結(jié)核分枝桿菌培養(yǎng)基制備、保存、質(zhì)量控制ppt課件

1、培育基制備、保管、質(zhì)量控制結(jié)核病國家參比室姜廣路.內(nèi)容培育基制備需求的儀器培育基制備需求的試劑培育基制備步驟和方法培育基制備本卷須知.培育基制備需求的儀器、耗材l 天平(靈敏度為0.01g)、稱量匙或勺、稱量紙l 高壓滅菌器或電爐l 蒸汽凝固器l PH計l 簡易分裝安裝l 培育管螺旋蓋l 打蛋器l 廣口瓶、錐形瓶l 鑷子l 消毒紗布、漏斗過濾混勻的雞蛋l(fā) 水浴. 酸性羅氏Lowenstein-Jensen培育基 天門冬素 3.6g 或谷氨酸鈉純度99%以上7.2gKH2PO4 14.0gMgSO4.7H2O 0.24g枸櫞酸鎂 0.6g丙三醇 12ml蒸餾水 600ml新穎雞卵液 1000ml

2、2%孔雀綠 20ml培 養(yǎng) 基 組 份.培育基制備需求的試劑2% 孔雀綠溶液，單獨配制 n孔雀綠染料2 g滅菌去離子水100 ml 運用無菌技術(shù)溶解染料于滅菌去離子水中放置于37C溫箱中小時或者在水浴中加熱。配制好的溶液儲存于深色瓶中。此溶液長時間放置并不穩(wěn)定，假設(shè)發(fā)生沉淀，應(yīng)丟棄并重新配制。 .培育基制備需求的試劑l 雞蛋應(yīng)該新穎不超越天，母雞喂養(yǎng)時飼料不應(yīng)運用抗生素。選擇中等大小的雞蛋，蛋白、蛋黃平衡的，即平均每升雞蛋大約個。. 培育基運用的本卷須知： 保管：4、密閉、直立。 1個月內(nèi)運用。 運用前恢復(fù)至室溫，并檢查污染情況。 在斜面的反面標注痰標本號、病人姓名、接種日期。 每份痰標本接種

3、2支培育基。 .培育基制備步驟和方法清潔、消毒桌面。用肥皂水清潔雞蛋，并用70%乙醇擦洗，晾干。雞蛋打入滅菌的容器內(nèi)，控制新穎度。將整個雞蛋轉(zhuǎn)入容器內(nèi)進展勻化經(jīng)過無菌的棉紗布過濾。參與鹽溶液。參與孔雀綠。緩慢混合一切的成分，防止氣泡、混勻。在培育管中分裝6-8 ml液體。.培育基制備步驟和方法將試管放在架子上，并堅持足夠的傾斜度，放在蒸汽凝固器中85C 50分鐘。將管子從蒸汽凝固器，并作標志。管子到達室溫時旋緊螺旋蓋否那么冷凝將會產(chǎn)生更多的水。將培育管直立放置于冰箱中，最好放在塑料袋或者容器內(nèi)。記錄批號的信息看下邊信息。 .培育基制備本卷須知培育基制備最好在公用“培育基制備間內(nèi)進展，制備培育基

4、時應(yīng)有相應(yīng)制造過程的記錄。 培育基制備前“培育基制備間的空氣、臺面等應(yīng)進展消毒。 制備培育基的一切物品器具應(yīng)高壓滅菌。.培育基制備本卷須知無菌實驗后，雖然沒有發(fā)現(xiàn)有可見菌落出現(xiàn)，但培育基曾經(jīng)變藍色或變黃色，與藍綠色或黃綠色有明顯區(qū)別時，應(yīng)視為污染棄去。每批培育基應(yīng)作無菌實驗。 .質(zhì)量控制內(nèi)容顏色質(zhì)地 濕度 勻質(zhì)性無菌性敏感性.顏色同一批制造的培育基假設(shè)呈現(xiàn)不同的顏色能夠是由于混勻得不好或者培育管中出現(xiàn)金屬沉渣。假設(shè)顏色為非常深的綠色能夠是由于孔雀綠過多或者PH值太低呈酸性。黃色的培育基闡明孔雀綠質(zhì)量不好或者PH值太高呈堿性。凝固的培育基顏色變淺還能夠是由于過高的溫度所致。 .質(zhì)地假設(shè)培育基液化

5、或者很容易碎裂，能夠是凝固溫度太低了。可以隨機抽取一批培育基中的1-2支培育管向手上敲打檢測。質(zhì)地較差的培育基不適宜于培育接種。 .濕度培育管的底部應(yīng)該有一些凝固水。然而，過多的水闡明在凝固后過早的將螺旋蓋旋緊或者培育基的成分不規(guī)范。當培育管挪動時培育基應(yīng)該不可以轉(zhuǎn)動。 .勻質(zhì)性假設(shè)凝固過程中培育基中有小泡，能夠是由于培育基凝固溫度過高，質(zhì)量遭到了影響。培育基中出現(xiàn)了塊狀闡明勻質(zhì)性較差。 .無菌性每批新制造的培育基要進展無菌實驗。36C孵育2天后應(yīng)該沒有細菌生長。 .培育基保管為了防止剩余過多過期的培育基，培育基應(yīng)該儲存在非常干凈的、有一定濕度的地方，最好是在4C冰箱內(nèi)，保管期限不超越2個月。標志應(yīng)該顯示：l 培育基的稱號l 制造者的稱號實驗室標示l