實驗6-小籃子法測定種子呼吸速率

1、實驗六 環(huán)境溫度對種子呼吸速率的影響（p165166）小籃子法測定種子呼吸速率呼吸速率是植物生命活動最重要的指標之一。測定呼吸速率的方法很多，可以分成兩大類：測定吸氧速率或者測定放出CO2速率。前者有測壓法、氧電極法；后者有小籃子法、紅外線CO2氣體分析儀（IRGA）等方法。測壓法、氧電極法是測定植物呼吸過程對O2的吸收，樣品用量少，且精確度高。利用紅外線CO2氣體分析儀測定植物呼吸速率比較快速、準確，是科研上常采用的方法。呼吸速率的測定方法1. 實驗目的1）學習呼吸強度的堿吸收測定方法；2）了解環(huán)境因素（如溫度）對呼吸強度的影響。 2. 實驗原理（小籃子法）植物進行呼吸時放出CO2，計算一定

2、的植物樣品在單位時間內放出CO2的數(shù)量，即為該樣品呼吸速率。呼吸放出的CO2可用氫氧化鋇溶液吸收，實驗結束后用已知濃度的草酸溶液滴定剩余的堿液，從空白和樣品二者消耗草酸溶液之差即可計算出呼吸過程中釋放的CO2的量。 Ba(OH)2 +CO2 BaCO3+ H2OBa(OH)2（剩余）+ H2C2O4BaC2O4+ 2H2O每毫升144 mol/l 的草酸相當于1mg CO2 3. 材料和儀器設備1）材料： 發(fā)芽的小麥種子和煮死的小麥種子2）儀器設備： 呼吸測定裝置（小籃子）； 電子天平； 酸式及堿式滴定管。3）試劑：飽和Ba(OH)2溶液144mol/l 草酸溶液酚酞指示劑 4. 實驗步驟1）

3、取500ml 廣口瓶4個，標記為0、1、2、3號，瓶口用橡皮塞塞緊，瓶塞下面掛一鐵絲小籃，以便裝植物樣品，整個裝置即謂“廣口瓶呼吸測定裝置”。Ba(OH)2溶液2）稱取20g死種子，放入其中的一個小籃子中；再稱取3份活種子，每份20g，分別放入另外3個小籃子中；3）分別在4個廣口瓶中準確加入20ml飽和Ba(OH)2溶液；4）將3個放有活種子的小籃子分別掛在編號為13的廣口瓶內，蓋緊瓶塞，在低溫（1號，冰箱冷藏室）、室溫（2號）和高溫（3號，40C）中處理，經(jīng)常搖動，以破壞堿液表面的硬膜；5）將放有死種子的小籃子掛在0號廣口瓶內，在室溫中按以上步驟處理；6）20min后，取出廣口瓶中的小籃子，

4、加入12滴酚酞指示劑，蓋緊瓶蓋；7）用草酸滴定廣口瓶中的堿液至紅色剛好消失為止，記錄空白及各個溫度處理下的草酸用量（記為V0、V1、V2、V3）；編號0123種子（10g）死種子活種子活種子活種子溫度室溫低溫4C室溫高溫40CBa(OH)220ml反應時間20min草酸體積V0V1V2V3實驗處理情況列表5. 數(shù)據(jù)記錄與處理處理空白滴定草酸用量（ml）處理滴定草酸用量（ml）空白與處理草酸用量差值（ml）呼吸速率（mgCO2 g1 fw h1）低溫室溫高溫結果計算與分析呼吸速率v（mgCO2 g1 fw. h1）：上式中，V0：空白滴定用去的草酸量（ml） Vn：處理滴定用去的草酸量（ml）v =（V0-Vn）X 草酸濃度 X CO2分子量種子質量（g）X 反應時間（h）=（V0-Vn）X X 4410 X0.3 X（V0-Vn）=4416020注意事項防止口中呼出的氣體進