茶產(chǎn)品特定成分檢驗ppt課件

1、第四章 茶產(chǎn)品特定成分檢驗茶葉特定成分概述茶產(chǎn)品特定成分檢驗.教學目的和要求了解茶產(chǎn)品特定成分檢驗的含義、作用 了解茶產(chǎn)品特定成分檢驗的普通內(nèi)容、原理掌握茶產(chǎn)品特定成分檢驗的根據(jù)方法 .第一節(jié) 茶產(chǎn)品特定成分概述茶作為一種特殊的食品，廣受消費者的歡迎。茶葉曾經(jīng)成為世界性飲品，目前全世界有30多億人飲茶。茶葉的品飲是人們?nèi)蝿?wù)、生活的重要組成部分。茶葉的質(zhì)量平安直接或間接與人們的生活質(zhì)量親密相關(guān)。消費者從單純追求茶葉產(chǎn)品的品味、營養(yǎng)開展到關(guān)注食品的質(zhì)量平安和對身體的調(diào)理功能，從解渴功能類食品開展到天然、營養(yǎng)、以及有益于安康的質(zhì)量平安型食品。.茶葉區(qū)別于其他食品的主要緣由是其特有的化學成分。茶產(chǎn)品特

2、定成分檢驗是對茶主要的化學成分進展的檢驗，主要有水分檢驗，灰分檢驗，水浸出物檢驗，茶多酚檢驗，咖啡堿檢驗，其他茶普通成分檢驗茶紅素、茶黃素、粗纖維、茶味道 等。.茶產(chǎn)品特定成分檢驗的意義和作用茶產(chǎn)品特定成分是其區(qū)別于其他食品的重要標志，是衡量茶產(chǎn)質(zhì)量量的重要根據(jù)；提高茶產(chǎn)質(zhì)量量，可以推進消費的開展；茶產(chǎn)質(zhì)量量是進入市場的通行證；茶產(chǎn)質(zhì)量量是茶產(chǎn)業(yè)生存、開展的根底；茶產(chǎn)質(zhì)量量是消費者生活安康的重要保證 。.茶產(chǎn)品檢驗的類別出廠檢驗：每批產(chǎn)品均應(yīng)做出廠檢驗，經(jīng)檢驗合格簽發(fā)合格證后，方可出廠。檢驗工程普通為：感官質(zhì)量、碎茶和粉末、水分、總灰分、凈含量等；型式檢驗：產(chǎn)質(zhì)量量規(guī)范中的檢驗工程都進展檢驗。

3、檢驗周期每年2次。有以下情況時，應(yīng)進展型式檢驗：如原料有較大改動，能夠影響產(chǎn)質(zhì)量量時；停產(chǎn)半年以上恢復(fù)消費時；國家法定質(zhì)量監(jiān)視機構(gòu)提出型式檢驗要求時。茶學研討檢驗.第二節(jié) 特定化學成分檢驗一、水分檢驗水分：在常壓條件下，試樣經(jīng)規(guī)定的溫度加熱至恒重時的質(zhì)量損失。檢驗方法根據(jù)：水分測定方法較多，檢驗時根據(jù)各類茶產(chǎn)品水分檢驗規(guī)范，在此以GB/T8304-2021為例。測定原理：試樣于1032 的電熱恒溫枯燥箱中加熱至恒重，稱重，并計算試樣損失的質(zhì)量即為水分。.儀器及器具樣品容器:清潔、枯燥、避光、密閉的玻璃或不與樣品發(fā)生反響的的資料制成；大小以能裝滿磨碎樣為宜鋁質(zhì)或玻璃質(zhì)烘皿：具蓋，內(nèi)徑75mm80

4、mm電熱鼓風恒溫枯燥箱：溫控1032 枯燥器：內(nèi)盛有效枯燥劑分析天平：感量0.001g.操作方法取樣：按GB/T 8302的規(guī)定取樣。試樣制備：按GB/T 8303的規(guī)定制備樣茶。烘皿的預(yù)備：將干凈的烘皿連同蓋置于 1032 的枯燥箱內(nèi)皿蓋翻開斜至皿邊，加熱1h，加蓋取出，于枯燥器內(nèi)冷卻至室溫。稱量準確至0.001g 。.測定仲裁法 1032 恒重法：稱取5g準確至0.001g 試樣于知質(zhì)量的烘皿中，置于1032 枯燥箱內(nèi)皿蓋翻開斜至皿邊。加熱4h，加蓋取出，于枯燥器內(nèi)冷卻至室溫，稱量。再置于枯燥箱內(nèi)加熱1h，加蓋取出，于枯燥器內(nèi)冷卻，稱量準確至0.001g 。反復(fù)加熱1h的操作，直至延續(xù)兩次

5、稱量差不超越0.005g，即為恒重，以最小稱量為準。快速法120 烘干法：稱取5g準確至0.001g 試樣于知質(zhì)量的烘皿中，置于120枯燥箱內(nèi)皿蓋翻開斜至皿邊。以2min內(nèi)上升到120 時計算 ，加熱1h，加蓋取出，于枯燥器內(nèi)冷卻至室溫，稱量準確至0.001g 。.結(jié)果計算：茶葉水分含量以質(zhì)量分數(shù)%表示 假設(shè)符合反復(fù)性要求，取兩次測定的算術(shù)平均值作為結(jié)果保管小數(shù)點后1位。反復(fù)性：在反復(fù)條件下同一樣品獲得的測定結(jié)果的絕對差值不得超越算術(shù)平均值的5%。 注：用第二法測定茶葉水分，反復(fù)性達不到要求時，按第一法規(guī)定進展測定。.二、水浸出物檢驗水浸出物：在規(guī)定條件下，用沸水浸出茶葉中的水可溶性物質(zhì)。檢驗

