平面色譜法課件

1、第十八章 平面色譜法Plane Chromatography憚刮衛(wèi)清沉弗虧恤皆惡舒厚絨仍行茄聲傘股酉睬皋輔碴戍射啞破雅營(yíng)亭宰第十八章平面色譜法第十八章平面色譜法第1頁(yè)，共23頁(yè)。平面色譜法（plane chromatography）是在平面上進(jìn)行分離的色譜方法主要包括：薄層色譜法 紙色譜法摯妒渝樞速奢留扁習(xí)燈碗糜卡府滌百夯媒豐拄醒略嚇董悍棍湍喊眼察男暖第十八章平面色譜法第十八章平面色譜法第2頁(yè)，共23頁(yè)。第一節(jié) 平面色譜法的分類(lèi)和原理1. 薄層色譜法固定相鋪在玻璃板、鋁箔、塑料板上形成薄層2. 紙色譜法固定相：紙纖維上吸附的水分（分配色譜）流動(dòng)相：不與水相混溶的有機(jī)溶劑3. 薄層電泳法帶電荷的

2、被分離物質(zhì)在薄層惰性支持介質(zhì)上，向與其相反的電極方向以不同速度泳動(dòng)而實(shí)現(xiàn)分離一、平面色譜法的分類(lèi)牽刊挎墨販塹賤妄淵遇嘩音翱輪勸拷捉珠啊脫銅拖悉洋瑩郵熔倚斷撣壺茫第十八章平面色譜法第十八章平面色譜法第3頁(yè)，共23頁(yè)。二、平面色譜法參數(shù)1. 比移值0 Rf 1Rf 0.20.8為宜（一）定性參數(shù)2. 相對(duì)比移值壹埂作囑矯棟久除秘?cái)\葫嗣濾妊余喉攝上橡遇待錘騾惦慨青國(guó)枉潤(rùn)旁舅鞭第十八章平面色譜法第十八章平面色譜法第4頁(yè)，共23頁(yè)。例 化合物A在薄層板上從原點(diǎn)遷移7.6cm，溶劑前沿距原點(diǎn)16.2cm。（1）計(jì)算化合物A的Rf值（2）色譜條件相同時(shí)，當(dāng)溶劑前沿移至距原點(diǎn)14.3cm時(shí)，化合物A的斑點(diǎn)應(yīng)在

3、何處？解勒戍澤溉總含蚜杏言邦旋飯逾警胞碾刮賒伊押王澇的擔(dān)箔中揚(yáng)咳酒捕膿潰第十八章平面色譜法第十八章平面色譜法第5頁(yè)，共23頁(yè)。（二）相平衡參數(shù)戳霓唾奮剃良焉蚤堿靛匙氫皺喻祭妻質(zhì)但肺搽助痔奶潮驟褂澆樸霧恕毯腳第十八章平面色譜法第十八章平面色譜法第6頁(yè)，共23頁(yè)。（三）面效參數(shù)1. 理論塔板數(shù)L ：原點(diǎn)到斑點(diǎn)的距離W：組分斑點(diǎn)的縱向?qū)挾?. 塔板高度L0 ：原點(diǎn)到展開(kāi)劑前沿的距離擱腳繭窮衛(wèi)檄全沸射衷嘗睫易鉸夕翅戎圭碘冶肚曉氖贊沙峻緘淮玲匿路扁第十八章平面色譜法第十八章平面色譜法第7頁(yè)，共23頁(yè)。（四）分離參數(shù)1. 分離度2. 分離數(shù)在相鄰斑點(diǎn)分離度為1.177時(shí)，在Rf=0和Rf=1兩組分斑點(diǎn)間能

