晶溶劑的選擇（關(guān)鍵關(guān)鍵）對(duì)所需成分熱時(shí)溶解，冷時(shí)析出；對(duì)雜質(zhì)來(lái)說(shuō)，對(duì)所需成分熱時(shí)溶解，冷時(shí)析出；對(duì)雜質(zhì)來(lái)說(shuō)，應(yīng)不溶或難溶。應(yīng)不溶或難溶。

29、一、天然產(chǎn)物化學(xué)成分的預(yù)試驗(yàn)與提取常用的結(jié)晶溶劑有甲醇、乙醇、丙酮和乙酸乙常用的結(jié)晶溶劑有甲醇、乙醇、丙酮和乙酸乙酯等。注：酯等。注：所選溶劑的沸點(diǎn)應(yīng)低于化合物的熔點(diǎn)；所選溶劑的沸點(diǎn)應(yīng)低于化合物的熔點(diǎn)；溶劑的沸點(diǎn)應(yīng)低于結(jié)晶時(shí)的溫度；溶劑的沸點(diǎn)應(yīng)低于結(jié)晶時(shí)的溫度；可選擇混合溶劑，要求低沸點(diǎn)溶劑對(duì)物質(zhì)的可選擇混合溶劑，要求低沸點(diǎn)溶劑對(duì)物質(zhì)的溶解度大、高沸點(diǎn)溶劑對(duì)物質(zhì)的溶解度小。溶解度大、高沸點(diǎn)溶劑對(duì)物質(zhì)的溶解度小。溶劑的沸點(diǎn)要適中，約在溶劑的沸點(diǎn)要適中，約在6060左右。左右。重結(jié)晶用的溶劑一般可參照結(jié)晶的溶劑，但也重結(jié)晶用的溶劑一般可參照結(jié)晶的溶劑，但也經(jīng)常改變。經(jīng)常改變。一、天然產(chǎn)物化學(xué)成分的

30、預(yù)試驗(yàn)與提取l制備結(jié)晶的方法制備結(jié)晶的方法溶解、過(guò)濾、濃縮、靜置；溶解、過(guò)濾、濃縮、靜置；加入少量晶種；加入少量晶種；如沒(méi)有晶種，可用玻璃棒摩擦玻璃容器內(nèi)壁；如沒(méi)有晶種，可用玻璃棒摩擦玻璃容器內(nèi)壁；l不易結(jié)晶或非晶體化合物的處理不易結(jié)晶或非晶體化合物的處理化合物不易結(jié)晶，原因之一是本身的性質(zhì)所決定，二化合物不易結(jié)晶，原因之一是本身的性質(zhì)所決定，二是純度不夠。前者需制備結(jié)晶性的衍生物或鹽，再用是純度不夠。前者需制備結(jié)晶性的衍生物或鹽，再用化學(xué)方法處理回復(fù)到原來(lái)的化合物。例如生物堿蓮心化學(xué)方法處理回復(fù)到原來(lái)的化合物。例如生物堿蓮心堿（成鹽）堿（成鹽）;美登素（衍生物），見(jiàn)教材美登素（衍生物），見(jiàn)教

31、材P33。結(jié)晶純度的判斷 化合物結(jié)晶的形狀和熔點(diǎn)往往因所用溶劑不同而有差異。 原托品堿在氯仿中形成棱柱狀結(jié)晶，熔點(diǎn)207；在丙酮中則形成半球狀結(jié)晶，熔點(diǎn)203；在氯仿和丙酮混合溶劑中則形成以上兩種晶形的結(jié)晶。 所以文獻(xiàn)中常在化合物的晶形、熔點(diǎn)之后注明所用溶劑。 一般單體純化合物結(jié)晶的熔程較窄，在0.51左右，如果熔程較長(zhǎng)則表示化合物不純。 例外：一些立體異構(gòu)體和結(jié)構(gòu)非常類似的混合物，熔點(diǎn)一致，熔程較窄，但不是單體；雙熔點(diǎn)，如防己諾林堿在176時(shí)熔化，至200時(shí)又固化，再在242時(shí)分解。 一、天然產(chǎn)物化學(xué)成分的預(yù)試驗(yàn)與提?。? 2）沉淀法）沉淀法 在溶液中加入另一種溶劑在溶液中加入另一種溶劑使極

