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文檔簡介

1、全國艾滋病檢測技術(shù)規(guī)范(2009年修訂版 )精選ppt2009年修訂版 與2004年版比較:本次主要對以下 6 個方面內(nèi)容進(jìn)行了修改、增補和完善。精選ppt修訂版(一)在樣品的采集和處理中,增加了濾紙干血斑樣品(DBS)的采集和處理,用于CD4+/CD8+T淋巴細(xì)胞測定樣品、尿液和唾液樣品的采集和處理;在HIV抗體檢測中,增加了免疫熒光法和化學(xué)發(fā)光法,進(jìn)一步明確了不同情況下的檢測策略;精選ppt修訂版(二)在HIV核酸檢測中,增加了HIV感染產(chǎn)婦所生嬰兒HIV感染早期診斷檢測流程和適用于窗口期的集合核酸檢測方法;根據(jù)臨床治療需求,增加了HIV-1的耐藥檢測;精選ppt修訂版(三)進(jìn)一步完善了艾

2、滋病檢測實驗室安全防護(hù)和艾滋病檢測實驗室的質(zhì)量管理,使其更加符合目前艾滋病防治工作的需求,更加具有可操作性;考慮到技術(shù)發(fā)展和新的需求,增加了HIV-1新近感染檢測和HIV-1的分離培養(yǎng)技術(shù)。精選ppt修訂后的規(guī)范(一) 共九章第一章 樣品的采集和處理第二章 HIV抗體檢測第三章 HIV-1抗原檢測第四章 HIV核酸檢測第五章 HIV-1耐藥檢測精選ppt修訂后的規(guī)范共九章第六章 CD4+ 和CD8+ T淋巴細(xì)胞檢測第七章 HIV-1的分離培養(yǎng)第八章 實驗室生物安全第九章 艾滋病檢測實驗室的質(zhì)量管理精選ppt第一章 樣品的采集和處理精選ppt樣品種類及相應(yīng)的用途(一) HIV抗體檢測的樣品包括:

3、全血、血清、血漿唾液、尿液DBS樣品精選ppt樣品種類及相應(yīng)的用途(二)抗凝全血可用于CD4+和CD8+T淋巴細(xì)胞測定。血漿可用于HIV-1病毒載量、基因型及耐藥檢測。DBS樣品可用于HIV-1基因型及耐藥檢測。全血、血漿、淋巴細(xì)胞富集液、外周血淋巴細(xì)胞(PBMC)及DBS樣品可用于HIV核酸的定性檢測。PBMC、全血、淋巴細(xì)胞富集液等可用于HIV-1分離培養(yǎng)。精選ppt采集和處理樣品(一)血液濾紙干血斑尿液和唾液精選ppt采集和處理樣品(二)血液:抗凝全血、末梢全血、血漿、血清、淋巴細(xì)胞富集液、PBMC注意:根據(jù)檢測要求選用適當(dāng)?shù)目鼓齽?,如CD4+和CD8+T淋巴細(xì)胞測定可選用EDTA鈉鹽或

4、鉀鹽、枸櫞酸鈉、肝素鈉,HIV病毒分離、核酸定性/定量檢測可選用EDTA鈉鹽或鉀鹽或枸櫞酸鈉。 精選ppt注意:所有的血液、血清、未固定的組織和組織液樣品,均應(yīng)視為有潛在傳染性,都應(yīng)以安全的方式進(jìn)行操作。精選ppt樣品的保存(一)用于抗體和抗原檢測的血清或血漿樣品,短期(1周)內(nèi)進(jìn)行檢測的可存放于28, 一周以上應(yīng)存放于-20以下。精選ppt樣品的保存(二)用于核酸檢測的血漿和血細(xì)胞樣品4天內(nèi)進(jìn)行檢測的可存放于4,3個月以內(nèi)應(yīng)存放于-20以下。3個月以上應(yīng)置于-70以下。精選ppt樣品的保存(三)艾滋病檢測篩查實驗室檢測的篩查陽性樣品應(yīng)及時送確證實驗室,篩查陰性樣品,可根據(jù)具體需要決定保存時間

5、,建議至少保存12個月。特殊用途或?qū)m楉椖康臉悠犯鶕?jù)具體要求確定保存時間。精選ppt樣品的保存(四)艾滋病檢測確證實驗室收到的篩查陽性樣品,無論確證結(jié)果如何,均應(yīng)將剩余的樣品保存至少10年,特殊用途或?qū)m楉椖康臉悠犯鶕?jù)具體要求確定保存時間。精選ppt樣品的運送應(yīng)符合生物安全要求;要獲得相應(yīng)部門批準(zhǔn)并由具有資質(zhì)的人員專程護(hù)送;應(yīng)采用三層容器對樣品進(jìn)行包裝,隨樣品應(yīng)附有與樣品唯一性編碼相對應(yīng)的送檢單。送檢單應(yīng)標(biāo)明受檢者姓名、樣品種類等信息,并應(yīng)放置在第二層和第三層容器之間。精選ppt樣品運送注意事項(一)用于抗體檢測的血清和血漿樣品應(yīng)在凍存條件下運送。用于CD4+和CD8+T淋巴細(xì)胞測定的樣品應(yīng)在

