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文檔簡介

1、電化學傳感器基于(jy)聚合(溴甲酚紫)修飾(xish)玻碳電極(dinj)用于同時測定尿酸,黃嘌呤,次黃嘌呤摘要:一種新型的電化學傳感器基于電聚合溴甲酚紫膜層修飾玻碳電極用于同時測定尿酸,黃嘌呤和次黃嘌呤。電聚合玻碳電極的探索和基本性能進行了詳細的研究。尿酸,黃嘌呤和次黃嘌呤在化學修飾電極上的電化學行為用循環(huán)伏安法進行研究。結果表明,這一項新的電化學傳感器杰出的證明電鍍活性物質傾向于氧化渣三種無至的分解物。這三種物質的陽極的最高峰能被很好的定義用更低的氧化電位和更高的氧化峰電流,因此聚合修飾電極用于同時測量含量有差別的尿酸,黃嘌呤,次黃嘌呤。在最適條件下,在0.5120,0.1100 和 0

2、.280mol/L的范圍內制備尿酸,黃嘌呤,次黃嘌呤的標準曲線。尿酸,黃嘌呤和次黃嘌呤的檢出限分別是0.2,0.06,和0.12mol/L。由于具有良好的選擇性和敏感度,上述方式已經被用于測定人體血液中的尿酸,黃嘌呤和次黃嘌呤的測定并取得了令人滿意的結果。關鍵詞:溴甲酚紫,化學修飾電極;尿酸;黃嘌呤;次黃嘌呤引言尿酸,黃嘌呤和次黃嘌呤在人體和更高級的靈長類動物體內進行新陳代謝被降解。尿酸是由黃嘌呤和次黃嘌呤被黃嘌呤酶降解的產物,反過來又合成嘌呤,因此黃嘌呤和次黃嘌呤是中間產物,尿酸是嘌呤代謝的最終降解產物。這三種物質能夠透過細胞膜在體液中濃度逐漸增高。他們在人體體液譬如血液和尿液中的濃度范圍是

3、很多臨床標準,包括圍產期缺氧,大腦缺氧,尿酸過多和痛風,因此在最初的很作相關疾病臨床診斷和研究黃嘌呤氧化酶系統(tǒng)動態(tài)平衡方面,精確檢查量化的尿酸,黃嘌呤和次黃嘌呤在人體中的含量起著非常重要的作用。這種測定嘌呤降解產物用高效液相色譜,毛細管電泳和電化學方法都能高效測定,但高效液相色譜要求樣品準備條件苛刻,持續(xù)測定時間和昂貴的實驗材料,毛細管電泳則需要昂貴的儀器。電化學傳感器通過電催化應用于生物學上已經成為目前研究的主攻方向。各種生物傳感器基于固定化酶來測定這三種物質已經被報道,但是這些酶催化方法更加昂貴并且缺乏穩(wěn)定性和靈敏度。另一方面,非酶催化電化學傳感器相對更加便宜,簡單,高效,和靈敏度高。然而

4、,只有很少的文獻報道了應用非酶催化電化學方式來同時測定尿酸,黃嘌呤和次黃嘌呤。Yao最先用玻碳電極對尿酸,黃嘌呤和次黃嘌呤進行了研究,但是這種方法強烈的抗壞血酸的干擾,在這種復合物的條件下電流響應的非線性受到嚴重的干擾。Cai提出在測定多種物質時對其進行預處理之后用玻碳電極測定響應。Zen通過按先后順序在電極上涂上一層膜來同時測定尿酸,黃嘌呤和次黃嘌呤,他們的檢出限分別為0.34,,0.07,和0.42mol/L。近期,Wang的團隊通過加入稀薄的碳膜從而改良單壁電極的特性來同時測定這三種嘌呤衍生物。最近,Kalimuthu和Abraham John描述了在電鍍一層2-氨基1,3,4-噻重氮修

