玉米細菌性枯萎病

1、玉米細菌性枯萎病 玉米細菌性枯萎病 病原物為斯氏泛生菌 Pantoea stewartii（E.F.Swith） 革蘭氏陰性菌，好氣性短桿菌寄主范圍：甜玉米為主，馬齒玉米很少感病，適宜PH值：4.58.5傳播昆蟲：玉米跳甲1主要分布產(chǎn)地美國中部及東南部，加拿大，巴西，歐洲南部，東南亞地區(qū)。危害癥狀 在葉片上產(chǎn)生與中脈平行的、分散的水漬狀條斑，病菌能夠通過莖或者直接侵染葉片而在幼苗或者較老植株上產(chǎn)生病斑，早期侵染可能引起苗枯，較晚侵染則阻止生長或者表現(xiàn)為不同程度的葉枯，具有明亮的或者紅色的斑紋，有或無分散的水漬狀斑點，最后全葉干枯。系統(tǒng)侵染的植株維管束變褐色，根或莖部呈水漬狀，并分泌出粘液（黃色

2、菌膿），出現(xiàn)濕腐狀 。2.3檢疫方法：一 伊凡諾夫培養(yǎng)基或魏氏培養(yǎng)基培養(yǎng)甘油30ml 檸檬酸鐵銨10g 磷酸氫二鉀2 . 5g, 氯化鈉15g硫酸鎂0.1g, 瓊脂17g 氯化鈣0.1g, 蒸餾水1000ml,PH7.0或魏氏培養(yǎng)基培養(yǎng)酵母膏3g，蛋白胨5g，蔗糖10g，磷酸二氫鉀0.5g，硫酸鎂0.25g，抗壞血酸1g，PH7.27.4二黑色素培養(yǎng)基上培養(yǎng)7d，30菌落中心呈黑色，邊緣透明4三 血清學檢疫：瓊脂雙擴散將適量稀釋后的抗體與等量瓊脂混勻，澆注成板，凝固后，在板上打孔，孔徑3mm，孔間距10mm，孔中加入抗原，每孔10L，放置濕盒中，37溫箱，抗原就會向孔的四周擴散，邊擴散邊與瓊脂

3、中的抗體結合。24h48h后觀察結果，在兩者比例適當處形成白色沉淀環(huán)。沉淀環(huán)的直徑與抗原的濃度成正比。如事先用不同濃度的標準抗原制成標準曲線，則從曲線中可求出標本中抗原的含量。熒光抗體法 用熒光素標記抗體，利用抗體與特定抗原相結合的原理，在熒光顯微鏡下快速檢測病原體的技術。 酶聯(lián)免疫吸附法5四 巢式PCR巢式PCR是一種變異的聚合酶鏈反應，使用兩對而非一對PCR引物擴增完整的片段。第一對PCR引物擴增片段和普通PCR相似。第二對引物稱為巢式引物（因為它們在第一次PCR擴增片段的內(nèi)部）結合在第一次PCR產(chǎn)物內(nèi)部，使得第二次PCR擴增片斷短于第一次擴增。其好處在于，如果第一次擴增產(chǎn)生了錯誤片斷，則第二次能在錯誤片段上進行引物配對并擴增的概率極低。檢疫靈敏，準確，迅速?？稍?小時內(nèi)得出建議結果，滿足口岸建議和田間病害診斷。 6步驟 1 目標的DNA模板 藍色的第一對引物結合