6、室溫下(1825)或4(特殊要求時)運送。用于病毒載量檢測的樣品應(yīng)在-20以下運輸。DBS樣品應(yīng)在室溫下(1825)運送。每一件包裝的體積以不超過50mL為宜。精選ppt樣品運送注意事項(二)運送樣品必須有記錄。特殊情況下經(jīng)有關(guān)部門批準(zhǔn)可以用特快專遞郵寄樣品,但必須按三層包裝,將樣品管包扎好,嚴(yán)禁使用玻璃容器。精選ppt樣品的接收(一)樣品包裹必須在具有處理感染性材料能力的實驗室內(nèi)、由經(jīng)過培訓(xùn)的、穿戴防護(hù)衣、戴口罩、防護(hù)眼鏡的工作人員在生物安全柜中打開,用后的包裹應(yīng)及時進(jìn)行消毒。核對樣品與送檢單,檢查樣品管有無破損和溢漏。如發(fā)現(xiàn)溢漏應(yīng)立即將尚存留的樣品移出,對樣品管和盛器消毒,同時報告實驗室負(fù)

7、責(zé)人和上一級實驗室技術(shù)人員。精選ppt樣品的接收(二)檢查樣品的狀況,記錄有無嚴(yán)重溶血、微生物污染、血脂過多以及黃疸等情況。如果污染過重或者認(rèn)為樣品不能被接受,應(yīng)將樣品安全廢棄。并將樣品情況立即通知送樣人。接收樣品時應(yīng)填寫樣品接收單。精選ppt第二章 HIV抗體檢測本章規(guī)定了HIV抗體的檢測方法、程序、結(jié)果報告、檢測策略及質(zhì)量控制。適用于各級各類醫(yī)療機構(gòu)、疾病預(yù)防控制機構(gòu)、檢驗檢疫機構(gòu)、采供血機構(gòu)及衛(wèi)生保健機構(gòu)。可作為對HIV感染者診斷和監(jiān)測的實驗室依據(jù)。精選pptHIV抗體檢測的目的HIV抗體檢測可用于診斷、血液篩查、監(jiān)測等。以診斷為目的的檢測是為了確定個體HIV感染狀況,包括臨床檢測、自愿

8、咨詢檢測、根據(jù)特殊需要進(jìn)行的體檢等。以血液篩查為目的的檢測是為了防止輸血傳播HIV,包括獻(xiàn)血員篩查和原料血漿篩查。以監(jiān)測為目的的檢測是為了解不同人群HIV感染率及其變化趨勢,包括各類高危人群、重點人群和一般人群。精選pptHIV抗體檢測的要點根據(jù)目的選擇檢測方法及檢測策略。嚴(yán)格遵守實驗室SOP。篩查試驗陽性,須作確證試驗。篩查試驗陰性, 不應(yīng)做確證試驗。篩查及確證試驗陽性均應(yīng)做好咨詢工作。 精選ppt以診斷為目的的檢測策略常規(guī)HIV抗體檢測的方法和程序HIV抗體檢測分為篩查試驗(包括初篩和復(fù)檢)和確證試驗。精選ppt篩查試驗篩查試劑篩查樣品篩查方法篩查程序精選ppt篩查試劑必須是經(jīng)國家食品藥品

9、監(jiān)督管理局注冊批準(zhǔn)、在有效期內(nèi)的試劑,其中酶聯(lián)免疫試劑應(yīng)批批檢合格。推薦使用臨床質(zhì)量評估敏感性和特異性高的試劑。精選ppt篩查樣品HIV抗體篩查可采用血清、血漿、濾紙干血斑、唾液和尿液樣品。精選ppt篩查方法酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELISA)化學(xué)發(fā)光或免疫熒光試驗快速檢測(RT)及其它檢測試驗精選ppt篩查程序初篩試驗復(fù)檢試驗 注:艾滋病檢測篩查實驗室復(fù)檢判定為陽性反應(yīng)的樣品,確證實驗室可以直接進(jìn)行確證試驗。初篩和復(fù)檢流程 (見圖)篩查試驗結(jié)果的報告篩查試驗呈陽性反應(yīng)樣品的轉(zhuǎn)送精選ppt復(fù)檢試驗如果抗原抗體聯(lián)合試劑檢測呈陽性反應(yīng),而抗體試劑檢測為陰性反應(yīng),則應(yīng)考慮進(jìn)行 HIV-1 p24抗原或核酸