6、方法根據(jù)：GB/T 8305-2021測定原理：用沸水回流提取茶葉中的水可溶性物質(zhì)，再經(jīng)過濾、沖洗、枯燥、稱量浸提后的茶渣，計算水浸出物含量。.儀器及器具電熱鼓風恒溫枯燥箱：溫控1202 沸水浴布氏漏斗連同減壓抽濾安裝鋁質(zhì)或玻璃質(zhì)烘皿：具蓋，內(nèi)徑75mm80mm枯燥器：內(nèi)盛有效枯燥劑分析天平：感量0.001g錐形瓶：500mL磨碎機：由不吸收水分的資料制成；死角盡能夠小，易于清掃；內(nèi)裝孔徑為3mm的篩子。.操作方法取樣：按GB/T 8302的規(guī)定取樣。試樣制備：先用磨碎機將少量試樣磨碎，棄去，在磨碎其他部分。烘皿預(yù)備：將干凈的烘皿連同15cm定性快速濾紙置于 1202 的恒溫枯燥箱內(nèi)，皿蓋翻開

7、斜至皿邊，烘干1h，加蓋取出，在枯燥器內(nèi)冷卻至室溫。稱量準確至0.001g 。.測定步驟：稱取2g準確至0.001g 磨碎試樣于500mL錐形瓶中，加沸蒸餾水300mL，立刻移入沸水浴中浸提45min每隔10min搖動一次。浸提終了后立刻趁熱減壓過濾用途置過的濾紙。用約150mL沸蒸餾水洗滌茶渣數(shù)次，將茶渣連同知質(zhì)量的濾紙移入烘皿內(nèi)，然后移入1202 的恒溫枯燥箱內(nèi)，皿蓋翻開斜至皿邊，烘干1h，加蓋取出，冷卻1h后再烘1h，立刻移入枯燥器內(nèi)冷卻至室溫，稱量準確至0.001g 。.結(jié)果計算計算方法：茶葉中水浸出物含量以干態(tài)質(zhì)量分數(shù)%表示： 假設(shè)符合反復(fù)性要求，取兩次測定的算術(shù)平均值作為結(jié)果，結(jié)果

8、保管小數(shù)點后1位。反復(fù)性：在反復(fù)條件下同一樣品獲得的測定結(jié)果的絕對差值不得超越算術(shù)平均值的2%。.三、總灰分檢驗總灰分：在規(guī)定條件下，茶葉經(jīng)525 25 灼燒灰化后所得的殘渣。檢驗方法根據(jù)：GB/T 8306-2021測定原理：試樣經(jīng)525 25 加熱灼燒，分解有機物至恒重。.儀器及器具坩堝：鉑金、瓷質(zhì)或者其他不會被測定條件影響的材質(zhì)。高型、容量30mL。電熱板。高溫電爐：能溫控525 25 ?？菰锲鳎簝?nèi)盛有效枯燥劑。坩堝鉗。分析天平：感量0.001g。.操作方法取樣：按GB/T 8302的規(guī)定。試樣制備：按GB/T 8303的規(guī)定。坩堝的預(yù)備：將干凈的坩堝置于 525 25 高溫電爐內(nèi)，灼燒

9、1h，待爐溫降至300 左右時 取出坩堝，于枯燥器內(nèi)冷卻至室溫，稱量準確至0.001g 。.測定方法：稱取混勻的磨碎試樣2g準確至0.001g 于坩堝內(nèi)，在電熱板上徐徐加熱，使試樣充分炭化至無煙，將坩堝移入52525 高溫電爐內(nèi)，灼燒至無炭粒不少于2h，待爐溫降至300 左右時，取出坩堝，置于枯燥器內(nèi)冷卻至室溫，稱量。再移入高溫電爐內(nèi)以52525 溫度灼燒1h，取出，冷卻，稱量。再移入高溫電爐內(nèi)，灼燒30min，取出，冷卻，稱量。反復(fù)此操作，直至延續(xù)兩次稱量差不超越0.001g 為止。以最小稱量為準。其他：必要時，可保管總會分供水溶性灰分和水不溶性灰分的測定。.結(jié)果計算計算方法：茶葉總灰分含量

10、以干態(tài)質(zhì)量分數(shù)%表示： 假設(shè)反復(fù)性符合要求，取兩次測定的算術(shù)平均值作為結(jié)果保管小數(shù)點后1位。反復(fù)性：在反復(fù)條件下同一樣品獲得的測定結(jié)果的絕對差值不得超越算術(shù)平均值的5%。.四、水溶性灰分和水不溶性灰分檢驗水溶性灰分：在規(guī)定條件下，總灰分中溶于水的部分。水不溶性灰分：在規(guī)定條件下，總灰分中不溶于水的部分。檢驗方法根據(jù)：GB 5009.4-2021替代原GB/T 8307-2021 茶 水溶性灰分和水不溶性灰分測定、GB/T 8308-2021 茶 酸不溶性灰分測定。測定原理：用熱水提取總灰分，經(jīng)無灰濾紙過濾、灼燒、稱量殘留物，測得水不溶性灰分，由總灰分和水不溶性灰分的質(zhì)量之差計算水溶性灰分。.儀

11、器及器具高溫爐：最高溫度950。分析天平：感量分別為0.1mg、1mg、0.1g。石英坩堝或瓷坩堝?？菰锲?內(nèi)有枯燥劑)。無灰濾紙。漏斗。外表皿：直徑6cm。燒杯(高型)：容量100mL。恒溫水浴鍋：控溫精度2。.操作方法坩堝預(yù)處置：取大小適宜的石英坩堝或瓷坩堝置高溫爐中，在55025下灼燒30min，冷卻至200左右，取出，放入枯燥器中冷卻30min，準確稱量。反復(fù)灼燒至前后兩次稱量相差不超越0.5mg為恒重。稱樣：灰分大于或等于10g/100g的試樣稱取2g3g(準確至0.0001g)；灰分小于或等于10g/100g的試樣稱取3g10g(準確至0.0001g，對于灰分含量更低的樣品可適當添

