第三章紫外可見分光光度法

1、第二章第二章第二章第二章第二章第二章 紫外紫外紫外紫外紫外紫外- - -可見分可見分可見分可見分可見分可見分光光度法光光度法光光度法光光度法光光度法光光度法(UV-(UV-(UV-visvisvis) ) )第一節(jié)第一節(jié) 光譜基礎(chǔ)光譜基礎(chǔ)一、定義；一、定義；一、定義；一、定義；一、定義；一、定義；二、特點(diǎn)；二、特點(diǎn)；二、特點(diǎn)；二、特點(diǎn)；二、特點(diǎn)；二、特點(diǎn)；三、產(chǎn)生；三、產(chǎn)生；三、產(chǎn)生；三、產(chǎn)生；三、產(chǎn)生；三、產(chǎn)生；四、光的吸收定律。四、光的吸收定律。四、光的吸收定律。四、光的吸收定律。四、光的吸收定律。四、光的吸收定律。1 1 1一、紫外一、紫外- -可見分光光度法可見分光光度法定義：定義：

2、研究物質(zhì)在研究物質(zhì)在研究物質(zhì)在 紫外、可見光區(qū)紫外、可見光區(qū)紫外、可見光區(qū)紫外、可見光區(qū)紫外、可見光區(qū)紫外、可見光區(qū) 的的的分子吸收分子吸收分子吸收分子吸收分子吸收分子吸收光譜光譜光譜光譜光譜光譜 的分析方法稱為紫外的分析方法稱為紫外的分析方法稱為紫外- - -可見分光光度法，可見分光光度法，可見分光光度法，又稱為紫外又稱為紫外又稱為紫外- - -可見可見可見( ( (分子分子分子) ) )吸收光譜法。吸收光譜法。吸收光譜法。 紫外紫外紫外- - -可見分光光度法是利用某些物質(zhì)的可見分光光度法是利用某些物質(zhì)的可見分光光度法是利用某些物質(zhì)的分子吸收分子吸收分子吸收200200200 800 nm

3、800 nm800 nm光譜區(qū)的輻射來進(jìn)行分光譜區(qū)的輻射來進(jìn)行分光譜區(qū)的輻射來進(jìn)行分析測定的方法。析測定的方法。析測定的方法。 2 2 2 這種分子吸收光譜產(chǎn)生于這種分子吸收光譜產(chǎn)生于這種分子吸收光譜產(chǎn)生于價(jià)電子價(jià)電子價(jià)電子價(jià)電子價(jià)電子價(jià)電子在在在電子電子電子電子電子電子能級間的躍遷能級間的躍遷能級間的躍遷能級間的躍遷能級間的躍遷能級間的躍遷，廣泛用于無機(jī)和有機(jī)物質(zhì)的廣泛用于無機(jī)和有機(jī)物質(zhì)的廣泛用于無機(jī)和有機(jī)物質(zhì)的定性和定量測定。定性和定量測定。定性和定量測定。 吸收光的波長范圍：吸收光的波長范圍：吸收光的波長范圍：吸收光的波長范圍：吸收光的波長范圍：吸收光的波長范圍：200-800 nm:2

4、00-800 nm:200-800 nm: (1) (1) (1)（近）紫外光區(qū)（近）紫外光區(qū)（近）紫外光區(qū)（近）紫外光區(qū)（近）紫外光區(qū)（近）紫外光區(qū): : : 200-400 200-400 200-400 nm nm nm (2) (2) (2) 可見光區(qū)可見光區(qū)可見光區(qū)可見光區(qū)可見光區(qū)可見光區(qū): : : 400-400-400-800 nm800 nm800 nm (3) (3) (3) 遠(yuǎn)紫外區(qū)：遠(yuǎn)紫外區(qū)：遠(yuǎn)紫外區(qū)：遠(yuǎn)紫外區(qū)：遠(yuǎn)紫外區(qū)：遠(yuǎn)紫外區(qū)：10-200 10-200 10-200 nmnmnm3 3 3二、紫外二、紫外二、紫外二、紫外二、紫外二、紫外- - -可見分光光度法可見分

5、光光度法可見分光光度法可見分光光度法可見分光光度法可見分光光度法特點(diǎn)特點(diǎn)特點(diǎn)特點(diǎn)特點(diǎn)特點(diǎn) 1 1 儀器設(shè)備和操作都比較簡單，價(jià)格儀器設(shè)備和操作都比較簡單，價(jià)格 低，分析速度較快。低，分析速度較快。 2 2 靈敏度較高。靈敏度較高。 3 3 有較好的選擇性。有較好的選擇性。通過適當(dāng)?shù)剡x擇測通過適當(dāng)?shù)剡x擇測 量條件，一般可在多種組分共存的體量條件，一般可在多種組分共存的體 系中，對某一種物質(zhì)進(jìn)行測定。系中，對某一種物質(zhì)進(jìn)行測定。4 4 4 4 4 精密度和準(zhǔn)確度較高。精密度和準(zhǔn)確度較高。在儀器設(shè)備和其在儀器設(shè)備和其 他測量條件較好的情況下，其相對誤差他測量條件較好的情況下，其相對誤差 可減小到可減

6、小到1 1一一2 2。 5 5 用途廣泛。用途廣泛。醫(yī)藥、化工、冶金、環(huán)境保醫(yī)藥、化工、冶金、環(huán)境保 護(hù)、地質(zhì)等諸多領(lǐng)域護(hù)、地質(zhì)等諸多領(lǐng)域-已成為必不可已成為必不可 少的測試手段之一。少的測試手段之一。5 5 5三、三、三、三、三、三、紫外-可見吸收光譜的產(chǎn)生 1.1.1.1.1.1.分子吸收光譜的產(chǎn)生分子吸收光譜的產(chǎn)生分子吸收光譜的產(chǎn)生分子吸收光譜的產(chǎn)生分子吸收光譜的產(chǎn)生分子吸收光譜的產(chǎn)生由能級間的躍遷引起由能級間的躍遷引起由能級間的躍遷引起由能級間的躍遷引起由能級間的躍遷引起由能級間的躍遷引起 物質(zhì)分子內(nèi)部三種運(yùn)動形式：物質(zhì)分子內(nèi)部三種運(yùn)動形式：物質(zhì)分子內(nèi)部三種運(yùn)動形式：物質(zhì)分子內(nèi)部三種運(yùn)

7、動形式：物質(zhì)分子內(nèi)部三種運(yùn)動形式：物質(zhì)分子內(nèi)部三種運(yùn)動形式： （1 1 1）電子相對于原子核的運(yùn)動）電子相對于原子核的運(yùn)動）電子相對于原子核的運(yùn)動）電子相對于原子核的運(yùn)動）電子相對于原子核的運(yùn)動）電子相對于原子核的運(yùn)動 （2 2 2）原子核在其平衡位置附近的）原子核在其平衡位置附近的）原子核在其平衡位置附近的）原子核在其平衡位置附近的）原子核在其平衡位置附近的）原子核在其平衡位置附近的相對振動相對振動相對振動相對振動相對振動相對振動 （3 3 3）分子本身繞其重心的轉(zhuǎn)動）分子本身繞其重心的轉(zhuǎn)動）分子本身繞其重心的轉(zhuǎn)動）分子本身繞其重心的轉(zhuǎn)動）分子本身繞其重心的轉(zhuǎn)動）分子本身繞其重心的轉(zhuǎn)動 分子