10、檢測,必要時進(jìn)行隨訪。精選ppt篩查試驗結(jié)果的報告HIV抗體篩查試驗:陰性反應(yīng)報告為“HIV抗體陰性(-)”;陽性反應(yīng)報告為“HIV抗體待復(fù)檢”。精選pptHIV抗體篩查檢測的流程樣品初篩試驗篩查試劑陽性反應(yīng)陰性反應(yīng)復(fù)檢試驗陰性報告原有試劑+另一不同原理(或廠家)試劑或另外兩種不同原理(或廠家)試劑一陰一陽均陽性反應(yīng)確證試驗報告陰性均陰性反應(yīng)精選ppt確證試驗(一)確證試劑確證樣品:可采用血清、血漿、濾紙干血斑樣品。確證方法:包括免疫印跡試驗(WB)、條帶免疫試驗、放射免疫沉淀試驗(RIPA)及免疫熒光試驗(IFA)等。確證流程 (見圖)精選ppt確證試驗(二)HIV抗體確證試驗結(jié)果的判定HI

11、V抗體確證試驗結(jié)果報告發(fā)出確證報告的同時要做好檢測后咨詢。HIV抗體確證報告的反饋和上報疑難樣本的仲裁精選pptHIV抗體確證試驗結(jié)果的判定HIV-1抗體陽性HIV-2抗體陽性HIV抗體不確定HIV抗體陰性精選pptHIV抗體確證試驗結(jié)果報告(一)注意:符合HIV抗體陰性判斷標(biāo)準(zhǔn),報告“HIV抗體陰性()”。如疑似“窗口期”感染,建議進(jìn)一步做HIV核酸檢測,盡早明確診斷。符合HIV抗體不確定判斷標(biāo)準(zhǔn),報告“HIV抗體不確定()”,在備注中應(yīng)注明“4周后復(fù)檢”。精選pptHIV抗體確證試驗結(jié)果報告(二)注意:省艾滋病確證中心實驗室難以確證的樣品,送國家艾滋病參比實驗室確證。同一受檢對象的樣品在不

12、同實驗室得到不一致的確證結(jié)果時,由國家艾滋病參比實驗室予以仲裁。精選pptHIV抗體確證檢測流程精選ppt質(zhì)量控制(QC)精選ppt在每次實驗中必須包含有內(nèi)部對照質(zhì)控血清和外部對照質(zhì)控血清。精選ppt 試劑盒內(nèi)部對照試劑盒內(nèi)部對照質(zhì)控品即為試劑盒內(nèi)提供的陽性和陰性對照血清。試劑盒內(nèi)部對照用于判斷每次實驗的有效性,但不能作為室內(nèi)質(zhì)控品使用。每一次檢測臨床樣品時,必須有試劑盒內(nèi)部對照,而且只能在同批號的試劑盒中使用。內(nèi)部對照結(jié)果無效,必須重新試驗。精選ppt室內(nèi)質(zhì)控品為非試劑盒組份的外部質(zhì)控品,是為了監(jiān)控檢測的重復(fù)性而設(shè)置的,包括強陽性、弱陽性和陰性質(zhì)控血清。也可以只設(shè)置一個弱陽性質(zhì)控,以該試劑盒

13、臨界值(Cut-off)的23倍為宜。外部質(zhì)控品的作用是,判斷該批臨床樣品檢測的有效性,因此,每次實驗必須包含室內(nèi)質(zhì)控品,其結(jié)果無效,必須重新試驗。室內(nèi)質(zhì)控品可以是商品或?qū)嶒炇易孕兄苽洹>xppt統(tǒng)計室內(nèi)質(zhì)控的主要表示方法建立質(zhì)控圖最常用的質(zhì)控圖是Levey-Jennings質(zhì)控圖,該圖使用累計和技術(shù)或趨勢分析技術(shù)的圖形提供系統(tǒng)偏移和漂移的狀況。精選ppt 建立質(zhì)控圖參數(shù)算術(shù)平均值 ( ):代表一組質(zhì)控血清測定的S/CO值的均值。為了統(tǒng)計學(xué)上有顯著性意義,應(yīng)該采用至少20次(天)所測得的外部對照質(zhì)控血清S/CO值結(jié)果計算出平均值。 標(biāo)準(zhǔn)差(s):是描述樣品與均數(shù)之間離散程度的一個指標(biāo),是與質(zhì)控

