疫苗工程復(fù)習(xí)資料

1、1疫苗概念：一切通過(guò)注射或黏膜途徑接種，可以誘導(dǎo)機(jī)體產(chǎn)生針對(duì)特定致病原的特異性 抗體或細(xì)胞免疫，從而使機(jī)體獲得保護(hù)或消滅該致病原能力的生物制品，統(tǒng)稱(chēng)為疫苗2按所用材料分類(lèi)：細(xì)菌性疫苗（舊稱(chēng)：菌苗）病毒性疫苗（舊稱(chēng)：疫苗）類(lèi)毒素3按疫苗研制技術(shù)分類(lèi)：傳統(tǒng)疫苗：滅活疫苗、減毒活疫苗、亞單位疫苗：用天然微生物的某些成分制成新型疫苗：基因工程亞單位疫苗、基因工程載體疫苗、核酸疫苗、基因缺失活疫苗、重組疫 苗、合成肽疫苗、抗獨(dú)特型抗體疫苗4有些微生物卻危害人類(lèi)的健康，引起各種疾病。這些能引起人類(lèi)疾病的微生物成為病原體 （pathogen），人體則是這些病原體的宿主（host）。5我們把由各種致病微生物或

2、稱(chēng)病原體侵入人體并大量繁殖所引起的一類(lèi)具有傳染性的疾 病稱(chēng)為傳染病（infectious disease）o6微生物的控制手段意義：防止疾病的發(fā)生和傳播，防止微生物的污染，防止微生物引起的原材料變質(zhì)和腐敗 手段：滅菌：利用物理或化學(xué)因子，使存在于物體中的所有微生物永久性地喪失其生活力， 包括最耐熱的細(xì)菌芽孢。（干熱滅菌、濕熱滅菌）消毒：殺死環(huán)境中一切病原微生物的過(guò)程（具體參考P53,表3-2）防腐化療7病原微生物感染的防治原則：以預(yù)防為主消毒滅菌防止感染免疫接種：人工主動(dòng)免疫：輸入抗原性物質(zhì)（菌苗、疫苗、類(lèi)毒素），刺激機(jī)體產(chǎn)生免疫力， 主要用于疾病的特異性預(yù)防。人工被動(dòng)免疫：給機(jī)體注射含特異性

3、抗體的免疫血清（如抗毒素血清）或其他免 疫細(xì)胞抑制劑（丙種球蛋白和細(xì)胞因子），是立即獲得免疫力，主要用于治療或緊急預(yù)防。 8微生物感染的治療 細(xì)菌感染的治療抗菌藥物的主要作用機(jī)制（P56）（1）影響細(xì)胞壁的合成 （青霉素）（2）影響細(xì)胞膜的功能（多粘菌素）（3）影響蛋白質(zhì)的合成（4）影響核酸的代謝9病原菌突破機(jī)體的某些防御機(jī)能，并在體內(nèi)定居繁殖和擴(kuò)散的能力，稱(chēng)為侵襲力 （invasiveness）10構(gòu)成侵襲力的物質(zhì)基礎(chǔ)是：菌體表面結(jié)構(gòu)（菌毛等粘附因子與細(xì)菌的致病有關(guān)、莢膜和 類(lèi)莢膜物質(zhì)）、侵襲性酶類(lèi)（A簇鏈球菌產(chǎn)生鏈激酶和透明質(zhì)酸酶，又稱(chēng)擴(kuò)散因子、DAN酶、 血漿凝固酶）、其他11產(chǎn)生外毒素

4、的細(xì)菌主要為G+菌：破傷風(fēng)梭菌、肉毒梭菌、白喉棒狀桿菌、產(chǎn)氣莢膜梭菌、金黃色葡萄球菌、 鏈球菌 次要為G-菌：痢疾桿菌、鼠疫桿菌、霍亂弧菌外毒素由細(xì)菌分泌到細(xì)胞外，而志賀氏菌和大腸桿菌的外毒素由細(xì)胞溶解后才釋放到細(xì)胞外 12內(nèi)毒素是G-菌細(xì)胞壁外膜中的脂多糖菌體死亡破裂或人工裂解后釋放內(nèi)毒素結(jié)構(gòu)：O特異性多糖、核心多糖、脂質(zhì)A （引起內(nèi)毒素的生物學(xué)活性）13內(nèi)毒素檢測(cè)方法：通常采用鱟（hou）試驗(yàn)（海洋節(jié)肢動(dòng)物、其血液中的有核變形細(xì)胞 能被內(nèi)毒素所裂解）14病毒感染的致病機(jī)制（1）殺細(xì)胞效應(yīng)-無(wú)包膜病毒（2）穩(wěn)定狀態(tài)感染：有包膜病毒（3）包涵體形成（4）細(xì)胞凋亡（5）基因整合與細(xì)胞轉(zhuǎn)化15疫苗

5、開(kāi)發(fā)的步驟步驟內(nèi)容基礎(chǔ)研究確定致病因素研究宿主對(duì)感染的免疫反應(yīng)確定候選疫苗臨床研究一期臨床疫苗一般安全性和抗原性的研究二期臨床疫苗擴(kuò)大的安全性和抗原性研究，尋找合適的計(jì)量和免疫程序三期臨床檢驗(yàn)疫苗的有效性獲準(zhǔn)生產(chǎn)后研究四期臨床進(jìn)一步確定疫苗安全性和有效性下一輪基礎(chǔ)一一臨床研究，進(jìn)一步提高疫苗質(zhì)量16實(shí)例疫苗生產(chǎn)工藝流程17臨床試驗(yàn)過(guò)程中幾個(gè)階段的比較（P135）階段志愿者人數(shù)持續(xù)時(shí)間目的第一階段（I期）20601218個(gè)月安全性，免疫方案第二階段（II期）505002年不同免疫方案下的安全性及免疫原性第三階段（III期）20001000034年安全性，功效第四階段（W期）500050000不定

