良性前列腺增生組織中IL-8、IL-6以及IFN-γ表達研究

1、良性前列腺增生組織中IL-8、IL-6以及IFN-表達研究 中英文及縮寫對照英文縮寫 英文名稱 中文全稱 良性前列腺增生一白細胞介素一一白細胞介素一?干擾素一下尿路病癥 國際前列腺癥狀評分?樣受體?。 一結(jié)合受體蛋白? 信號轉(zhuǎn)導(dǎo)蛋白前列腺特異性抗原。慢性前列腺炎 慢性骨盆疼痛綜合征維生素受體磷酸鹽緩沖液、良性前列腺增生組織中 以及 的表達研究中文摘要目的:探討白細胞介素一,、白細胞介素一,以及干擾素一,?在正常前列腺組織和良性前列腺增生組織 ,中的表達水平及臨床意義。材料與方法:.實驗標(biāo)本:尸解后正常前列腺標(biāo)本:經(jīng)尿道前列腺電切術(shù),的患者標(biāo)本。以上患者均未罹患前列腺腫瘤及其他泌尿系統(tǒng)腫瘤。.實

2、驗分組:正常前列腺組例歲,良性前列腺增生組例。.用免疫組織化學(xué)方法檢測各標(biāo)本中、以及的表達情況。結(jié)果:例中陽性表達例%;對照組例正常前列腺組陽性表達例%。在組中表達明顯高于正常前列腺組織中的表達尸.。 例中陽性表達例.%;對照組例正常前列腺組陽性表達例%。在組中表達明顯高于正常前列腺組織中的表達尸.。例中?陽性表達例.%;對照組例正常前列腺組?陽性表達例%。在組中表達明顯高于正常前列腺組織中的表達.。例組織中與,與的表達有顯著。性相關(guān)關(guān)系.。結(jié)論:的發(fā)生開展足多因素共同參與的結(jié)果,、以及?在中表達水平明顯上調(diào),與以及與之間均具有正相關(guān)性,提示它們的高表達在的發(fā)生開展中起協(xié)同作用,進一步說明炎癥

3、在發(fā)病機制中的作用,為以后治療提供新的靶點。碩士研究生:羅庚泌尿外科學(xué)指導(dǎo)教師: 王友寶教授關(guān)鍵詞:良性前列腺增生;白細胞介素;白細胞介素:干擾素一、.丫:?一、一一, ., .: ? . . , .一、一 ?.:一,%. , 一% . ,.%一 . 一 , ?。?。一. .,.%。 .,?% . 尸. .? 一 一.:?. 一? 一。 , .: .: ;目錄弓言第一章材料和方法?.標(biāo)本收集?.主要儀器與試劑?“.實驗方法?第二章結(jié)果.一、一和?在正常前列腺組織與組織中的表達.一及在組織中表達的相關(guān)性分析.及在組織中表達的相關(guān)性分析?第三章討論?.?.結(jié)論;?附圖 參考文獻綜麥盎 攻讀學(xué)位期間

4、的研究成果?:致謝 學(xué)位論文獨創(chuàng)性聲明、學(xué)位論文知識產(chǎn)權(quán)權(quán)屬聲明?引言引言 良性前列腺增生是一種老年男性常見病,隨著社會老齡化,發(fā)病率逐年增加,給老年男性帶來相應(yīng)臨床病癥,可以從輕微的排尿不適到腎功能衰竭。的發(fā)病機制主要關(guān)于激素、生長因子、細胞凋亡等方面,涉及多個環(huán)節(jié)和因素。到目前為止,我們對于的細胞和分子水平的病理機制沒有確切的認識,而且對于如何引起病癥的產(chǎn)生的機制也不明確。盡管雄激素和雌激素所起的作用已經(jīng)被證明,但是單純通過性激素來解釋前列腺增生的開展過程仍然是不夠的。目前研究發(fā)現(xiàn)慢性炎癥在發(fā)病機制中也起重要作用。故需要進一步研究其發(fā)病機制,用于臨床指導(dǎo)疾病的預(yù)防和治療。目前研究發(fā)現(xiàn)與前列

5、腺增生癥有關(guān)的炎癥細胞因子主要包括,以及?等。其中家族包括、和等,他們的受體均有公有鏈。通過免疫組化分析,在正常的前列腺上皮細胞中可微量標(biāo)記至。但是在組織中基質(zhì)細胞和上皮細胞均可大量發(fā)現(xiàn),尤其是上皮細胞中?？梢酝瓢闹饕缮掀ぜ毎置凇儆谮吇约毎蜃蛹易逯械膩喿?前列腺基質(zhì)細胞和上皮細胞均可分泌,其主要功能為趨化并激活中性粒細胞,趨化嗜堿性粒細胞及細胞,刺激血管生成,還可直接促進前列腺上皮細胞和基質(zhì)細胞的增殖。的增多會募集更多的白細胞以應(yīng)對感染或者損傷,維持了慢性炎癥的狀態(tài)。目前研究發(fā)現(xiàn)是的細胞因子中檢測前列腺炎具有代表性的生化指標(biāo),并且可以區(qū)分/ 和/,也是炎癥過程中的一個重要媒介。與前列

6、腺液中的白細胞具有高度相關(guān)性。也有研究發(fā)現(xiàn),乩一的水平與前列腺組織的老化有高度相關(guān)性。且可促進前列腺上皮細胞和基質(zhì)細胞的增生。可通過上皮一基質(zhì)相互作用促進上皮細胞增生,該作用取決于基質(zhì)細胞對的反響及其含量。本研究同時對增生前列腺組織中的細胞因子、?進行檢測,以明確其在良性前列腺增生發(fā)生機制中的作用。并將炎癥細胞因子與組織學(xué)、臨床癥狀進行相關(guān)分析,了解其與臨床病癥的關(guān)系。以探討良性前列腺增生的病因。材料與方法第一章材料與方法.標(biāo)本收集、實驗組:收集青島海慈醫(yī)療集團泌尿外科年月一年月間住院,術(shù)前予以評分,手術(shù)切除并經(jīng)術(shù)后病理證實的前列腺增生癥患者的蠟塊標(biāo)本,對,有完整的臨床資料例進行研究。、對照組