14、血清S/CO值均值有關(guān)的預(yù)期范圍。一組S/CO值的標(biāo)準(zhǔn)差以s表示。精選ppt變異系數(shù)(cv)是反映各次S/CO值相對于均值離散程度的一個指標(biāo),可以用來衡量檢測的重復(fù)性或精密度。精選ppt控制限由實驗室根據(jù)對外部質(zhì)控品檢測結(jié)果的均值和標(biāo)準(zhǔn)差來確定。例如2S質(zhì)控規(guī)則的控制限為外部質(zhì)控品S/CO均值加減2個標(biāo)準(zhǔn)差;3S質(zhì)控規(guī)則的控制限為外部質(zhì)控品S/CO均值加減3個標(biāo)準(zhǔn)差。精選ppt質(zhì)控圖的繪制步驟在常規(guī)條件下,對同一批外部質(zhì)控血清連續(xù)測定20次(天)或以上,獲得一組S/CO值,求均數(shù)( )和標(biāo)準(zhǔn)差(s), 超出2s或3s的數(shù)據(jù)不應(yīng)刪除。將均值( )和標(biāo)準(zhǔn)差(s)分別在質(zhì)控框架圖中標(biāo)示出來。以S/C

15、O值作縱座標(biāo)(Y軸),每一批次試驗作橫座標(biāo)(X軸),繪制質(zhì)控圖。從第21次起,將每次質(zhì)控血清的檢測結(jié)果依次點入該質(zhì)控框架圖中,檢驗進(jìn)入質(zhì)控狀態(tài)。精選ppt質(zhì)控圖精選ppt繪制和分析質(zhì)控圖的要點(一)分析數(shù)據(jù)時,超出2s或3s的數(shù)據(jù)不應(yīng)刪除。由專人負(fù)責(zé)建立質(zhì)控圖,每月定期召開質(zhì)控分析會,討論本月的質(zhì)量控制情況。建議長期和穩(wěn)定地使用一種質(zhì)量好的試劑,更換不同廠家的試劑后,須重新繪制質(zhì)控圖。改用新批號試劑如外部質(zhì)控品測定出現(xiàn)較大變化也應(yīng)重新制作質(zhì)控圖。使用新批號或不同廠家的試劑,必須在質(zhì)控圖上注明使用日期。精選ppt繪制和分析質(zhì)控圖的要點(二)發(fā)現(xiàn)質(zhì)控結(jié)果失控,應(yīng)填寫報告單,上交質(zhì)量負(fù)責(zé)人,分析原因

16、并決定是否發(fā)出檢測報告。使用新批次的外部質(zhì)控品時,如測定值出現(xiàn)較大變化,須重新繪制質(zhì)控圖。變異系數(shù)(cv)小于20,表示外部質(zhì)控品處于穩(wěn)定狀態(tài)。精選ppt室內(nèi)質(zhì)控其他方式“即刻法”質(zhì)控“即刻法”質(zhì)控方法是在對同一批外部質(zhì)控血清連續(xù)測定3次后,即可對第3次檢驗結(jié)果進(jìn)行質(zhì)控。精選pptLevey-Jennings質(zhì)控圖基本的統(tǒng)計學(xué)含義穩(wěn)定條件下,在20個IQC結(jié)果中不應(yīng)有多于1個結(jié)果超過2SD(95.5%可信限)限度;在1000個測定結(jié)果中超過3SD(99.7%可信限)的結(jié)果不多于3個。如以3s為失控限,假失控的概率為0.3%。 精選ppt服從正態(tài)分布的條件誤差因素多而小,無一個占優(yōu),彼此相互獨立

17、(中心極限定理)。一般認(rèn)為,當(dāng)影響測量的因素在15個以上,且相互獨立,其影響程度相當(dāng),可以認(rèn)為測量值服從正態(tài)分布;若要求不高,影響因素則應(yīng)在5個(至少3個)以上,也可視為正態(tài)分布。精選ppt概率密度函數(shù)正態(tài)分布的密度函數(shù)為測量總體的數(shù)學(xué)期望,如不計系統(tǒng)誤差,則=-即為隨機誤差為測量總體的標(biāo)準(zhǔn)差,也是=-隨機誤差的標(biāo)準(zhǔn)差精選ppt分布的誤差特性單峰性:小誤差出現(xiàn)的概率比大誤差出現(xiàn)的概率大。對稱性:正誤差出現(xiàn)的概率與負(fù)誤差出現(xiàn)的概率相等。抵償性:隨測量次數(shù)增加,算術(shù)平均值趨于零。正態(tài)分布的這三個特點與誤差大樣本下的統(tǒng)計特性相符。但在理論上,正態(tài)分布無界,這也是正態(tài)分布與實際誤差有界性不相符之處。精

18、選ppt精選ppt正態(tài)分布的某些k值的置信概率k3.33.02.582.01.961.6451.00.6745p0.9990.99730.990.9540.950.900.6830.50.0010.00270.010.0460.050.100.3170.5精選ppt正態(tài)分布在誤差理論和實踐中的地位(1)經(jīng)典誤差理論都是建立在正態(tài)分布的基礎(chǔ)上。凡是有3、5個以上的、差不多微小的、獨立影響的合成分布都趨近正態(tài)分布。這是被前人早已證明了的中心極限定理告訴我們的一個事實。(2)許多非正態(tài)分布可以用正態(tài)分布來表示。(3)正態(tài)分布的概率密度函數(shù)具有簡單的數(shù)學(xué)形式和優(yōu)良的性質(zhì)。(4)也有不少的誤差分布并不能

