芳胺及芳烴胺類藥物的分析TheAnalysisofAromaticamines課件

1、第七章芳香胺類藥物的分析第1頁(yè)，共69頁(yè)。 芳胺類藥物指氨基直接與苯環(huán)相連。 芳胺類: 酰胺類、對(duì)氨基苯甲酸酯類 芳烴胺類藥物指氨基在烴基側(cè)鏈上苯乙胺類、苯丙胺類藥物第2頁(yè)，共69頁(yè)。第一節(jié) 芳胺類藥物的分析一、對(duì)氨基苯甲酸酯類具有對(duì)氨基苯甲酸酯基本結(jié)構(gòu)具有游離的芳伯氨基。1結(jié)構(gòu)特點(diǎn)：第3頁(yè)，共69頁(yè)。代表藥物有： 鹽酸普魯卡因苯佐卡因鹽酸丁卡因第4頁(yè)，共69頁(yè)。2性質(zhì)：芳伯氨基特性 具有芳伯氨基，可發(fā)生重氮化偶合反應(yīng)；可與芳醛發(fā)生縮合反應(yīng)，易氧化變色。 水解特性 具有酯鍵，易發(fā)生水解。水解的快慢受光線、溫度或堿性條件影響。 第5頁(yè)，共69頁(yè)。 弱堿性 脂烴胺側(cè)鏈為叔胺氮原子，故具有弱堿性；可

2、與生物堿沉淀劑發(fā)生沉淀反應(yīng)；可在非水溶劑中被滴定 紫外吸收 具有苯環(huán)結(jié)構(gòu)，有紫外吸收 紅外吸收第6頁(yè)，共69頁(yè)。1.結(jié)構(gòu)特點(diǎn)： 苯胺酰基衍生物，酰胺基鄰位或?qū)ξ挥腥〈?。二、酰胺類?頁(yè)，共69頁(yè)。代表藥物有：對(duì)乙酰氨基酚鹽酸利多卡因第8頁(yè)，共69頁(yè)。2性質(zhì)：利多卡因，酰胺基鄰位上有兩個(gè)甲基，有很大空間位阻，水解較為困難。（利多卡因在80%的硫酸溶液中加熱才能水解） 水解后可發(fā)生重氮化反應(yīng)具有酰胺結(jié)構(gòu)共性。水解成芳伯氨基，發(fā)生重氮化偶合反應(yīng)。第9頁(yè)，共69頁(yè)。 水解產(chǎn)物易酯化：酯鍵或酰胺鍵易水解 與FeCl3反應(yīng) 具有酚羥基或水解后能產(chǎn)生酚羥基，可與FeCl3作用呈色。 堿性利多卡因側(cè)鏈中具有

3、叔氨N原子，顯弱堿性，能與酸成鹽，且能與生物堿沉淀試劑或重金屬離子反應(yīng)。第10頁(yè)，共69頁(yè)。三、鑒別反應(yīng) 1、重氮化-偶合反應(yīng) 具有芳伯氨基藥物，如鹽酸普魯卡因等，在酸性溶液中與NaNO2發(fā)生重氮化反應(yīng)，再與堿性-萘酚偶合產(chǎn)生紅色偶氮化合物。第11頁(yè)，共69頁(yè)。 直接反應(yīng)：苯佐卡因、鹽酸普魯卡因、 鹽酸普 魯卡因胺間接反應(yīng)：對(duì)乙酰氨基酚、醋氨苯砜 利多卡因和布比卡因由于空間位阻很難發(fā)生此反應(yīng)。第12頁(yè)，共69頁(yè)。第13頁(yè)，共69頁(yè)。第14頁(yè)，共69頁(yè)。 鹽酸丁卡因（芳香第二胺結(jié)構(gòu)）與 NaNO2作用生成乳白色N-亞硝基化合物沉淀。第15頁(yè)，共69頁(yè)。 2、三氯化鐵反應(yīng) 具有酚羥基（如對(duì)乙酰氨基