8、具有三種不同能級：電子能級、振動能級分子具有三種不同能級：電子能級、振動能級分子具有三種不同能級：電子能級、振動能級分子具有三種不同能級：電子能級、振動能級分子具有三種不同能級：電子能級、振動能級分子具有三種不同能級：電子能級、振動能級和轉(zhuǎn)動能級和轉(zhuǎn)動能級和轉(zhuǎn)動能級和轉(zhuǎn)動能級和轉(zhuǎn)動能級和轉(zhuǎn)動能級 6 6 6 三種能級都是量子化的，且各自具有相應(yīng)三種能級都是量子化的，且各自具有相應(yīng)三種能級都是量子化的，且各自具有相應(yīng)三種能級都是量子化的，且各自具有相應(yīng)三種能級都是量子化的，且各自具有相應(yīng)三種能級都是量子化的，且各自具有相應(yīng) 的能量的能量的能量的能量的能量的能量 分子的內(nèi)能：電子能量分子的內(nèi)能：電

9、子能量分子的內(nèi)能：電子能量分子的內(nèi)能：電子能量分子的內(nèi)能：電子能量分子的內(nèi)能：電子能量E E E E E Ee e e e e e 、振動能量振動能量振動能量振動能量振動能量振動能量E E E E E Ev v v v v v 、 轉(zhuǎn)動能量轉(zhuǎn)動能量轉(zhuǎn)動能量轉(zhuǎn)動能量轉(zhuǎn)動能量轉(zhuǎn)動能量E E E E E Er r r r r r 即即即即即即 E E E E E EE E E E E Ee e e e e e+ + + + + +E E E E E Ev v v v v v+ + + + + +E E E E E Er r r r r r 分子內(nèi)運(yùn)動涉及三種躍遷能級，所需能量分子內(nèi)運(yùn)動涉及三種躍遷能

10、級，所需能量分子內(nèi)運(yùn)動涉及三種躍遷能級，所需能量分子內(nèi)運(yùn)動涉及三種躍遷能級，所需能量分子內(nèi)運(yùn)動涉及三種躍遷能級，所需能量分子內(nèi)運(yùn)動涉及三種躍遷能級，所需能量 大小順序：大小順序：大小順序：大小順序：大小順序：大小順序： e e ev v vr r r 7 7 7 若用一連續(xù)的電磁輻射照射樣品分子，將照射若用一連續(xù)的電磁輻射照射樣品分子，將照射前后的光強(qiáng)度變化轉(zhuǎn)變?yōu)殡娦盘柌⒂涗浵聛?，就可前后的光?qiáng)度變化轉(zhuǎn)變?yōu)殡娦盘柌⒂涗浵聛恚涂傻玫焦鈴?qiáng)度變化對波長的關(guān)系曲線，即為得到光強(qiáng)度變化對波長的關(guān)系曲線，即為分子吸收分子吸收光譜。光譜。躍遷：躍遷：躍遷：躍遷：躍遷：躍遷：電子受激發(fā)，從低能級轉(zhuǎn)移到高能級

11、的過程。電子受激發(fā)，從低能級轉(zhuǎn)移到高能級的過程。電子受激發(fā)，從低能級轉(zhuǎn)移到高能級的過程。電子受激發(fā)，從低能級轉(zhuǎn)移到高能級的過程。電子受激發(fā)，從低能級轉(zhuǎn)移到高能級的過程。電子受激發(fā)，從低能級轉(zhuǎn)移到高能級的過程。 分子只有分子只有分子只有分子只有分子只有分子只有選擇性的吸收選擇性的吸收選擇性的吸收選擇性的吸收選擇性的吸收選擇性的吸收( ( (h h h = = = E E E) ) )某些波長某些波長某些波長某些波長某些波長某些波長（頻率）的光才能由較低的能級躍遷到較高能級上。（頻率）的光才能由較低的能級躍遷到較高能級上。（頻率）的光才能由較低的能級躍遷到較高能級上。（頻率）的光才能由較低的能級躍

12、遷到較高能級上。（頻率）的光才能由較低的能級躍遷到較高能級上。（頻率）的光才能由較低的能級躍遷到較高能級上。8 8 8（1 1 1 1 1 1）轉(zhuǎn)動能級間的能量差）轉(zhuǎn)動能級間的能量差）轉(zhuǎn)動能級間的能量差）轉(zhuǎn)動能級間的能量差）轉(zhuǎn)動能級間的能量差）轉(zhuǎn)動能級間的能量差E E E E E Er r r r r r：0.0050.0050.0050.0050.0050.0050.050 0.050 0.050 0.050 0.050 0.050 eVeVeVeVeVeV， 躍遷產(chǎn)生吸收光譜位于遠(yuǎn)紅外區(qū)，稱為躍遷產(chǎn)生吸收光譜位于遠(yuǎn)紅外區(qū)，稱為躍遷產(chǎn)生吸收光譜位于遠(yuǎn)紅外區(qū)，稱為躍遷產(chǎn)生吸收光譜位于遠(yuǎn)紅外區(qū)，

13、稱為躍遷產(chǎn)生吸收光譜位于遠(yuǎn)紅外區(qū)，稱為躍遷產(chǎn)生吸收光譜位于遠(yuǎn)紅外區(qū)，稱為遠(yuǎn)紅外遠(yuǎn)紅外遠(yuǎn)紅外遠(yuǎn)紅外遠(yuǎn)紅外遠(yuǎn)紅外 光譜或分子轉(zhuǎn)動光譜光譜或分子轉(zhuǎn)動光譜光譜或分子轉(zhuǎn)動光譜光譜或分子轉(zhuǎn)動光譜光譜或分子轉(zhuǎn)動光譜光譜或分子轉(zhuǎn)動光譜；（2 2 2 2 2 2）振動能級的能量差）振動能級的能量差）振動能級的能量差）振動能級的能量差）振動能級的能量差）振動能級的能量差E E E E E Ev v v v v v約為：約為：約為：約為：約為：約為：0.050.050.050.050.050.05eVeVeVeVeVeV，躍躍躍躍躍躍 遷產(chǎn)生的吸收光譜位于紅外區(qū)，稱為遷產(chǎn)生的吸收光譜位于紅外區(qū)，稱為遷產(chǎn)生的吸收光譜

14、位于紅外區(qū)，稱為遷產(chǎn)生的吸收光譜位于紅外區(qū)，稱為遷產(chǎn)生的吸收光譜位于紅外區(qū)，稱為遷產(chǎn)生的吸收光譜位于紅外區(qū)，稱為紅外光譜紅外光譜紅外光譜紅外光譜紅外光譜紅外光譜 或分子振動光譜或分子振動光譜或分子振動光譜或分子振動光譜或分子振動光譜或分子振動光譜；（3 3 3 3 3 3）電子能級的能量差）電子能級的能量差）電子能級的能量差）電子能級的能量差）電子能級的能量差）電子能級的能量差E E E E E Ee e e e e e較大較大較大較大較大較大1 1 1 1 1 120 20 20 20 20 20 eVeVeVeVeVeV。電子躍電子躍電子躍電子躍電子躍電子躍 遷產(chǎn)生的吸收光譜在紫外遷產(chǎn)生的

15、吸收光譜在紫外遷產(chǎn)生的吸收光譜在紫外遷產(chǎn)生的吸收光譜在紫外遷產(chǎn)生的吸收光譜在紫外遷產(chǎn)生的吸收光譜在紫外- - - - - -可見光區(qū)，稱為可見光區(qū)，稱為可見光區(qū)，稱為可見光區(qū)，稱為可見光區(qū)，稱為可見光區(qū)，稱為紫紫紫紫紫紫 外外外外外外- - - - - -可見光譜或分子的電子光譜可見光譜或分子的電子光譜可見光譜或分子的電子光譜可見光譜或分子的電子光譜可見光譜或分子的電子光譜可見光譜或分子的電子光譜2 2 2 2 2 2能級躍遷的討論能級躍遷的討論能級躍遷的討論能級躍遷的討論能級躍遷的討論能級躍遷的討論9 9 9 （4 4 4 4 4 4）吸收光譜的波長分布是由產(chǎn)生譜帶的躍遷能級間）吸收光譜的波