19、簡單地用正態(tài)分布來描述。因而,現(xiàn)代誤差理論及其實踐需要進(jìn)一步研究非正態(tài)分布的問題。精選ppt 正態(tài)分布圖-0.682精選ppt質(zhì)控規(guī)則及其使用告警(1 2S)失控(1 3S)漂移趨勢精選ppt告警(12S):當(dāng)外部對照的S/CO值超出+2s范圍時,系統(tǒng)處于告警狀態(tài),應(yīng)予注意,是否可以繼續(xù)檢測需要進(jìn)一步觀察。若將12S做失控標(biāo)準(zhǔn),有較高的假失控概率,所以一般不采用。失控(13S):當(dāng)外部對照的S/CO值超出+3s范圍時,系統(tǒng)處于失控狀態(tài),本次實驗結(jié)果不能被接受,可能是系統(tǒng)誤差、隨機誤差或外部對照滴度下降造成。精選ppt漂移:連續(xù)幾次(35次)外部對照S/CO值都落在均值的一側(cè)則稱為位移,提示實驗

20、條件發(fā)生了較大的變化。趨勢:連續(xù)幾次(57次)外部對照S/CO值幾乎按一個方向分布時稱為趨勢,通常由參數(shù)的緩慢改變引起。 精選ppt 出現(xiàn)下列情況時,應(yīng)暫停檢測查找原因: 出現(xiàn)一次3s范圍的變化 連續(xù)兩次出現(xiàn)同一方向2s范圍的變化 連續(xù)四次出現(xiàn)同一方向的1s范圍的變化 連續(xù)10次結(jié)果都在1s范圍內(nèi),但落在均值線 的同一側(cè)。 精選ppt第三章第七章第三章 HIV-1抗原檢測第四章 HIV核酸檢測第五章 HIV-1耐藥檢測第六章 CD4+和CD8+T淋巴細(xì)胞檢測第七章 HIV-1的分離培養(yǎng)精選ppt第八章 艾滋病實驗室生物安全精選pptHIV的生物危害第一類、第二類病原微生物統(tǒng)稱為高致病性病原微生

21、物。人類免疫缺陷病毒(HIV)屬第二類病原微生物,是高致病性病原微生物。精選pptHIV相關(guān)檢測的生物安全級別(一)HIV抗體檢測(包括篩查和確證實驗)、抗原檢測和相關(guān)的免疫學(xué)檢測應(yīng)在符合級生物安全實驗室(BSL-2)要求的艾滋病檢測實驗室中進(jìn)行。HIV分離培養(yǎng)、濃縮、中和試驗、細(xì)胞培養(yǎng)及研究工作及其它需要應(yīng)用活病毒的研究工作,應(yīng)在級生物安全實驗室(BSL-3)中進(jìn)行。精選pptHIV相關(guān)檢測的生物安全級別(二)HIV核酸提取和檢測均應(yīng)在符合級生物安全實驗室(BSL-2)要求的艾滋病檢測實驗室中進(jìn)行。HIV病毒株應(yīng)保存在符合級生物安全實驗室(BSL-3)要求的艾滋病實驗室;HIV陽性樣品,包括

22、全血、血清、血槳和其他組織(液)、核酸提取物應(yīng)保存在符合BSL-2要求的艾滋病實驗室。精選ppt生物安全相關(guān)法律法規(guī)及標(biāo)準(zhǔn)中華人民共和國傳染病防治法病原微生物實驗室生物安全管理條例醫(yī)療廢棄物管理條例可感染人類的高致病性病原微生物菌(毒)種或樣本運輸管理規(guī)定人間傳染的病原微生物名錄實驗室 生物安全通用要求微生物和生物醫(yī)學(xué)實驗室生物安全通用準(zhǔn)則精選ppt實驗室 生物安全通用要求(GB 19489-2008)風(fēng)險評估及風(fēng)險控制實驗室生物安全防護(hù)分級實驗室設(shè)施和設(shè)備要求管理要求精選pptBSL-2級實驗室工作人員可能的暴露途徑經(jīng)口感染:在實驗室吃東西、飲水或吸煙,用嘴吸液,經(jīng)污染的手指或物品將病原體帶