4、酚），可與FeCl3作用顯藍(lán)紫色。 3、與重金屬離子的反應(yīng) 具有烴胺側(cè)鏈，與生物堿沉淀試劑反應(yīng). 根據(jù)沉淀顏色或測(cè)定沉淀熔點(diǎn)進(jìn)行鑒別。 第16頁(yè)，共69頁(yè)。(1)與銅離子的反應(yīng)(2)與鈷鹽反應(yīng)第17頁(yè)，共69頁(yè)。第18頁(yè)，共69頁(yè)。（3）羥肟酸鐵的反應(yīng) 具有芳酰胺結(jié)構(gòu)，被H2O2氧化成羥肟酸，羥肟 酸與FeCl3反應(yīng)生成紫紅色羥肟酸鐵，隨即 變?yōu)榘底厣磷睾谏Ｈ琨}酸普魯卡因胺。具有酰胺結(jié)構(gòu)的藥物羥肟酸羥肟酸鐵第19頁(yè)，共69頁(yè)。（4）與汞離子反應(yīng)第20頁(yè)，共69頁(yè)。鹽酸普魯卡因的鑒別 4、水解產(chǎn)物反應(yīng)鹽酸普魯卡因 + NaOH普魯卡因油狀物對(duì)氨基苯甲酸鈉 + 二乙氨基乙醇（使?jié)駶?rùn)的紅色石蕊試

5、紙變蘭色）對(duì)氨基苯甲酸鈉 + HCl對(duì)氨基苯甲酸（白色）第21頁(yè)，共69頁(yè)。第22頁(yè)，共69頁(yè)。苯佐卡因的水解反應(yīng)第23頁(yè)，共69頁(yè)。5、制備衍生物測(cè)熔點(diǎn)三硝基苯酚衍生物 鹽酸利多卡因 ChP（2005）鑒別 取本品0.2g，加水20ml溶解。（1）取溶液10ml，加三硝基苯酚試液10ml，即生成沉淀；濾過，沉淀用水洗滌后，干燥，依法測(cè)定（附錄C），熔點(diǎn)為228232，熔融時(shí)同時(shí)分解。鹽酸布比卡因 ChP（2005）第24頁(yè)，共69頁(yè)。利多卡因和布比卡因第25頁(yè)，共69頁(yè)。硫氰酸鹽衍生物 鹽酸丁卡因 ChP（2005） 鑒別 （1）取本品約0.1g，加5%醋酸鈉溶液10ml溶解后，加25%硫氰

6、酸銨溶液1ml，即析出白色結(jié)晶；濾過，結(jié)晶用水洗滌，在80干燥，依法測(cè)定（附錄C），熔點(diǎn)約為131。第26頁(yè)，共69頁(yè)。6、UV鹽酸布比卡因 ChP（2005）鑒別 （2）取本品，精密稱定，按干燥品計(jì)算，加0.01mol/L鹽酸溶液制成每1ml中含0.40mg的溶液，照分光光度法（附錄A）測(cè)定，在263nm與271nm的波長(zhǎng)處有最大吸收；其吸收度分別為0.530.58與0.430.48。第27頁(yè)，共69頁(yè)。7、紅外吸收光譜法 利用化合物結(jié)構(gòu)中特殊基團(tuán)的振動(dòng)和轉(zhuǎn)動(dòng)等紅外活性振動(dòng)產(chǎn)生的紅外吸收峰對(duì)藥物進(jìn)行鑒別的方法。要求能夠?qū)R圖中的cm-1（）進(jìn)行正確的歸屬。第28頁(yè)，共69頁(yè)。四、特殊雜質(zhì)檢

7、查1、對(duì)乙酰氨基酚雜質(zhì)檢查 對(duì)乙酰氨基酚中除檢查酸度、氯化物、硫酸鹽、重金屬、水分、熾灼殘?jiān)纫话汶s質(zhì)外，還需要檢查：乙醇溶液的澄清度與顏色、有關(guān)物質(zhì)（對(duì)氯乙酰苯胺） 、對(duì)氨基酚等特殊雜質(zhì)。第29頁(yè)，共69頁(yè)。對(duì)乙酰氨基酚以對(duì)硝基氯苯為原料合成。第30頁(yè)，共69頁(yè)。(1)乙醇溶液的澄清度與顏色 對(duì)乙酰氨基酚易溶于乙醇中，如乙醇液不澄清或有顏色，則說明有雜質(zhì)存在。 生產(chǎn)工藝用鐵粉作還原劑，如帶入成品，則導(dǎo)致對(duì)乙酰氨基酚乙醇溶液產(chǎn)生渾濁。 中間體對(duì)氨基酚有色氧化物在乙醇中顯橙紅色或棕色。 第31頁(yè)，共69頁(yè)。（2）有關(guān)物質(zhì)（對(duì)氯乙酰苯胺） 副反應(yīng)副副反應(yīng)對(duì)硝基氯苯為原料合成對(duì)乙酰氨基酚時(shí)，如發(fā)生這

