血清蛋白質(zhì)測(cè)定

1、會(huì)計(jì)學(xué)1血清蛋白質(zhì)測(cè)定血清蛋白質(zhì)測(cè)定第一節(jié)第一節(jié) 概概 述述p機(jī)體蛋白質(zhì)機(jī)體蛋白質(zhì)：p體液蛋白質(zhì)的檢測(cè)：體液蛋白質(zhì)的檢測(cè)： 機(jī)體主要的機(jī)體主要的 生物大分子生物大分子含量：人體固體成分的含量：人體固體成分的45%種類：種類：10萬(wàn)，萬(wàn)，30005000種種/單細(xì)胞單細(xì)胞功能：生長(zhǎng)，代謝、血凝、運(yùn)動(dòng)、免功能：生長(zhǎng)，代謝、血凝、運(yùn)動(dòng)、免疫、信息傳遞等疫、信息傳遞等疾病發(fā)生疾病發(fā)生體液蛋白質(zhì)體液蛋白質(zhì)異常異常方法：瓊脂凝膠電泳方法：瓊脂凝膠電泳染料：氨基黑染料：氨基黑正常血清蛋白電泳圖正常血清蛋白電泳圖檢查結(jié)果：Alb 44.2%()；1 4.6%(N)；2 14.6%() 18.3%()； 18.

2、3%(N)；慢性腎炎患者。以以%表示：表示：Alb: 57%68%1: 1.0%5.7%2: 4.9%11.2% : 7%13% : 9.8%18.2%以以g/L表示：表示：Alb: 3552 g/L1: 1.04.0 g/L 2: 4.08.0 g/L : 5.010.0 g/L : 6.013.0 g/L血清蛋白電泳的正常組分血清蛋白電泳的正常組分四、血清電泳組分分析四、血清電泳組分分析M蛋白血癥型蛋白血癥型在- 區(qū)帶中間出現(xiàn)M蛋白區(qū)帶(1)(1)急性和慢性炎癥急性和慢性炎癥主要特征：主要特征：白蛋白減少或正常，白蛋白減少或正常，1 1和和2 2球蛋白增高，球蛋白增高，當(dāng)有明顯的急性炎癥病

3、灶時(shí)，可顯著增高。炎癥轉(zhuǎn)為當(dāng)有明顯的急性炎癥病灶時(shí)，可顯著增高。炎癥轉(zhuǎn)為慢性時(shí)其增加程度減低。慢性時(shí)其增加程度減低。球蛋白增高不明顯，當(dāng)炎球蛋白增高不明顯，當(dāng)炎癥轉(zhuǎn)為慢性時(shí)，可明顯增加。癥轉(zhuǎn)為慢性時(shí)，可明顯增加。 /N急性炎癥型急性炎癥型 代表疾病代表疾病：慢性：慢性膽道感染、慢性膽道感染、慢性泌尿系感染、結(jié)泌尿系感染、結(jié)核病、自身免疫核病、自身免疫性疾病、過(guò)敏性性疾病、過(guò)敏性疾病、惡性腫瘤疾病、惡性腫瘤等。等。慢性炎癥型慢性炎癥型（2）腎臟疾病）腎臟疾病 腎臟疾病常有血漿蛋白質(zhì)的丟失。蛋白尿包腎臟疾病常有血漿蛋白質(zhì)的丟失。蛋白尿包括腎小球性、腎小管性和混合性蛋白尿三類。括腎小球性、腎小管性和

4、混合性蛋白尿三類。腎小球性蛋白尿：以中分子量為主，如腎小球性蛋白尿：以中分子量為主，如TRF等等，稱選擇性蛋白尿，稱選擇性蛋白尿;可見于腎小球性腎炎、糖可見于腎小球性腎炎、糖尿病、自身免疫性疾病等。尿病、自身免疫性疾病等。腎小管性蛋白尿腎小管性蛋白尿:主要是相對(duì)小分子質(zhì)量的蛋主要是相對(duì)小分子質(zhì)量的蛋白質(zhì)排泄增多，如白質(zhì)排泄增多，如:2-微球蛋白（微球蛋白（2-M）?？桑??？梢娪谀I盂腎炎，腎血管性疾病等。見于腎盂腎炎，腎血管性疾病等?；旌闲缘鞍啄颍杭嬗心I小球?yàn)V過(guò)功能與腎小管混合性蛋白尿：兼有腎小球?yàn)V過(guò)功能與腎小管重吸收功能的障礙。嚴(yán)重腎病致腎小球失去分重吸收功能的障礙。嚴(yán)重腎病致腎小球失去分子篩