4、容納的色譜斑點(diǎn)數(shù)憨摩由均驗(yàn)酷估凳樞藤臺(tái)撅唬際礬跳卡蛻擇洗星隊(duì)蕾知屁碴納裝銻像帶吳第十八章平面色譜法第十八章平面色譜法第8頁(yè)，共23頁(yè)。證明：鄧勇攤釋替廚禽蔥瓶丑阿制炒煌慧襪媚類(lèi)藐薦巒歇屯彥輝食鐘礙孟盒頁(yè)法第十八章平面色譜法第十八章平面色譜法第9頁(yè)，共23頁(yè)。武郎豁述樞戲內(nèi)室窮芋因史痙娥臍韋妮酉受鳥(niǎo)諱北瓤傭吐嚙叮條舶菠薯爵第十八章平面色譜法第十八章平面色譜法第10頁(yè)，共23頁(yè)。第二節(jié) 薄層色譜法（TLC）（一）吸附薄層色譜法固定相：吸附劑（二）分配薄層色譜法固定相：吸留在載體上的液體（如，硅膠上的水）流動(dòng)相極性固定相極性 反相色譜一、薄層色譜法的主要類(lèi)型彩及肉攆匝霞診拎泊熒鋤歷持談櫥臭侍名混民聘

5、譽(yù)攝貴公霄鞭仟甭長(zhǎng)贅聽(tīng)第十八章平面色譜法第十八章平面色譜法第11頁(yè)，共23頁(yè)。二、吸附薄層色譜的吸附劑和展開(kāi)劑1. 硅膠為多孔性無(wú)定形粉末，表面有硅醇基呈弱酸性，通過(guò)硅醇基與極性基團(tuán)形成氫鍵而表現(xiàn)其吸附性能。失活：硅膠吸水后形成水合硅醇基而失去吸附能力活化：加熱至100C以上pH5，適合中性、酸性物質(zhì)的分離種類(lèi)：硅膠H、硅膠G、硅膠GF254等2. 氧化鋁種類(lèi)：中性、堿性、酸性（一）吸附劑劉賞教竟踏硼踩濟(jì)斤包當(dāng)瑤遺爭(zhēng)燙醫(yī)孽歧查砰陀浮存壁蹭攤虹夜草塞派鷗第十八章平面色譜法第十八章平面色譜法第12頁(yè)，共23頁(yè)。（二）展開(kāi)劑展開(kāi)劑的選擇主要根據(jù)被分離物質(zhì)的極性、展開(kāi)劑的極性來(lái)決定常用溶劑極性強(qiáng)弱：水

6、酸吡啶甲醇乙醇正丙醇丙酮乙酸乙酯乙醚氯仿二氯甲烷甲苯苯三氯乙烷四氯乙烷環(huán)己烷石油醚是紙潑募惦糧叛店袋突劫耳贖棵滬侄斂芹兜簇蕉衷愉較碧戌科唉湖砷之哀第十八章平面色譜法第十八章平面色譜法第13頁(yè)，共23頁(yè)。例：P390/15答：極性小的組分Rf值大六種染料的極性順序?yàn)椋号嫉綄?duì)甲氧基偶氮苯蘇丹黃蘇丹紅對(duì)氨基偶氮苯對(duì)羥基偶氮苯根據(jù)取代基的極性大小排出順序蘇丹黃、蘇丹紅是帶有羥基的偶氮苯，但其構(gòu)型易形成分子內(nèi)氫鍵而使極性降低蘇丹紅因共軛體系比蘇丹黃更長(zhǎng)，極性更強(qiáng)。灼臉故伴安烙格授菊風(fēng)衷鐵競(jìng)服碾被誨純陛蔑捧蛾低攢艷到吧詞濤腰孩憾第十八章平面色譜法第十八章平面色譜法第14頁(yè)，共23頁(yè)。三、薄層色譜操作方法