23、入口腔。經(jīng)皮膚感染:被針頭或其它利器、玻璃等意外刺傷、割傷、刮擦傷。經(jīng)眼睛感染:傳染性物質(zhì)濺入眼中;或經(jīng)污染的手指將病原體帶入眼中。經(jīng)肺感染:經(jīng)呼吸吸入含有病原體的氣溶膠。精選pptBSL-2 實驗室設(shè)施和設(shè)備要求(一)適用時,應(yīng)符合本標(biāo)準(zhǔn) 6.1 的要求。實驗室主入口的門、放置生物安全柜實驗間的門應(yīng)可自動關(guān)閉。實驗室工作區(qū)域外應(yīng)有存放大量的備用物品的條件。應(yīng)在實驗室工作區(qū)配備洗眼裝置。精選pptBSL-2 實驗室設(shè)施和設(shè)備要求(二)應(yīng)在實驗室或其所在的建筑內(nèi)配備高壓蒸汽滅菌器或其它適當(dāng)?shù)南驹O(shè)備,所配備的消毒設(shè)備應(yīng)以風(fēng)險評估為依據(jù)。應(yīng)在操作經(jīng)空氣傳播致病性生物材料的實驗間內(nèi)配備生物安全柜。精

24、選pptBSL-2 實驗室設(shè)施和設(shè)備要求(三)生物安全柜的安裝和使用應(yīng)遵循制造商的建議。如果生物安全柜的排風(fēng)在室內(nèi)循環(huán),室內(nèi)應(yīng)具備通風(fēng)換氣的條件;如果使用需要管道排風(fēng)的生物安全柜,應(yīng)通過獨立于建筑物公共通風(fēng)系統(tǒng)的管道排出。應(yīng)有可靠的電力供應(yīng)。必要時,重要設(shè)備如培養(yǎng)箱、生物安全柜、冰箱等應(yīng)配置備用電源。精選pptBSL1實驗室設(shè)施和設(shè)備要求(一)實驗室的門應(yīng)有可視窗并可鎖閉,門鎖及門的開啟方向應(yīng)不妨礙室內(nèi)人員逃生。應(yīng)有防止節(jié)肢動物和嚙齒動物進(jìn)入的措施。應(yīng)設(shè)洗手池,宜設(shè)置在靠近實驗室的出口處。在實驗室門口處應(yīng)設(shè)存衣或掛衣裝置,可將個人服裝與實驗室工作服分開放置。精選pptBSL1實驗室設(shè)施和設(shè)備要

25、求(二)實驗室的墻壁、天花板和地面應(yīng)易清潔、不滲水、耐化學(xué)品和消毒劑的腐蝕。地面應(yīng)平整、防滑,不應(yīng)鋪設(shè)地毯。實驗室臺柜和座椅等應(yīng)穩(wěn)固,邊角應(yīng)圓滑。實驗室臺柜等和其擺放應(yīng)便于清潔,實驗臺面應(yīng)防水、耐腐蝕、耐熱和堅固。實驗室應(yīng)有足夠的空間和臺柜等擺放實驗室設(shè)備和物品。精選pptBSL1實驗室設(shè)施和設(shè)備要求(三)應(yīng)根據(jù)工作性質(zhì)和流程合理擺放實驗室設(shè)備、臺柜、物品等,避免相互干擾、交叉污染,并應(yīng)不妨礙逃生和急救。實驗室可以利用自然通風(fēng)。如果采用機械通風(fēng),應(yīng)避免交叉污染。如果有可開啟的窗戶,應(yīng)安裝可防蚊蟲的紗窗。實驗室內(nèi)應(yīng)避免不必要的反光和強光。精選pptBSL1實驗室設(shè)施和設(shè)備要求(四)若操作刺激或腐

26、蝕性物質(zhì),應(yīng)在 30 米內(nèi)設(shè)洗眼設(shè)施,必要時應(yīng)設(shè)緊急噴淋裝置。若操作有毒、刺激性、放射性揮發(fā)物質(zhì),應(yīng)在風(fēng)險評估的基礎(chǔ)上,配備適當(dāng)?shù)呢?fù)壓排風(fēng)柜。若使用高毒性、放射性等物質(zhì),應(yīng)配備相應(yīng)的安全設(shè)施、設(shè)備和個體防護(hù)裝備,應(yīng)符合國家、地方的相關(guān)規(guī)定和要求。精選pptBSL1實驗室設(shè)施和設(shè)備要求(五)若使用高壓氣體和可燃?xì)怏w,應(yīng)有安全措施,應(yīng)符合國家、地方的相關(guān)規(guī)定和要求。應(yīng)設(shè)應(yīng)急照明裝置。應(yīng)有足夠的電力供應(yīng)。應(yīng)有足夠的固定電源插座,避免多臺設(shè)備使用共同的電源插座。應(yīng)有可靠的接地系統(tǒng),應(yīng)在關(guān)鍵節(jié)點安裝漏電保護(hù)裝置或監(jiān)測報警裝置。精選pptBSL1實驗室設(shè)施和設(shè)備要求(六)供水和排水管道系統(tǒng)應(yīng)不滲漏,下水應(yīng)