12、加稱樣量)。.總灰分制備：按GB/T 8306的規(guī)定。測定方法：用約25mL熱蒸餾水分次將總灰分從坩堝中洗入100mL燒杯中，蓋上外表皿，用小火加熱至微沸,防止溶液濺出。趁熱用無灰濾紙過濾，并用熱蒸餾水分次洗滌杯中殘渣，直至濾液和洗滌體積約達150mL為止，將濾紙連同殘渣移入原坩堝內(nèi)，放在沸水浴鍋上小心地蒸去水分，然后將坩堝烘干并移入高溫爐內(nèi)，以55025灼燒至無炭粒(普通需1h)。待爐溫降至200時，放入枯燥器內(nèi)，冷卻至室溫，稱重(準確至0.0001g)。再放入高溫爐內(nèi)，以55025灼燒30min，如前冷卻并稱重。如此反復(fù)操作，直至延續(xù)兩次稱重之差不超越0.5mg為止，記下最低質(zhì)量。.結(jié)果計

13、算計算方法：以試樣質(zhì)量計水不溶性灰分的含量 X1=m1-m2/m3-m2100 式中： X1水不溶性灰分的含量，單位為克每百克(g/100g)； m1坩堝和水不溶性灰分的質(zhì)量，單位為克(g)； m2坩堝的質(zhì)量，單位為克(g)； m3坩堝和試樣的質(zhì)量，單位為克(g)； 100單位換算系數(shù)。.水溶性灰分的含量,按式(6)計算: X2 =m4 -m5/m0100 式中： X2水溶性灰分的質(zhì)量，單位為克(g/100g)； m0 試樣的質(zhì)量，單位為克(g)； m4總灰分的質(zhì)量，單位為克(g)； m5 水不溶性灰分的質(zhì)量，單位為克(g)；.以干物質(zhì)計水不溶性灰分的含量： X1 =m1 -m2/ (m3 -

14、m2)100 式中： X1水不溶性灰分的含量，單位為克每百克(g/100g)； m1坩堝和水不溶性灰分的質(zhì)量，單位為克(g)； m2坩堝的質(zhì)量，單位為克(g)； m3坩堝和試樣的質(zhì)量，單位為克(g)； 試樣干物質(zhì)含量(質(zhì)量分數(shù))，%； 100單位換算系數(shù)。.水溶性灰分的含量： X2 =m4 -m5/m0 100 式中： X2 水溶性灰分的質(zhì)量，單位為克(g/100g)； m0 試樣的質(zhì)量，單位為克(g)； m4 總灰分的質(zhì)量，單位為克(g)； m5 水不溶性灰分的質(zhì)量，單位為克(g)； 試樣干物質(zhì)含量(質(zhì)量分數(shù))，%； 100單位換算系數(shù)。 試樣中灰分含量10g/100g時，保管三位有效數(shù)字；

15、試樣中灰分含量10g/100g時，保管兩位有效數(shù)字。精細度反復(fù)性：在反復(fù)性條件下獲得的兩次獨立測定結(jié)果的絕對差值不得超越算術(shù)平均值的5%。.五、酸不溶性灰分檢驗酸不溶性灰分：在規(guī)定條件下，總灰分經(jīng)鹽酸處置后的殘留部分。檢驗方法根據(jù)：GB 5009.4-2021替代原GB/T 8307-2021 茶 水溶性灰分和水不溶性灰分測定、GB/T 8308-2021 茶 酸不溶性灰分測定。測定原理：用鹽酸溶液處置總灰分，過濾、灼燒、稱量殘留物。.儀器及器具高溫爐：最高溫度950。分析天平：感量分別為0.1mg、1mg、0.1g。石英坩堝或瓷坩堝?？菰锲?內(nèi)有枯燥劑)。無灰濾紙。漏斗。外表皿：直徑6cm。

16、燒杯(高型)：容量100mL。恒溫水浴鍋：控溫精度2。.操作方法坩堝處置：見前稱樣：見前總灰分處置：見前.測定方法 用25mL10%鹽酸溶液將總灰分分次洗入100mL燒杯中，蓋上外表皿，在沸水浴上小心加熱，至溶液由渾濁變?yōu)橥该鲿r，繼續(xù)加熱5min，趁熱用無灰濾紙過濾，用沸蒸餾水少量反復(fù)洗滌燒杯和濾紙上的殘留物，直至中性(約150mL)。將濾紙連同殘渣移入原坩堝內(nèi)，在沸水浴上小心蒸去水分，移入高溫爐內(nèi)，以55025灼燒至無炭粒(普通需1h)。待爐溫降至200時，取出坩堝，放入枯燥器內(nèi)，冷卻至室溫，稱重(準確至0.0001g)。再放入高溫爐內(nèi)，以550 25 灼燒30min，如前冷卻并稱重。如此反

17、復(fù)操作，直至延續(xù)兩次稱重之差不超越0.5mg為止，記下最低質(zhì)量。.結(jié)果計算以試樣質(zhì)量計：酸不溶性灰分的含量： X1 =m1 -m2/m3 -m2100 式中： X1 酸不溶性灰分的含量,單位為克每百克(g/100g)； m1 坩堝和酸不溶性灰分的質(zhì)量，單位為克(g)； m2坩堝的質(zhì)量，單位為克(g)； m3 坩堝和試樣的質(zhì)量，單位為克(g)； 100單位換算系數(shù)。.以干物質(zhì)計：酸不溶性灰分的含量： X1 =m1-m2/(m3 -m2)100 式中： X1酸不溶性灰分的含量，單位為克每百克(g/100g)； m1坩堝和酸不溶性灰分的質(zhì)量，單位為克(g)； m2坩堝的質(zhì)量，單位為克(g)； m3坩