32、性改變使極性改變， 某些成分溶解度改變而析出沉淀。某些成分溶解度改變而析出沉淀。如水提醇沉如水提醇沉 法、醇提水沉法、醇提醚沉法、醇提丙酮沉法。法、醇提水沉法、醇提醚沉法、醇提丙酮沉法。（3 3）酸堿沉淀法）酸堿沉淀法 對(duì)酸性、堿性或兩性有機(jī)化合物來(lái)說(shuō)，常對(duì)酸性、堿性或兩性有機(jī)化合物來(lái)說(shuō)，常 可通過(guò)加入酸、堿以調(diào)節(jié)溶液的可通過(guò)加入酸、堿以調(diào)節(jié)溶液的pHpH值值，改變分，改變分 子的存在狀態(tài)（游離型或解離型），從而改變?nèi)茏拥拇嬖跔顟B(tài)（游離型或解離型），從而改變?nèi)?解度而實(shí)現(xiàn)分離。解度而實(shí)現(xiàn)分離。如生物堿：酸提堿沉法；如生物堿：酸提堿沉法； 黃酮、蒽醌類酚酸性成分：堿提酸沉法。黃酮、蒽醌類酚酸性成

33、分：堿提酸沉法。一、天然產(chǎn)物化學(xué)成分的預(yù)試驗(yàn)與提?。? 4）沉淀試劑沉淀法）沉淀試劑沉淀法 酸性或堿性化合物還可通過(guò)加入某種酸性或堿性化合物還可通過(guò)加入某種沉沉 淀淀試劑試劑使之生成不溶于水的鹽類沉淀析出。使之生成不溶于水的鹽類沉淀析出。如：如： 生物堿：苦味酸鹽、磷鉬酸鹽等生物堿：苦味酸鹽、磷鉬酸鹽等 酸性化合物可生成鈣鹽，鋇鹽、酸性化合物可生成鈣鹽，鋇鹽、鉛鹽鉛鹽等。等。 一、天然產(chǎn)物化學(xué)成分的預(yù)試驗(yàn)與提取 2. 2. 根據(jù)物質(zhì)在兩相溶劑中的根據(jù)物質(zhì)在兩相溶劑中的分配比不同分配比不同進(jìn)進(jìn) 行分離行分離常見(jiàn)的方法：液常見(jiàn)的方法：液- -液萃取法及液液萃取法及液- -液分配色譜法。液分配色譜法

34、。（1 1）液）液- -液萃取法液萃取法（2 2）液）液- -液分配色譜法液分配色譜法 操作方式：操作方式：紙色譜紙色譜、分配薄層色譜、分配薄層色譜、分配柱色譜分配柱色譜液-液萃取法（兩相溶劑）萃取法 原理：是利用混合物中各成分在兩種互不相溶的溶劑中分配系數(shù)的不同而達(dá)到分離的方法。 萃取時(shí)，如果各成分在兩相溶劑中分配系數(shù)相差越大，則分離效率越高。 如果在水提取液中的有效成分是親脂性物質(zhì)，一般多用親脂性有機(jī)溶劑，如苯、氯仿或乙醚進(jìn)行兩相萃取；如果有效成分是偏親水性的物質(zhì)，在親脂性溶劑中難溶解，就需要改用弱親水性的溶劑，例如乙酸乙酯、正丁醇等。 萃取操作中的注意事項(xiàng)： 1）破壞乳化方法：較長(zhǎng)時(shí)間放

35、置；加入少量電解質(zhì)，如氯化鈉。2）溶劑與水溶液應(yīng)保持一定量的比例，第一次萃取時(shí)，溶劑要多一些，一般為水提取液的1/3，以后的用量可以少一些，一般為1/4-1/5。 3）一般萃取34次即可。但親水性較大的成分不易轉(zhuǎn)入有機(jī)溶劑層時(shí)，須增加萃取次數(shù)，或改變萃取溶劑。紙色譜紙色譜(PC)1 1、紙色譜：、紙色譜： 以濾紙作為載體，以濾紙纖維上吸附的水份做固定相，用于水互不相溶的溶劑做展開(kāi)劑的一種分配色譜。2、分離原理： 利用混合物中各成分在兩種互不相溶的溶劑中分配系數(shù)的不同，從而使得各成分分離。3 3、紙色譜的操作、紙色譜的操作選擇合適的濾紙：選擇合適的濾紙：選擇原則：光滑整齊，無(wú)折痕適宜的機(jī)械強(qiáng)度，