5、作用，出現(xiàn)非選擇性蛋白尿，可表現(xiàn)為廣子篩作用，出現(xiàn)非選擇性蛋白尿，可表現(xiàn)為廣泛的低血漿蛋白質(zhì)血癥。泛的低血漿蛋白質(zhì)血癥。主要特征：此圖形的分子此圖形的分子篩效應(yīng)明顯，為典型的篩效應(yīng)明顯，為典型的選擇性蛋白漏出型圖形選擇性蛋白漏出型圖形，其特征為白蛋白明顯，其特征為白蛋白明顯減低，減低，1 1球蛋白輕度球蛋白輕度增增,2 2球蛋白明顯增加球蛋白明顯增加，球蛋減低、正?；蚯虻皽p低、正?；蛟龈摺３扇四I病綜合征增高。成人腎病綜合征時(shí)時(shí),球蛋白通常增加球蛋白通常增加，特別是狼瘡性腎炎淀，特別是狼瘡性腎炎淀粉樣腎病等，粉樣腎病等，球蛋白球蛋白則明顯增加。則明顯增加。 N選擇性蛋白質(zhì)丟失的特征選擇性蛋白質(zhì)丟

6、失的特征 Alb區(qū)帶：區(qū)帶： Alb明顯低下，明顯低下，PA也下降也下降 1-球蛋白區(qū)帶：球蛋白區(qū)帶：AAG，AAT下降，下降， AAG合成增加合成增加 2-球蛋白區(qū)帶：球蛋白區(qū)帶：AMG和和Hp增加增加 -球蛋白區(qū)帶：球蛋白區(qū)帶：-Lp增加，增加，TRF下降下降 -球蛋白區(qū)帶：球蛋白區(qū)帶：IgG降低，降低，IgM可有增可有增加加 不定不定低白蛋白血癥型低白蛋白血癥型（3）肝臟疾病）肝臟疾病 + ()主要特征：主要特征：清蛋白在所有病清蛋白在所有病例中均有不同程度的減低，例中均有不同程度的減低，1、2和和球蛋白正?；蚪档颓虻鞍渍；蚪档?，球蛋白常明顯增高，球蛋白常明顯增高，區(qū)區(qū)帶的寬度也明顯增

7、加，可見帶的寬度也明顯增加，可見-橋，為本病的特征。根據(jù)橋，為本病的特征。根據(jù)-橋的程度可將其分為三型橋的程度可將其分為三型。Alb帶帶: PA，Alb明顯降低明顯降低1-帶：帶：AAT增高顯著增高顯著, AAG偏低偏低2-帶：帶：Cp輕度升高，輕度升高，AMG明顯明顯增增 高；高； Hp偏低偏低-帶：帶：TRF明顯降低明顯降低-帶：帶：IgG彌散性增高，彌散性增高，IgA明顯明顯升升 高；高；CRP輕度升高。輕度升高。肝硬化肝硬化第第型：型： 和和區(qū)帶連成一片，難于分開，稱為區(qū)帶連成一片，難于分開，稱為-橋。此型除橋。此型除見于極少數(shù)結(jié)締組織疾病外，幾乎全見于肝硬化，如見見于極少數(shù)結(jié)締組織疾