18、堝和試樣的質(zhì)量，單位為克(g)； 試樣干物質(zhì)含量(質(zhì)量分數(shù))，%； 100單位換算系數(shù)。 試樣中灰分含量10g/100g時，保管三位有效數(shù)字；試樣中灰分含量10g/100g時，保管兩位有效數(shù)字。精細度反復(fù)性：在反復(fù)性條件下同一樣品獲得的測定結(jié)果的絕對差值不得超越算術(shù)平均值的5%。.六、水溶性灰分堿度檢驗水溶性灰分堿度：中和水溶性灰分浸出液所需求酸的量，或相當于該酸量的堿量。檢驗方法根據(jù)：GB/T 8309-2021。測定原理：用甲基橙作指示劑，以鹽酸規(guī)范溶液滴定來自水溶性灰分的溶液。.儀器及器具滴定管：容量50mL。三角燒瓶：250ml。試劑和溶液鹽酸：0.1mol/L規(guī)范溶液，按GB/T 6

19、01配置與標定。甲基橙指示劑：甲基橙0.5g，用熱蒸餾水溶解后稀釋至1L。.操作方法取樣：按GB/T 8302的規(guī)定。試樣制備：按GB/T 8303的規(guī)定。水溶性灰分溶液的制備：按GB 5009.4的規(guī)定。測定：將水溶性灰分溶液冷卻后，加甲基橙指示劑2滴，用0.1mol/L鹽酸溶液滴定。運用兩次測定水溶性灰分和水不溶性灰分的濾液，平行測定兩次。.結(jié)果計算計算方法：堿度的表示，即中和100g干態(tài)磨碎樣品所需的一定濃度鹽酸的物質(zhì)的量，或換算為相當于干態(tài)磨碎樣品中所含氫氧化鉀的質(zhì)量分數(shù)。堿度用100g干態(tài)磨碎樣品所需鹽酸物質(zhì)的量mol/100g表示 式中： V滴定時耗費0.1mol/L鹽酸規(guī)范溶液的

20、體積，單位為毫升mL； m0試樣的質(zhì)量，單位為克g； w 試樣干物質(zhì)含量質(zhì)量分數(shù)，%。 注：假設(shè)運用鹽酸規(guī)范溶液的濃度未準確到所要求的濃度，那么計算時用校正系數(shù)滴定濃度/0.1。 .堿度用氫氧化鉀的質(zhì)量分數(shù)%表示 水溶性灰分堿度=56V/(10*1000*m0*w)*100% 式中： V、m0、w與上一樣； 56氫氧化鉀的摩爾質(zhì)量，單位為克每摩爾g/mol。 假設(shè)符合反復(fù)性的要求，那么取兩次測定的算術(shù)平均值作為結(jié)果保管小數(shù)點后1位。反復(fù)性：在反復(fù)條件下同一樣品獲得的兩次測定結(jié)果的絕對差值不得超越算術(shù)平均值的10%。.七、粗纖維檢驗粗纖維：植物細胞壁的主要組成成分，包括纖維素、半纖維素、木質(zhì)素及

21、角質(zhì)等成分。檢驗方法根據(jù)：GB/T 8310-2021。測定原理：用一定濃度的酸、堿消化處置試樣，殘留物再經(jīng)灰化、稱量。由灰化時的質(zhì)量損失計算粗纖維含量。.儀器及器具：分析天平：感量0.001g。尼龍布：孔徑50m相當于300目。玻璃質(zhì)砂芯坩堝：微孔平均直徑80m160m，體積30mL。高溫電爐： 525 25 。電熱鼓風枯燥箱：溫控120 2 ?？菰锲鳎簝?nèi)盛有效枯燥劑。.試劑和溶液除非另有闡明，所用試劑均為分析純，水為蒸餾水。1.25%硫酸溶液：汲取6.9mL濃硫酸密度為1.84g/mL，質(zhì)量分數(shù)為98.3%，漸漸參與少量水中，冷卻后，定容至1L，搖勻。1.25%氫氧化鈉溶液。1%鹽酸溶液體

22、積分數(shù)：取10mL濃鹽酸密度1.18g/mL，質(zhì)量分數(shù)37.5%，加水定容至1L。搖勻。乙醇95%。丙酮.操作方法：取樣：按GB/T 8302的規(guī)定。試樣制備：按GB/T 8303的規(guī)定。.測定：酸消化：稱取試樣約2.5g準確至0.001g于400mL于燒杯中，參與約100的1.25%硫酸溶液200mL，放在電爐上加熱在1min內(nèi)煮沸。準確微沸30min，并隨時補加熱水，以堅持原溶液的體積。移去熱源，將酸消化液倒入內(nèi)鋪50m尼龍布的布氏漏斗中，漸漸抽氣減壓過濾，并用每次50mL沸蒸餾水洗滌殘渣，直至中性，10min內(nèi)完成。.堿消化：用約100的1.25%氫氧化鈉200mL，將將尼龍布上的殘渣全

23、部洗入原燒杯中，放在電爐上加熱在1min內(nèi)煮沸。準確微沸30min，并隨時補加熱水，以堅持原溶液的體積。將堿消化液連同殘渣倒入銜接抽濾瓶的玻質(zhì)砂芯坩堝中，漸漸抽氣減壓過濾，用50mL左右沸蒸餾水洗滌殘渣，再用1%鹽酸洗滌一次，然后用沸蒸餾水洗滌數(shù)次，直至中性，最后用乙醇洗滌二次，丙酮洗滌三次并抽濾至干，除去溶劑。.枯燥：將上述坩堝及殘留物移入枯燥箱中，120烘4h，放在枯燥器中冷卻，稱量準確至0.001g?；一簩⒁逊Q量的坩堝，置于高溫爐中， 525 25 灰化2h，待爐溫降至300 左右時，取出坩堝，于枯燥器中冷卻，稱量準確至0.001g。.結(jié)果計算計算方法：茶葉中粗纖維含量以干態(tài)質(zhì)量分數(shù)%