36、潤(rùn)濕不變形純度高，雜質(zhì)含量少濾紙種類：快速濾紙：結(jié)構(gòu)疏松，宜用來(lái)分離Rf值相差 較大的成分。慢速濾紙：結(jié)構(gòu)致密，宜用來(lái)分離Rf值相差 較小的成分 中速濾紙：比較常用 點(diǎn)樣：點(diǎn)樣：展開(kāi)：展開(kāi)：顯色：顯色：計(jì)算計(jì)算R Rf f值值與薄層色譜相似一、天然產(chǎn)物化學(xué)成分的預(yù)試驗(yàn)與提取基本原理：基本原理：將兩相溶劑中的一相涂覆在硅膠等多孔載將兩相溶劑中的一相涂覆在硅膠等多孔載體上，作為固定相，填充在色譜柱中，然后加入與固體上，作為固定相，填充在色譜柱中，然后加入與固定相不相混溶的另一相溶劑（流動(dòng)相）沖洗色譜柱。定相不相混溶的另一相溶劑（流動(dòng)相）沖洗色譜柱。這樣，物質(zhì)同樣可在兩相溶劑相對(duì)作逆流移動(dòng)，在移這樣

37、，物質(zhì)同樣可在兩相溶劑相對(duì)作逆流移動(dòng)，在移動(dòng)過(guò)程中不斷進(jìn)行動(dòng)態(tài)分配而得以分離。動(dòng)過(guò)程中不斷進(jìn)行動(dòng)態(tài)分配而得以分離。方法：方法：將載體和固定液混合，然后分次移入色譜柱中將載體和固定液混合，然后分次移入色譜柱中并壓緊；樣品可溶于固定液，混以少量載體，加在色并壓緊；樣品可溶于固定液，混以少量載體，加在色譜柱上端；流動(dòng)相洗脫。譜柱上端；流動(dòng)相洗脫。一、天然產(chǎn)物化學(xué)成分的預(yù)試驗(yàn)與提取n正相分配色譜正相分配色譜：分離水溶性或極性較大的成分如生物堿、苷類、糖類、有機(jī)酸等化合物分離水溶性或極性較大的成分如生物堿、苷類、糖類、有機(jī)酸等化合物固定相：固定相：強(qiáng)極性溶劑，如水、緩沖液等強(qiáng)極性溶劑，如水、緩沖液等流動(dòng)

38、相：流動(dòng)相：氯仿、乙酸乙酯等弱極性有機(jī)溶劑氯仿、乙酸乙酯等弱極性有機(jī)溶劑洗脫規(guī)律：洗脫規(guī)律：極性小成分先洗下極性小成分先洗下 極性大成分后洗下極性大成分后洗下一、天然產(chǎn)物化學(xué)成分的預(yù)試驗(yàn)與提取n反相分配色譜反相分配色譜：分離脂溶性化合物時(shí)，如高級(jí)脂肪酸、油脂、游離甾體等分離脂溶性化合物時(shí)，如高級(jí)脂肪酸、油脂、游離甾體等親脂性有機(jī)溶劑親脂性有機(jī)溶劑固定相，固定相，水或親水性溶劑水或親水性溶劑流動(dòng)相。流動(dòng)相。固定相：可用石蠟油固定相：可用石蠟油流動(dòng)相：則用水或甲醇等強(qiáng)極性溶劑流動(dòng)相：則用水或甲醇等強(qiáng)極性溶劑洗脫規(guī)律：極性大成分先洗下洗脫規(guī)律：極性大成分先洗下 極性小成分后洗下極性小成分后洗下一、天

