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文檔簡介

1、組織胚胎學1第一章 緒論一、組織胚胎學的研究內(nèi)容 組織學:研究正常機體的微細結(jié)構(gòu)及其相關(guān)的功能。包括:細胞細胞是機體形態(tài)結(jié)構(gòu)和功能的基本單位組織組織是由形態(tài)相似,功能相關(guān)的細胞和細胞間質(zhì)(細胞外基質(zhì))組成。有四大基本組織:上皮組織、結(jié)締組織、肌組織、神經(jīng)組織。器官器官是由幾種不同的組織按功能需要合理構(gòu)筑而成。系統(tǒng)由多個功能相關(guān)的器官組合在一起構(gòu)成。2細胞3組織4器官5系統(tǒng)6胚胎學:是研究人體發(fā)生、發(fā)育及其變化規(guī)律的科學,主要研究從受精卵開始,通過細胞的分裂、分化逐漸發(fā)育成新個體的全過程。還包括在胚胎發(fā)育過程中形成的先天性畸形及其原因。 7二、組織學的研究技術(shù)(一)一般光學顯微鏡術(shù)(光鏡、LM

2、):最大分辨率為0.2微米(m),可將物體放大約1500倍。最常用的方法是石蠟切片、HE染色。過程:取材、固定、包埋、切片、脫蠟、染色、透明、封片。 8HE 染色(蘇木精-伊紅染色)(hematoxylin-eosin) 蘇木精將細胞核染成紫蘭色伊紅將細胞質(zhì)染成粉紅色。9嗜堿性、嗜酸性、中性。親銀性:有些組織結(jié)構(gòu)可直接使硝酸銀還原而顯色,稱親銀性。嗜銀性:有些結(jié)構(gòu)需加入還原劑后才能顯色,稱嗜銀性。異染性:有些組織成分用甲苯胺藍等堿性染料染色后不顯藍色而呈紫紅色,這種現(xiàn)象稱異染性。10肝 HE染色11常用長度單位毫米(mm):1mm=1000m微米(m):1m=1000nm納米(nm)12除石蠟

3、切片外,還有:冰凍切片、涂片、鋪片、磨片等。13(二)電子顯微鏡技術(shù)(電鏡,EM )透射電鏡(TEM )和掃描電鏡(SEM )最大分辨率為.納米(nm)、超微結(jié)構(gòu)電子顯微鏡是以電子束代替可見光,以電磁透鏡代替光學透鏡,最后將放大的物像投射到熒光屏上進行觀察。14掃描EM可觀察細胞表面的立體結(jié)構(gòu)。戊二醛固定、合成樹脂包埋、超薄切片、重金屬染色。電子密度高、電子密度低。15 冷凍蝕刻法是透射電鏡下研究膜相結(jié)構(gòu)的一種方法。 標本經(jīng)過驟冷、斷裂、蝕刻、鍍鉑、復型、腐蝕等步驟,將生物膜的類脂雙分子層的疏水層斷開,制成鉑碳復型膜。16光、電鏡圖17掃描EM18圖細胞膜19(三)一般組織化學和細胞化學技術(shù)一

4、般組織化學是通過化學的或物理的反應原理顯示組織切片或細胞內(nèi)的某些化學成分,進行定位、定量,研究它與功能的關(guān)系。如糖類、脂類、酶類、核酸等與試劑發(fā)生化學的或物理的反應,形成有色的終末產(chǎn)物,在光鏡下觀察。如在電鏡下觀察,即電鏡組化。201、過碘酸雪夫氏反應(PAS 反應)過碘酸氧化多糖生成醛基,再與Schiff試劑形成紫色沉淀??娠@示細胞內(nèi)的多糖。多糖-多醛 -紫色沉淀 過碘酸 Schiff試劑212、免疫組織化學技術(shù) 免疫組織化學基本原理是利用抗原與抗體能特異性結(jié)合的特點,檢測細胞中某種肽類及蛋白質(zhì)等大分子物質(zhì)的分布。22 3、熒光組織化學 在免疫組織化學的基礎(chǔ)上,再用熒光素標記抗體,以熒光顯微

5、鏡進行觀察。234、原位雜交術(shù)是一種核酸分子雜交組織化學術(shù)。它可用于檢測細胞內(nèi)mRNA和DNA序列片段,原位研究細胞合成某種多肽或蛋白質(zhì)的基因表達,研究遺傳基因、抗原基因、受體基因、癌基因等在染色體上的定位和表達。原位雜交是一種簡單、直接和精確的核酸定位方法,具有極高的敏感性和特異性,已成為當前細胞生物學、分子生物學研究的主要手段。24(四)細胞和細胞化學定量術(shù)1、顯微分光光度測量術(shù):是應用顯微分光光度計,以物質(zhì)分子對光波的選擇性吸收為基礎(chǔ),在顯微鏡下對生物樣品中的化學物質(zhì)進行定量分析。2、流式細胞術(shù):是近年來發(fā)展起來的細胞分類和定量研究技術(shù)。3、形態(tài)計量術(shù):是運用幾何學和統(tǒng)計學原理,將觀察組織和細胞獲取的二維平面圖像資料,推導出三維立體定量的方法。25(五)細胞分離術(shù)利用離心方法和通過細胞分離器,可把一種或多種細胞從含有多種細胞的群體中分離出來。1、差速離心法2、密度梯度離心法26(六)組織培養(yǎng)技術(shù)觀察活細胞的結(jié)構(gòu)。組織學的研究方法很多。與儀器的進步有關(guān)熒光顯微鏡倒置顯微鏡倒置相差顯微鏡共聚焦激光掃描顯微鏡27 三、組織學在醫(yī)學中的地位 是醫(yī)學中重要的基礎(chǔ)學科。與病理學和臨床各科關(guān)系密切。與生物化學、免疫學、生殖醫(yī)學等相關(guān)科學互相滲透?,F(xiàn)代醫(yī)學研究的熱點,如細胞凋亡、細胞

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