16、長分布是由產(chǎn)生譜帶的躍遷能級間）吸收光譜的波長分布是由產(chǎn)生譜帶的躍遷能級間）吸收光譜的波長分布是由產(chǎn)生譜帶的躍遷能級間）吸收光譜的波長分布是由產(chǎn)生譜帶的躍遷能級間）吸收光譜的波長分布是由產(chǎn)生譜帶的躍遷能級間的能量差所決定，反映了分子內(nèi)部能級分布狀況，是的能量差所決定，反映了分子內(nèi)部能級分布狀況，是的能量差所決定，反映了分子內(nèi)部能級分布狀況，是的能量差所決定，反映了分子內(nèi)部能級分布狀況，是的能量差所決定，反映了分子內(nèi)部能級分布狀況，是的能量差所決定，反映了分子內(nèi)部能級分布狀況，是物物物物物物質(zhì)定性質(zhì)定性質(zhì)定性質(zhì)定性質(zhì)定性質(zhì)定性的依據(jù)。的依據(jù)。的依據(jù)。的依據(jù)。的依據(jù)。的依據(jù)。 （5 5 5 5 5

17、 5）吸收譜帶的強(qiáng)度與分子偶極矩變化、躍遷概率有）吸收譜帶的強(qiáng)度與分子偶極矩變化、躍遷概率有）吸收譜帶的強(qiáng)度與分子偶極矩變化、躍遷概率有）吸收譜帶的強(qiáng)度與分子偶極矩變化、躍遷概率有）吸收譜帶的強(qiáng)度與分子偶極矩變化、躍遷概率有）吸收譜帶的強(qiáng)度與分子偶極矩變化、躍遷概率有關(guān)，也提供分子結(jié)構(gòu)的信息。通常將在最大吸收波長處關(guān)，也提供分子結(jié)構(gòu)的信息。通常將在最大吸收波長處關(guān)，也提供分子結(jié)構(gòu)的信息。通常將在最大吸收波長處關(guān)，也提供分子結(jié)構(gòu)的信息。通常將在最大吸收波長處關(guān)，也提供分子結(jié)構(gòu)的信息。通常將在最大吸收波長處關(guān)，也提供分子結(jié)構(gòu)的信息。通常將在最大吸收波長處測得的摩爾吸光系數(shù)測得的摩爾吸光系數(shù)測得的摩

18、爾吸光系數(shù)測得的摩爾吸光系數(shù)測得的摩爾吸光系數(shù)測得的摩爾吸光系數(shù)maxmaxmax也作為定性的依據(jù)。也作為定性的依據(jù)。也作為定性的依據(jù)。也作為定性的依據(jù)。也作為定性的依據(jù)。也作為定性的依據(jù)。不同物質(zhì)不同物質(zhì)不同物質(zhì)不同物質(zhì)不同物質(zhì)不同物質(zhì)的的的的的的 maxmaxmax有時(shí)可能相同，但有時(shí)可能相同，但有時(shí)可能相同，但有時(shí)可能相同，但有時(shí)可能相同，但有時(shí)可能相同，但maxmaxmax不一定相同。不一定相同。不一定相同。不一定相同。不一定相同。不一定相同。 （6 6 6 6 6 6）吸收譜帶強(qiáng)度與該物質(zhì)分子吸收的光子數(shù)成正比）吸收譜帶強(qiáng)度與該物質(zhì)分子吸收的光子數(shù)成正比）吸收譜帶強(qiáng)度與該物質(zhì)分子吸收

19、的光子數(shù)成正比）吸收譜帶強(qiáng)度與該物質(zhì)分子吸收的光子數(shù)成正比）吸收譜帶強(qiáng)度與該物質(zhì)分子吸收的光子數(shù)成正比）吸收譜帶強(qiáng)度與該物質(zhì)分子吸收的光子數(shù)成正比, , , , , ,定量分析定量分析定量分析定量分析定量分析定量分析的依據(jù)。的依據(jù)。的依據(jù)。的依據(jù)。的依據(jù)。的依據(jù)。101010 由于分子吸收紫外由于分子吸收紫外由于分子吸收紫外由于分子吸收紫外由于分子吸收紫外由于分子吸收紫外- - - - - -可見光區(qū)的電磁輻射，分可見光區(qū)的電磁輻射，分可見光區(qū)的電磁輻射，分可見光區(qū)的電磁輻射，分可見光區(qū)的電磁輻射，分可見光區(qū)的電磁輻射，分子中價(jià)電子（或外層電子）的能級躍遷而產(chǎn)生紫子中價(jià)電子（或外層電子）的能級

20、躍遷而產(chǎn)生紫子中價(jià)電子（或外層電子）的能級躍遷而產(chǎn)生紫子中價(jià)電子（或外層電子）的能級躍遷而產(chǎn)生紫子中價(jià)電子（或外層電子）的能級躍遷而產(chǎn)生紫子中價(jià)電子（或外層電子）的能級躍遷而產(chǎn)生紫外外外外外外- - - - - -可見吸收光譜?？梢娢展庾V?？梢娢展庾V?？梢娢展庾V?？梢娢展庾V?？梢娢展庾V。 電子能級電子能級電子能級電子能級電子能級電子能級間躍遷的同時(shí)總伴隨有振動和轉(zhuǎn)動間躍遷的同時(shí)總伴隨有振動和轉(zhuǎn)動間躍遷的同時(shí)總伴隨有振動和轉(zhuǎn)動間躍遷的同時(shí)總伴隨有振動和轉(zhuǎn)動間躍遷的同時(shí)總伴隨有振動和轉(zhuǎn)動間躍遷的同時(shí)總伴隨有振動和轉(zhuǎn)動能級間的躍遷。即電子光譜中總包含有振動能級能級間的躍遷。即電子光譜中總包

21、含有振動能級能級間的躍遷。即電子光譜中總包含有振動能級能級間的躍遷。即電子光譜中總包含有振動能級能級間的躍遷。即電子光譜中總包含有振動能級能級間的躍遷。即電子光譜中總包含有振動能級和轉(zhuǎn)動能級間躍遷產(chǎn)生的若干譜線而呈現(xiàn)寬譜帶，和轉(zhuǎn)動能級間躍遷產(chǎn)生的若干譜線而呈現(xiàn)寬譜帶，和轉(zhuǎn)動能級間躍遷產(chǎn)生的若干譜線而呈現(xiàn)寬譜帶，和轉(zhuǎn)動能級間躍遷產(chǎn)生的若干譜線而呈現(xiàn)寬譜帶，和轉(zhuǎn)動能級間躍遷產(chǎn)生的若干譜線而呈現(xiàn)寬譜帶，和轉(zhuǎn)動能級間躍遷產(chǎn)生的若干譜線而呈現(xiàn)寬譜帶，即即即即即即帶狀光譜。帶狀光譜。帶狀光譜。帶狀光譜。帶狀光譜。帶狀光譜。 （線狀光譜）（線狀光譜）（線狀光譜）（線狀光譜）（線狀光譜）（線狀光譜）3 3 3

22、紫外紫外紫外- - -可見吸收光譜的產(chǎn)生可見吸收光譜的產(chǎn)生可見吸收光譜的產(chǎn)生111111四、光的吸收定律四、光的吸收定律四、光的吸收定律四、光的吸收定律四、光的吸收定律四、光的吸收定律 1.1.1.1.1.1.朗伯朗伯朗伯朗伯朗伯朗伯比耳定律比耳定律比耳定律比耳定律比耳定律比耳定律 布格布格布格布格布格布格( ( ( ( ( (Bouguer)Bouguer)Bouguer)Bouguer)Bouguer)Bouguer)和朗伯和朗伯和朗伯和朗伯和朗伯和朗伯( ( ( ( ( (Lambert)Lambert)Lambert)Lambert)Lambert)Lambert)先后于先后于先后于先