5、飾玻碳電極來同時測定抗壞血酸,尿酸,黃嘌呤和次黃嘌呤。Kumar的團隊報道了運用二氯化四亞甲基亞砜酸釕聚合全氟磺酸來修飾電極來同時測定黃嘌呤,次黃嘌呤和尿酸在人體尿液中的含量.在這篇文獻中,我們準備用一種非酶催化電化學傳感器聚合鎮(zhèn)定劑來催化尿酸,黃嘌呤和次黃嘌呤的氧化,這就提供了一種簡單而且靈敏度高的方法來同時測定這三種物質的組成。溴甲酚紫,5,5,-二溴磷-0-甲酚(ji fn)-鄰苯二酸是一中pH指示劑。也用于在醫(yī)學(yxu)實驗室中對清蛋白的上色。這種在電極表面的電聚合作為電鍍物質(wzh)還從未在文獻中提到。在這方面工作中,用BCP高分子膜修飾玻碳電極是首次提出并且描述修飾好的玻碳電極

6、的電化學行為。聚BCP化學修飾電極具有較大的真是表面積,-共軛鍵,一個很好的活性位點并且具有良好的導電性,修飾電極通過這種不同的結合位點來檢測嘌呤類衍生物。因此,尿酸,黃嘌呤,次黃嘌呤的氧化電化學可逆性在這種BCP薄層下可能會大大加速電子轉移速率,這表明BCP膜層在修飾電極表面具有優(yōu)良電催化活性氧化尿酸,黃嘌呤和次黃嘌呤。而且,修飾電極在同時測定尿酸,黃嘌呤和次黃嘌呤上表現出良好的靈敏度,選擇性和重現性。據報道,該相對于其他電化學傳感器,聚BCP修飾電極以其優(yōu)良的特性具有線性范圍寬,穩(wěn)定性好能令人滿意地用于尿酸,黃嘌呤,次黃嘌呤的同時測定通過差示脈沖伏安法。實驗部分2.1化學藥品UA,XA和H

7、X購自Sigma(美國)。BCP和抗壞血酸從上?;瘜W試劑獲得(上海,中國)。所有化學品的分析級沒有進一步的純化。0.067摩爾升磷酸鹽緩沖液(PBS)在不同pH值通過混合0.067 mol/ L磷酸二氫鉀和磷酸氫二鈉儲備液。所有溶液用水都是預先準備的重蒸餾水。2.2儀器電化學測量與LK2005執(zhí)行微機電化學系統(tǒng)(天津市蘭力科,中國)。采用的是傳統(tǒng)的三電極電池,包括飽和甘汞電極(SCE)為參比電極,鉑電極為對電極和一個直徑3.0mm裸的或修飾玻碳電極(GCE)作為工作電極。所有的pH值測量用一個pHS-3C數字pH計(上海雷磁裝置工程,上海,中國)與組合玻璃電極。一個KQ250B超聲波清洗機(昆

8、山超聲儀器廠,昆山,中國)是用來清洗電極。 2.3聚BCP修飾電極的準備 循環(huán)伏安法(CV)被用來形成聚合膜。其改性之前,該赤裸的GCE用0.05um氧化鋁粉末進行拋光和1:1的硝酸,乙醇,雙蒸餾水溶液中連續(xù)10分鐘漂洗。電極進行預處理后,在 0.5mol /L硫酸溶液中電化學掃描中,在-0.5和1.5V的電位,掃描速率100mv/s掃描十次獲得一個穩(wěn)定的背景電流,BCP修飾電極通過電聚合預先制備。在2103 mol /L BCP電聚合后,對該聚合結薄膜沉積在0.01 mol L1硝酸鈉溶液中從-1.0到1.5V,掃描速率100mv/s掃描 20個周期。聚合后,修飾電極用雙蒸餾水洗滌,然后干燥

9、。2.4實驗方案循環(huán)伏安發(fā)和差示脈沖伏安法在PBS溶液中在三電極體系中測定。循環(huán)伏安曲線記錄的循環(huán)電位在0.0和1.4V之間,掃描速率100mv/s。差示脈沖伏安法的測定是在掃描電位在0.0到1.2之間,脈沖幅度50mV,脈沖寬度0.1s。所有實驗均在室溫下進行。這個BCP修飾電極在被沖洗干凈用濾紙擦干后可以被反復使用。2.5樣品(yngpn)制備從山東師范大學醫(yī)院(yyun)健康(jinkng)志愿者收集血液樣本。一個1.0ml新鮮血液離心20分鐘,3000轉,過濾樣品所有沉淀物質后分離血清,稀釋20倍,在pH 6.5的磷酸鹽緩沖溶液中,測試一份10.0mL試樣轉移到電化學實驗室用DPV同時

