實(shí)驗(yàn)6-小籃子法測(cè)定種子呼吸速率

1、實(shí)驗(yàn)六 環(huán)境溫度對(duì)種子呼吸速率的影響（p165166）小籃子法測(cè)定種子呼吸速率呼吸速率是植物生命活動(dòng)最重要的指標(biāo)之一。測(cè)定呼吸速率的方法很多，可以分成兩大類：測(cè)定吸氧速率或者測(cè)定放出CO2速率。前者有測(cè)壓法、氧電極法；后者有小籃子法、紅外線CO2氣體分析儀（IRGA）等方法。測(cè)壓法、氧電極法是測(cè)定植物呼吸過程對(duì)O2的吸收，樣品用量少，且精確度高。利用紅外線CO2氣體分析儀測(cè)定植物呼吸速率比較快速、準(zhǔn)確，是科研上常采用的方法。呼吸速率的測(cè)定方法1. 實(shí)驗(yàn)?zāi)康?）學(xué)習(xí)呼吸強(qiáng)度的堿吸收測(cè)定方法；2）了解環(huán)境因素（如溫度）對(duì)呼吸強(qiáng)度的影響。 2. 實(shí)驗(yàn)原理（小籃子法）植物進(jìn)行呼吸時(shí)放出CO2，計(jì)算一定

2、的植物樣品在單位時(shí)間內(nèi)放出CO2的數(shù)量，即為該樣品呼吸速率。呼吸放出的CO2可用氫氧化鋇溶液吸收，實(shí)驗(yàn)結(jié)束后用已知濃度的草酸溶液滴定剩余的堿液，從空白和樣品二者消耗草酸溶液之差即可計(jì)算出呼吸過程中釋放的CO2的量。 Ba(OH)2 +CO2 BaCO3+ H2OBa(OH)2（剩余）+ H2C2O4BaC2O4+ 2H2O每毫升144 mol/l 的草酸相當(dāng)于1mg CO2 3. 材料和儀器設(shè)備1）材料： 發(fā)芽的小麥種子和煮死的小麥種子2）儀器設(shè)備： 呼吸測(cè)定裝置（小籃子）； 電子天平； 酸式及堿式滴定管。3）試劑：飽和Ba(OH)2溶液144mol/l 草酸溶液酚酞指示劑 4. 實(shí)驗(yàn)步驟1）

3、取500ml 廣口瓶4個(gè)，標(biāo)記為0、1、2、3號(hào)，瓶口用橡皮塞塞緊，瓶塞下面掛一鐵絲小籃，以便裝植物樣品，整個(gè)裝置即謂“廣口瓶呼吸測(cè)定裝置”。Ba(OH)2溶液2）稱取20g死種子，放入其中的一個(gè)小籃子中；再稱取3份活種子，每份20g，分別放入另外3個(gè)小籃子中；3）分別在4個(gè)廣口瓶中準(zhǔn)確加入20ml飽和Ba(OH)2溶液；4）將3個(gè)放有活種子的小籃子分別掛在編號(hào)為13的廣口瓶?jī)?nèi)，蓋緊瓶塞，在低溫（1號(hào)，冰箱冷藏室）、室溫（2號(hào)）和高溫（3號(hào)，40C）中處理，經(jīng)常搖動(dòng)，以破壞堿液表面的硬膜；5）將放有死種子的小籃子掛在0號(hào)廣口瓶?jī)?nèi)，在室溫中按以上步驟處理；6）20min后，取出廣口瓶中的小籃子，

4、加入12滴酚酞指示劑，蓋緊瓶蓋；7）用草酸滴定廣口瓶中的堿液至紅色剛好消失為止，記錄空白及各個(gè)溫度處理下的草酸用量（記為V0、V1、V2、V3）；編號(hào)0123種子（10g）死種子活種子活種子活種子溫度室溫低溫4C室溫高溫40CBa(OH)220ml反應(yīng)時(shí)間20min草酸體積V0V1V2V3實(shí)驗(yàn)處理情況列表5. 數(shù)據(jù)記錄與處理處理空白滴定草酸用量（ml）處理滴定草酸用量（ml）空白與處理草酸用量差值（ml）呼吸速率（mgCO2 g1 fw h1）低溫室溫高溫結(jié)果計(jì)算與分析呼吸速率v（mgCO2 g1 fw. h1）：上式中，V0：空白滴定用去的草酸量（ml） Vn：處理滴定用去的草酸量（ml）v =（V0-Vn）X 草酸濃度 X CO2分子量種子質(zhì)量（g）X 反應(yīng)時(shí)間（h）=（V0-Vn）X X 4410 X0.3 X（V0-Vn）=4416020注意事項(xiàng)防止口中呼出的氣體進(jìn)