7、:對照組選取例尸解后正常前列腺標(biāo)本。實驗組與對照組標(biāo)本均經(jīng)%的中性多聚甲醛固定,石蠟包埋并常規(guī)切片。.主要儀器與試劑.主要儀器自動石蠟包埋機德國全自動組織浸臘脫水機 日本切片機?德國組織切片烤片機一日本恒溫烤箱上海躍進醫(yī)療器械廠型光學(xué)顯微鏡日本恒溫水浴箱江蘇儀器廠移液器芬蘭普通冰箱青島海爾一.主要試劑兔抗人多克隆抗體購自北京博奧森生物技術(shù)兔抗人多克隆抗體購自北京博奧森生物技術(shù)兔抗人多克隆抗體購自北京博奧森生物技術(shù)檢測試劑盒購自北京中杉金橋生物技術(shù)顯色試劑盒購自北京中杉金橋生物技術(shù)青島大學(xué)碩士論文抗原修復(fù)緩沖液購自北京中杉金橋生物技術(shù)檸檬酸抗原修復(fù)緩沖液購自北京中杉金橋生物技術(shù)磷酸鹽緩沖液購自北

8、京中杉金橋生物技術(shù)磷酸鹽緩沖液 ,:.:由磷酸鹽.粉劑購自北京中杉公司加雙蒸水配制而成。其它試劑有:不同濃度的乙醇溶液如%,%,%,%,二甲苯,.%的蘇木素溶液,雙蒸水,中性樹膠等。.實驗方法.抗原修復(fù)方法、以及均采用抗原熱修復(fù)法。.石蠟切片及染色觀察、固定。將行術(shù)后的標(biāo)本取出約.大小,放入濃度為%的中性多聚甲醛中固定。、脫水。將已固定好的組織投入%的乙醇,;%的乙醇,;%的乙醇,;%的乙醇,;無水乙醇,;,每次,以保證脫水干凈。、透明。放入至/酒精/甲苯中,再放入到二甲苯中,兩次,每次為?具體的時間視情況定,在二甲苯中,當(dāng)組織呈現(xiàn)棕黃或者暗紅乞透明即可。、浸蠟。透蠟前應(yīng)先將蠟融化,放入到熔蠟

9、箱箱內(nèi)所用石蠟的熔點為,將已經(jīng)透明組織放入/:甲苯/石蠟的混合液中,再放入純蠟中進行透蠟,兩次,第一次為,第二次為時浸蠟至組織柔軟適中即可。所用的固定液、二甲苯、酒精、石蠟體積均為組織塊體積的倍以上。、包埋。將熔化好的石蠟注入到包埋筐中,待底面的石蠟稍稍凝固時,用熱的鑷子夾取材料與方法組織放入到包埋筐中央,要切的面朝向盒子的底部。將病理號清楚的記錄在包埋筐的一側(cè),待石蠟冷卻完全后小心剝出蠟塊,并修整好蠟塊的邊緣,以備切片。、切片、展片與貼片切片:將蠟塊固定于切片機上,調(diào)整刻度指針至 ,左手握轉(zhuǎn)輪把柄,搖轉(zhuǎn)切片機,右手執(zhí)毛筆托住石蠟組織切片,隨著切片機的轉(zhuǎn)動,毛筆慢慢轉(zhuǎn)動將蠟片展開,挑斷蠟片后輕

10、輕放于水浴中。展片與貼片:用多聚賴氨酸處理好的載玻片從水浴中將蠟片撈起,并放于的電熱板上,待載玻片上的水分流下后,置于烘箱中烘烤、時,儲藏在切片盒中。、染色脫蠟:二甲苯中,二甲苯中,無水乙醇中,無水乙醇中,%的乙醇中,%的乙醇中,%的乙醇中,%的乙醇中,蒸餾水中。蘇木精液染色,流水沖洗蘇木精液。分化與藍化。%的鹽酸乙醇分化;稍水洗。伊紅染色。%的乙醇中;%的乙醇中;.%的伊紅染液中。洗滌。%的乙醇中,根據(jù)染色結(jié)果調(diào)整。%的乙醇中,時間長短視伊紅染色的情況而定。假設(shè)伊紅染色深,那么浸泡時間長;假設(shè)伊紅染色淺,那么浸泡時間。短。脫水,透明,封片。無水乙醇中;無水乙醇中;后二甲苯中;后二甲苯中。待切

11、片稍干后中性樹膠封片;自然風(fēng)干或烤干,顯微鏡觀察。.免疫組織化學(xué)步驟如下:青島大學(xué)碩士學(xué)位論文、石蠟切片置于恒溫烤箱中烤片小時,常規(guī)經(jīng)二甲苯、脫蠟各。、石蠟切片置于梯度酒精%、%、%、。%分別浸泡、石蠟切片置于自來水洗 .沖洗次,溶液.,。每次、除去溶液,每張切片上加%的過氧化氫溶液 ,以阻斷內(nèi)源性過氧化物酶活性,室溫下孵育。、將石蠟組織切片置于溶液., .中沖洗次,每次。、抗原修復(fù)、及抗原的修復(fù):采用檸檬酸抗原修復(fù)緩沖液高壓熱力修復(fù)法,即將石蠟組織玻片置于裝有檸檬酸抗原修復(fù)緩沖液.,.的切片缸中,再浸泡于高壓鍋內(nèi)已沸騰的檸檬酸緩沖液.,.中,蓋上鍋蓋,繼續(xù)加熱到高壓鍋噴氣持續(xù)分鐘,移開熱源冷