39、然產(chǎn)物化學(xué)成分的預(yù)試驗(yàn)與提取分配柱色譜法分配柱色譜法基本原理與基本原理與方法方法正正相相分分配配色色譜譜反反相相分分配配色色譜譜正相正相色譜色譜極性物質(zhì)吸附強(qiáng)極性物質(zhì)吸附強(qiáng)非極性物質(zhì)吸附弱非極性物質(zhì)吸附弱后出后出先出先出反相反相色譜色譜極性物質(zhì)吸附弱極性物質(zhì)吸附弱非極性物質(zhì)吸附強(qiáng)非極性物質(zhì)吸附強(qiáng)先出先出后出后出一、天然產(chǎn)物化學(xué)成分的預(yù)試驗(yàn)與提取 3. 3. 根據(jù)物質(zhì)的根據(jù)物質(zhì)的吸附性差別吸附性差別進(jìn)行分離進(jìn)行分離吸附色譜法吸附色譜法l吸附的類型（固液吸附）：吸附的類型（固液吸附）：物理吸附物理吸附（physical adsorption）：）：也稱表面吸附，常見(jiàn)如采用硅膠、氧化鋁、活性炭為吸也

40、稱表面吸附，常見(jiàn)如采用硅膠、氧化鋁、活性炭為吸附劑的吸附色譜。（無(wú)選擇性，吸附和解吸可逆）附劑的吸附色譜。（無(wú)選擇性，吸附和解吸可逆）化學(xué)吸附（化學(xué)吸附（chemical adsorption）：）：如黃酮等酚酸性物質(zhì)與堿性氧化鋁。如黃酮等酚酸性物質(zhì)與堿性氧化鋁。( (有選擇性，吸附牢有選擇性，吸附牢固，有時(shí)不可逆固，有時(shí)不可逆) )半化學(xué)吸附（半化學(xué)吸附（semi-chemical-adsorption）：）： 聚酰胺對(duì)黃酮、醌類的氫鍵吸附聚酰胺對(duì)黃酮、醌類的氫鍵吸附。（力量較弱）（力量較弱）一、天然產(chǎn)物化學(xué)成分的預(yù)試驗(yàn)與提取u物理吸附基本規(guī)律物理吸附基本規(guī)律相似者易于吸附相似者易于吸附吸附

41、三要素：吸附劑、溶質(zhì)（被分離成吸附三要素：吸附劑、溶質(zhì)（被分離成分）、溶劑（展開(kāi)劑或洗脫劑）。分）、溶劑（展開(kāi)劑或洗脫劑）。 吸附法分離的依據(jù)：吸附法分離的依據(jù)： 化合物極性差異大，吸附性差異大，化合物極性差異大，吸附性差異大， 分離效果愈好。分離效果愈好。u常用的吸附劑有：常用的吸附劑有： 硅膠、氧化鋁、活性炭等。硅膠、氧化鋁、活性炭等。 一、天然產(chǎn)物化學(xué)成分的預(yù)試驗(yàn)與提取 (1) 硅膠、氧化鋁：為極性吸附劑。對(duì)極性物質(zhì)具有較強(qiáng)的親和能力，極性強(qiáng)的溶質(zhì)對(duì)極性物質(zhì)具有較強(qiáng)的親和能力，極性強(qiáng)的溶質(zhì)將被優(yōu)先吸附。將被優(yōu)先吸附。溶劑極性越弱，則吸附劑對(duì)溶質(zhì)表現(xiàn)出較強(qiáng)的吸溶劑極性越弱，則吸附劑對(duì)溶質(zhì)表

42、現(xiàn)出較強(qiáng)的吸附能力。溶劑極性增強(qiáng)，則吸附劑對(duì)溶質(zhì)的吸附能附能力。溶劑極性增強(qiáng)，則吸附劑對(duì)溶質(zhì)的吸附能力即隨之減弱。力即隨之減弱。 溶質(zhì)即使被硅膠、氧化鋁吸附，但一旦加入極性溶質(zhì)即使被硅膠、氧化鋁吸附，但一旦加入極性較強(qiáng)的溶劑時(shí)，溶質(zhì)又可被后者置換洗脫下來(lái)。較強(qiáng)的溶劑時(shí)，溶質(zhì)又可被后者置換洗脫下來(lái)。 其吸附特點(diǎn)是：其吸附特點(diǎn)是：一、天然產(chǎn)物化學(xué)成分的預(yù)試驗(yàn)與提取 （2）活性炭：是是非極性非極性吸附劑，對(duì)非極性吸附劑，對(duì)非極性物質(zhì)具有較強(qiáng)的親和力。物質(zhì)具有較強(qiáng)的親和力。吸附規(guī)律：吸附規(guī)律： 芳香族化合物吸附力脂肪族化合物芳香族化合物吸附力脂肪族化合物 溶劑極性降低，活性炭對(duì)溶質(zhì)的吸附能力也溶劑極性

