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文檔簡介
1、 實驗十三 石蠟切片法(二) 透明、透蠟、包埋 一、實驗原理 透明 是指利用透明劑既可與脫水劑相混合又能和石蠟相混合的性質(zhì),將脫水劑替換出來,使石蠟?zāi)茼樌M入材料中。 透蠟 是指將材料中的透明劑逐步清除,以至完全由石蠟充分滲透。 包埋 是把被石蠟浸透的材料連同熔化的石蠟一起倒入一定形狀的容器內(nèi),并立即投入冷水中,使它凝固成含材料的蠟塊,以備切片。1二、試劑與器材 1.試 劑:1/2 無水乙醇+1/2二甲苯、 二甲苯、 1/2二甲苯+1/2石蠟、 純石蠟。 2.器 材:恒溫箱、蠟杯、鑷子、解剖針、 酒精燈、塑料面盆、溫臺。 2三、實驗程序1透明:透明也是漸次由低濃度至高濃度。材料先在純酒精和二甲
2、苯各半的混合液浸1530分鐘,再轉(zhuǎn)入純二甲苯中透明(至透明為止),一般1530分鐘。 2透蠟:材料自二甲苯中取出后,先移入二甲苯和石蠟等量的混合液中約30分鐘,然后進入純石蠟中約4060分鐘,再換純石蠟一次約4060分鐘。3 附:植物材料的透蠟過程必須緩慢進行,所須的時間約需1-2天。其方法如下:將材料連同二甲苯一起倒入小蠟杯中;然后輕輕倒入溶解的石蠟。石蠟就在二甲苯的上層凝固起來。此時可將小蠟杯放在35-37C溫箱內(nèi),使石蠟徐徐熔解到飽和為止,約需1-2天;將蠟杯移入56-60C溫箱中,待石蠟熔解后,倒去含有二甲苯的石蠟,以后每隔1小時左右更換已熔的純蠟一次,共換純蠟2-3次即可進行包埋。4
3、 3包埋:從溫箱中取出盛放純石蠟的蠟杯,倒入包埋用的紙盒中,取出存放材料的蠟杯,用溫鑷子夾取材料平放于紙盒底部,使之排列整齊。將紙盒兩側(cè)的把手提起,慢慢地平放在面盆的水面,待石蠟的表面凝固,將紙盒慢慢浸入水中,待石蠟完全凝固(約30分鐘)后即可取出備用。5四、注意事項 透明的注意事項 使用透明劑時,要隨時蓋緊蓋子,以免空氣中水分進入; 更換透明劑,動作要迅速; 材料周圍出現(xiàn)白色霧狀,應(yīng)退回純酒精中重新脫水。 透蠟的注意事項 動物材料常用的石蠟熔點為52-56C;植物材料為54-60C。 透蠟溫度要恒定,不可忽高忽低; 包埋的注意事項 包埋前應(yīng)先把必需的用具(恒溫箱、溫臺、紙盒)準備好。 包埋用的鑷子要先放
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