12、卻至室溫?。、取出石蠟組織切片,置于溶液., .中沖洗次,每次、除去溶液,每張切片加%羊血清工作液室溫封閉分鐘,傾去,勿洗。、除去溶液后,每張切片參加約 第一抗體使其覆蓋所有的組織第一抗體的濃度經(jīng)預(yù)實驗,均采用:稀釋,以溶液替代一抗作陰性對照,室溫下孵育時。、取出石蠟組織切片,置于溶液., .中沖洗次,每次,、除去溶液后,每張切片參加 第二抗體使其覆蓋所有組織,室溫孵育。、取出石蠟組織切片,置于溶液., .中沖洗次,每次。、除去后,每張切片參加 新鮮配制的顯色試劑顯色,顯微鏡下控制顯色,以背景不著色而特異性顯色較好為準,達最正確效果后,蒸餾材料與方法水沖洗,終止反響。、石蠟組織玻片經(jīng)蘇木素復(fù)染

13、,然后自來水沖洗。、石蠟組織玻片經(jīng)%鹽酸酒精溶液浸泡秒,然后自來水沖洗。、石蠟組織玻片經(jīng).%氨水返藍提插?次,然后自來水沖洗。、石蠟組織玻片放入梯度酒精溶液中各分鐘%的酒精;%酒精;%的酒精;無水乙醇:、石蠟組織玻片放入二甲苯、二甲苯溶液中透明,每次分鐘:、用中性樹膠封固石蠟組織玻片。注:室溫。.免疫組化對照的設(shè)立陽性對照:購置各指標(biāo)陽性切片作陽性對照,結(jié)果陽性。陰性對照:用液代替一抗孵育陽性切片作陰性對照,結(jié)果陰性。.結(jié)果判定根據(jù)參考文獻來確立三種細胞因子的判定標(biāo)準。、一主要在前列腺上皮細胞基底部表達,腺泡內(nèi)也有少量表達,前列腺間質(zhì)及浸潤的炎癥細胞上也有表達,具體表現(xiàn)為胞漿、腺泡內(nèi)呈棕黃色顆

14、粒。?主要在前列腺上皮細胞內(nèi)表達,胞漿內(nèi)可見大量棕黃色顆粒。黃色顆粒為陽性表達。在雙盲條件下,由兩名病理科的中級及以上醫(yī)師對標(biāo)本進行觀察,每個標(biāo)本隨機選擇個高倍鏡視野倍,結(jié)果判定采用半定量積分分級。標(biāo)準如下:按染色強度評分:分為無色,分為淡黃色,分為棕黃色,分為棕褐色。再按陽性細胞所占百分比評分,陽性細胞數(shù):分為陰性,分為陽性細胞%,分為%,分為%,分為%。積分為以上兩項的和,分級標(biāo)準為:分為陰性一,分為弱陽性,?分為陽性,?分為強陽性,其中和判定為陽性。.統(tǒng)計學(xué)處理青島大學(xué)碩士學(xué)位論文.統(tǒng)計學(xué)處理以.件進行所有的數(shù)據(jù)處理及分析,指標(biāo)之間的陽性率比擬以及關(guān)聯(lián)性分析均采用檢驗,.有統(tǒng)計學(xué)意義。嘉

15、;。驢,套曩心。奠點一噙謗憾,公,。.。努射礦,嘉。;,.,墓,.結(jié)果第二章結(jié) 果. 、 在正常前列腺組織與組織中的表達、和?的陽性表達均表現(xiàn)為細胞漿及腺泡內(nèi)棕黃色顆粒。在正常前列腺組織中,陽性表達多為淡黃色且多表達在上皮細胞基底部;在組織中,陽性表達多為棕黃色且表達于前列腺上皮細胞,局部間質(zhì)細胞及腺泡內(nèi)。一在例組織中陽性表達率為%/,在正常前列腺組織中陽性表達率為%/。在組織中的表達明顯高于在正常前列腺組織中的表達.,.,見表。一在例組織中陽性表達率為.%/,在正常前列腺組織中陽性表達率為%/。一在組織中的表達明顯高于在正常前列腺組織中的表達.,.,見表。?在例組織中陽性表達率為.%/,在例

16、正常前列腺組織中陽性表達率為%/。?在組織中的表達明顯高于在正常前列腺組織中的表達.,.,見表。表 在組織和正常前列腺組織中的表達情況比照幾一陽性 .?. 尸一 率柳 . . . .正常前列腺青島大學(xué)碩士學(xué)位論文表 在組織和正常前列腺組織中的表達情況比照表在組織和正常前列腺組織中的表達情況比照. 及在組織中表達的相關(guān)性分析.,在例組織中,一陽性表達組例,其中有例?表達陽性;一陰性表達組例,其中例?表達陰性見表。相關(guān)性分析研究發(fā)現(xiàn)的高表達和?的高表達呈顯著正相關(guān)性.,.,.。表 表達及表達的相關(guān)性結(jié)果. 及 在組織中表達的相關(guān)性分析在例組織中,陽性表達組例,其中有例表達陽性;一陰性表達組例,其中

17、例?表達陰性見表。相關(guān)性分析研究發(fā)現(xiàn)一的高表達和?的高表達呈顯著正相關(guān)性.,.,.。表 表達及卅表達的相關(guān)性.合計.陽性 陰性陽性陰性合計討論討論良性前列腺增生 ,是導(dǎo)致中老年男性發(fā)生排尿障礙的最常見的一種良性疾病。病理學(xué)研究發(fā)現(xiàn)良性前列腺增生的發(fā)病率隨著年齡的增長而逐漸增加,通常在歲左右發(fā)病,歲時發(fā)病率為%,歲時為%,?歲時為%口,中國人的前列腺增生的組織學(xué)發(fā)病率較低,歲為%,歲時為%,歲時為.%,歲時為.%船。目前明確的導(dǎo)致發(fā)生的兩個重要條件是老齡及有功能的睪丸。但引起良性前列腺增生的具體機制尚不明確,可能與間質(zhì)和上皮細胞的增殖與細胞凋亡的失平衡有關(guān)。其相關(guān)的因素主要有雄激素、雄激素與雌激