8、病外，幾乎全見于肝硬化，如見到到-橋，并伴有橋，并伴有1和和2球蛋白減少時(shí)可確診為肝硬化球蛋白減少時(shí)可確診為肝硬化，故將此型稱為，故將此型稱為肝硬化型肝硬化型。第第型：型： 有有-橋存在，但在橋存在，但在與與區(qū)帶之間仍可見一淺谷，兩者區(qū)帶之間仍可見一淺谷，兩者可分開，稱為不完全性可分開，稱為不完全性-橋，但僅據(jù)此尚不能診斷為橋，但僅據(jù)此尚不能診斷為肝硬化，僅能作出提示診斷，故將此型稱為肝硬化，僅能作出提示診斷，故將此型稱為提示肝硬化提示肝硬化型型。第第型：型： 為非特異型，為非特異型，與與區(qū)帶能明顯分離，沒(méi)有形成區(qū)帶能明顯分離，沒(méi)有形成-橋，橋，與其它原因所致的高與其它原因所致的高球蛋白血癥完

9、全不能區(qū)別。球蛋白血癥完全不能區(qū)別。原發(fā)性肝癌型原發(fā)性肝癌型 主要特征：主要特征：白蛋白和白蛋白和1球蛋白之間有一小的甲球蛋白之間有一小的甲胎蛋白帶。胎蛋白帶。AFP M區(qū)帶區(qū)帶w特點(diǎn)特點(diǎn)：多出現(xiàn)于：多出現(xiàn)于到慢到慢區(qū)，且較區(qū)，且較IgA或或 IgM形成的形成的M蛋白區(qū)帶窄而濃集。如果濃度很高，可形成象小蛋白區(qū)帶窄而濃集。如果濃度很高，可形成象小波浪的蛋白帶。波浪的蛋白帶。 M區(qū)帶區(qū)帶特點(diǎn)：特點(diǎn)：可出現(xiàn)于可出現(xiàn)于2 、區(qū)。多出現(xiàn)區(qū)。多出現(xiàn)和和之間。之間。第二節(jié)第二節(jié) 體液蛋白質(zhì)測(cè)定體液蛋白質(zhì)測(cè)定總蛋白測(cè)定總蛋白測(cè)定個(gè)別個(gè)別蛋白質(zhì)的測(cè)定蛋白質(zhì)的測(cè)定蛋白分離測(cè)定技術(shù)蛋白分離測(cè)定技術(shù)p發(fā)展趨勢(shì)發(fā)展趨

10、勢(shì): :p測(cè)定體液標(biāo)本測(cè)定體液標(biāo)本: :血漿血漿：普遍：普遍尿液，腦脊液和胸腹水等尿液，腦脊液和胸腹水等：有選擇性的組織病變檢查：有選擇性的組織病變檢查免疫化學(xué)法特異定量個(gè)別蛋白質(zhì)免疫化學(xué)法特異定量個(gè)別蛋白質(zhì)p體液蛋白質(zhì)的測(cè)定方法概括：體液蛋白質(zhì)的測(cè)定方法概括：常規(guī)：免疫濁度法、免疫擴(kuò)散法，免疫電泳法，常規(guī)：免疫濁度法、免疫擴(kuò)散法，免疫電泳法，微量：放射免疫測(cè)定（微量：放射免疫測(cè)定（RIARIA），酶免疫測(cè)定法（），酶免疫測(cè)定法（ELA/ELISAELA/ELISA）電泳測(cè)定：電泳測(cè)定：定量化學(xué)測(cè)定定量化學(xué)測(cè)定TPr，Alb電泳電泳 組成圖譜組成圖譜 半定量半定量 定量定量染料結(jié)合法，染料結(jié)合

11、法，UVUV法，折光法等法，折光法等一、血清總蛋白測(cè)定n假設(shè)：假設(shè)：、 純多肽鏈，含氮量平均為純多肽鏈，含氮量平均為16 % 16 % 、各種蛋白質(zhì)與化學(xué)試劑反應(yīng)性一致，僅為相對(duì)定量、各種蛋白質(zhì)與化學(xué)試劑反應(yīng)性一致，僅為相對(duì)定量n測(cè)定依據(jù)：測(cè)定依據(jù)：蛋白質(zhì)測(cè)定一般利用蛋白質(zhì)以下的結(jié)構(gòu)或蛋白質(zhì)測(cè)定一般利用蛋白質(zhì)以下的結(jié)構(gòu)或性質(zhì)性質(zhì)1 1、元素組成測(cè)定：元素組成測(cè)定：含含N N穩(wěn)定；穩(wěn)定；2 2、重復(fù)的肽鏈結(jié)構(gòu)：、重復(fù)的肽鏈結(jié)構(gòu)：具有多個(gè)肽鍵；具有多個(gè)肽鍵；3 3、酪氨酸和色氨酸與、酪氨酸和色氨酸與Folin-Folin-酚試劑反應(yīng)酚試劑反應(yīng)顯色顯色或或UV UV 吸收；吸收；4 4、與色素結(jié)合的