23、后于先后于先后于172917291729172917291729年和年和年和年和年和年和176017601760176017601760年闡明了光的吸收程度和吸收層厚度的關(guān)系。年闡明了光的吸收程度和吸收層厚度的關(guān)系。年闡明了光的吸收程度和吸收層厚度的關(guān)系。年闡明了光的吸收程度和吸收層厚度的關(guān)系。年闡明了光的吸收程度和吸收層厚度的關(guān)系。年闡明了光的吸收程度和吸收層厚度的關(guān)系。A A A A A A 185218521852185218521852年比耳年比耳年比耳年比耳年比耳年比耳( ( ( ( ( (Beer)Beer)Beer)Beer)Beer)Beer)又提出了光的吸收程度和吸收物又提出

24、了光的吸收程度和吸收物又提出了光的吸收程度和吸收物又提出了光的吸收程度和吸收物又提出了光的吸收程度和吸收物又提出了光的吸收程度和吸收物濃度之間也具有類似的關(guān)系。濃度之間也具有類似的關(guān)系。濃度之間也具有類似的關(guān)系。濃度之間也具有類似的關(guān)系。濃度之間也具有類似的關(guān)系。濃度之間也具有類似的關(guān)系。A A A A A A c c c c c c 二者的結(jié)合稱為朗伯二者的結(jié)合稱為朗伯二者的結(jié)合稱為朗伯二者的結(jié)合稱為朗伯二者的結(jié)合稱為朗伯二者的結(jié)合稱為朗伯比耳定律，其數(shù)學(xué)表達(dá)式為：比耳定律，其數(shù)學(xué)表達(dá)式為：比耳定律，其數(shù)學(xué)表達(dá)式為：比耳定律，其數(shù)學(xué)表達(dá)式為：比耳定律，其數(shù)學(xué)表達(dá)式為：比耳定律，其數(shù)學(xué)表達(dá)式為

25、： 121212朗伯朗伯朗伯朗伯朗伯朗伯比耳定律數(shù)學(xué)表達(dá)式比耳定律數(shù)學(xué)表達(dá)式比耳定律數(shù)學(xué)表達(dá)式比耳定律數(shù)學(xué)表達(dá)式比耳定律數(shù)學(xué)表達(dá)式比耳定律數(shù)學(xué)表達(dá)式 A A Alglg lg（I I I0 0 0/ / /I I It t t)= )= )= EL cEL cEL c 式中式中式中式中式中式中A A A A A A：吸光度；描述溶液對光的吸收程度；吸光度；描述溶液對光的吸收程度；吸光度；描述溶液對光的吸收程度；吸光度；描述溶液對光的吸收程度；吸光度；描述溶液對光的吸收程度；吸光度；描述溶液對光的吸收程度； L L L L L L：液層厚度液層厚度液層厚度液層厚度液層厚度液層厚度( ( ( (

26、( (光程長度光程長度光程長度光程長度光程長度光程長度) ) ) ) ) )，通常以，通常以，通常以，通常以，通常以，通常以cmcmcmcmcmcm為單位；為單位；為單位；為單位；為單位；為單位； c c c c c c：溶液的濃度溶液的濃度溶液的濃度溶液的濃度溶液的濃度溶液的濃度； E E E E E E：吸光系數(shù)吸光系數(shù)吸光系數(shù)吸光系數(shù)吸光系數(shù)吸光系數(shù)； 1313132 2 2 2 2 2吸光系數(shù)吸光系數(shù)吸光系數(shù)吸光系數(shù)吸光系數(shù)吸光系數(shù)E E E E E E常有兩種表示法：常有兩種表示法：常有兩種表示法：常有兩種表示法：常有兩種表示法：常有兩種表示法： 1 1 1 1 1 1）摩爾吸光系數(shù)

27、）摩爾吸光系數(shù)）摩爾吸光系數(shù)）摩爾吸光系數(shù)）摩爾吸光系數(shù)）摩爾吸光系數(shù)( ( ( ( ( (單位：單位：單位：單位：單位：單位：LmolLmolLmol-1-1-1 cm cm cm -1-1-1 ) ) ) ) ) )，：，：，：，：，：，： 在一定在一定在一定在一定在一定在一定下，下，下，下，下，下，C=1 mol/LC=1 mol/LC=1 mol/LC=1 mol/LC=1 mol/LC=1 mol/L，L=1cmL=1cmL=1cmL=1cmL=1cmL=1cm時(shí)的吸光度。時(shí)的吸光度。時(shí)的吸光度。時(shí)的吸光度。時(shí)的吸光度。時(shí)的吸光度。 2 2 2 2 2 2）百分含量吸光系數(shù)或比吸光系

28、數(shù)）百分含量吸光系數(shù)或比吸光系數(shù)）百分含量吸光系數(shù)或比吸光系數(shù)）百分含量吸光系數(shù)或比吸光系數(shù)）百分含量吸光系數(shù)或比吸光系數(shù)）百分含量吸光系數(shù)或比吸光系數(shù) ( ( (單位：單位：單位：單位：單位：單位：100m100m100mLgLgLg-1-1-1 cm cm cm -1-1-1 ) ) ) ： 在一定在一定在一定在一定在一定在一定下，下，下，下，下，下，C=1g/100mLC=1g/100mLC=1g/100mLC=1g/100mLC=1g/100mLC=1g/100mL，L=1cmL=1cmL=1cmL=1cmL=1cmL=1cm時(shí)的吸光度。時(shí)的吸光度。時(shí)的吸光度。時(shí)的吸光度。時(shí)的吸光度。

29、時(shí)的吸光度。 3 3 3 3 3 3）兩者關(guān)系：）兩者關(guān)系：）兩者關(guān)系：）兩者關(guān)系：）兩者關(guān)系：）兩者關(guān)系：11cm1/M(mol)10ELc1cm100/1000(L)M%11Ecm141414透光度透光度透光度透光度透光度透光度( ( ( ( ( (透光率透光率透光率透光率透光率透光率) ) ) ) ) )T T T T T T透光度透光度透光度透光度透光度透光度T T T : : : 描述入射光透過溶液的程度描述入射光透過溶液的程度描述入射光透過溶液的程度描述入射光透過溶液的程度描述入射光透過溶液的程度描述入射光透過溶液的程度: : : T T T = = = I I I t t t /

30、 / / I I I0 0 0吸光度吸光度吸光度吸光度吸光度吸光度A A A與透光度與透光度與透光度與透光度與透光度與透光度T T T的關(guān)系的關(guān)系的關(guān)系的關(guān)系的關(guān)系的關(guān)系: : : A A A lg lg lg T T T 朗伯朗伯朗伯朗伯朗伯朗伯比耳定律是吸光光度法的比耳定律是吸光光度法的比耳定律是吸光光度法的比耳定律是吸光光度法的比耳定律是吸光光度法的比耳定律是吸光光度法的理論基礎(chǔ)和定量理論基礎(chǔ)和定量理論基礎(chǔ)和定量理論基礎(chǔ)和定量理論基礎(chǔ)和定量理論基礎(chǔ)和定量測定的依據(jù)。應(yīng)用于各種光度法的吸收測量測定的依據(jù)。應(yīng)用于各種光度法的吸收測量測定的依據(jù)。應(yīng)用于各種光度法的吸收測量測定的依據(jù)。應(yīng)用于各種

31、光度法的吸收測量測定的依據(jù)。應(yīng)用于各種光度法的吸收測量測定的依據(jù)。應(yīng)用于各種光度法的吸收測量；1515153.3.摩爾吸光系數(shù)摩爾吸光系數(shù)的討論的討論 （1 1 1 1 1 1）吸收物質(zhì)在）吸收物質(zhì)在）吸收物質(zhì)在）吸收物質(zhì)在）吸收物質(zhì)在）吸收物質(zhì)在一定波長和溶劑一定波長和溶劑一定波長和溶劑一定波長和溶劑一定波長和溶劑一定波長和溶劑條件下的條件下的條件下的條件下的條件下的條件下的特征常特征常特征常特征常特征常特征常數(shù)數(shù)數(shù)數(shù)數(shù)數(shù)； （2 2 2 2 2 2）不隨濃度不隨濃度不隨濃度不隨濃度不隨濃度不隨濃度c c c c c c和光程長度的改變而改變和光程長度的改變而改變和光程長度的改變而改變和光程