43、降低，活性炭對(duì)溶質(zhì)的吸附能力也 隨之降低，隨之降低，從活性炭上洗脫被吸附物質(zhì)時(shí)，從活性炭上洗脫被吸附物質(zhì)時(shí)， 洗脫劑洗脫能力隨溶劑極性的降低而增強(qiáng)。洗脫劑洗脫能力隨溶劑極性的降低而增強(qiáng)。 水中對(duì)溶質(zhì)的吸附力有機(jī)溶劑中對(duì)溶質(zhì)的水中對(duì)溶質(zhì)的吸附力有機(jī)溶劑中對(duì)溶質(zhì)的 吸附力吸附力溶劑（展開(kāi)劑或洗脫劑） 化合物被吸附劑吸附后，需用合適的溶劑進(jìn)行展開(kāi)，這種溶劑稱為展開(kāi)劑，在柱色譜中習(xí)慣稱為洗脫劑。展開(kāi)劑在吸附色譜中主要作用是解吸附。 在吸附色譜中，展開(kāi)劑的展開(kāi)能力與其極性有關(guān)。對(duì)于極性吸附劑，展開(kāi)劑的極性越大，其展開(kāi)能力越強(qiáng)，化合物移動(dòng)的速度就越快；而對(duì)非極性吸附劑則相反，展開(kāi)劑的極性越小，其展開(kāi)能力越

44、強(qiáng)。 溶質(zhì)（被分離成分） 如果吸附劑和展開(kāi)劑極性不變，被分離成分極性越大，吸附劑的吸附作用越強(qiáng)，展開(kāi)距離越短；被分離成分極性越小，吸附劑的吸附作用越弱，展開(kāi)距離越長(zhǎng)。 被分離成分的極性主要取決于母核結(jié)構(gòu)類型及官能團(tuán)的極性。極性大小順序：烷烴鹵代烷醚酯酮醛酰胺胺 醇水酚將三者混合物的水溶液通過(guò)NH4+型弱酸性離子交換樹(shù)脂，隨后先用水洗下，繼續(xù)用NH4Cl洗下，最后用Na2CO3洗下。二、天然產(chǎn)物化學(xué)成分的結(jié)構(gòu)鑒定（一）天然產(chǎn)物天然產(chǎn)物化學(xué)成分的一般鑒定方法化學(xué)成分的一般鑒定方法 已知化合物鑒定的一般程序已知化合物鑒定的一般程序 （1 1）測(cè)定樣品的熔點(diǎn)，與已知品的文獻(xiàn)值對(duì)照。）測(cè)定樣品的熔點(diǎn)，與

45、已知品的文獻(xiàn)值對(duì)照。 （2 2）測(cè)樣品與標(biāo)準(zhǔn)品的混熔點(diǎn)，所測(cè)熔點(diǎn)值不）測(cè)樣品與標(biāo)準(zhǔn)品的混熔點(diǎn)，所測(cè)熔點(diǎn)值不下降。下降。 （3 3）將樣品與標(biāo)準(zhǔn)品共薄層色譜或紙色譜，比）將樣品與標(biāo)準(zhǔn)品共薄層色譜或紙色譜，比較其較其R Rf f值是否一致。值是否一致。1. 1. （4 4）測(cè)樣品的紅外光譜圖，與標(biāo)準(zhǔn)譜圖進(jìn)行比）測(cè)樣品的紅外光譜圖，與標(biāo)準(zhǔn)譜圖進(jìn)行比較。較。二、天然產(chǎn)物化學(xué)成分的結(jié)構(gòu)鑒定（1 1）測(cè)定樣品的物理常數(shù)）測(cè)定樣品的物理常數(shù)（查文獻(xiàn)手冊(cè)，初步判斷（查文獻(xiàn)手冊(cè)，初步判斷樣品是已知物還是未知物）樣品是已知物還是未知物）（2 2）進(jìn)行檢識(shí)反應(yīng)）進(jìn)行檢識(shí)反應(yīng)（確定樣品是哪個(gè)類型的化合物）（確定樣品是