27、有防回流設(shè)計。應(yīng)配備適用的應(yīng)急器材,如消防器材、意外事故處理器材、急救器材等。應(yīng)配備適用的通訊設(shè)備。必要時,應(yīng)配備適當(dāng)?shù)南驹O(shè)備。精選pptBSL-2 實驗室個人防護(hù)基本要求(一)BSL-2實驗室的工作人員進(jìn)入實驗室后應(yīng)穿工作服,根據(jù)操作內(nèi)容確定是否需要外加隔離服;應(yīng)戴帽子、口罩和一次性手套,必要時應(yīng)戴雙層手套和防護(hù)眼鏡。一次性手套不得清洗和再次使用;精選pptBSL-2實驗室個人防護(hù)基本要求(二)當(dāng)進(jìn)行的感染性操作不可能在生物安全柜內(nèi)進(jìn)行、必須采取外部操作時,為防止感染性材料濺出或霧化危害,須使用面部保護(hù)裝置,如護(hù)目鏡;離開實驗室時,工作服和任何防護(hù)物品必須脫下并留在實驗室區(qū)域內(nèi),不得穿著防

28、護(hù)用品進(jìn)入辦公區(qū)域或其它公共場合;用過的防護(hù)用品及時清潔消毒。精選ppt個人保健和防護(hù)(一)遇有手部皮膚有開放性傷口及其他不適于工作的情況,應(yīng)暫停工作。 皮膚的微小傷口、擦傷、皸裂等,應(yīng)用防水敷料嚴(yán)密覆蓋。 應(yīng)為每一名在艾滋病實驗室工作的人員提供充足的防護(hù)服、一次性乳膠手套、口罩、帽子和覆蓋足背的工作鞋。應(yīng)將清潔的防護(hù)服和其他個人防護(hù)用品置于實驗室清潔區(qū)內(nèi)的專用處存放。實驗室應(yīng)設(shè)置應(yīng)急沖洗眼睛裝置。精選ppt個人保健和防護(hù)(二)工作人員上崗前必須進(jìn)行HIV抗體和乙型肝炎病毒、丙型肝炎病毒等肝炎病毒標(biāo)志物檢測,應(yīng)接種乙肝疫苗。應(yīng)每年對工作人員采血檢測HIV抗體,血清應(yīng)長期保留。進(jìn)實驗室工作前要摘

29、除首飾,修剪長的帶刺的指甲,以免刺破手套。嚴(yán)禁在實驗室內(nèi)進(jìn)食、飲水、吸煙和化妝。精選ppt個人保健和防護(hù)(三)實驗操作時應(yīng)穿合適防護(hù)服、戴手套和口罩、穿實驗室專用的工作鞋。如接觸物的傳染性大、應(yīng)戴雙層手套;含有HIV的液體(樣品或病毒培養(yǎng)液)有可能噴濺時,應(yīng)戴防護(hù)眼鏡、穿防水(如塑料)圍裙。工作完畢,先脫去手套,再脫去防護(hù)服,用肥皂和流動水洗手。穿過的污染的防護(hù)服應(yīng)及時放入污物袋中,消毒后方可洗滌或廢棄。精選ppt個人保健和防護(hù)(四) 注意: 操作過程中,如發(fā)現(xiàn)防護(hù)服被污染應(yīng)立即更換,如手套破損,應(yīng)立即丟棄、洗手并換上新手套。 不能用戴手套的手觸摸暴露的皮膚、口唇、眼睛、耳朵和頭發(fā)等。 不要將

30、手套清洗或消毒后再次使用,因為使用表面活性劑清洗可使手套對水的通透性增加,消毒劑可以引起手套的破損。精選ppt個人保健和防護(hù)(五)禁止使用口腔吸液管,必須使用移液器來操作實驗的所有液體。精選ppt離心機使用注意事項(一)必要時應(yīng)設(shè)負(fù)壓排風(fēng)罩,并能通過生物安全風(fēng)險評估。離心機不能放入級生物安全柜中使用。在級生物安全柜中使用時,應(yīng)評估離心機對安全柜開口處氣流的影響,以及安全柜對離心機可能產(chǎn)生氣溶膠的防護(hù)能力。精選ppt離心機使用注意事項(二)在離心具有潛在危害的生物學(xué)材料結(jié)束后,打開離心機蓋前要先等候5min。應(yīng)定期清理離心管座,檢查轉(zhuǎn)子是否損壞、破裂或腐蝕。離心杯應(yīng)定期清洗,并用適當(dāng)?shù)南緞┣宄?/p>

31、污染。離心時發(fā)生破裂或泄露后均應(yīng)及時清潔消毒。精選ppt離心機使用注意事項(三)要特別加強離心機持續(xù)使用過程中的維修保養(yǎng)。使用過程中如果發(fā)生離心管、離心杯等破裂或泄漏,應(yīng)重新評估離心操作規(guī)范,必要時更換更加安全的離心設(shè)備。精選ppt離心機內(nèi)溢灑的處理(一)在離心感染性物質(zhì)時,要使用密封管以及密封的轉(zhuǎn)子或安全桶。每次使用前,檢查并確認(rèn)所有密封圈都在位并狀態(tài)良好。離心結(jié)束后,至少再等候5 min 打開離心機蓋。如果打開蓋子后發(fā)現(xiàn)離心機已經(jīng)被污染,立即小心關(guān)上。如果離心期間發(fā)生離心管破碎,立即關(guān)機,不要打開蓋子。切斷離心機的電源,至少30 min后開始清理工作。精選ppt離心機內(nèi)溢灑的處理(二)穿著