24、表示： 式中： m0試樣的質(zhì)量，單位為克g； m1灰化前坩堝及殘留物的質(zhì)量，單位為克g； m2灰化后坩堝、灰分的質(zhì)量，單位為克g； w試樣干物質(zhì)含量質(zhì)量分數(shù)，%。 假設(shè)符合反復(fù)性的要求，取兩次測定的算術(shù)平均值作為結(jié)果保管小數(shù)點后2位。反復(fù)性：在反復(fù)條件下同一樣品獲得的兩次測定結(jié)果的絕對差值不得超越算術(shù)平均值的5%。.八、咖啡堿檢驗咖啡堿：一種黃嘌呤生物堿化合物，是一種中樞神經(jīng)興奮劑，可以暫時的驅(qū)走睡意并恢復(fù)精神。檢驗方法根據(jù)：GB/T 8312-2021。測定原理：高效液相色譜法：茶葉中咖啡堿經(jīng)沸水和氧化鎂混合提取后，經(jīng)高效液相色譜儀、C18分別柱、紫外檢測器檢測，與規(guī)范系列比較定量。紫外分光

25、光度法：茶葉中的咖啡堿易溶于水，除去干擾物質(zhì)后，用特定波長測定其含量。.高效液相色譜法儀器及器具高效液相色譜儀：具有紫外檢測器。分析柱： C18ODS柱反相色譜柱。分析天平：感量0.0001g。.試劑和溶液除非另有闡明，所用試劑均為分析純，水為蒸餾水。氧化鎂：重質(zhì)，分析純。甲醇：色譜純。高效液相色譜流動相：取600mL甲醇倒入1400mL蒸餾水，混勻，過0.45m膜。咖啡堿規(guī)范液：稱取125mg咖啡堿純度不低于99%加乙醇:水1:4溶解，定容至250mL，搖勻，規(guī)范貯藏液1mL中相當于含0.5mg咖啡堿。汲取1.0mL、2.0mL、5.0、10.0mL上述規(guī)范貯藏液，分別加水定容至50mL作為

26、系列規(guī)范任務(wù)液，每1mL該系列規(guī)范任務(wù)液中，分別相當于含10g、20g、50g、100g咖啡堿。.操作方法取樣：按GB/T 8302的規(guī)定。試樣制備：按GB/T 8303的規(guī)定。測定：試液預(yù)備：稱取1.0g準確至0.001g磨碎試樣或0.5g固態(tài)速溶茶準確至0.001g，置于500mL燒瓶中，加4.5g氧化鎂及300mL沸水，于沸水浴中加熱，浸提20min每隔5min搖動一次，浸提終了后立刻趁熱減壓過濾，濾液移入500mL容量瓶中，冷卻后，用水定容至刻度，混勻。取一部分試液，經(jīng)過0.45m濾膜過濾，待測。.色譜條件： 檢測波長紫外檢測器，波長280nm； 流動相； 流速：0.5mL/min1.

27、5mL/min; 柱溫：40； 進樣量：10LL。測定：準確汲取制備液10L20L，注入高效液相色譜儀，并用咖啡堿系列規(guī)范任務(wù)液制造規(guī)范曲線，進展色譜測定。.結(jié)果計算計算方法：比較試樣和規(guī)范樣的峰面積進展定量，茶葉中咖啡堿含量以干態(tài)質(zhì)量分數(shù)%表示： 式中： C1根據(jù)規(guī)范曲線上計算得出的測定液中咖啡堿濃度，單位為微克每毫升g/mL； V1樣品總體積，單位為毫升mL； m試樣的質(zhì)量，單位為克g； w試樣干物質(zhì)含量質(zhì)量分數(shù)，% 假設(shè)符合反復(fù)性的要求，取兩次測定的算術(shù)平均值作為結(jié)果，結(jié)果保管小數(shù)點后1位。反復(fù)性：在反復(fù)條件下同一樣品獲得的測定結(jié)果的絕對差值不得超越算術(shù)平均值的10%。.紫外分光光度法儀

28、器和器具紫外分光光度儀分析天平：感量0.001g。試劑和溶液除非另有闡明，所用試劑均為分析純，水為蒸餾水。堿式乙酸鉛溶液：稱取50g堿式乙酸鉛，加水100mL，靜置過夜，傾出上清液過濾。0.01mol/L鹽酸溶液：取0.9mL濃鹽酸，用水稀釋至1L，搖勻。4.5 mol/L硫酸溶液：取250mL濃鹽酸，用水稀釋至1L，搖勻?？Х葔A規(guī)范液：稱取100mg咖啡堿純度不低于99%溶于100mL水中，作為母液。準確汲取5mL，加水至100mL作為任務(wù)液1mL含咖啡堿0.05mg。.操作方法試液預(yù)備：稱取3g準確至0.001g磨碎試樣于500mL錐形瓶中，加沸蒸餾水450mL，立刻移入沸水浴中，浸提45

29、min每隔10min搖動一次，浸提終了后立刻趁熱減壓過濾，殘渣用少量熱蒸餾水洗滌23次。將濾液轉(zhuǎn)入500mL容量瓶中，冷卻后用水定容至刻度，搖勻。.測定：用移液管準確汲取10mL試液至100mL容量瓶中，參與4mL0.01mol/L鹽酸和1mL堿式乙酸鉛溶液，用水定容至刻度，混勻，靜置廓清過濾。準確汲取濾液25mL，注入50mL容量瓶中參與0.1mL4.5mol/L硫酸溶液，加水稀釋至刻度，搖勻，靜置廓清過濾。用10min石英比色杯，在波長274nm處以試劑空白溶液作參比，測定吸光度A。.咖啡堿規(guī)范曲線的制造：分別汲取0.0mL、1.0mL、2.0mL、3.0mL、4.0mL、5.0mL、6.