46、哪個(gè)類型的化合物）（3 3）分子式的測(cè)定：）分子式的測(cè)定：高分辨高分辨MS測(cè)定分子式測(cè)定分子式（4 4）結(jié)構(gòu)分析：四大光譜）結(jié)構(gòu)分析：四大光譜（5 5）結(jié)構(gòu)驗(yàn)證：用）結(jié)構(gòu)驗(yàn)證：用NMR的數(shù)據(jù)驗(yàn)證。的數(shù)據(jù)驗(yàn)證。注：波譜分析的方法難以解決，須借助注：波譜分析的方法難以解決，須借助X X射線的衍射。射線的衍射。2. 2. 未知化合物的結(jié)構(gòu)測(cè)定方法未知化合物的結(jié)構(gòu)測(cè)定方法二、天然產(chǎn)物化學(xué)成分的結(jié)構(gòu)鑒定UVIRMSNMR（二）結(jié)構(gòu)研究的主要手段 波譜方法二、天然產(chǎn)物化學(xué)成分的結(jié)構(gòu)鑒定l紫外光譜紫外光譜 用波長(zhǎng)在用波長(zhǎng)在200200400nm400nm之間的連之間的連續(xù)光掃描記錄下來(lái)的圖譜，吸收帶比較續(xù)光

47、掃描記錄下來(lái)的圖譜，吸收帶比較寬；寬；l紅外光譜紅外光譜 用波長(zhǎng)在用波長(zhǎng)在800nm800nm2020mm之間的之間的連續(xù)光掃描記錄下來(lái)的圖譜，譜線比較連續(xù)光掃描記錄下來(lái)的圖譜，譜線比較尖銳；尖銳；二、天然產(chǎn)物化學(xué)成分的結(jié)構(gòu)鑒定 生色團(tuán)：生色團(tuán)： 產(chǎn)生紫外吸收的不飽和基團(tuán)，如產(chǎn)生紫外吸收的不飽和基團(tuán)，如C=C, C=O, O=N=O等；等； 助色團(tuán)助色團(tuán)：其本身是飽和基團(tuán)（常含有雜原子），其本身是飽和基團(tuán)（常含有雜原子），它連到生色團(tuán)上時(shí)，能使后者吸收波長(zhǎng)變長(zhǎng)或它連到生色團(tuán)上時(shí)，能使后者吸收波長(zhǎng)變長(zhǎng)或吸收強(qiáng)度增加，如吸收強(qiáng)度增加，如-OH, -NH2, -Cl等；等； 深色位移深色位移：由于基

48、團(tuán)取代或溶劑效應(yīng)，最大吸由于基團(tuán)取代或溶劑效應(yīng)，最大吸收波長(zhǎng)變長(zhǎng)，也叫紅移（收波長(zhǎng)變長(zhǎng)，也叫紅移（red shift）；）； 淺色位移淺色位移：由于基團(tuán)取代或溶劑效應(yīng)，最大吸由于基團(tuán)取代或溶劑效應(yīng)，最大吸收波長(zhǎng)變短，也叫藍(lán)移（收波長(zhǎng)變短，也叫藍(lán)移（blue shift）；）；二、天然產(chǎn)物化學(xué)成分的結(jié)構(gòu)鑒定測(cè)定范圍：波長(zhǎng)測(cè)定范圍：波長(zhǎng)200200400nm 400nm 之間之間作用：作用： 提供基本骨架信息提供基本骨架信息; ; 樣品中雜質(zhì)的測(cè)定。樣品中雜質(zhì)的測(cè)定。特點(diǎn)：特點(diǎn)： 液態(tài)樣品才能測(cè)定；液態(tài)樣品才能測(cè)定； 常規(guī)紫外光譜儀價(jià)格低廉；常規(guī)紫外光譜儀價(jià)格低廉； 樣品用量少樣品用量少 具 有