12、能力：、與色素結(jié)合的能力：與染料以離子鍵或共價(jià)鍵連與染料以離子鍵或共價(jià)鍵連接；接；5 5、沉淀后借濁度測(cè)定：、沉淀后借濁度測(cè)定：光度計(jì)測(cè)定；光度計(jì)測(cè)定；6 6、光折射測(cè)定：、光折射測(cè)定：折射儀測(cè)定。折射儀測(cè)定。n方法方法：1.1.凱氏定氮法參考方法凱氏定氮法參考方法2.2.雙縮脲法雙縮脲法( ( 推薦推薦) ) 3.3.酚試劑法酚試劑法4.4.散射比濁法散射比濁法5.5.染料結(jié)合法染料結(jié)合法6. UV 6. UV 法法. .折光測(cè)定法折光測(cè)定法1.凱氏定氮法參考標(biāo)準(zhǔn)方法凱氏定氮法參考標(biāo)準(zhǔn)方法(0.05mg N 0.3g pro)消化消化用濃硫酸將蛋白質(zhì)消化為硫酸銨；（耗時(shí)）用濃硫酸將蛋白質(zhì)消化

13、為硫酸銨；（耗時(shí)） 蒸餾蒸餾用堿性溶液堿化消化液并蒸餾揮發(fā)；用堿性溶液堿化消化液并蒸餾揮發(fā)； 吸收吸收用酸性溶液（硼酸）吸收氣態(tài)氨（使用酸性溶液（硼酸）吸收氣態(tài)氨（使HH+ + ）滴定滴定用已標(biāo)定的無(wú)機(jī)酸滴用已標(biāo)定的無(wú)機(jī)酸滴（使（使H+ 恢復(fù)），恢復(fù)），計(jì)算總氮量計(jì)算總氮量定蛋白定蛋白（總氮量總氮量- -非蛋白氮）非蛋白氮）6.25=6.25=蛋白含量蛋白含量納氏試劑：碘化汞和碘化鉀的堿性溶液與氨反應(yīng)生成淡黃棕納氏試劑：碘化汞和碘化鉀的堿性溶液與氨反應(yīng)生成淡黃棕色膠態(tài)化合物，其色度與氨氮含量成正比。色膠態(tài)化合物，其色度與氨氮含量成正比。 n原理：原理：三聚氰胺化學(xué)式：三聚氰胺化學(xué)式：C3N6H

14、6，分子量：，分子量：126 含氮量達(dá)含氮量達(dá)66%。 n評(píng)價(jià)：評(píng)價(jià)：優(yōu)點(diǎn)：準(zhǔn)確度高，精密度優(yōu)點(diǎn)：準(zhǔn)確度高，精密度高，靈敏度高，是公認(rèn)的參高，靈敏度高，是公認(rèn)的參考方法?？挤椒?。缺點(diǎn)：操作復(fù)雜，費(fèi)時(shí)，缺點(diǎn)：操作復(fù)雜，費(fèi)時(shí)，不適合常規(guī)檢測(cè)，血清各蛋不適合常規(guī)檢測(cè)，血清各蛋白含氮量會(huì)有所變化尤其是白含氮量會(huì)有所變化尤其是疾病時(shí)。疾病時(shí)。 n應(yīng)用：應(yīng)用：標(biāo)準(zhǔn)蛋白的標(biāo)定標(biāo)準(zhǔn)蛋白的標(biāo)定及校正其它常規(guī)方法及校正其它常規(guī)方法2.雙雙 縮脲法縮脲法n原原 理：理： 蛋白質(zhì)中的肽鍵蛋白質(zhì)中的肽鍵（-CONH-CONH-）在在堿性堿性溶液中能與溶液中能與Cu2+作用而產(chǎn)作用而產(chǎn)生生紫紅色絡(luò)合物紫紅色絡(luò)合物，其顏色