8、樣的副反應(yīng)就能夠引入對(duì)氯乙酰苯胺。副反應(yīng)第32頁(yè)，共69頁(yè)。TLC法 樣品液 對(duì)照液對(duì)氯乙酰苯胺乙醚溶液（50g/ml） 分離系統(tǒng)硅膠GF254氯仿-丙酮-甲苯（1352）第33頁(yè)，共69頁(yè)。 限量: 點(diǎn)樣量樣品液：200l 點(diǎn)于硅膠GF254薄層板上對(duì)照液：40l 判斷在254nm波長(zhǎng)紫外燈下觀察，供試品與對(duì)照品主斑點(diǎn)Rf值相同的斑點(diǎn)比較,不得超過其大小與顏色。第34頁(yè)，共69頁(yè)。(3)對(duì)氨基酚 制備中乙酰化不完全或貯存不當(dāng)發(fā)生水解都能引入對(duì)氨基酚檢查原理： 對(duì)氨基酚在堿性條件下，與亞硝基鐵氰化鈉作用，生成藍(lán)色絡(luò)合物，與對(duì)照液比較判斷對(duì)氨基酚的限量。 第35頁(yè)，共69頁(yè)。四、含量測(cè)定（一）亞

9、硝酸鈉滴定法1. 原理 具有芳伯氨基藥物，在酸性條件下與NaNO2反應(yīng)生成重氮鹽，根據(jù)消耗NaNO2量，計(jì)算出含量。潛在芳伯氨基藥物，如芳酰氨基、硝基等，可先水解或還原，得芳伯氨基后，再進(jìn)行測(cè)定。 第36頁(yè)，共69頁(yè)。第37頁(yè)，共69頁(yè)。2. 操作中的主要條件重氮化反應(yīng)屬于分子反應(yīng)滴定液NaNO2及反應(yīng)生成的重氮鹽都不穩(wěn)定反應(yīng)速度受多種因素影響第38頁(yè)，共69頁(yè)。第一步反應(yīng)速度比較慢，而后兩步反應(yīng)速度則比較快。（1）加入溴化鉀加快反應(yīng)速度重氮化反應(yīng)機(jī)制：第39頁(yè)，共69頁(yè)。 a. 當(dāng)苯環(huán)上特別是氨基鄰位或?qū)ξ簧嫌形娀鶗r(shí),如 吸電基通過誘導(dǎo)效應(yīng)使氨基 上電子云密度降低，從而堿 性降低，游離芳伯

10、胺濃度增 大，所以反應(yīng)速度就快。等可使氨基的堿性降低，重氮化反應(yīng)速度加快。第40頁(yè)，共69頁(yè)。 b.當(dāng)在苯環(huán)上有供電基時(shí)，則使反應(yīng)速度降低。如 等。供電基能使氨基堿性增強(qiáng)，這樣氨基成鹽的機(jī)會(huì)就增大，游離芳伯胺的濃度就減小，所以反應(yīng)速度就慢。第41頁(yè)，共69頁(yè)。（2）反應(yīng)速度與酸及酸度的關(guān)系a.酸的種類重氮化反應(yīng)在HBr、HCl、H2SO4中反應(yīng)速度是 HBrHClH2SO4 K1比K2大300倍第42頁(yè)，共69頁(yè)。 用HBr時(shí)，生成NOBr量大，反應(yīng)速度快。 但HBr價(jià)格貴，用鹽酸代替，為加快反應(yīng)速度，需加入KBr（催化劑）。 產(chǎn)生HBr與HNO2反應(yīng)，可生成大 量NOBr，加快反應(yīng)速度。第4

11、3頁(yè)，共69頁(yè)。b. 鹽酸的用量理論上: 芳胺鹽酸11mol 實(shí)際上: 芳胺鹽酸12.56mol原因：強(qiáng)酸性可加速反應(yīng)重氮鹽在酸性下穩(wěn)定酸性下避免副反應(yīng)發(fā)生。 第44頁(yè)，共69頁(yè)。 如鹽酸量增加，則反應(yīng)向左進(jìn)行。 如鹽酸濃度太大，反到會(huì)使游離芳伯氨的量減?。ǔ甥}），而影響重氮化反應(yīng)速度，使反應(yīng)速度減慢。如酸度不足則沒反應(yīng)的芳胺與生成的重氮鹽產(chǎn)生偶氮氨基化合物，而影響測(cè)定結(jié)果。第45頁(yè)，共69頁(yè)。（3）反應(yīng)速度與滴定時(shí)溫度的關(guān)系 一般，溫度升高反應(yīng)速度加快。但重氮化反應(yīng)所生成的重氮鹽不穩(wěn)定，溫度升高重氮鹽分解速度也加快。另外，溫度高時(shí)，滴定液亞硝酸鈉也容易分解逸失，而影響測(cè)定結(jié)果。所以，重氮化反