49、相 同 基具 有 相 同 基本骨架化合物本骨架化合物的的UVUV光譜相光譜相同，但并非是同，但并非是同一化合物同一化合物二、天然產(chǎn)物化學(xué)成分的結(jié)構(gòu)鑒定 測(cè)定范圍測(cè)定范圍 波數(shù)波數(shù)6006004000cm 4000cm -1 -1之間，其中之間，其中1500cm1500cm-1 -1以上為化合物的特征基團(tuán)區(qū)，以上為化合物的特征基團(tuán)區(qū)，1500-600cm1500-600cm-1 -1為指紋為指紋區(qū)。區(qū)。 作用作用 主要用于定性分析，功能基的確認(rèn)，芳環(huán)取主要用于定性分析，功能基的確認(rèn)，芳環(huán)取代類型的判斷等。代類型的判斷等。 優(yōu)點(diǎn)：優(yōu)點(diǎn)： uu 液態(tài)、固態(tài)樣品均可測(cè)定；液態(tài)、固態(tài)樣品均可測(cè)定； uu

50、 常規(guī)紅外光譜儀價(jià)格低廉；常規(guī)紅外光譜儀價(jià)格低廉； uu 樣品用量少（只需樣品用量少（只需5-10 g5-10 g）二、天然產(chǎn)物化學(xué)成分的結(jié)構(gòu)鑒定紅外光譜的吸收區(qū)域可簡(jiǎn)單分為如下幾部分：紅外光譜的吸收區(qū)域可簡(jiǎn)單分為如下幾部分：（1 1）3750-2500 cm3750-2500 cm-1 -1：各類各類X-HX-H單鍵的伸縮振動(dòng)區(qū)，單鍵的伸縮振動(dòng)區(qū)，如如N-HN-H、O-HO-H、C-HC-H。（2 2）2500-2000 cm2500-2000 cm-1 -1：叁鍵和積累雙鍵的伸縮振動(dòng)區(qū)。叁鍵和積累雙鍵的伸縮振動(dòng)區(qū)。（3 3）2000-1300 cm2000-1300 cm-1 -1：雙鍵伸

51、縮振動(dòng)區(qū)。雙鍵伸縮振動(dòng)區(qū)。（4 4）1300-1000 cm1300-1000 cm-1 -1：包括包括C-CC-C、C-OC-O、C-NC-N、C-FC-F等單等單鍵的伸縮振動(dòng)和碳硫、氧硫、磷氧等雙鍵的伸縮振動(dòng)。鍵的伸縮振動(dòng)和碳硫、氧硫、磷氧等雙鍵的伸縮振動(dòng)。（5 5）1000-667 cm1000-667 cm-1 -1：包括包括C-HC-H的彎曲振動(dòng)。在鑒別鏈的彎曲振動(dòng)。在鑒別鏈的長(zhǎng)、短，烯烴雙鍵取代程度、構(gòu)型及苯環(huán)取代基位置的長(zhǎng)、短，烯烴雙鍵取代程度、構(gòu)型及苯環(huán)取代基位置等方面，提供有用的信息。等方面，提供有用的信息。-OH-C-O-CH3OH本章思考題：本章思考題： 1中草藥有效成分

52、的提取方法有哪些？其各自的使用范圍及其優(yōu)缺點(diǎn)是什么？ 2. 分離中草藥成分常用的色譜方法有哪些？他們分別適用于哪些類別化合物的分離？各自最常用的洗脫劑及洗脫順序是什么？ 一、天然產(chǎn)物化學(xué)成分的預(yù)試驗(yàn)與提取u如何判斷極性？如何判斷極性？（1 1）各官能團(tuán)的極性順序（）各官能團(tuán)的極性順序（P P2222）（2）化合物的極性由分子中官能團(tuán)的種類、）化合物的極性由分子中官能團(tuán)的種類、數(shù)目及排列方式等綜合因素決定。數(shù)目及排列方式等綜合因素決定。如硬脂酸，極性很弱。如硬脂酸，極性很弱。（3）溶劑的極性可根據(jù)介電常數(shù)）溶劑的極性可根據(jù)介電常數(shù)()()的大小的大小判斷判斷。一、天然產(chǎn)物化學(xué)成分的預(yù)試驗(yàn)與提取1

