大四藥物分析12級(jí)課件vdve

1、結(jié)構(gòu)：甾醇的衍生物維生素D 維生素D2維生素D31、脂溶性2、不飽和烯烴光、氧氣和其他氧化劑可將其氧化顯色3、手性碳原子旋光性4、UV鑒別-顯色反應(yīng)1與醋酐-濃硫酸反應(yīng)取維生素D2或D3約0.5mg，加氯仿5ml溶解后，加醋酐0.3ml與硫酸0.1ml，振搖，維生素D2初顯黃色，漸變紅色，迅即變?yōu)樽仙詈蟪删G色。維生素D3初顯黃色，漸變紅色，迅即變?yōu)樽仙⑺{(lán)綠色，最后變?yōu)榫G色。2與三氯化銻反應(yīng)取本品適量（約1000單位），加1,2-二氯乙烷1ml溶解，加三氯化銻試液4ml，溶液即顯橙紅色，逐漸變?yōu)榉奂t色。鑒別-比旋度取維生素D2，精密稱定，加無水乙醇溶解并定量稀釋制成每1ml中含40mg的溶

2、液，依法測(cè)定，比旋度為102.5107.5；維生素D3加無水乙醇溶解并定量稀釋制成每1ml中含5mg的溶液，依法測(cè)定，比旋度為105112 鑒別-其他IRUVTLC維生素D2、D3的區(qū)別反應(yīng)取維生素D10mg，溶于96乙醇10ml中。取此液0.1ml，加乙醇1ml和85硫酸5ml。維生素D2顯紅色，在570nm波長(zhǎng)處有最大吸收；維生素D3顯黃色，在495nm波長(zhǎng)處有最大吸收。雜質(zhì)檢查VD2：麥角甾醇（是VD2前體 ,當(dāng)受到紫外線照射時(shí)可轉(zhuǎn)化為維生素D2 ）光照產(chǎn)物有關(guān)物質(zhì)（包含光照產(chǎn)物）-NP-HPLC自身對(duì)照法含量測(cè)定NP-HPLC自身對(duì)照法VD總結(jié)脂溶性不飽和烯烴光、氧氣和其他氧化劑可將其

3、氧化顯色手性碳原子旋光性UV鑒別醋酐-濃硫酸SbCl3TCL*VD2和VD3區(qū)別反應(yīng)：乙醇+硫酸旋光度UV、HPLC檢查NP-HPLCVD2：麥角甾醇光照產(chǎn)物有關(guān)物質(zhì)(NP-HPLC主成分自身對(duì)照)含量測(cè)定NP-HPLCNP-HPLC維生素E 維生素E（vitamin E）：生育酚（ tocopherol） 及其各種酯類。 、等多種異構(gòu)體 活性最強(qiáng)天然異構(gòu)體 右旋體（d ）合成品 消旋體 （dl ）中國藥典收載的維生素E為消旋 生育酚醋酸酯（ dl tocopheryl），收載的制劑有粉劑、片劑、注射劑、膠丸。一、結(jié)構(gòu)和性質(zhì)（一）結(jié)構(gòu) ()-2,5,7,8-四甲基-2-(4,8,12-三甲基十

4、三烷基) - 6-苯駢二氫吡喃醋酸酯 維生素E(消旋 生育酚醋酸酯 ) C31H52O3 = 472.75 維生素E: 苯并二氫吡喃(色滿醇)衍生物, 苯環(huán)上有一個(gè)乙?；姆恿u基結(jié)構(gòu)和性質(zhì)（二）性質(zhì)：1. 性狀、溶解性： 維生素E為微黃色或黃色透明的粘稠液體，幾乎無臭。 易溶于無水乙醇、丙酮、乙醚或石油醚，不溶于水。2. 紫外吸收： 苯環(huán)，紫外吸收，無水乙醇284nm有最大吸收， 為41.045.0 ，可用于鑒別。3. 酚羥基被氧化： 乙?；恿u基 酸性、堿性溶液中加熱水解 游離生育酚氧、氧化劑 醌型化合物/二聚體 二、鑒別試驗(yàn)硝酸反應(yīng)三氯化鐵反應(yīng)紫外光譜法薄層色譜法HPLCIR（一）硝酸反應(yīng)

5、供試品 乙醇溶解 硝酸，75C， 橙紅色 HNO3 ,75C O 維生素E 酸性水解再氧化 生育紅(橙紅色) 鄰醌結(jié)構(gòu)(二)三氯化鐵反應(yīng)供試品 醇制氫氧化鉀 + 聯(lián)吡啶+ 三氯化鐵 血紅色 KOH 生育酚 + Fe3+ + Fe2+ Fe2+ + 3 紅色配離子 (三)紫外光譜法 0.01%無水乙醇液在波長(zhǎng)284nm處有最大吸收, 在波長(zhǎng)254nm處有最小吸收. (四)薄層色譜法 薄層板: 硅膠G薄層板 展開劑: 環(huán)己烷-乙醚(4:1) 顯色劑: 硫酸 結(jié)果: 生育酚、 生育酚醋酸酯、 生育醌的Rf 值分別為0.5、0.7、0.9。三、雜質(zhì)檢查酸度（制備過程中引入的游離醋酸）生育酚（乙?；煌?/p>

6、全）正己烷（殘留溶劑：GC-FID、HP-5、外標(biāo)法）有關(guān)物質(zhì)（主成分自身對(duì)照法）游離生育酚的檢查中國藥典采用硫酸鈰滴定法檢查維生素E中的游離生育酚，限量為2.15%。原理： 游離生育酚具強(qiáng)還原性 可被硫酸鈰定量氧化，用消耗硫酸鈰滴定液的體積控制游離生育酚的限量。顯色劑：二苯胺 （此反應(yīng)可用于含量測(cè)定）四、含量測(cè)定利用水解產(chǎn)物游離生育酚易被氧化的性質(zhì) 鈰量法將鐵(III)還原為鐵(II)后，與不同試劑生成配位化合物進(jìn)行比色測(cè)定。高效液相色譜法氣相色譜法：簡(jiǎn)便快速、專屬性強(qiáng)。 各國藥典多采用，適于VE尤其制劑測(cè)定。（一）氣相色譜法維生素E的沸點(diǎn) 350C 直接GC測(cè)定中國藥典收載的維生素E原料及

7、其制劑均采用。1. 色譜條件2. 系統(tǒng)適用性試驗(yàn)3. 校正因子測(cè)定4. 測(cè)定法5. 含量計(jì)算1. 色譜條件載氣：氮?dú)夤潭ㄏ啵汗柰∣V-17）柱溫：265C檢測(cè)器：FID2. 系統(tǒng)適用性試驗(yàn)內(nèi)標(biāo)：正三十二烷 正己烷溶解對(duì)照溶液：維生素E 對(duì)照品約20mg，精密稱定，置棕色具塞錐形瓶中，精密加入內(nèi)標(biāo)溶液10ml，密塞，振搖溶解，取13l 進(jìn)樣，記錄色譜圖。理論塔板數(shù)：按維生素E 峰計(jì)算應(yīng)不得低于 500分離度：維生素E 與正三十二烷峰的分離度 應(yīng)大于2 （二）鈰量法此法曾被中國藥典及其它國家藥典所采用，但由于本法缺乏專屬性，故目前已為快速、專屬、靈敏的氣相色譜所替代。（三）高效液相色譜法日本藥局方JP（15）收載的維生素E 為 dl -生育酚，含量測(cè)定采用本法。色譜條件及色譜系統(tǒng)