30、0mL咖啡堿任務(wù)液于一組25mL容量瓶中，各參與1.0mL鹽酸，用水稀釋至刻度，混勻，用10min石英比色杯，在波長274nm處，以試劑空白溶液作參比，測定吸光度A。將測得的吸光度與對應(yīng)的咖啡堿濃度繪制規(guī)范曲線。.結(jié)果計算計算方法：茶葉中咖啡堿含量以干態(tài)質(zhì)量分數(shù)%表示 式中： C2根據(jù)試樣測得的吸光度A，從咖啡堿規(guī)范曲線上查的的咖啡堿相應(yīng)含量，單位為毫克每毫升mg/mL； V2試液總量，單位為毫升mL； m試樣用量，單位為克g； w試樣干物質(zhì)含量質(zhì)量分數(shù)，%。 假設(shè)符合反復(fù)性的要求，取兩次測定的算術(shù)平均值作為結(jié)果，結(jié)果保管小數(shù)點后1位。反復(fù)性：在反復(fù)條件下同一樣品獲得的測定結(jié)果的絕對差值不得超

31、越算術(shù)平均值的10%。.九、茶多酚和兒茶素類檢驗茶多酚：茶葉中多酚類物質(zhì)的總稱，包括黃烷醇類、花樣苷類、黃酮類、黃酮醇類和酚酸類等。主要為黃烷醇兒茶素類，兒茶素占6080%。 研討闡明，茶多酚等活性物質(zhì)具解毒和抗輻射作用，能有效地阻止放射性物質(zhì)侵入骨髓，并可使鍶90和鈷60迅速排出體外，被安康及醫(yī)學界譽為“輻射克星。兒茶素：又稱兒茶精，茶單寧。為黃烷醇的衍生物，分子式C15H14O6。兒茶素最初由兒茶中提取出。為無色結(jié)晶形固體；能溶于水；其水溶液受熱或在無機酸存在下，容易聚合成無定形鞣質(zhì)。和咖啡因同屬茶葉中的兩大重要機能性成分，但是又以兒茶素為茶湯中最主要的成分。兒茶素可以經(jīng)過血液循環(huán)進入全身

32、，加強新陳代謝，加強脂肪的氧化和能量耗費從而到達抑制肥胖的作用，尤其是對內(nèi)臟脂肪的抑制造用，能到達理想的減肥效果。.檢驗方法根據(jù)：GB/T 8313-2021。測定原理茶多酚：茶葉磨碎樣中的茶多酚用70%的甲醇在70水浴上提取，福林酚試劑氧化茶多酚中-OH基團并顯藍色，最大吸收波長為765nm，用沒食子酸做校正規(guī)范定量茶多酚。兒茶素類：茶葉磨碎樣中的兒茶素用70%的甲醇在70水浴上提取，兒茶素類的測定用C18柱、檢測波長278nm、梯度洗脫、HPLC分析，用兒茶素類規(guī)范物質(zhì)外標法直接定量，也可用兒茶素類與咖啡堿的相對校正因子RRFStdISO國際環(huán)試結(jié)果來定量。.茶葉中兒茶素類的檢測HPLC法

33、儀器及器具分析天平：感量0.0001g。水?。?01 。離心機：轉(zhuǎn)速3500r/min?；靹蚱鳌８咝б合嗌V儀HPLC：包含梯度洗脫及檢測器檢測波長278nm。數(shù)據(jù)處置系統(tǒng)。液相色譜柱：C18粒徑5m，250mm*4.6mm。.試劑所用水均為重蒸餾水，除特殊規(guī)定外，所用試劑為分析純。乙腈：色譜純。甲醇。乙酸。甲醇水溶液體積比：7+3.乙二胺四乙酸EDTA溶液：10mg/mL現(xiàn)配。抗壞血酸溶液：10mg/mL現(xiàn)配。.穩(wěn)定溶液：分別將25mLEDTA溶液、25mL抗壞血酸溶液、50mL乙腈參與500mL容量瓶中，用水定容至刻度，搖勻。液相色譜流動相：流動相A：分別將90mL乙腈、20mL乙酸、2m

34、LEDTA參與1000mL容量瓶中，用水定容至刻度，搖勻。溶液需過0.45m膜。流動相B：分別將800mL乙腈、20mL乙酸、2mLEDTA參與1000mL容量瓶中，用水定容至刻度，搖勻。溶液需過0.45m膜。.規(guī)范貯藏溶液：咖啡堿貯藏溶液：2.00mg/mL。沒食子酸GA貯藏溶液： 0.100mg/mL。兒茶素類貯藏溶液：+C1.00mg/mL，+EC1.00mg/mL，+EGC2.00mg/mL，+EGCG2.00mg/mL，+ECG2.00mg/mL。規(guī)范任務(wù)溶液：用穩(wěn)定溶液配制。 規(guī)范任務(wù)溶液的濃度：沒食子酸5g/mL25g/mL、咖啡堿50g/mL150g/mL、+C50g/mL15