53、. 1. 固定相或載體固定相或載體（1 1）常用的固定相）常用的固定相硅膠、硅藻土、氧化鋁、微晶纖維素等硅膠、硅藻土、氧化鋁、微晶纖維素等（2 2）粒度）粒度 一般要求直徑為一般要求直徑為101040m40m。太粗，分離效太粗，分離效果差，太細(xì)，難以鋪層。果差，太細(xì)，難以鋪層。2. 2. 展開(kāi)劑展開(kāi)劑一、天然產(chǎn)物化學(xué)成分的預(yù)試驗(yàn)與提?。? 1）R Rf f值值R Rf f= =展開(kāi)后原點(diǎn)與斑點(diǎn)的距離展開(kāi)后原點(diǎn)與斑點(diǎn)的距離/ /原點(diǎn)與溶劑前沿間距離原點(diǎn)與溶劑前沿間距離化合物極性小，化合物極性小，R Rf f值大；值大；展開(kāi)劑極性越大，同一化合展開(kāi)劑極性越大，同一化合物物R Rf f值越大值越大一

54、、天然產(chǎn)物化學(xué)成分的預(yù)試驗(yàn)與提取(2)(2)展開(kāi)劑的選擇展開(kāi)劑的選擇 不與樣品起化學(xué)反應(yīng)；對(duì)顯色劑不與樣品起化學(xué)反應(yīng)；對(duì)顯色劑無(wú)不良影響；組分恒定無(wú)不良影響；組分恒定, ,不因溫度不因溫度的變化而變化；的變化而變化； 被分離物的被分離物的R Rf f值在值在0.050.05 0.85, 0.85, 二二種成分的種成分的R Rf f值之差大于值之差大于0.050.05，以免，以免斑點(diǎn)重疊。鑒定單一化合物斑點(diǎn)重疊。鑒定單一化合物R Rf f值在值在0.40.4 0.60.6，斑點(diǎn)圓而集中，界線清，斑點(diǎn)圓而集中，界線清晰，分布適中。晰，分布適中。 一、天然產(chǎn)物化學(xué)成分的預(yù)試驗(yàn)與提取 若大部分斑點(diǎn)近于

55、起始若大部分斑點(diǎn)近于起始線，表明溶劑極性太小，應(yīng)線，表明溶劑極性太小，應(yīng)加大極性溶劑的比例。若近加大極性溶劑的比例。若近于溶劑前沿則相反。于溶劑前沿則相反。 某化合物用某化合物用10ml10ml氯仿作展氯仿作展開(kāi)劑開(kāi)劑, ,薄層色譜后其薄層色譜后其R Rf f值很小值很小, ,接近于起始線接近于起始線, ,該如何處理該如何處理? ? 加大展開(kāi)劑的極性加大展開(kāi)劑的極性: :改變組改變組成成: : 如氯仿如氯仿- -丙酮，氯仿丙酮，氯仿- -甲醇；甲醇；改變配比改變配比: : 如如9:1, 8:2, 5:59:1, 8:2, 5:5一、天然產(chǎn)物化學(xué)成分的預(yù)試驗(yàn)與提取a a點(diǎn)樣點(diǎn)樣 樣品的溶解：揮發(fā)性較高的溶劑，避免用水、甲醇（易使樣品的溶解：揮發(fā)性較高的溶劑，避免用水、甲醇（易使斑點(diǎn)擴(kuò)散、影響吸附劑活性）斑點(diǎn)擴(kuò)散、影響吸附劑活性） 點(diǎn)樣位置：基線（距底邊點(diǎn)樣位置：基線（距底邊2.0cm2.0cm） 點(diǎn)樣直徑：擴(kuò)散點(diǎn)樣直徑：擴(kuò)散 2-3 mm 2-3 mm 可反復(fù)點(diǎn)樣（等溶劑揮發(fā)后）可反復(fù)點(diǎn)樣（等溶劑揮發(fā)后） 點(diǎn)樣量：太少，不易檢出；太多，斑點(diǎn)大，交叉點(diǎn)樣量：太少，不易檢出；太多，斑點(diǎn)大，交叉b. b.展開(kāi)展開(kāi): : 浸