32、長度的改變而改變和光程長度的改變而改變和光程長度的改變而改變。在溫。在溫。在溫。在溫。在溫。在溫度和波長等條件一定時(shí)，度和波長等條件一定時(shí)，度和波長等條件一定時(shí)，度和波長等條件一定時(shí)，度和波長等條件一定時(shí)，度和波長等條件一定時(shí)，僅與吸收物質(zhì)本身的性質(zhì)僅與吸收物質(zhì)本身的性質(zhì)僅與吸收物質(zhì)本身的性質(zhì)僅與吸收物質(zhì)本身的性質(zhì)僅與吸收物質(zhì)本身的性質(zhì)僅與吸收物質(zhì)本身的性質(zhì)有關(guān)，與待測物濃度無關(guān)；有關(guān)，與待測物濃度無關(guān)；有關(guān)，與待測物濃度無關(guān)；有關(guān)，與待測物濃度無關(guān)；有關(guān)，與待測物濃度無關(guān)；有關(guān)，與待測物濃度無關(guān)； （3 3 3 3 3 3）可作為）可作為）可作為）可作為）可作為）可作為定性鑒定的參數(shù)定性鑒定

33、的參數(shù)定性鑒定的參數(shù)定性鑒定的參數(shù)定性鑒定的參數(shù)定性鑒定的參數(shù)； （4 4 4）同一吸收物質(zhì)在不同波長下的）同一吸收物質(zhì)在不同波長下的）同一吸收物質(zhì)在不同波長下的）同一吸收物質(zhì)在不同波長下的）同一吸收物質(zhì)在不同波長下的）同一吸收物質(zhì)在不同波長下的 值是不同的。值是不同的。值是不同的。值是不同的。值是不同的。值是不同的。在最大吸收波長在最大吸收波長在最大吸收波長在最大吸收波長在最大吸收波長在最大吸收波長 maxmaxmax處的摩爾吸光系數(shù)，常以處的摩爾吸光系數(shù)，常以處的摩爾吸光系數(shù)，常以處的摩爾吸光系數(shù)，常以處的摩爾吸光系數(shù)，常以處的摩爾吸光系數(shù)，常以 maxmaxmax表示表示表示表示表示表示

34、。161616 maxmaxmax表明了該表明了該表明了該表明了該表明了該表明了該吸收物質(zhì)最大限度的吸光能力吸收物質(zhì)最大限度的吸光能力吸收物質(zhì)最大限度的吸光能力吸收物質(zhì)最大限度的吸光能力吸收物質(zhì)最大限度的吸光能力吸收物質(zhì)最大限度的吸光能力，也反映，也反映，也反映，也反映，也反映，也反映了光度法測定該物質(zhì)可能達(dá)到的最大靈敏度。了光度法測定該物質(zhì)可能達(dá)到的最大靈敏度。了光度法測定該物質(zhì)可能達(dá)到的最大靈敏度。了光度法測定該物質(zhì)可能達(dá)到的最大靈敏度。了光度法測定該物質(zhì)可能達(dá)到的最大靈敏度。了光度法測定該物質(zhì)可能達(dá)到的最大靈敏度。 （5 5 5 5 5 5） maxmaxmax越大表明該物質(zhì)的吸光能力越

35、強(qiáng)，用光度法越大表明該物質(zhì)的吸光能力越強(qiáng)，用光度法越大表明該物質(zhì)的吸光能力越強(qiáng)，用光度法越大表明該物質(zhì)的吸光能力越強(qiáng)，用光度法越大表明該物質(zhì)的吸光能力越強(qiáng)，用光度法越大表明該物質(zhì)的吸光能力越強(qiáng)，用光度法測定該物質(zhì)的靈敏度越高。測定該物質(zhì)的靈敏度越高。測定該物質(zhì)的靈敏度越高。測定該物質(zhì)的靈敏度越高。測定該物質(zhì)的靈敏度越高。測定該物質(zhì)的靈敏度越高。 1010104 4 4： 強(qiáng)吸收；強(qiáng)吸收；強(qiáng)吸收；強(qiáng)吸收；強(qiáng)吸收；強(qiáng)吸收； 10 10 102 2 2 101010 4 4 4 ： 中強(qiáng)吸收；中強(qiáng)吸收；中強(qiáng)吸收；中強(qiáng)吸收；中強(qiáng)吸收；中強(qiáng)吸收； 1010102 2 2 ： 弱吸收。弱吸收。弱吸收。弱吸

36、收。弱吸收。弱吸收。1717174 4、偏離朗伯、偏離朗伯比耳定律的原因比耳定律的原因 （了解了解） 標(biāo)準(zhǔn)曲線法測定未知溶液的濃度時(shí)，發(fā)現(xiàn)：標(biāo)準(zhǔn)曲線標(biāo)準(zhǔn)曲線法測定未知溶液的濃度時(shí)，發(fā)現(xiàn)：標(biāo)準(zhǔn)曲線標(biāo)準(zhǔn)曲線法測定未知溶液的濃度時(shí)，發(fā)現(xiàn)：標(biāo)準(zhǔn)曲線標(biāo)準(zhǔn)曲線法測定未知溶液的濃度時(shí)，發(fā)現(xiàn)：標(biāo)準(zhǔn)曲線標(biāo)準(zhǔn)曲線法測定未知溶液的濃度時(shí)，發(fā)現(xiàn)：標(biāo)準(zhǔn)曲線標(biāo)準(zhǔn)曲線法測定未知溶液的濃度時(shí)，發(fā)現(xiàn)：標(biāo)準(zhǔn)曲線常發(fā)生彎曲（尤其當(dāng)溶液濃度較高時(shí)），這種現(xiàn)象稱為對常發(fā)生彎曲（尤其當(dāng)溶液濃度較高時(shí)），這種現(xiàn)象稱為對常發(fā)生彎曲（尤其當(dāng)溶液濃度較高時(shí)），這種現(xiàn)象稱為對常發(fā)生彎曲（尤其當(dāng)溶液濃度較高時(shí)），這種現(xiàn)象稱為對常發(fā)生彎曲（尤其當(dāng)溶液

37、濃度較高時(shí)），這種現(xiàn)象稱為對常發(fā)生彎曲（尤其當(dāng)溶液濃度較高時(shí)），這種現(xiàn)象稱為對朗伯朗伯朗伯朗伯朗伯朗伯比耳定律的偏離。比耳定律的偏離。比耳定律的偏離。比耳定律的偏離。比耳定律的偏離。比耳定律的偏離。 引起這種偏離的因素（兩大類）：引起這種偏離的因素（兩大類）：引起這種偏離的因素（兩大類）：引起這種偏離的因素（兩大類）：引起這種偏離的因素（兩大類）：引起這種偏離的因素（兩大類）： （1 1 1 1 1 1）物理性因素，即儀器的非理想引起的；）物理性因素，即儀器的非理想引起的；）物理性因素，即儀器的非理想引起的；）物理性因素，即儀器的非理想引起的；）物理性因素，即儀器的非理想引起的；）物理性因素，

38、即儀器的非理想引起的； （2 2 2 2 2 2）化學(xué)性因素。）化學(xué)性因素。）化學(xué)性因素。）化學(xué)性因素。）化學(xué)性因素。）化學(xué)性因素。181818（1）物理性因素物理性因素 難以獲得真正的純單色光難以獲得真正的純單色光難以獲得真正的純單色光難以獲得真正的純單色光難以獲得真正的純單色光難以獲得真正的純單色光。 朗伯朗伯朗伯朗伯朗伯朗伯比耳定律的前提條件之一是入射光為單色光。比耳定律的前提條件之一是入射光為單色光。比耳定律的前提條件之一是入射光為單色光。比耳定律的前提條件之一是入射光為單色光。比耳定律的前提條件之一是入射光為單色光。比耳定律的前提條件之一是入射光為單色光。 分光光度計(jì)只能獲得近乎單色