18、素比例失調(diào)、前列腺間質(zhì)與腺上皮細胞之間的相互作用、炎癥、生長因子、神經(jīng)遞質(zhì)和遺傳因素等?。近些年來,炎癥在良性前列腺增生的發(fā)生及開展中的作用越來越受到關(guān)注。與前列腺炎的聯(lián)系的提出,是建立在很大比例的組織中增生結(jié)節(jié)和慢性炎癥浸潤的同時共存,而且很多患者的病癥表現(xiàn)為前列腺炎和下尿路病癥,。年輕時的前列腺炎最后進展為的病史也說明了炎癥反響在的發(fā)病機制和疾病進展中的重要性障。有研究發(fā)現(xiàn)日常應(yīng)用非甾體類抗炎藥物會減輕的臨床病癥。等一人搜集例完整的前列腺標(biāo)本來分析慢性炎癥的浸潤和分布,發(fā)現(xiàn).的前列腺周圍帶和.%的移行帶中有慢性炎癥浸潤,且在移行帶中,.%的病例的慢性炎癥分布在增生區(qū)域。等人的研究也發(fā)現(xiàn),需

19、要手術(shù)治療的患者中,%以上的病例出現(xiàn)陽性的細胞與巨噬細胞浸潤,重度組織學(xué)前列腺炎的患者其前列腺體積、國際前列腺病癥評分 ,評清楚顯高于輕度組織學(xué)前列腺炎的患者。前列腺組織中,?主要表達在前列腺上皮細胞中,基質(zhì)細胞及細胞中亦有表達。?的受體包括?和?。在正常的前列腺組織中,前列腺上皮細胞和基質(zhì)細胞中均同時表達上述兩種受體,可能通過自分泌調(diào)控作用發(fā)揮抑制細胞增殖的作用。而在組織中,前列腺上皮細胞和基質(zhì)細胞只表達?,不表達?。這就導(dǎo)致這兩種細胞可以產(chǎn)生?,但不對應(yīng)答。青島大學(xué)碩士學(xué)位論文?不能發(fā)揮抑制細胞增殖的作用,而前列腺上皮細胞對其的產(chǎn)生亦失去控制砷。過量的?可趨化細胞及有利于炎癥反響維持。體外

20、細胞培養(yǎng)研究發(fā)現(xiàn),人前列腺間質(zhì)細胞可以作為抗原提呈細胞促進細胞釋放?和。因此前列腺間質(zhì)細胞具有引起維持炎癥反響的作用。?和可以通過與卜,樣受體結(jié)合促進細胞釋放和。而這種因子是促進前列腺上皮細胞和間質(zhì)細胞增生的主要因子,同時也構(gòu)成了細胞誘導(dǎo)的細胞反響和前列腺組織增生一個潛在紐帶。因此,人間質(zhì)細胞既可以引起炎癥反響,也可以作為炎癥反響的靶細胞。根據(jù)這一結(jié)論可以推論和慢性前列腺炎可能具有一些相同的病理機制。前列腺細胞可以作為抗原提呈細胞同時又可以與結(jié)合來釋放促炎細胞因子和趨化因子的能力,而促炎細胞因子和趨化因子可以募集浸潤細胞和促進前列腺細胞的增生。正是因為前列腺細胞的這些能力,所以說炎癥在的發(fā)生開

21、展中起重要作用們。本實驗中?在組織的表達明顯高于正常前列腺組織。?與表達呈正相關(guān),相關(guān)系數(shù)為. ,這說明兩者之間表達存在聯(lián)系。與的表達亦呈正相關(guān),相關(guān)系數(shù)為. ,這說明兩者之間表達亦存在聯(lián)系。結(jié)合體外細胞培養(yǎng)所示,可能是 促進了一和一在中的表達。慢性前列腺炎患者血清水平非常顯著地高于正常人組.,其升高的機理可能與患者的細胞免疫功能受抑、細胞調(diào)節(jié)紊亂有關(guān)婦:而本身生長刺激單核細胞、上皮細胞,也造成血中水平的升高羽。目前研究發(fā)現(xiàn)一是的細胞因子中檢測前列腺炎最具有代表性的生化指標(biāo),并且可以區(qū)分和型前列腺炎,也是炎癥過程中的一個重要媒介九。不僅在正常的前列腺上皮細胞和基質(zhì)細胞中功能性的表達,而且在表達

22、同源受體的組織中也有表達,說明參與了前列腺組織增生這一病理過程?？梢源龠M基質(zhì)細胞和上皮細胞的過度增生,例如:可以直接促進衰老上皮細胞的增生,使基質(zhì)細胞獲得成纖維母細胞的增生表型,還可以間接促進的分泌,以及通過/途徑來發(fā)揮作用的,該通路可刺激的表達和的產(chǎn)生。 等人研究發(fā)現(xiàn)在/、/和患者中以下檢測指標(biāo)中如細胞因子、討論和趨化性細胞因子、/在精漿中的水平均高于常人,但是只有的水平顯著高于正常人。在精漿中的水平與/和患者的病癥評分和? 水平高度相關(guān)。在患者和/患者的精漿中水平的升高以及其水平與病癥評分和水平呈正比說明了一可以作為可信賴的前列腺炎癥疾患的標(biāo)記物鍆。最近研究發(fā)現(xiàn),的表達不僅歸因于上皮細胞,

23、基質(zhì)細胞也可以功能性的募集表達一的受體和的白細胞。細胞和細胞源性細胞因子可刺激基質(zhì)細胞分泌一,一和,從而募集多種免疫細胞。一直接通過自分泌或者旁分泌途徑促進基質(zhì)細胞的增生 。因此,可能是基質(zhì)細胞誘導(dǎo)的免疫應(yīng)答、慢性炎病癥態(tài)的維持以及組織增生之間的紐帶。本實驗中在的表達明顯高于正常前列腺組織中的表達,與前研究相符。家族成員包括、和,它們的受體均有公有鏈。化學(xué),細菌及細胞因子的刺激均可促進體外培養(yǎng)的前列腺基質(zhì)細胞分泌鍆。在正常和增生性前列腺組織中, 作為一種潛在的自分泌促生長因子由基底上皮細胞分泌是由基底上皮細胞分泌的一種潛在的促生長因子,通過自分泌途徑促進基底上皮細胞的增殖。通過免疫組化分析,在