10、檢測UA,XA和HX。結果與討論3.1在玻碳電極表面電聚合BCP膜 用循環(huán)伏安法的電化學聚合膜。電位的掃描范圍是最重要的因素在制備聚(BCP)膜過程中。如果聚合的正電位值低于1.0V或如果負以上0.8 V,無聚合物發(fā)生反應。實驗結果表明,聚合物形成的膜是導電當電位掃描電位是從1至1.5 V。因此,它被選定在本文的電化學勢范圍。當硝酸鈉為支持電解質聚合膜層時,比較與其他支持如磷酸鹽緩沖液用電聚合結薄膜的工藝方案,所得到的聚合結膜是比較完整的,均勻的和緊湊的,表現出更好的氧化的電催化活性測定UA,XA和HX。因此硝酸鈉作為電聚合支持電解質。圖1. 從1到20的BCP在電解(dinji)過程中的循環(huán)

11、伏安曲線周期(zhuq)。BCP:2103 mol/L;支持(zhch)電解質:0.01mol/L硝酸鈉;掃描速度:100mv/s連續(xù)循環(huán)伏安法在2103 mol/LBCP和0.01 mol/L硝酸鈉溶液作支持電解質聚合在裸的玻碳電極表面如圖1所示。在第一個周期,一個較強的陽極峰在0.800 V(峰值),這可能與氧化BCP單體有關。陰極峰值也出現0.480v(B峰)在第一個周期。從第二個周期,一個新的氧化峰電位出現在0.520V(C峰)在循環(huán)伏安圖中,它的峰電流隨著繼時性掃描增長,說明膜層已經形成。在聚合過程中,A峰和B峰隨著循環(huán)時間一圈一圈傳下去。在18圈以后,陽極和陰極的電位均趨于穩(wěn)定。這

12、個現象表明最初形成BCP膜層是聚合了18圈,這暗示著 高分子膜層在玻碳電極表面的一個自我調整【19】。所以在聚合膜層時,電化學掃描的總圈數是20。在修飾完成后,玻碳電極表面出現了一層藍色的聚合膜層,這表明BCP已經電聚合在玻碳電極表面了。圖2. 聚循環(huán)伏安(BCP)修飾玻碳電極在pH6.5的磷酸鹽緩沖溶液在不同的掃描速率。 (a) 10mV/s; (b) 20mV/s;(c) 40mV/s; (d) 60mV/s; (e) 80mV/s; (f) 100mV/s.BCP修飾電極的電化學行為在PBS溶液中運用循環(huán)伏安法進行研究。在不同掃速下在pH為6.5的緩沖溶液中中運用循環(huán)伏安法電聚合BCP如

13、圖Fig.2所示。每掃描一圈均有一對氧化還原電對。陽極峰電位與掃描速率線性相關在掃描范圍為10-100mV/L,回歸方程ipa(uA)=0.5596+0.04106v(mV/L)(相關系數,R=0.9983),表明電化學過程是受表面控制的。而且,陽極峰電流與陰極峰電流(ipa/ipc)的幾乎相等。隨著掃描速率增加,峰電位的差值(Ep=EpaEpc)將不會改變。以上結果表明電化學反應過程是可逆的【20】。Ep(=58.3mV)接近于2.3RT/nF(或者59/n mV在25攝氏度時),與能斯特電化學可逆行為一致。因此電化學過程中轉移電子數約為一(n1.01)。聚(BCP)修飾電極的表面修飾采用夏

14、普【21】等人所使用的方法。通過這種方法,峰電流與電極表面物質的濃度有關,如以下方程ip=n2F2AV4RT。n代表參與電化學反應的電子數,A是電極表面的幾何面積(0.0706cm2), 代表表面覆蓋的濃度(mol/cm2),其他符號具有通常的意義。從陽極的峰電流與掃描速率可知,聚(BCP)的表面濃度被計算為6.81108摩爾每平方厘米。圖2中的結果證明了BCP被聚合在玻碳表面,在多功能組(BCP)的膜具有良好的氧化還原活性。pH值對聚(BCP)修飾(xish)電極的電化學行為的影響(yngxing),在磷酸鹽緩沖溶液中的研究在pH值范圍(fnwi)從4.5到9.2。結果表明,Epa和Epc傾