39、的狹窄光帶。復(fù)合光可導(dǎo)分光光度計(jì)只能獲得近乎單色的狹窄光帶。復(fù)合光可導(dǎo)分光光度計(jì)只能獲得近乎單色的狹窄光帶。復(fù)合光可導(dǎo)分光光度計(jì)只能獲得近乎單色的狹窄光帶。復(fù)合光可導(dǎo)分光光度計(jì)只能獲得近乎單色的狹窄光帶。復(fù)合光可導(dǎo)分光光度計(jì)只能獲得近乎單色的狹窄光帶。復(fù)合光可導(dǎo)致對朗伯致對朗伯致對朗伯致對朗伯致對朗伯致對朗伯比耳定律的正或負(fù)偏離。比耳定律的正或負(fù)偏離。比耳定律的正或負(fù)偏離。比耳定律的正或負(fù)偏離。比耳定律的正或負(fù)偏離。比耳定律的正或負(fù)偏離。 非單色光、雜散光、非平行入射非單色光、雜散光、非平行入射非單色光、雜散光、非平行入射非單色光、雜散光、非平行入射非單色光、雜散光、非平行入射非單色光、雜散光

40、、非平行入射光光光光光光都會引起對朗伯都會引起對朗伯都會引起對朗伯都會引起對朗伯都會引起對朗伯都會引起對朗伯比耳定律的偏離，比耳定律的偏離，比耳定律的偏離，比耳定律的偏離，比耳定律的偏離，比耳定律的偏離，其中其中其中其中其中其中非單色光非單色光非單色光非單色光非單色光非單色光是引起偏離的最主要的是引起偏離的最主要的是引起偏離的最主要的是引起偏離的最主要的是引起偏離的最主要的是引起偏離的最主要的因素因素因素因素因素因素。 191919(2) (2) 化學(xué)性因素化學(xué)性因素 朗伯朗伯朗伯朗伯朗伯朗伯比耳定律的假定：所有的吸光質(zhì)點(diǎn)之間不發(fā)生比耳定律的假定：所有的吸光質(zhì)點(diǎn)之間不發(fā)生比耳定律的假定：所有的

41、吸光質(zhì)點(diǎn)之間不發(fā)生比耳定律的假定：所有的吸光質(zhì)點(diǎn)之間不發(fā)生比耳定律的假定：所有的吸光質(zhì)點(diǎn)之間不發(fā)生比耳定律的假定：所有的吸光質(zhì)點(diǎn)之間不發(fā)生相互作用；相互作用；相互作用；相互作用；相互作用；相互作用；只有在稀溶液只有在稀溶液只有在稀溶液只有在稀溶液只有在稀溶液只有在稀溶液( ( (c c c101010 10 102 2 2 mol/L mol/L mol/L 時(shí)，吸光質(zhì)點(diǎn)間可能發(fā)生締合等時(shí)，吸光質(zhì)點(diǎn)間可能發(fā)生締合等時(shí)，吸光質(zhì)點(diǎn)間可能發(fā)生締合等時(shí)，吸光質(zhì)點(diǎn)間可能發(fā)生締合等時(shí)，吸光質(zhì)點(diǎn)間可能發(fā)生締合等時(shí)，吸光質(zhì)點(diǎn)間可能發(fā)生締合等相互作用，直接影響了對光的吸收。相互作用，直接影響了對光的吸收。相互作

42、用，直接影響了對光的吸收。相互作用，直接影響了對光的吸收。相互作用，直接影響了對光的吸收。相互作用，直接影響了對光的吸收。 故：朗伯故：朗伯故：朗伯故：朗伯故：朗伯故：朗伯比耳定律只適用于稀溶液比耳定律只適用于稀溶液比耳定律只適用于稀溶液比耳定律只適用于稀溶液比耳定律只適用于稀溶液比耳定律只適用于稀溶液。 溶液中存在著離解、聚合、互變異構(gòu)、配合物的形成等溶液中存在著離解、聚合、互變異構(gòu)、配合物的形成等溶液中存在著離解、聚合、互變異構(gòu)、配合物的形成等溶液中存在著離解、聚合、互變異構(gòu)、配合物的形成等溶液中存在著離解、聚合、互變異構(gòu)、配合物的形成等溶液中存在著離解、聚合、互變異構(gòu)、配合物的形成等化學(xué)

43、平衡時(shí)。使吸光質(zhì)點(diǎn)的濃度發(fā)生變化，影響吸光度?；瘜W(xué)平衡時(shí)。使吸光質(zhì)點(diǎn)的濃度發(fā)生變化，影響吸光度。化學(xué)平衡時(shí)。使吸光質(zhì)點(diǎn)的濃度發(fā)生變化，影響吸光度。化學(xué)平衡時(shí)。使吸光質(zhì)點(diǎn)的濃度發(fā)生變化，影響吸光度?；瘜W(xué)平衡時(shí)。使吸光質(zhì)點(diǎn)的濃度發(fā)生變化，影響吸光度。化學(xué)平衡時(shí)。使吸光質(zhì)點(diǎn)的濃度發(fā)生變化，影響吸光度。 例：例：例：例：例：例： 鉻酸鹽或重鉻酸鹽溶液中存在下列平衡：鉻酸鹽或重鉻酸鹽溶液中存在下列平衡：鉻酸鹽或重鉻酸鹽溶液中存在下列平衡：鉻酸鹽或重鉻酸鹽溶液中存在下列平衡：鉻酸鹽或重鉻酸鹽溶液中存在下列平衡：鉻酸鹽或重鉻酸鹽溶液中存在下列平衡： CrOCrOCrO4 4 42- 2- 2- 2 2 2H

44、 H H = = = Cr Cr Cr2 2 2O O O7 7 72- 2- 2- H H H2 2 2O O O 溶液中溶液中溶液中溶液中溶液中溶液中CrOCrOCrO4 4 42-2-2-、 Cr Cr Cr2 2 2O O O7 7 72-2-2-的顏色不同，吸光性質(zhì)也不相的顏色不同，吸光性質(zhì)也不相的顏色不同，吸光性質(zhì)也不相的顏色不同，吸光性質(zhì)也不相的顏色不同，吸光性質(zhì)也不相的顏色不同，吸光性質(zhì)也不相同。故此時(shí)溶液同。故此時(shí)溶液同。故此時(shí)溶液同。故此時(shí)溶液同。故此時(shí)溶液同。故此時(shí)溶液pH pH pH 對測定有重要影響。對測定有重要影響。對測定有重要影響。對測定有重要影響。對測定有重要影

45、響。對測定有重要影響。202020第二章第二章第二章第二章第二章第二章 紫外紫外紫外紫外紫外紫外- - - - - -可見分光可見分光可見分光可見分光可見分光可見分光光度法光度法光度法光度法光度法光度法一、紫外一、紫外- -可見分光光可見分光光度計(jì)的類型度計(jì)的類型二、構(gòu)成二、構(gòu)成第二節(jié)第二節(jié)第二節(jié)第二節(jié)第二節(jié)第二節(jié) 紫外紫外紫外紫外紫外紫外- - - - - -可見分光可見分光可見分光可見分光可見分光可見分光光度計(jì)光度計(jì)光度計(jì)光度計(jì)光度計(jì)光度計(jì)212121一、紫外一、紫外一、紫外一、紫外一、紫外一、紫外- - - - - -可見分光光度計(jì)的類型可見分光光度計(jì)的類型可見分光光度計(jì)的類型可見分光光