24、正常的前列腺上皮細胞中可微量標(biāo)記至。但是在組織中基質(zhì)細胞和上皮細胞均可大量發(fā)現(xiàn),尤其是上皮細胞中。可以推測在中主要由上皮細胞分泌。發(fā)生時,可能通過自分泌參與了上皮一間質(zhì)相互作用,而貝通過旁分泌參與這一過程刀。的促增生作用以及其在組織的基質(zhì)細胞和上皮細胞上的表達說明其可能在炎癥相關(guān)的開展中起重要作用,。在的治療中適當(dāng)參加抗炎藥物,減少炎性細胞因子的產(chǎn)生,阻斷炎性細胞因子的連鎖反響或許能夠阻斷的進程,起到治療的效果。 等研究發(fā)現(xiàn)聯(lián)合應(yīng)用抑制劑和一復(fù)原酶抑制劑治療的患者,其凋亡指數(shù)與單獨運用的患者相比明顯升高啪。最近研究發(fā)現(xiàn)維生素受體沖動劑可以通過減少的分泌,還通過減少的表達和的分泌來發(fā)揮作用。促進

25、細胞增生,而維生素受體沖動劑可以通過抑制/通路抑偉對細胞增殖的作用。結(jié)論結(jié)論本實驗通過免疫組化方法分析前列腺增生組織中、和,.的表達發(fā)現(xiàn),一、一和?在良性前列腺增生組織中的表達明顯高于正常前列腺組織;?與的表達呈正相關(guān);?與的表達亦呈正相關(guān)。結(jié)合體外培養(yǎng)免疫研究,可以推論?可以促進一和一的表達。炎癥在前列腺增生癥發(fā)生發(fā)展中的作用機制以及將抗炎治療作為的治療靶點仍需要進一步的實驗及臨床的研究。附 圖圖:正常前列腺組織免疫組化切片圖:前列艨增生組織免疫組化切片圖:正常前列腺組織免疫組化切片青島大學(xué)碩士學(xué)位論文曦聚,專附圖前列腺增生組織臟染色正常前列腺組織腿染色參考文獻參考文獻. , ., / ,

26、,.,:. ,. , , , . .,:. ., ,. ,:.,:., , , 。. , ,.,:?. . 兒, ,躚, ? .,:., ., .,.,:?. , , ., 塒,:. , , , .:.,.:., . .青島大學(xué)碩士學(xué)位論文 ?. ,:?.、.呂玉宏,張再高,李家承.慢性前列腺炎患者治療前后血清、 和?檢測的臨床意義.放射免疫學(xué)雜志,:一.賀麗雅,楊愛民,劉豹,等.一、一、?水平在發(fā)病中的意義.放射免疫學(xué)雜志,:.,.,.,:。/.:?., .一, , , .,:. ., , , .,:一., , ,。 /?.,:. . . ,:., . 一. .,:一. , , , . .,

27、:., , , , 參考文獻 : .,:.綜述良性前列腺增生是一種老年男性常見病,隨著社會的老齡化,發(fā)病率逐年增加。一般認為,的發(fā)病機制主要與激素學(xué)說、生長因子、細胞凋亡學(xué)說等多個環(huán)節(jié)有關(guān)。目前研究發(fā)現(xiàn),慢性炎癥在發(fā)病機制中起著重要作用。前列腺組織中慢性炎癥的發(fā)生和持續(xù)存在,激發(fā)并維持著前列腺間質(zhì)和上皮的增殖。一、炎癥與與前列腺炎的聯(lián)系的提出,是建立在很大比例的組織中增生結(jié)節(jié)和慢性炎癥浸潤的同時共存,而且很多患者的病癥表現(xiàn)為前列腺炎和下尿路病癥雎。年輕時的前列腺炎最后進展為的病史也說明了炎癥反響在的發(fā)病機制和疾病進展中的重要性口。有研究發(fā)現(xiàn)日常應(yīng)用非甾體類抗炎藥物會減輕的臨床癥狀。等哺人搜集例

28、完整的前列腺標(biāo)本來分析慢性炎癥的浸潤和分布,發(fā)現(xiàn).%的前列腺周圍帶和.%的移行帶中有慢性炎癥浸潤,且在移行帶中,等人的研究也發(fā)現(xiàn),.%的病例的慢性炎癥分布在增生區(qū)域。需要手術(shù)治療的患者中,%以上的病例出現(xiàn)陽性的細胞與巨噬細胞浸潤,重度組織學(xué)前列腺炎的患者其前列腺體積、評清楚顯高于輕度組織學(xué)前列腺炎的患者。正常前列腺的淋巴組織有兩種主要成分,一是在腺體周圍以淋巴細胞/為細胞的浸潤為主:其二是以淋巴細胞濾泡聚集在以平滑肌為主的間質(zhì)中,在濾泡周圍聚集的淋巴細胞中,細胞是細胞的兩倍以上。而在組織中的/的比例與正常前列腺組織相比是倒置的。此外,很多流行病學(xué)研究發(fā)現(xiàn)急性和慢性前列腺炎會加快臨床病癥的開展。

29、前列腺病癥醫(yī)學(xué)試驗發(fā)現(xiàn),有炎癥浸潤的腺體明顯大于非炎癥浸潤的腺體,而且此類患者更容易發(fā)生急性尿潴留等并發(fā)癥口一。對前列腺組織增生起重要作用的細胞因子包括、 和等。這些因子在增生區(qū)域表達顯著增高并啟動前列腺增生的程序,而這一程序在正常成年人中是被抑制的。前列腺組織中最具有代表性的成員是青島大學(xué)碩士學(xué)位論文和。主要由前列腺基質(zhì)細胞和上皮細胞合成,上述兩種細胞亦表達其受體,從而通過自分泌作用刺激自身增殖,不但能維持正常前列腺間質(zhì)細胞。的生長平衡,還能在發(fā)病早期導(dǎo)致典型的組織重構(gòu)舊。的初始階段是以細胞主要產(chǎn)生和,參與細胞免疫反響為主的們,因為組織中?和一的表達量明顯高于正常前列腺組織。的發(fā)病過程中,