15、向于增加pH值的方向,這表明質子已經在電極部分過程。氧化峰電位呈線性,斜率為56.4mV/pH,這表明對通過聚(BCP)的膜的質子對的電子轉移率是1:1。因此,可能的聚(BCP)在玻碳電極膜反應機制的可表示如下(方案1):BCP(A)首先被沉積在玻碳表面氧化形成苯醌結構(B),并隨后在BCP膜上反向掃描。當將其放置在干燥的狀態(tài)下時該修飾電極表現出高穩(wěn)定性。將完整沒有無損的電極進行循環(huán)掃描6個小時,電極沒有改性。甚至放置一個月,電極也沒有惡化。3.2聚(BCP)修飾電極對尿酸(UA),黃嘌呤(XA)和次黃嘌呤(HX)的電化學行為圖3. 含UA,XA和HX混合物在pH6.5的磷酸鹽緩沖溶液(hun

16、 chn rn y)的循環(huán)伏安曲線裸的玻碳電極(dinj)(A)和聚(BCP)修飾(xish)電極(B)。UA:4105mol /L XA:1,210 -5mol /L,HX:210 -5mol /L和掃描速率:100mv/s。圖3顯示了混合液中含有的UA,XA和HX在裸的GCE和修飾電極在pH值為6.5的PBS溶液中進行循環(huán)伏安法。如圖3A所示,在赤裸的GCE下,所有三個化合物表現出較差的電流反應并沒有明顯的氧化峰,表示一個緩慢的電子轉移動力學。因此,無法使用裸電極同時測定這三種化合物。當改性采用混合電極,產生巨大的反差,顯示出三個明顯的和靈敏的氧化峰。峰位于0.321,0.707和1.06

17、2 V,分別對應于UA,XA和HX的氧化。UAXA和XA-HX的氧化峰電位差異分別為386和355 mV,這是足夠分離在一個混合XA,HX,UA的溶液中同時測定三者。因此,可以注意到,UA,XA和HX的峰值電流顯著增強和所有三的氧化峰過電位在聚(BCP)修飾電極上向負電位位移。增強的電流響應和降低過電位清楚地表明,聚(BCP)電極可以加速電子傳遞速率,對UA,XA和HX的氧化具有優(yōu)良的的電催化活性。聚(BCP)薄膜的表面具有高濃度的帶負電官能團的SO3和富電子氧原子,這可能與嘌呤衍生物的相互作用有關,如作為UA,XA和HX。此外,聚(BCP)修飾電極具有較大的真實表面積,-共軛鍵,一個大的活性

18、位點,具有更好的導電性,使嘌呤衍生物與不同的共軛效應接口。因此,在聚(BCP)修飾電極的電子傳遞速率提高的情況下,該電化學修飾電極對UA,XA和HX的氧化有很大提高。基于聚(BCP)修飾電極的高的電催化活性,UA,XA和HX可以很好的完全分離。3.3掃描(somio)速率對UA,XA和HX在聚(BCP)修飾(xish)電極表面掃描的氧化性的影響(yngxing) 圖4. 循環(huán)(xnhun)伏安法UA(A),XA(B)和HX(C)在修飾(xish)電極在不同的掃描(somio)速率。(A)20mv/s,(B)40mv/s,(C)60mv/s,(D)80mv/s,(E)100mv/s(F)150m

19、v/s,(G)200mv/s,(H)250mv/s ;UA:4105mol /L,XA:210 -5mol/ LHX:1,210 -5mol /L;pH為6.5的PBS。圖4AC記錄聚(BCP)修飾電極在不同電位掃描速率。該圖的Ipa作為v的三分子圖也在的插圖圖4中所示。所有的三種化合物,氧化峰電流隨著掃描速率的增加呈線性增加,這表明系統(tǒng)的特點對應于UA,XA和HX 22 吸附控制的過程。線性回歸方程與掃描率在20250mV/s范圍內,發(fā)現:UA:ipa(A)= 5.922 + 0.1261v(mV/s)(相關系數R=0.9985) ;XA:ipa(A)= 10.13 + 0.2228 (mV

20、/s)(R = 0.9991);HX: ipa(A) = 7.696 + 0.1395 (mV/s)(R = 0.9982)。此外,對于所有化合物,當掃描速率增加時,催化氧化峰電位也隨著增加。這些數據的分析結果表明,Epa的對數與掃描速度的呈一種線性關系,表明電催化氧化UA,XA和HX對修飾電極表面不可逆過程 20 。3.4在聚(BCP)修飾電極表面pH值對氧化UA,XA和HX的影響圖5所示的陽極(yngj)峰電位Epa和陽極峰值(fn zh)電流Ipa對UA(1104 mol/ L),XA(4105 mol /L)和HX(4105 mol /L)在pH緩沖溶液(hun chn rn y)中的