35、0g/mL、+EC50g/mL150g/mL、+EGC100g/mL300g/mL、+EGCG100g/mL400g/mL、+ECG50g/mL200g/mL。.操作方法取樣：按GB/T 8302的規(guī)定。試樣制備：按GB/T 8303的規(guī)定。測定：干物質(zhì)含量測定：按GB/T 8303的規(guī)定。.供試液的制備： 母液：稱取0.2g準確到0.0001g均勻磨碎的試樣于10mL離心管中，參與在70中預(yù)熱過的70%甲醇溶液5mL，用玻璃棒充分攪拌均勻潤濕，立刻移入70水浴中，浸提10min隔5min攪拌一次，浸提后冷卻至室溫，轉(zhuǎn)入離心機在3500r/min轉(zhuǎn)速下離心10min，將上清液轉(zhuǎn)移至10mL容量

36、瓶。殘渣再用5mL的70%甲醇溶液提取一次，反復(fù)以上操作。合并提取液定容至10mL，搖勻，過0.45m膜，待用該提取液在4 下可至多保管24h 。 測試液：用移液管移取母液2mL至10mL容量瓶中，用穩(wěn)定溶液定容至刻度，搖勻，過0.45m膜，待測。.色譜條件 流動相流速：1mL/min。柱溫：35 。紫外檢測器：波長278nm。 梯度條件：100%A相堅持10min 15min內(nèi)由100%A相68%A相、32%B相 68%A相、32%B相堅持10min 100%A相.測定待流速和柱溫穩(wěn)定后，進展空白運轉(zhuǎn)。準確汲取10L混合規(guī)范系列任務(wù)液注射入HPLC。在一樣的色譜條件下注射10L測試液。測試液

37、以峰面積定量。.結(jié)果計算計算方法：以兒茶素類規(guī)范物質(zhì)定量： 式中： A所測樣品中被測成分的峰面積； fStd所測成分的校正因子濃度/峰面積，濃度單位g/mL； V樣品提取液的體積。單位為毫升mL； d稀釋因子通常為2mL稀釋成10mL，那么其稀釋因子為5； m1樣品稱取量，單位為克g； m樣品的干物質(zhì)含量，%。.計算方法：以咖啡堿規(guī)范物質(zhì)定量 式中： RRfStd所測成分相對與咖啡堿的校正因子； SCaf咖啡堿規(guī)范曲線的斜率峰面積/濃度，濃度單位g/mL 。兒茶素類相對咖啡堿的校正因子表名稱GA+EGC+C+EC+EGCG+ECGRRfStd0.8411.243.583.671.721.42.

38、兒茶素類總量計算公式反復(fù)性：同一樣品兒茶素類總量的兩次測定值相對誤差應(yīng)10%，假設(shè)測定值的相對誤差在此范圍，取兩次測得值的算術(shù)平均值為結(jié)果，保管小數(shù)點后2位。.茶葉中茶多酚的檢測儀器及器具分析天平：感量0.001g。水?。?701 。離心機：轉(zhuǎn)速3500r/min。分光光度計。.試劑所用水均為重蒸餾水，除特殊規(guī)定外，所用試劑為分析純。乙腈：色譜純。甲醇。碳酸鈉。甲醇水溶液體積比：7+3。福林酚試劑。10%福林酚試劑現(xiàn)配：將20mL福林酚試劑轉(zhuǎn)移到200mL容量瓶中，用水定容并搖勻。.7.5%碳酸鈉質(zhì)量濃度：稱取37.50g0.01g碳酸鈉，加適量水溶解，轉(zhuǎn)移至500mL容量瓶中，定容至刻度，搖

39、勻室溫下可堅持1個月。沒食子酸規(guī)范貯藏溶液1000 g/mL ：稱取0.110g0.001g沒食子酸，于100mL容量瓶中溶解并定容至刻度，搖勻現(xiàn)配。沒食子酸任務(wù)液：用移液管分別移取1.0、2.0、3.0、4.0、5.0mL的沒食子酸規(guī)范貯藏溶液于100mL容量瓶中，分別用水定容至刻度，搖勻，濃度分別為10、20、30、40、50 g/mL。.操作方法供試液的制備母液：同兒茶素類測定母液制備。測試液：移去母液1.0mL于100mL容量瓶中，用水定容至刻度，搖勻，待測。.測定用移液管分別移取沒食子酸任務(wù)液、水做空白對照用及測試液各1.0mL于刻度試管內(nèi)，在每個試管內(nèi)分別參與5.0mL的福林酚試劑

40、，搖勻。反響3min8min內(nèi)，參與4.0mL7.5%碳酸鈉溶液，加水定容至刻度，搖勻。室溫下放置60min，用10mm比色皿、在765nm波長下用分光光度計測定吸光度A。根據(jù)沒食子酸任務(wù)液的吸光度A與各任務(wù)溶液的沒食子酸濃度，制造規(guī)范曲線。.結(jié)果計算計算方法：比較試樣和規(guī)范任務(wù)液的吸光度 式中： A樣品測試液吸光度； V樣品提取液體積，10mL； d稀釋因子通常為1mL稀釋成100mL，那么其稀釋因子為100； SLOPEStd沒食子酸規(guī)范曲線的斜率； m樣品干物質(zhì)含量，% m1樣質(zhì)量量，單位為克g。.反復(fù)性：同一樣品的兩次測定值，每100g試樣不得超越0.5g，假設(shè)測定值相對誤差在此范圍，

41、那么取兩次測定值的算術(shù)平均值為結(jié)果，保管小數(shù)點后1位。本卷須知：樣品吸光度應(yīng)在沒食子酸規(guī)范任務(wù)曲線的校準范圍內(nèi)，假設(shè)樣品吸光度高于50 g/mL濃度的沒食子酸規(guī)范任務(wù)溶液的吸光度，那么應(yīng)重新配置高濃度沒食子酸規(guī)范任務(wù)液進展校準。.十、游離氨基酸總量檢驗游離氨基酸：茶葉水浸出物中呈游離形狀存在的具有-氨基的有機酸。檢驗方法根據(jù)：GB/T 8314-2021。測定原理： -氨基酸在pH8.0的條件下與茚三酮共熱，構(gòu)成紫色絡(luò)合物，用分光光度法在特定的波長下測定其含量。儀器及器具分析天平：感量0.001g。分光光度計。比色管：具塞，25mL。.試劑和溶液除非另有闡明，所用試劑均為分析純，水為蒸餾水。p