30、的增長也伴隨著一、一和的增長,說明炎癥增生組織中包含有和主要產(chǎn)生一和一等細胞因子,參與體液免疫,肥大細胞脫顆粒等反響。前列腺上皮細胞和基質(zhì)細胞能夠大量表達多種, 樣受體、激發(fā)?及一基因表達和維持免疫反響。上皮細胞具有表達 分子的能力羽。這一發(fā)現(xiàn)連同、和的大量表達,說明前列腺上皮細胞在誘導(dǎo)免疫炎癥反響和細胞因子分泌中起重要作用。最近研究發(fā)現(xiàn),前列腺基質(zhì)細胞參與器官特異性炎癥反響過程是通過作為受體的沖動劑以及抗原遞呈細胞來激活抗原特異性細胞。組織細胞上的激活導(dǎo)致了一系列前炎癥細胞因子如和趨化性細胞因子如和的增殖。炎癥刺激導(dǎo)致前列腺基質(zhì)細胞大量表達 分子和共刺激分子、和羽。這些分子的表達使得前列腺基

31、質(zhì)細胞像抗原遞呈細胞一樣激活 分子依賴的細胞,引起和維持免疫反響的持續(xù)存在。此外,細胞還具備抗原提呈細胞的另一個重要特征,分泌高水平的和等導(dǎo)致或促進細胞的分化?？傊?這些發(fā)現(xiàn)說明前列腺組織中炎癥介導(dǎo)損傷的修復(fù)過程啟動了增殖程序,導(dǎo)致了結(jié)節(jié)的發(fā)生。二、炎癥細胞因子的作用細胞因子與受體結(jié)合后,主要通過途徑和途徑激活轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)因子,再通過作用于細胞核,使特定基因轉(zhuǎn)錄激活,發(fā)揮相應(yīng)的生物學(xué)作用。.是在前列腺炎癥中起重要作用的細胞因子,在正常前列腺中微量存在,但是在組織中顯著升高。主要由激活的細胞、上皮細胞和平滑肌細胞分泌和表達,其主要生物學(xué)作用為誘導(dǎo)人表皮細胞、內(nèi)皮細胞和成纖維細胞分泌一、一和;促進入成

32、纖維細胞表達細胞間黏附分子一,參與血管形成。等釘研究發(fā)現(xiàn),標(biāo)本中的含量比正常前列腺增力%,在前列腺基質(zhì)細胞中可刺激和分別上調(diào)倍和倍,并能與協(xié)同刺激的產(chǎn)生,同時也可促進的表達上調(diào)。其對組織的促增生作用,可能主要是通過上調(diào)的表達等實現(xiàn)。之所以在免疫應(yīng)答的發(fā)生和維持方面起重要作用主要是因為其可以多方面控制促炎癥反響系統(tǒng),如誘導(dǎo)上皮細胞、內(nèi)皮細胞和基質(zhì)細胞中、和基因的表達,刺激中細胞釋放 、和一,上調(diào)上皮細胞中一的水平伽。重要地是,相對于其他炎癥刺激物如脂多糖來講更能引起細胞因子和趨化因子水平的升高。同時因為還具有維持炎癥反響以及因氧化應(yīng)激損傷導(dǎo)致前列腺組織增生的作用,所以可以將其看做組織中免疫應(yīng)答的

33、調(diào)節(jié)器。.主要由活化的細胞包括、細胞和幾乎所有的陽性細胞和細胞產(chǎn)生。?可以通過旁鄰方式控制細胞生長。其作用為:激活巨噬細胞并促進其功能;促進多種細胞表達 類和 分子;促進細胞分化為細胞,并抑帛細胞增殖;促進成熟及活性:促進細胞分化,產(chǎn)生抗體及類型轉(zhuǎn)換;激活中性粒細胞功能和細胞殺傷活性;激活血管內(nèi)皮細胞。體外細胞培養(yǎng)研究發(fā)現(xiàn),人前列腺間質(zhì)細胞可以作為抗原提呈細胞促進細胞釋放?和一。因此前列腺間質(zhì)細胞具有引起維持炎癥反響的作用。和一可以通過與,樣受體結(jié)合促進細胞釋放一和一。而這種因子是促進前列腺上皮細胞和間質(zhì)細胞增生的主要因子,同時也構(gòu)成了細胞誘導(dǎo)的細胞反響和前列腺組織增生一個潛在紐帶羽。. 生物

34、學(xué)特征:白細胞介素一一作為前炎癥細胞因子,在炎癥反響過程中起著重要作用?；蚨ㄎ挥诘谔柸旧w,分子量為。一的生物學(xué)功能通青島大學(xué)碩士學(xué)位論文過和其受體形成一/一/復(fù)合體才能進行信號轉(zhuǎn)導(dǎo)從而發(fā)揮作用。受體系統(tǒng)包括兩條肽鏈:鏈又稱特異性結(jié)合鏈即一結(jié)合受體蛋白一,為配體特異性受體一,分子量為人一由個氨基酸組成,糖基化位點。單獨一與一結(jié)合為低親和力。分布廣泛,如活化細胞、骨髓瘤細胞、靜止細胞、單核細胞等:鏈又稱信號轉(zhuǎn)導(dǎo)鏈即信號轉(zhuǎn)導(dǎo)蛋白? ,分子量為。 分子量為的糖蛋白,共有個潛在一糖基化位點。不能直接與配基一結(jié)合,在生理情況下,一與一受體結(jié)合后使一的構(gòu)象發(fā)生變化進而迅速與兩個分子結(jié)合,形成高親和力的結(jié)