46、度計(jì)的類型可見分光光度計(jì)的類型可見分光光度計(jì)的類型1.1.1.1.1.1.單光束單光束單光束單光束單光束單光束 優(yōu)點(diǎn)：優(yōu)點(diǎn)：優(yōu)點(diǎn)：優(yōu)點(diǎn)：優(yōu)點(diǎn)：優(yōu)點(diǎn)：簡單，簡單，簡單，簡單，簡單，簡單，價(jià)廉，適于在給價(jià)廉，適于在給價(jià)廉，適于在給價(jià)廉，適于在給價(jià)廉，適于在給價(jià)廉，適于在給定波長處測量吸定波長處測量吸定波長處測量吸定波長處測量吸定波長處測量吸定波長處測量吸光度或透光度。光度或透光度。光度或透光度。光度或透光度。光度或透光度。光度或透光度。 缺點(diǎn)：缺點(diǎn)：缺點(diǎn)：缺點(diǎn)：缺點(diǎn)：缺點(diǎn)：一般一般一般一般一般一般不能作全波段光不能作全波段光不能作全波段光不能作全波段光不能作全波段光不能作全波段光譜掃描，要求光譜掃

47、描，要求光譜掃描，要求光譜掃描，要求光譜掃描，要求光譜掃描，要求光源和檢測器具有源和檢測器具有源和檢測器具有源和檢測器具有源和檢測器具有源和檢測器具有很高的穩(wěn)定性。很高的穩(wěn)定性。很高的穩(wěn)定性。很高的穩(wěn)定性。很高的穩(wěn)定性。很高的穩(wěn)定性。2222222.2.2.2.2.2.雙光束雙光束雙光束雙光束雙光束雙光束 優(yōu)點(diǎn)：優(yōu)點(diǎn)：優(yōu)點(diǎn)：優(yōu)點(diǎn)：優(yōu)點(diǎn)：優(yōu)點(diǎn)：自動記錄，自動記錄，自動記錄，自動記錄，自動記錄，自動記錄，快速全波段掃描?？煽焖偃ǘ螔呙??？煽焖偃ǘ螔呙??？煽焖偃ǘ螔呙?。可快速全波段掃描。可快速全波段掃描。可消除光源不穩(wěn)定、檢消除光源不穩(wěn)定、檢消除光源不穩(wěn)定、檢消除光源不穩(wěn)定、檢消除光源不穩(wěn)定、

48、檢消除光源不穩(wěn)定、檢測器靈敏度變化等因測器靈敏度變化等因測器靈敏度變化等因測器靈敏度變化等因測器靈敏度變化等因測器靈敏度變化等因素的影響，特別適合素的影響，特別適合素的影響，特別適合素的影響，特別適合素的影響，特別適合素的影響，特別適合于結(jié)構(gòu)分析。儀器復(fù)于結(jié)構(gòu)分析。儀器復(fù)于結(jié)構(gòu)分析。儀器復(fù)于結(jié)構(gòu)分析。儀器復(fù)于結(jié)構(gòu)分析。儀器復(fù)于結(jié)構(gòu)分析。儀器復(fù)雜，價(jià)格較高。是目雜，價(jià)格較高。是目雜，價(jià)格較高。是目雜，價(jià)格較高。是目雜，價(jià)格較高。是目雜，價(jià)格較高。是目前用的最多的分光光前用的最多的分光光前用的最多的分光光前用的最多的分光光前用的最多的分光光前用的最多的分光光度計(jì)。度計(jì)。度計(jì)。度計(jì)。度計(jì)。度計(jì)。23

49、23233.3.雙波長雙波長 將不同波長的兩束單色光將不同波長的兩束單色光將不同波長的兩束單色光將不同波長的兩束單色光將不同波長的兩束單色光將不同波長的兩束單色光( ( ( ( ( (1 1 1 1 1 1、2 2 2 2 2 2) ) ) ) ) ) 快束交替通快束交替通快束交替通快束交替通快束交替通快束交替通過同一吸收池而后到達(dá)檢測器。產(chǎn)生交替信號。無需過同一吸收池而后到達(dá)檢測器。產(chǎn)生交替信號。無需過同一吸收池而后到達(dá)檢測器。產(chǎn)生交替信號。無需過同一吸收池而后到達(dá)檢測器。產(chǎn)生交替信號。無需過同一吸收池而后到達(dá)檢測器。產(chǎn)生交替信號。無需過同一吸收池而后到達(dá)檢測器。產(chǎn)生交替信號。無需參比池。參

50、比池。參比池。參比池。參比池。參比池。 = = = = = =1 1 1 1 1 12 2 2 2 2 2nmnmnmnmnmnm。兩波長同時(shí)掃描即可獲得導(dǎo)數(shù)兩波長同時(shí)掃描即可獲得導(dǎo)數(shù)兩波長同時(shí)掃描即可獲得導(dǎo)數(shù)兩波長同時(shí)掃描即可獲得導(dǎo)數(shù)兩波長同時(shí)掃描即可獲得導(dǎo)數(shù)兩波長同時(shí)掃描即可獲得導(dǎo)數(shù)光譜。光譜。光譜。光譜。光譜。光譜。光源光源光源光源光源光源檢測器檢測器檢測器檢測器檢測器檢測器單色器單色器單色器單色器單色器單色器單色器單色器單色器單色器單色器單色器切光器切光器切光器切光器切光器切光器吸收池吸收池吸收池吸收池吸收池吸收池雙波長分光光度計(jì)示意圖雙波長分光光度計(jì)示意圖雙波長分光光度計(jì)示意圖雙波長

51、分光光度計(jì)示意圖雙波長分光光度計(jì)示意圖雙波長分光光度計(jì)示意圖242424優(yōu)點(diǎn)：優(yōu)點(diǎn)：優(yōu)點(diǎn)：優(yōu)點(diǎn)：優(yōu)點(diǎn)：優(yōu)點(diǎn)： 利用吸光度差值定量：利用吸光度差值定量：利用吸光度差值定量：利用吸光度差值定量：利用吸光度差值定量：利用吸光度差值定量： A A A A A A（111111222222）C LC LC LC LC LC L； 消除干擾和吸收池不匹配引起的誤差消除干擾和吸收池不匹配引起的誤差消除干擾和吸收池不匹配引起的誤差消除干擾和吸收池不匹配引起的誤差消除干擾和吸收池不匹配引起的誤差消除干擾和吸收池不匹配引起的誤差（即（即（即 252525儀器儀器儀器儀器儀器儀器 可見分光光度計(jì)可見分光光度計(jì)可見分

52、光光度計(jì)二、基本組成二、基本組成二、基本組成二、基本組成二、基本組成二、基本組成262626儀器儀器儀器儀器儀器儀器 紫外紫外紫外- - -可見分光光度計(jì)可見分光光度計(jì)可見分光光度計(jì)272727光源光源光源單色器單色器單色器樣品室樣品室樣品室檢測器檢測器檢測器顯示顯示顯示1. 1. 1. 1. 1. 1. 光源光源光源光源光源光源 在整個紫外光區(qū)或可見光譜區(qū)可以發(fā)射連續(xù)光譜，具在整個紫外光區(qū)或可見光譜區(qū)可以發(fā)射連續(xù)光譜，具在整個紫外光區(qū)或可見光譜區(qū)可以發(fā)射連續(xù)光譜，具在整個紫外光區(qū)或可見光譜區(qū)可以發(fā)射連續(xù)光譜，具在整個紫外光區(qū)或可見光譜區(qū)可以發(fā)射連續(xù)光譜，具在整個紫外光區(qū)或可見光譜區(qū)可以發(fā)射連