15、的深淺與蛋白質(zhì)的濃度成正比，而與其顏色的深淺與蛋白質(zhì)的濃度成正比，而與蛋白質(zhì)的分子量及氨基酸成分無(wú)關(guān)。蛋白質(zhì)的分子量及氨基酸成分無(wú)關(guān)。條件：至少含兩個(gè)肽鍵（條件：至少含兩個(gè)肽鍵（-CONH-CONH-）基團(tuán)才能和）基團(tuán)才能和CuCu2+2+形成絡(luò)合物形成絡(luò)合物, ,氨基酸及二肽無(wú)反氨基酸及二肽無(wú)反 應(yīng)應(yīng), ,三肽以上才能反應(yīng)。三肽以上才能反應(yīng)。 雙縮脲生成雙縮脲生成 加熱加熱NH322H180022222N 端端C 端端n評(píng)價(jià)：評(píng)價(jià)：優(yōu)點(diǎn)：簡(jiǎn)便，準(zhǔn)確，重復(fù)性好，優(yōu)點(diǎn)：簡(jiǎn)便，準(zhǔn)確，重復(fù)性好，10g-120g/L10g-120g/L線性好，線性好，特異性與精密度好，批內(nèi)特異性與精密度好，批內(nèi)CV%

16、CV%2%2%，顯色穩(wěn)定。，顯色穩(wěn)定。缺點(diǎn)：靈敏度較差，對(duì)蛋白質(zhì)含量低的體液標(biāo)本不適缺點(diǎn)：靈敏度較差，對(duì)蛋白質(zhì)含量低的體液標(biāo)本不適合。合。 n應(yīng)用：應(yīng)用：常規(guī)推薦方法。手工或上機(jī)使用。常規(guī)推薦方法。手工或上機(jī)使用。3.3.酚試劑法酚試劑法(Folin(Folin試劑法試劑法）n原理：原理： 蛋白質(zhì)分子中的蛋白質(zhì)分子中的酪氨酸殘基酪氨酸殘基和和色氨酸殘基色氨酸殘基能夠和能夠和酚試劑酚試劑中的中的磷鎢酸磷鎢酸- -磷鉬酸磷鉬酸反應(yīng)生成藍(lán)色化合物，反應(yīng)生成藍(lán)色化合物， Lowry Lowry改良法：改良法：在在酚試劑中加入酚試劑中加入CuCu2+2+，提高了呈色的靈敏提高了呈色的靈敏度，為度，為雙縮

17、脲法的雙縮脲法的100100倍左右。吸收峰為倍左右。吸收峰為745-750nm745-750nm。n評(píng)價(jià)及應(yīng)用：評(píng)價(jià)及應(yīng)用：優(yōu)點(diǎn)：操作簡(jiǎn)單，改良法靈敏度高（優(yōu)點(diǎn)：操作簡(jiǎn)單，改良法靈敏度高（10g-6010g-60g），適合，適合測(cè)定蛋白含量少的標(biāo)本。測(cè)定蛋白含量少的標(biāo)本。缺點(diǎn)：各種蛋白質(zhì)缺點(diǎn)：各種蛋白質(zhì)酪氨酸酪氨酸和和色氨酸色氨酸比例不同，只適合測(cè)定比例不同，只適合測(cè)定單一蛋白質(zhì)。受一些藥物干擾。單一蛋白質(zhì)。受一些藥物干擾。 4.4.比濁法比濁法n原理：原理： n評(píng)價(jià)及應(yīng)用：評(píng)價(jià)及應(yīng)用：優(yōu)點(diǎn)：簡(jiǎn)便不需特殊儀器。優(yōu)點(diǎn)：簡(jiǎn)便不需特殊儀器。缺點(diǎn)：濁度形成的干擾因素多（加試劑方法，反應(yīng)溫度，蛋缺點(diǎn)：濁