42、H8.0磷酸鹽緩沖液：1/15mol/L磷酸二氫鈉：稱取23.9g十二水磷酸氫二鈉，加水溶解后轉(zhuǎn)入1L容量瓶中，定容至刻度，搖勻。1/15mol/L磷酸二氫鉀：稱取經(jīng)110烘干2h的磷酸氫二鉀9.08g，加水溶解后轉(zhuǎn)入1L容量瓶中，定容至刻度，搖勻。取1/15mol/L得磷酸二氫鈉溶液95mL和1/15mol/L磷酸二氫鉀5mL，混勻，該混合液的pH為8.02%茚三酮溶液：稱取水合茚三酮純度不低于99%2g，加50mL水和80mg氯化亞錫攪拌均勻。分次加少量水溶解，放在暗處，靜置一晝夜，過濾后加水定容至100mL。.茶氨酸或谷氨酸系列規(guī)范任務(wù)液10mg/mL規(guī)范貯藏液：稱取250mg茶氨酸或谷

43、氨酸純度不低于99%溶于適量水中，轉(zhuǎn)移定容至25mL，搖勻。該規(guī)范任務(wù)貯藏液1mL含有10mg的茶氨酸或谷氨酸。移取0.0mL、1.0mL、1.5mL、2.0mL、2.5mL、3.0mL規(guī)范貯藏液，分別加水定容至50mL，搖勻。該系列規(guī)范任務(wù)液1mL分別含有0mg、0.2mg、0.3mg、0.4mg、0.5mg、0.6mg茶氨酸或谷氨酸。.操作方法取樣：按GB/T 8302的規(guī)定。試樣制備：按GB/T 8303的規(guī)定。測定試液制備：按GB/T 8312中4.4.1的規(guī)定。測定：準確汲取試液1mL，注入25mL比色管中，加0.5mLpH8.0磷酸鹽緩沖液和0.5mL2%茚三酮溶液，在沸水浴中加熱

44、15min。待冷卻后加水定容至25mL。放置10min后，用5mm比色杯，在570nm處，以試劑空白溶液作參比，測定吸光度A。.氨基酸規(guī)范曲線的制造：分別汲取1mL茶氨酸或谷氨酸系列規(guī)范任務(wù)液于一組25mL比色管中，各加pH8.0磷酸鹽緩沖液0.5mL和2%茚三酮溶液0.5mL ，在沸水浴中加熱15min。待冷卻后加水定容至25mL，按上面方法測定吸光度A。將測得的吸光度與對應(yīng)的茶氨酸或谷氨酸濃度繪制規(guī)范曲線。.結(jié)果計算計算方法：茶葉中游離氨基酸含量以干態(tài)質(zhì)量分數(shù)%表示： 式中： C根據(jù)測定的吸光度從規(guī)范曲線上查得的茶氨酸或谷氨酸的毫克數(shù)，單位為毫克mg； V1試液總量，單位為毫升mL； V2

45、測定用試液量，單位為毫升mL； m試樣用量，單位為克g; w試樣干物質(zhì)含量質(zhì)量分數(shù)0，%。. 假設(shè)符合反復(fù)性，取兩次測定的算術(shù)平均值作為結(jié)果，保管小數(shù)點后1位。反復(fù)性：在反復(fù)條件下同一樣品獲得的測定結(jié)果的絕對誤差值不得超越算術(shù)平均值的10%。.十一、茶黃素檢驗茶黃素：紅茶中溶于乙酸乙酯呈橙黃色的物質(zhì)，由多酚類及其衍生物氧化縮合而來，紅茶中茶黃素類的含量普通為03%15%，對紅茶的色香味及質(zhì)量起著決議性的作用。由于茶黃素具有多種與人體安康有關(guān)的潛在功能，如抗氧化、防治心血管疾病、降血脂、抗癌防癌等，因此遭到國內(nèi)外的廣泛關(guān)注，成為茶葉質(zhì)量化學與功能成分的研討熱點。檢驗方法根據(jù)：GB/T 30483

46、-2021.測定原理：茶葉磨碎試樣中的茶黃素兒茶素用70%的甲醇在70水浴上提取，速溶茶用熱的10%乙腈溶解。茶黃素兒茶素的測定用C18柱、檢測波長278nm、梯度洗脫、HPLC分析，用茶黃素兒茶素規(guī)范物質(zhì)外標法直接定量。儀器與設(shè)備分析天平：感量0.0001g。水浴。離心機：轉(zhuǎn)速3500r/min?；靹蚱鳌８咝б合嗌V儀HPLC：包含梯度洗脫及紫外檢測器檢測波長278nm。液相色譜柱： C18粒徑5m，250mm*4.6mm。.試劑除非另有闡明，所用試劑均為分析純，水為蒸餾水，。乙腈：色譜純。甲醇。冰乙酸。70%甲醇水溶液體積分數(shù)。10mg/mLEDTA-2Na溶液：現(xiàn)配。10mg/mL抗壞血酸溶液：現(xiàn)配。.穩(wěn)定溶液：分別將25mLEDTA-2Na溶液、25mL抗壞血酸溶液、50mL乙腈參與500mL容量瓶中，用水定容至刻度，搖勻。液相色譜流動相：流動相A：分別將90mL乙腈、20mL冰乙酸、2mLEDTA-2Na參與1L容量瓶中，用水定容至刻度，搖勻。溶液需過0.45m膜。流動相B：分別將800mL乙腈、20mL冰乙酸、2mLEDTA-2Na參與1L容量瓶中，用水定容