35、合位點,并通過亞單位傳遞信號。一與 均以膜型和可溶性受體的形式存在。一可溶性一一是一的一種特殊形式,分子量為。其產(chǎn)生機制有兩種:膜受體 蛋白的溶蛋白性裂解和的選擇性剪接。與其它可溶性細胞因子受體不同,一結(jié)合一形成一/復(fù)合體后可與細胞膜外表結(jié)合,誘導(dǎo)胞內(nèi)信號產(chǎn)生,通過這種被稱為跨信號轉(zhuǎn)導(dǎo)?的機制,一可以激活不表達 一的細胞,由于的廣泛存在,這一途徑正引起人們越來越多的關(guān)注:而可溶性可抑一/一復(fù)合物的活性。高水平的與一在一些慢性炎癥性疾病和某些自身免疫性疾病包括癌癥 一的信號轉(zhuǎn)導(dǎo)?通路:激酶與或白血病抑制因子受體結(jié)合后,由:或:二聚體誘導(dǎo)其磷酸化活化,并使和上的個酪氨酸殘基磷酸化,通過信號轉(zhuǎn)導(dǎo)及轉(zhuǎn)

36、錄激活子一和上的同源結(jié)構(gòu)域一與磷酸化的酪氨酸相互作用形成同源或異源二聚體,二聚體與其結(jié)合位點別離并在酪氨酸磷酸化后轉(zhuǎn)移到核內(nèi),調(diào)節(jié)靶基因表達。/通路:激活可誘導(dǎo)同源膠原蛋白與生長因子受體結(jié)合蛋白一復(fù)合物形成和活化,然后與鳥嘌呤核苷酸交換因子結(jié)合,激活蛋白?；罨霓D(zhuǎn)導(dǎo)信號參與絲裂原活化的蛋白激酶途徑。一.以通過抑制巨噬細胞產(chǎn)生一和腫瘤壞死因子而在細菌內(nèi)毒素誘導(dǎo)的實驗性肺損傷中起細胞保護和抗炎作用。由于具有致炎和抗炎的雙向功能,它的作用與組織中的含量有關(guān),正常水平對機體有利,產(chǎn)生過多會引起一系列綜述炎性損害。與:化學(xué),細菌及細胞因子的刺激均可促進體外培養(yǎng)的前列腺基質(zhì)細胞分泌和。由免疫細胞激活的和細

37、胞,巨噬細胞,單核細胞和非免疫細胞成纖維細胞,內(nèi)皮細胞,基質(zhì)細胞和腫瘤細胞產(chǎn)生的參與了急性期炎癥反響,促血管生成,抗原特異性免疫應(yīng)答,神經(jīng)發(fā)育等過程引。在正常和增生性前列腺組織中,一作為一種潛在的自分泌促生長因子由基底上皮細胞分泌。通過免疫組化分析,在正常的前列腺上皮細胞中可微量標(biāo)記到一。但是在組織中基質(zhì)細胞和上皮細胞均可大量發(fā)現(xiàn),尤其是上皮細胞中?？梢酝茰y主要由上皮細胞分泌。分布于所有的正常前列腺細胞中,組織的所有細胞中也都可以標(biāo)記到,但含量升高。在正常前列腺中只分布于基質(zhì)細胞,但是在中除基質(zhì)細胞表達外,%的標(biāo)本中上皮細胞也被標(biāo)記到。在正常前列腺中,僅在基質(zhì)細胞中被標(biāo)記在組織中,只有一半標(biāo)本

38、僅在基質(zhì)細胞中標(biāo)記到,而另一半標(biāo)本中還在上皮細胞的細胞漿和細胞核中發(fā)現(xiàn),但表達量明顯增多。的生物學(xué)作用主要為:促進細胞增殖分化和分泌抗體;在存在下,可促進成熟和未成熟細胞分化為;作為內(nèi)源性致熱原,參與炎癥反響。發(fā)生時,可能通過自分泌參與了上皮一間質(zhì)相互作用,而貝通過旁分泌參與。一的促增生作用以及其在組織的基質(zhì)細胞和腔內(nèi)上皮細胞上的表達說明其可能在一決定的相關(guān)圳。的炎癥反響中起重要作用. 生物學(xué)特性: 結(jié)構(gòu)一是一種糖蛋白,其分子量為 ,屬于含谷氨酸一亮氨酸一精氨酸序列的趨化因子,即其氨基酸序列中有個保守半胱氨酸,前兩個之間有一個其它氨基酸相隔,且其末端有一谷氨酸一亮氨酸一精氨酸組成的三聯(lián)體氨基酸

39、基序一基序,該基序在促血管生成,由個外顯子及個內(nèi)含子組成,中起重要作用。位于人染色體,長在區(qū)有細胞核因子, 、肝細胞核因子一、干擾素調(diào)節(jié)因子一、等核因子的結(jié)合部位,還有不同的調(diào)節(jié)元件糖皮質(zhì)激素受體元件氯霉素乙酰基轉(zhuǎn)移酶盒、/反響元青島大學(xué)碩士學(xué)位論文件、增強子核心序列和一個樣的結(jié)構(gòu)。許多細胞在適當(dāng)刺激后能產(chǎn)生,包括單核巨噬細胞、淋巴細胞、中性粒細胞、嗜酸性粒細胞、血管內(nèi)皮細胞、上皮細胞等。此外,多種腫瘤細胞及腫瘤周圍基質(zhì)細胞也可分泌。通過個細胞膜受體和發(fā)揮生物學(xué)效應(yīng),均是含有一條肽鏈的糖蛋白,屬于視紫紅質(zhì)樣蛋白偶聯(lián)受體超家族。它們除表達在白細胞外表外,還表達某些癌細胞和新生血管內(nèi)皮細胞上。兩種

40、受體氨基酸序列有%同源體,屬于有個跨膜區(qū)的結(jié)合蛋白相關(guān)受體超家族,其結(jié)構(gòu)主要由個疏水的跨膜區(qū)、細胞外的氨基端、胞質(zhì)中的羧基端及細胞內(nèi)、外的個環(huán)組成。與受體的末端及胞外的環(huán)都有較高的親和性,受體的末端有許多絲氨酸和蘇氨酸殘基,其磷酸化參與信號的轉(zhuǎn)導(dǎo)及受體的脫敏作用。與受體結(jié)合后,活化磷脂酶、蛋白等。磷脂酶水解磷酸肌醇,形成三磷酸肌醇和二脂酰甘油,促使細胞內(nèi)儲存的釋放,活化蛋白激酶,使絲裂原活化蛋白激酶磷酸化。細胞內(nèi)濃度的升高和激酶的活化可促進細胞的增殖與分化。蛋白可調(diào)控細胞骨架重排,參與粘附和趨化過程。在未受到刺激時,無表達或少量表達;但在感染、低氧等刺激后多種細胞都能產(chǎn)生:單核細胞是產(chǎn)生的主要