18、度形成的干擾因素多（加試劑方法，反應(yīng)溫度，蛋白絮狀沉淀等）白絮狀沉淀等） 某些酸類（磺基水楊酸等）和血清蛋白質(zhì)結(jié)合產(chǎn)生沉淀某些酸類（磺基水楊酸等）和血清蛋白質(zhì)結(jié)合產(chǎn)生沉淀，測(cè)其濁度，與標(biāo)準(zhǔn)對(duì)比，可求蛋白含量。，測(cè)其濁度，與標(biāo)準(zhǔn)對(duì)比，可求蛋白含量。5.5.染料結(jié)合法染料結(jié)合法 在酸性環(huán)境下，帶正電的蛋白質(zhì)（在酸性環(huán)境下，帶正電的蛋白質(zhì)（-NH3+)與染料的陰離子與染料的陰離子產(chǎn)生顏色反應(yīng)，使染料的吸收峰改變，可既而用分光光度法產(chǎn)生顏色反應(yīng)，使染料的吸收峰改變，可既而用分光光度法比色測(cè)定。比色測(cè)定。n原理：原理：常用染料：常用染料：氨基黑，考馬斯亮藍(lán)等等6.6.紫外分光光度法紫外分光光度法（1）

19、蛋白質(zhì)分子中的蛋白質(zhì)分子中的酪氨酸酪氨酸和和色氨酸等芳香族氨基酸可色氨酸等芳香族氨基酸可使蛋白質(zhì)溶液在使蛋白質(zhì)溶液在280nm280nm處有一吸收峰處有一吸收峰?？捎糜跍y(cè)定蛋白質(zhì)但可用于測(cè)定蛋白質(zhì)但需避免核酸干擾。需避免核酸干擾。 （1 1）Lowry-Kalcker Lowry-Kalcker 公式公式 蛋白質(zhì)濃度（蛋白質(zhì)濃度（mg/mlmg/ml）=1.45 A =1.45 A 280280 - 0.74 A - 0.74 A 260260 （2 2）Warburg-Christian Warburg-Christian 公式公式 蛋白質(zhì)濃度（蛋白質(zhì)濃度（mg/mlmg/ml）=1.55

20、A =1.55 A 280280 - 0.76 A - 0.76 A 260260 n原理：原理：n評(píng)價(jià)及應(yīng)用：評(píng)價(jià)及應(yīng)用：優(yōu)點(diǎn)：敏感而簡(jiǎn)便，可優(yōu)點(diǎn)：敏感而簡(jiǎn)便，可保留蛋白生物活性保留蛋白生物活性，常用與較純的酶，常用與較純的酶和免疫球蛋白。需和免疫球蛋白。需紫外分光光度計(jì)及石英比色皿。紫外分光光度計(jì)及石英比色皿。缺點(diǎn)：各種蛋白質(zhì)中芳香族氨基酸含量和比例不同；在缺點(diǎn)：各種蛋白質(zhì)中芳香族氨基酸含量和比例不同；在280nm280nm測(cè)定易受游離色測(cè)定易受游離色aaaa和酪和酪aaaa以及尿酸和膽紅素的干擾；核以及尿酸和膽紅素的干擾；核酸在酸在206nm206nm有最大吸收，在有最大吸收，在280n

21、m280nm有較大吸收，導(dǎo)致準(zhǔn)確性和有較大吸收，導(dǎo)致準(zhǔn)確性和特異性受影響。特異性受影響。措施：在措施：在220-225nm220-225nm波長(zhǎng)區(qū)域，用波長(zhǎng)區(qū)域，用0.15mol/l0.15mol/l的的NaClNaCl稀釋稀釋1000-20001000-2000倍可消除干擾。倍可消除干擾。7.7.折光測(cè)定法折光測(cè)定法 溶解在溶液中的固體可增加溶液的光折射率，在固定溶解在溶液中的固體可增加溶液的光折射率，在固定波長(zhǎng)和溫度下，光折射率和血清中蛋白質(zhì)含量成正比。波長(zhǎng)和溫度下，光折射率和血清中蛋白質(zhì)含量成正比。n原理：原理：n評(píng)價(jià)及應(yīng)用：評(píng)價(jià)及應(yīng)用：優(yōu)點(diǎn)：簡(jiǎn)便、快速，易掌握，重復(fù)性較好，適合臨床急診