21、測定。當溶液pH值在4.59.2范圍增加,峰電位(Epa)對UA,XA和HX顯示同樣的趨勢和幾乎呈線性轉移向負電位,表明質子是直接參與率三個化合物的氧化反應。有關的方程Epa與pH值的關系:UA:Epa(v)= 0.72810.0618pH(R = 0.9986),XA:Epa(v)= 1.0690.0556pH(R = 0.9995),HX:Epa(V)= 1.4680.0625pH(R = 0.9979)。UA的直線斜率為61.8mV/pH,XA的斜率為55.6mV/pH 和HX的斜率為62.5mV/pH均接近理論值59mV/pH,這表明電子轉移步驟之前由一個質子和數量相等的電子參與氧化。

22、pH值對UA,XA和HX陽極電流峰值如圖5所示??梢钥闯?,在pH范圍在4.5-9.2范圍內UA的陽極峰電流減小。不過,pH值為6.5,XA和HX陽極峰電流增加,然后峰電流下降。在pH 6.5為XA和HX的最優(yōu)pH。表1 UA,XA和HX的同時測定的分析(fnx)特性。分析物線性范圍線性回歸方程相關系數檢出限(mol/L)UA5.0E-7-1.2E-4ipa=1.983+0.1612C0.99912.00E-07XA1.0E-7-1.0E-4ipa=2.072+0.6456C0.99956.00E-08HX2.0E-7-8.0E-5ipa=1.491+0.3892C0.99861.20E-07表

23、2 UA,XA和HX的測定(cdng)所提出(t ch)的電化學方法的比較。電極線性范圍(mol/L)檢出限參考電化學預處理電極UA:5.94E-8-1.19E-4UA: 2.97108【12】XA:1.31E-7-6.57E-4XA: 6.57108HX:3.67E-7-7.35E-5HX: 7.35108預氧化綠脫石修飾玻碳電極UA:2.0E-6-4.0E-5UA: 4.2107【13】XA:2.0E-6-4.0E-5XA: 7.0108HX:4.0E-6-3.0E-5HX: 3.4107嵌入超薄碳糊單壁碳納米管修飾電極UA:1.0E-7-1.0E-4UA: 8.0108【14】XA:2.

24、0E-7-1.0E-4XA: 1.46107HX:8.0E-7-1.0E-4HX: 5.62107聚(ATD)石墨烯修飾電極UA:5.0E6-4.5E5UA: 1.9107【15】XA:5.0E6-4.5E5XA: 5.9107Ru(DMSO)4Cl2納米聚合膜修飾電極UA:1.0E4-7.0E4UA: 3.72107【16】XA:5.0E5-5.0E4XA: 2.35106HX:5.0E5-3.0E4HX: 2.37106聚(BCP)石墨烯修飾電極UA:5.0E7-1.2E4UA: 2.0107本實驗XA:1.0E7-1.0E4XA: 6.0108HX:2.0E7-8.0E5HX: 1.21

25、07表3人血清樣品中UA,XA和HX的測定(n = 6)。樣品原始(umol/L)附加(umol/L)發(fā)現(umol/L)回收率(%)UAXAHXUAXAHXUAXAHAUAXAHA111.891.233.68102422.183.197.47101.398.897.328.15.451.8986215.8611.723.8198.5102.497.9322.455.86_2061041.8511.659.9398.698.299.33.5UA,XA和HX同時(tngsh)測定根據上述實驗(shyn)結果,在較寬的pH范圍(fnwi)內,修飾電極對UA,XA和HX具有良好的電催化活性的氧化反應

26、。最大峰值電流值可以在pH 4.5觀察UA和pH值6.5觀察XA和HX。由于pH 6.5比pH值4.5接近于生理pH值,并且三種化合物的氧化在此pH值具有較高的電化學響應,Ph6.5被選為UA,XA和HX的同時測定的最佳pH值。由于差分脈沖伏安法(DPV)比循環(huán)伏安法具有較高的靈敏度和更好的分辨率,使用DPV對UA,XA和HX的同時測定。DPV參數脈沖寬度50mv,脈沖幅度100ms,為了獲得最大峰值電流三種嘌呤衍生物的定量測定。結果表明,三個化合物的DPV峰電流與濃度成線性比例的。在優(yōu)化的條件下,UA,XA和HX線性范圍和檢測限在表1所示。每次測定后,該修飾電極可以在空白溶液中,在電位為0.