6、安全性（所有情況下）18疫苗的效果分析與評(píng)價(jià)（1）臨床試驗(yàn)的有效性評(píng)價(jià)疫苗的有效性初步有效性的支持性研究（1期11期）核心有效性研究（11期m期）（2）疫苗效果的免疫學(xué)分析能夠誘導(dǎo)保護(hù)性免疫應(yīng)答，包括免疫原性檢測(cè)、活菌數(shù)檢測(cè)，病毒滴度測(cè)定（3）疫苗效果的流行病學(xué)評(píng)估通過(guò)人群中使用后疾病的流行過(guò)程的變化來(lái)評(píng)價(jià)疫苗的效果（4）影響疫苗效果評(píng)價(jià)的因素上市前的臨床考核（I期，11期，111期）疫苗效果及常見(jiàn)副反應(yīng)上市后的臨床考核（W期）大量人群、不同年齡組中實(shí)際應(yīng)用的免疫效果和罕見(jiàn)的嚴(yán)重副反 應(yīng)19免疫佐劑的定義和類(lèi)別佐劑（新概念）：凡是可以增強(qiáng)抗原特異性免疫應(yīng)答的物質(zhì)稱(chēng)為佐劑（adjuvate）。佐

7、劑（舊概念）：當(dāng)一種物質(zhì)先于抗原或與抗原混合或同時(shí)注射于動(dòng)物體內(nèi)，能非特異性地 改變或增強(qiáng)機(jī)體對(duì)該抗原的特異性免疫應(yīng)答，發(fā)揮其輔佐作用的物質(zhì).以前作為佐劑使用時(shí)沒(méi)有免疫原性，但現(xiàn)在有所改變，如IL-2是佐劑和IL-8 一類(lèi)細(xì)胞因子 佐劑卻不一樣，具有免疫調(diào)節(jié)和免疫增強(qiáng)作用，單獨(dú)使用時(shí)卻具有免疫原性。20佐劑的作用機(jī)理（1）儲(chǔ)存作用（2）直接或間接作用于A(yíng)PC，增進(jìn)抗原遞呈作用（3）刺激APC分泌免疫調(diào)節(jié)細(xì)胞因子21異常反應(yīng)指合格的疫苗在實(shí)施規(guī)范接種過(guò)程中或者實(shí)施規(guī)范接種后造成受種者機(jī)體組織器官、功能損 害，相關(guān)各方均無(wú)過(guò)錯(cuò)的藥品不良反應(yīng)。22下列不屬于預(yù)防異常接種反應(yīng)（1）因疫苗本身特性引起的

8、接種后一般反應(yīng)（2）因疫苗質(zhì)量不合格給受種者造成的損害（3）因接種單位違反預(yù)防接種工作規(guī)范、免疫程序、疫苗使用指導(dǎo)原則、接種方案給受種 者造成的損害（4）受種者在接種時(shí)正處于某種疾病的潛伏期或者前驅(qū)期，接種后偶合發(fā)?。?）受種者有疫苗說(shuō)明書(shū)規(guī)定的接種禁忌，在接種前受種者或者其監(jiān)護(hù)人未如實(shí)提供受種者健康狀況和接種禁忌等情況，接種后受種者原有疾病復(fù)發(fā)或者病情加重（6）因心理因素發(fā)生個(gè)體或者群體的心理性反應(yīng)23轉(zhuǎn)基因植物疫苗的優(yōu)越性（1）植物細(xì)胞的全能性（2）完整的真核細(xì)胞表達(dá)系統(tǒng)（3）誘導(dǎo)粘膜免疫反應(yīng)（4）生產(chǎn)簡(jiǎn)便、成本低廉（5）接種簡(jiǎn)便（6）安全性24優(yōu)化重組基因插入基因的3端加上微粒體保留信號(hào)

9、SEKDEL多肽序列選擇特異的啟動(dòng)子密碼子改進(jìn)其他的方法25無(wú)抗生素抗性的轉(zhuǎn)基因植物在轉(zhuǎn)基因植物的再生過(guò)程中抗生素作為篩選標(biāo)記被廣泛應(yīng)用子代去除抗生素基因的策略共轉(zhuǎn)化（其基本原理是將一個(gè)具有抗生素標(biāo)記的質(zhì)粒和另一個(gè)僅含目的基因質(zhì)粒同時(shí)導(dǎo)人同 一農(nóng)桿菌。由于不同質(zhì)粒的基因一般插入到植物基因組的不同部位，可以通過(guò)有性生殖而分 離，在子一代的植株中就可以篩選得到無(wú)抗生素基因而只含有目的基因的轉(zhuǎn)基因植物。）26粘膜的概述是人體先天性免疫系統(tǒng)中很重要的防止病原微生物入侵的生理防線(xiàn)能將機(jī)體的內(nèi)環(huán)境和外環(huán)境隔離開(kāi)來(lái)，有效地將致病因子和對(duì)機(jī)體有害物質(zhì)攔阻在外； 分泌液可防止病原微生物在其表面生長(zhǎng)，并可通過(guò)排泄或咳痰等生理過(guò)程將它們清除出去 27黏膜免疫的優(yōu)點(diǎn)（1）口服疫苗可在粘膜局部產(chǎn)生特異的抗體反應(yīng)，來(lái)有效地阻止病原