32、適當(dāng)?shù)膫€體防護(hù)裝備,準(zhǔn)備好清理工具。必要時,清理人員需要佩戴呼吸保護(hù)裝置。消毒后小心將轉(zhuǎn)子轉(zhuǎn)移到生物安全柜內(nèi),浸泡在適當(dāng)?shù)姆歉g性消毒液內(nèi),建議浸泡60 min 以上。精選ppt離心機內(nèi)溢灑的處理(三)小心將離心管轉(zhuǎn)移到專用的收集容器中。一定要用鑷子夾取破碎物,可以用鑷子夾著棉花收集細(xì)小的破碎物。通過用適當(dāng)?shù)南緞┎潦煤蛧婌F的方式消毒離心轉(zhuǎn)子倉室和其它可能被污染的部位,空氣晾干。如果溢灑物流入離心機的內(nèi)部,需要評估后采取適用的措施。精選ppt污染物處理精選ppt污染物處理應(yīng)按照實驗室生物安全通用要求(GB 19489-2004)和消毒技術(shù)規(guī)范(2002年版)處置實驗室廢棄物。艾滋病實驗室產(chǎn)生的

33、所有廢棄物,包括不再需要的樣品、培養(yǎng)物和其它物品,均應(yīng)視為感染性廢棄物,應(yīng)置于專用的密封防漏容器中,安全運至消毒室,經(jīng)高壓消毒后再進(jìn)行處理或廢棄。精選ppt污染物處理常用的消毒方法(一) 1. 物理消毒方法高壓蒸汽消毒,121,保持 1520min; 干燥空氣烘箱消毒(干烤消毒),140,保持23h。精選ppt污染物處理常用的消毒方法(二)2. 化學(xué)消毒方法含氯消毒劑(次氯酸鈉,含有效氯20005000mg/L)75%乙醇2%戊二醛精選ppt艾滋病檢測實驗室物品常用的消毒方法廢棄物缸:5000mg/L 次氯酸鈉。生物安全柜工作臺面和儀器表面:75%乙醇。溢出物:5000mg/L次氯酸鈉。污染的

34、臺面和器具:2000mg/L 次氯酸鈉,也可以用過氧化氫或過氧乙酸。器械可用2%戊二醛消毒。精選ppt意外事故處理發(fā)生意外事故時,應(yīng)針對事故的類型立即進(jìn)行緊急處理 。精選ppt意外事故緊急處理方法(一)皮膚針刺傷或切割傷,應(yīng)立即用肥皂和大量流水沖洗,盡可能擠出損傷處的血液,用70%乙醇或其它消毒劑消毒傷口。皮膚污染:用水和肥皂沖洗污染部位,并用適當(dāng)?shù)南緞┙?,?0%乙醇或其它皮膚消毒劑。粘膜污染:用大量流水或生理鹽水沖洗污染部位。衣物污染:盡快脫掉污染的衣物,進(jìn)行消毒處理。精選ppt意外事故緊急處理方法(二)污染物潑濺:小范圍污染物潑濺,應(yīng)立即進(jìn)行消毒處理和清洗。發(fā)生大范圍污染物潑濺事故時

35、,應(yīng)立即通知實驗室主管領(lǐng)導(dǎo)和安全負(fù)責(zé)人到達(dá)事故現(xiàn)場,查清情況,確定消毒的程序。發(fā)生空氣污染時,可采用低溫蒸汽甲醛氣體對空氣進(jìn)行消毒,但甲醛有致癌作用,不宜用于生物安全柜和實驗室的常規(guī)空氣消毒。精選ppt意外事故緊急處理方法(三)如果發(fā)生重大潑濺事故,應(yīng)采取疏散人員、控制污染擴(kuò)散等措施。:意外及事故的登記、報告和檢測對重大意外和事故必須進(jìn)行登記,對職業(yè)暴露事故應(yīng)填寫“艾滋病職業(yè)暴露人員個案登記表”;對重大意外和事故必須進(jìn)行報告和檢測。精選ppt“艾滋病職業(yè)暴露人員個案登記表” 內(nèi)容包括:意外和事故發(fā)生的時間、地點及詳細(xì)經(jīng)過。詳細(xì)記錄職業(yè)暴露發(fā)生的時間、地點及經(jīng)過;暴露方式;損傷的具體部位、程度;暴露物種類(培養(yǎng)液、血液或其它體液)和含有HIV的情況;事故處理方法和經(jīng)過,

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