27、0-1.4V循環(huán)再生六次,增加其重現性。對修飾電極的重現性試驗,測定三種化合物(2105 mol/ L)六次。UA,XA和HX的峰值電流的相對標準偏差(RSD)分別為1.6%,1.1%和2.3%。六只電極獨立分別測定UA.XA和HA的峰電流相對標準偏差(RSD)分別為2.2%,1.5%和2.8%。上述結果表明,所提出的方法有靈敏度高,線性范圍寬,重復性好。比較該方法對其它電化學方法對UA,XA和HX的測定如表2中所列出的。3.6.干擾圖 6. 不同(b tn)濃度BCP的微分(wi fn)脈沖伏安法在UA:10.0umol/L XA和HX:20.0umol/L存在(cnzi)(BCP)改性:(

28、a)20.0_mol L1,(b)40.0_mol L 1,L 1(c)60.0_mol,(d)80.0_mol L 1,L 1(e)100.0_mol;脈沖幅度:50mV;脈沖寬度:100ms;pH= 6.5 PBS緩沖溶液為了檢查之間UA,XA和HX的分子間的作用,三種不同的實驗條件下進行最佳的條件。在每個實驗中,三種化合物一個的濃度被改變,而其他兩個物種濃度的保持不變。圖6中的結果表明在XA和HX峰值電流無明顯變化(減小10倍的UA的濃度可以減少1.8%的XA和1.2%的HX峰值電流)和不同的UA的濃度電位。此外,UA的氧化峰電流與UA的濃度呈線性增加相關系數為0.9991。同樣的,XA

29、或HX其濃度增加而保持其它兩種化合物的濃度為常數,氧化峰電流也增加,觀察表明無干擾的。所有的結果發(fā)現,UA,XA和HX在聚(BCP)修飾電極的氧化過程相互獨立,所以使用修飾電極可以同時測定三種化合物,沒有任何相互干擾。為評價該修飾電極的選擇性,不同的可能的干擾物質的影響進行了檢查UA,XA和HX(他們都是2105 mol /L)的測定。公差最大限制為外來物質導致的濃度的相對誤差約5%。如果測試了共存干擾物檢測電流信號偏差低于5%的情況下,我們認為到上述物質不干擾。結果表明,100倍的葡萄糖,乳酸,絲氨酸,60倍半胱氨酸,20倍的抗壞血酸,尿嘧啶,茶堿,10倍咖啡因,白蛋白和5倍多巴胺,腺嘌呤,

30、鳥嘌呤,對UA,XA和HX的測定沒有干擾。從以上干擾實驗,該方法可適用于實際生物樣品的檢測。3.7.分析(fnx)應用修飾電極的實際(shj)分析效用由測定人血清(xuqng)樣品中的UA,XA和HX說明。在所有的血清樣品稀釋20倍,在pH 6.5的磷酸鹽緩沖溶液中,三種化合物所提出的同時測定方法。所得到的結果總結在表3。由圖可以看出,所有的回收率均準確和精確的,這表明聚(BCP)修飾電極對真正的UA,XA和HX樣品具有良好的適用性。4.結論在本文中,新的聚(BCP)修飾電極已通過簡單和快速的電化學聚合方法制備,并作為電化學傳感器用于測定的UA,XA和HX。該修飾電極具有良好的穩(wěn)定性,靈敏度和

31、選擇性。結果表明,該方法對血清樣品中的嘌呤衍生物的含量測定是一種快速,靈敏,重現性的方法。因此,我們相信,聚(BCP)修飾電極可以成為一個測定UA,XA和H的有用工具,而由于其精密度好,低成本的分析,被用于快速的臨床診斷,。感謝 這個文獻的研由山東省自然科學基金支持(批準號,中國y2006b28)。參考文獻1 D.E. Metzler, Biochemistry: The Chemical Reactions of Living Cells, AcademicPress, New York, 1977.2 M. Heinig, R.J. Johnson, Role of uric acid i

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