53、續(xù)光譜，具有足夠的輻射強(qiáng)度、較好的穩(wěn)定性、較長的使用壽命。有足夠的輻射強(qiáng)度、較好的穩(wěn)定性、較長的使用壽命。有足夠的輻射強(qiáng)度、較好的穩(wěn)定性、較長的使用壽命。有足夠的輻射強(qiáng)度、較好的穩(wěn)定性、較長的使用壽命。有足夠的輻射強(qiáng)度、較好的穩(wěn)定性、較長的使用壽命。有足夠的輻射強(qiáng)度、較好的穩(wěn)定性、較長的使用壽命。 可見光區(qū)：可見光區(qū)：可見光區(qū)：可見光區(qū)：可見光區(qū)：可見光區(qū)：鎢燈作為鎢燈作為鎢燈作為鎢燈作為鎢燈作為鎢燈作為光源，其輻射波長范圍在光源，其輻射波長范圍在光源，其輻射波長范圍在光源，其輻射波長范圍在光源，其輻射波長范圍在光源，其輻射波長范圍在3203203203203203202500 2500 25

54、00 2500 2500 2500 nmnmnmnmnmnm。現(xiàn)多用碘現(xiàn)多用碘現(xiàn)多用碘現(xiàn)多用碘現(xiàn)多用碘現(xiàn)多用碘鎢燈。鎢燈。鎢燈。鎢燈。鎢燈。鎢燈。 紫外區(qū)：紫外區(qū)：紫外區(qū)：紫外區(qū)：紫外區(qū)：紫外區(qū)：氫、氘燈。氫、氘燈。氫、氘燈。氫、氘燈。氫、氘燈。氫、氘燈。發(fā)射發(fā)射發(fā)射發(fā)射發(fā)射發(fā)射185185185185185185400 400 400 400 400 400 nmnmnmnmnmnm的連續(xù)光的連續(xù)光的連續(xù)光的連續(xù)光的連續(xù)光的連續(xù)光譜。譜。譜。譜。譜。譜?，F(xiàn)多用氘燈?，F(xiàn)多用氘燈。現(xiàn)多用氘燈?，F(xiàn)多用氘燈?，F(xiàn)多用氘燈。現(xiàn)多用氘燈。282828 2.2.單色器單色器棱鏡棱鏡棱鏡棱鏡棱鏡棱鏡光柵光柵光

55、柵光柵光柵光柵 292929 入射狹縫：光源的光由此進(jìn)入單色器；入射狹縫：光源的光由此進(jìn)入單色器；入射狹縫：光源的光由此進(jìn)入單色器；入射狹縫：光源的光由此進(jìn)入單色器；入射狹縫：光源的光由此進(jìn)入單色器；入射狹縫：光源的光由此進(jìn)入單色器； 準(zhǔn)光裝置：透鏡或返射鏡使入射光成為平行光束；準(zhǔn)光裝置：透鏡或返射鏡使入射光成為平行光束；準(zhǔn)光裝置：透鏡或返射鏡使入射光成為平行光束；準(zhǔn)光裝置：透鏡或返射鏡使入射光成為平行光束；準(zhǔn)光裝置：透鏡或返射鏡使入射光成為平行光束；準(zhǔn)光裝置：透鏡或返射鏡使入射光成為平行光束； 色散元件：將復(fù)合光分解成單色光：棱鏡或光柵；色散元件：將復(fù)合光分解成單色光：棱鏡或光柵；色散元件：

56、將復(fù)合光分解成單色光：棱鏡或光柵；色散元件：將復(fù)合光分解成單色光：棱鏡或光柵；色散元件：將復(fù)合光分解成單色光：棱鏡或光柵；色散元件：將復(fù)合光分解成單色光：棱鏡或光柵； 聚焦裝置：透鏡或凹面反射鏡，將分光后所得單色聚焦裝置：透鏡或凹面反射鏡，將分光后所得單色聚焦裝置：透鏡或凹面反射鏡，將分光后所得單色聚焦裝置：透鏡或凹面反射鏡，將分光后所得單色聚焦裝置：透鏡或凹面反射鏡，將分光后所得單色聚焦裝置：透鏡或凹面反射鏡，將分光后所得單色光聚焦至出射狹縫；光聚焦至出射狹縫；光聚焦至出射狹縫；光聚焦至出射狹縫；光聚焦至出射狹縫；光聚焦至出射狹縫； 出射狹縫。出射狹縫。出射狹縫。出射狹縫。出射狹縫。出射狹縫

57、。3030303131313. 3. 樣品室樣品室 樣品室放置各種類型的吸收池（比色皿）和樣品室放置各種類型的吸收池（比色皿）和樣品室放置各種類型的吸收池（比色皿）和樣品室放置各種類型的吸收池（比色皿）和樣品室放置各種類型的吸收池（比色皿）和樣品室放置各種類型的吸收池（比色皿）和相應(yīng)的池架附件。吸收池主要有石英池和玻璃池相應(yīng)的池架附件。吸收池主要有石英池和玻璃池相應(yīng)的池架附件。吸收池主要有石英池和玻璃池相應(yīng)的池架附件。吸收池主要有石英池和玻璃池相應(yīng)的池架附件。吸收池主要有石英池和玻璃池相應(yīng)的池架附件。吸收池主要有石英池和玻璃池兩種。兩種。兩種。兩種。兩種。兩種。 在紫外區(qū)須采用在紫外區(qū)須采用在

58、紫外區(qū)須采用在紫外區(qū)須采用在紫外區(qū)須采用在紫外區(qū)須采用石英池石英池石英池石英池石英池石英池，可見區(qū)一般用，可見區(qū)一般用，可見區(qū)一般用，可見區(qū)一般用，可見區(qū)一般用，可見區(qū)一般用玻璃玻璃玻璃玻璃玻璃玻璃池池池池池池，也可用石英池。要求：兩個的透光率相差要，也可用石英池。要求：兩個的透光率相差要，也可用石英池。要求：兩個的透光率相差要，也可用石英池。要求：兩個的透光率相差要，也可用石英池。要求：兩個的透光率相差要，也可用石英池。要求：兩個的透光率相差要小于小于小于小于小于小于0.50.50.50.50.50.5。323232玻璃玻璃333333石英石英343434吸收池的形狀吸收池的形狀吸收池的形狀

59、吸收池的形狀吸收池的形狀吸收池的形狀波長范圍、波長范圍、波長范圍、波長范圍、波長范圍、波長范圍、使用注意事項(xiàng)：使用注意事項(xiàng)：使用注意事項(xiàng)：使用注意事項(xiàng)：使用注意事項(xiàng)：使用注意事項(xiàng)：容易破碎容易破碎容易破碎容易破碎容易破碎容易破碎 可拆卸圓形測量池可拆卸圓形測量池可拆卸圓形測量池可拆卸圓形測量池可拆卸圓形測量池可拆卸圓形測量池兩面透光兩面透光兩面透光兩面透光兩面透光兩面透光圓形測量池圓形測量池圓形測量池圓形測量池圓形測量池圓形測量池兩面透光兩面透光兩面透光兩面透光兩面透光兩面透光1cm 1cm 1cm 長方形測量池長方形測量池長方形測量池長方形測量池長方形測量池長方形測量池兩面透光兩面透光兩面透

60、光兩面透光兩面透光兩面透光氣體測量池氣體測量池氣體測量池氣體測量池氣體測量池氣體測量池兩面透光兩面透光兩面透光兩面透光兩面透光兩面透光微量測量池微量測量池微量測量池微量測量池微量測量池微量測量池兩面透光兩面透光兩面透光兩面透光兩面透光兩面透光流動測量池流動測量池流動測量池流動測量池流動測量池流動測量池兩面透光兩面透光兩面透光兩面透光兩面透光兩面透光3535354. 4. 4. 4. 4. 4. 檢測器檢測器檢測器檢測器檢測器檢測器 利用光電效應(yīng)將透過吸收池的利用光電效應(yīng)將透過吸收池的利用光電效應(yīng)將透過吸收池的利用光電效應(yīng)將透過吸收池的利用光電效應(yīng)將透過吸收池的利用光電效應(yīng)將透過吸收池的光信號變