22、，體檢篩查優(yōu)點(diǎn)：簡(jiǎn)便、快速，易掌握，重復(fù)性較好，適合臨床急診，體檢篩查和胸腹水蛋白質(zhì)測(cè)定。和胸腹水蛋白質(zhì)測(cè)定。缺點(diǎn)：準(zhǔn)確性較差，易受高血脂癥，高膽紅素血癥以及溶血等因素影缺點(diǎn)：準(zhǔn)確性較差，易受高血脂癥，高膽紅素血癥以及溶血等因素影響，會(huì)由于響，會(huì)由于A/GA/G比值變化而產(chǎn)生誤差。比值變化而產(chǎn)生誤差。 p參考范圍：成人參考范圍：成人606080g/L80g/Lp臨床意義：臨床意義：總蛋白升高：總蛋白升高：總蛋白降低總蛋白降低：丟失過(guò)多：丟失過(guò)多 消耗增加消耗增加 白蛋白合成減少白蛋白合成減少 水腫水腫真性升高：真性升高：MMMM、巨球蛋白血癥、自身免疫性疾病等、巨球蛋白血癥、自身免疫性疾病等假

23、性升高：機(jī)體明顯失水，總蛋白含量相對(duì)升高，假性升高：機(jī)體明顯失水，總蛋白含量相對(duì)升高，A/GA/G幾乎不變幾乎不變二、血清白蛋白測(cè)定p方法方法：1.1.染料結(jié)合法染料結(jié)合法( ( 推薦推薦) ) 2.2.鹽析法鹽析法3.3.電泳法電泳法4.4.免疫化學(xué)法免疫化學(xué)法1.1.染料結(jié)合法染料結(jié)合法( ( 推薦推薦) )n原理原理: : 血清血清ALBALB可通過(guò)可通過(guò)離子鍵或疏水鍵離子鍵或疏水鍵與包括與包括染料染料在內(nèi)的各種在內(nèi)的各種有機(jī)離子結(jié)合有機(jī)離子結(jié)合, ,而而GLBGLB很少結(jié)合外源性染料很少結(jié)合外源性染料, ,可在可在不分離不分離ALBALB與與GLBGLB的情況下直接測(cè)定的情況下直接測(cè)定

24、ALBALB。染料染料BCGBCGBCPBCP優(yōu)點(diǎn)優(yōu)點(diǎn) 缺點(diǎn)缺點(diǎn) 易于和非人源性白蛋白結(jié)合易于和非人源性白蛋白結(jié)合 與白蛋白結(jié)合特異性較差與白蛋白結(jié)合特異性較差 與與非人源性白蛋白結(jié)合力弱非人源性白蛋白結(jié)合力弱 與白蛋白結(jié)合特異性好與白蛋白結(jié)合特異性好 在在3030秒內(nèi)測(cè)可提高特異性秒內(nèi)測(cè)可提高特異性n應(yīng)用及評(píng)價(jià)應(yīng)用及評(píng)價(jià): : 嚴(yán)格控制反應(yīng)時(shí)間的嚴(yán)格控制反應(yīng)時(shí)間的BCGBCG法法既適合既適合手工手工也適合也適合自動(dòng)自動(dòng)化分析?；治觥ＥR床上推薦使用臨床上推薦使用。n原理原理: : 鹽析是由于加入大量的中性鹽破壞了蛋白質(zhì)的鹽析是由于加入大量的中性鹽破壞了蛋白質(zhì)的水化膜、水化膜、中和其所帶的中和其所帶的電電荷荷從而使蛋白質(zhì)分子聚集而從而使蛋白質(zhì)分子聚集而沉淀沉淀析出