7、薄板：加粘合劑的硬板、不加粘合劑的軟板粘合劑：羧甲基纖維素鈉 CMCNa 硅膠CMC板煅石膏 CaSO41/2H2O 硅膠G板（一）薄層板的制備有機(jī)溶劑，濃度約為0.010.1原點(diǎn)直徑：24mm工具：點(diǎn)樣毛細(xì)管、微量注射器（二）點(diǎn)樣斗獎(jiǎng)藝徽擠關(guān)逐蠅究印武查苯松噸菇謗羊禮蝸喇癬暮淮甕卻樸乃吩翟因挎第十八章平面色譜法第十八章平面色譜法第15頁(yè)，共23頁(yè)。（三）展開(kāi)和展開(kāi)劑的流速1. 展開(kāi)劑的流速2. 展開(kāi)展開(kāi)器皿常為長(zhǎng)方形密閉玻璃缸，上行法展開(kāi)汛新昭若野齋哨產(chǎn)瘤柬溝薛兌景橇瘸鉻提札埔銀傭瞞儡蔗濺脅掩劇溉凳恍第十八章平面色譜法第十八章平面色譜法第16頁(yè)，共23頁(yè)。（四）顯色在日光下觀察在紫外燈下觀察

8、熒光薄層板檢測(cè)顯色劑顯色沛漁用彼倦紙假欠存滾罷荊搏急檄殼膳雖搬橢屬蹋敢婚爾計(jì)概摸掘贖柴實(shí)第十八章平面色譜法第十八章平面色譜法第17頁(yè)，共23頁(yè)。四、定性和定量分析用Rf值定性（二）定量分析1. 洗脫法用溶劑將斑點(diǎn)中的組分洗脫下來(lái)，再定量測(cè)定2. 直接定量法目視法薄層掃描法（一）定性分析佐牽阿滔頗琴窯宏拔蒜柵屯僚蓑痛燒濰敝斯峰維殺掙鉗渙哪封銷(xiāo)帆擒金溫第十八章平面色譜法第十八章平面色譜法第18頁(yè)，共23頁(yè)。五、高效薄層色譜法HPTLC高效薄層板用噴霧法制成吸附劑顆粒比經(jīng)典薄層色譜法小得多有效塔板數(shù)可達(dá)5000以上亭諺扳寵機(jī)疹雷旁醒悄斯睛澗局蘇虧競(jìng)瘤岔底鴻扯嘻欺扦蓄耗飾贖六揭沖第十八章平面色譜法第十

9、八章平面色譜法第19頁(yè)，共23頁(yè)。六、薄層掃描法用一定波長(zhǎng)和強(qiáng)度的光束照射薄層上的斑點(diǎn)，用儀器測(cè)量照射前后光束強(qiáng)度的變化，從而求得物質(zhì)含量的方法。透射法測(cè)定反射法測(cè)定掃描方法：光源不動(dòng)，薄層板動(dòng)定量分析：外標(biāo)法脾盧鈍謬峻戴翻幻溺宗橢升腮購(gòu)康哄肆髓萌曼棚粱虹家莽雷派坐疚拇鏡券第十八章平面色譜法第十八章平面色譜法第20頁(yè)，共23頁(yè)。七、薄層色譜的應(yīng)用及實(shí)例判斷合成反應(yīng)的程度藥品的鑒別和純度的檢查天然藥物的鑒別和定量測(cè)定推詭亂藥虎歹疵恬射尉相飯鋸竣愿強(qiáng)辜膨奈闡縛灰僵搖蕪寢良睛庚媽叼筏第十八章平面色譜法第十八章平面色譜法第21頁(yè)，共23頁(yè)。第三節(jié) 紙色譜法紙色譜過(guò)程是溶質(zhì)在固定相和流動(dòng)相之間連續(xù)萃取的過(guò)程屬于正相分配色譜化合物極性大或親水性強(qiáng)，則分配系數(shù)大，Rf值小一、紙色譜法的分離原理貍曙旭蔣熟賜窟怨雅悍戍淫瘴室敖蚜蹈湊潰孵忌宗遏試泊甄曲就藻永疙盜第十八章平面色譜法第十八章平面色譜法第22頁(yè)，共23頁(yè)。二、紙色譜法的實(shí)驗(yàn)條件1. 色譜紙的選擇2. 固定相濾紙纖維通常含2025的水分，其