41、細胞:血管內(nèi)皮細胞、巨噬細胞、上皮細胞、淋巴細胞、成纖維細胞亦表達:中性粒細胞在酵母多糖及脂多糖等刺激下可產(chǎn)生。一與:與類似,可以被多種細胞分泌,例如:單核細胞,激活的細胞,嗜中性粒細胞,嗜酸性粒細胞,成纖維細胞,內(nèi)皮細胞,上皮細胞等。其首要作用是募集中性粒細胞到炎癥區(qū)域晗們。人類前列腺組織中很多正常細胞和腫瘤細胞系均可在體內(nèi)或體外培養(yǎng)中產(chǎn)生一。而且前列腺癌患者的外周血淋巴細胞中的含量是正常的倍。此外,一在標(biāo)本中大量表達,并且極有可能參與了的發(fā)病過程并起積極作用心“翱。慢性前列腺炎患者血清水平非常顯著地高于正常人組.。其升高的機理可能與患者的細胞免疫功能受抑、細胞調(diào)節(jié)紊亂有關(guān)九:另一原因可能是

42、患者本身生長中刺激單核細胞、上皮細胞,因而造成血中水平的升高嚕耵。目前研究發(fā)現(xiàn)是的細胞因子中檢測前列腺炎具有代表性的生化指標(biāo),并且可以區(qū)分/ 和/ ,也是炎癥過程中的一個重要媒介。一與前列腺液中的白細胞具有高度相關(guān)性。不僅在正常的前列腺上皮細胞和基質(zhì)細胞中功能性的表達,而且在表達同源受體的組織中也有表達,說明參與了前列腺組織增生這一病理過程。在所有被分析的上述細胞因子中,是診斷前列腺炎癥情況如/、最可靠的也是最具有代表性的標(biāo)記物晗副。確實,可以促進基質(zhì)細胞和上皮細胞的過度增生,例如:可以直接促進衰老上皮細胞的增生,使基質(zhì)細胞獲得成纖維母細胞的增生表型,還可以間接促進的分泌,以及通過/途徑來發(fā)揮

43、作用的,該通路可刺激等人研究發(fā)現(xiàn)在/ 、/一的表達和的產(chǎn)生。和患者中以下檢測指標(biāo)中如細胞因子、和趨化性細胞因子、/在精漿中的水平均高于常人,但是只有的水平顯著高于正常人。在精漿中的水平與/和患者的病癥評分和? 水平高度相關(guān)。在患者和/患者的精漿中水平的升高以及其水平與病癥評分和水平呈正比說明了可以作為可信賴的前列腺炎癥疾患的標(biāo)記物瞳捌。最近研究發(fā)現(xiàn),的表達不僅歸因于上皮細胞羽,基質(zhì)細胞也可以功能性的募集表達的受體和的白細胞。細胞和細胞源性細胞因子可刺激基質(zhì)細胞分泌,和,從而募集多種免疫細胞,尤其是細胞。直接通過自分泌或者旁分泌途徑促進基質(zhì)細胞的增生例。因此,可能是基質(zhì)細胞誘導(dǎo)的免疫應(yīng)答,慢性炎

44、病癥態(tài)的維持以及組織增生之間的紐帶。最近研究發(fā)現(xiàn)維生素受體沖動劑可以通過減少的分泌、減少的表達和的分泌來發(fā)揮作用。一促進細胞增生,而可以通過抑/通路抑制對細胞增殖的作用。因此,上述研究對在發(fā)病機制中的作用提出了一種解釋,說明和源性的炎癥細胞因子可以顯著促進基質(zhì)細胞分泌一。而且也說明在的發(fā)病機制中可以作為聯(lián)系炎癥反響和細胞增生的橋梁,這一聯(lián)系可以被通過多種機制阻斷。.其他相關(guān)的炎癥細胞因子. 家族一由單核吞噬細胞產(chǎn)生,其中一在前列腺炎的發(fā)生開展中,介導(dǎo)一系列青島大學(xué)碩士學(xué)位論文的免疫炎癥反響:促使血管細胞和內(nèi)皮細胞表達粘附分子如選擇素、細胞問粘附分子、血管細胞黏附分子等,導(dǎo)致單核細胞、淋巴細胞和

45、多形核白細胞從血管滲出,浸入前列腺組織;誘導(dǎo)巨噬細胞和內(nèi)皮細胞合成家族的低相對分子質(zhì)量炎性細胞因子,進一步活化白細胞;通過誘導(dǎo)炎癥細胞和內(nèi)皮細胞、成纖維細胞等分泌細胞因子使炎癥級聯(lián)反響擴大;誘導(dǎo)型磷脂酶和的基因表達,一旦觸發(fā),的產(chǎn)生迅速增多,使細胞產(chǎn)生大量的前列腺素,引起許多生物學(xué)效應(yīng)。. 主要由陽性和陽性細胞產(chǎn)生,此細胞、細胞、轉(zhuǎn)化的細胞亦可產(chǎn)生。分布于細胞、細胞、細胞及巨噬細胞。的生物學(xué)作用主要為:促進所有亞型細胞增殖及產(chǎn)生;促進細胞毒活性及產(chǎn)生;誘導(dǎo)細胞擴增;促使活化細胞增生及產(chǎn)生抗體;激活單核一吞噬細胞。在組織中與的水平分別上升了倍和倍呤。二十碳五烯酸、二十二六烯酸和一亞麻酸都可抑制其生成。一. 單核細胞趨化蛋白 包括一、一和。屬于趨化性細胞因子家族中的亞族,是組織中含量最高的蛋白之一,主要由前列腺基質(zhì)細胞分泌, 、和可促進其分泌。前列腺基質(zhì)細胞和上皮細胞都可表達的受體。但研究發(fā)現(xiàn)