12、應(yīng)應(yīng)在低溫條件下進(jìn)行。第46頁(yè)，共69頁(yè)。 中國(guó)藥典規(guī)定：在30C以下，把滴定管尖端插入液面下 進(jìn)行滴定。在滴定時(shí)一邊攪拌一邊加入大部分標(biāo)準(zhǔn)溶液。到近終點(diǎn)時(shí)把滴定管提出液面，用水沖洗后再繼續(xù)滴定至終點(diǎn)。標(biāo)準(zhǔn)溶液在液面下加入，可避免HNO2揮發(fā)。第47頁(yè)，共69頁(yè)。（4）反應(yīng)速度與滴定速度的關(guān)系 重氮化反應(yīng)屬分子反應(yīng)，反應(yīng)速度比較慢，滴定速度不能過快。 尤其是近終點(diǎn)時(shí)，更要慢慢地滴定。近終點(diǎn)時(shí)，游離芳伯胺濃度非常低，反應(yīng)速度就更慢了。 所以，每加一滴標(biāo)準(zhǔn)液后，要攪拌15分鐘后再判斷終點(diǎn)。第48頁(yè)，共69頁(yè)。 3. 指示終點(diǎn)的方法 (1) 用停滴定法 溶液 檢流計(jì) 終點(diǎn)前： 無過量 無電流 HNO

13、2 終點(diǎn)時(shí)：有過量 有電流（使指針偏離零 HNO2 永停在某一位置） (2) 外指示劑法 用KI-淀粉指示劑 指示終點(diǎn)的原理： 2NaO2 + 2KI + 4HCl 2NO + I2 + 2KCl + 2NaCl + 2H2OGVVR1R2+V第49頁(yè)，共69頁(yè)。（二）非水溶液滴定法 脂烴胺側(cè)鏈，具弱堿性（三）紫外分光光度法 對(duì)乙酰氨基酚在0.4氫氧化鈉溶液中，于257nm波長(zhǎng)處有最大吸收，其紫外吸收光譜特征，可用于其原料及其制劑的含量測(cè)定。第50頁(yè)，共69頁(yè)。 對(duì)乙酰氨基酚的含量測(cè)定：取本品42mg，精密稱定，置250ml量瓶中，加0.4%氫氧化鈉溶液50ml溶解后，加水至刻度，搖勻，精密量

14、取5ml，置100ml量瓶中，加0.4%氫氧化鈉溶液10ml，加水至刻度，搖勻。在1cm的吸收池中，照分光光度法在257nm的波長(zhǎng)處測(cè)定吸收度為0.572。按C8H9NO2的吸收系數(shù)為715計(jì)算。求對(duì)乙酰氨基酚的百分含量？第51頁(yè)，共69頁(yè)。（四）HPLC法 鹽酸普魯卡因注射液 可同時(shí)測(cè)定鹽酸普魯卡因及其降解產(chǎn)物對(duì)氨基苯甲酸；離子抑制色譜法 外標(biāo)法定量（五）體內(nèi)藥物分析 高效毛細(xì)管電泳法測(cè)定血漿中普魯卡因、利多卡因、丁卡因和布比卡因第52頁(yè)，共69頁(yè)。高效毛細(xì)管電泳測(cè)定幾種局麻藥電泳分析條件：40 mmol/l的H3PO4-Tris buffer pH=5.0毛細(xì)管：59 cm70m柱溫：18

15、壓力進(jìn)樣：3Kpa5s工作電壓：20 KV檢測(cè)波長(zhǎng)：220 nm第53頁(yè)，共69頁(yè)。分析樣品的處理：血漿堿化乙醚：二氯甲烷萃取離心揮干有機(jī)溶劑緩沖溶液溶解殘?jiān)M(jìn)樣分析第54頁(yè)，共69頁(yè)。第二節(jié) 苯乙胺類藥物分析一結(jié)構(gòu)特點(diǎn)具有烴胺側(cè)鏈，屬于芳烴胺類藥物。多數(shù)在苯環(huán)上有12個(gè)羥基取代基。第55頁(yè)，共69頁(yè)。代表藥物腎上腺素去甲腎上腺素第56頁(yè)，共69頁(yè)。二性質(zhì)：1. 易被氧化 鄰苯二酚或苯酚結(jié)構(gòu)，可與重金屬離子絡(luò)和呈色；易被氧化呈色。3. 具有旋光性 具有手性碳原子，具有光學(xué)活性。2. 顯堿性 具有烴胺側(cè)鏈（仲氨），顯弱堿性。能與酸成鹽。 第57頁(yè)，共69頁(yè)。三鑒別試驗(yàn) 1、三氯化鐵反應(yīng)(酚羥基)

16、： 在0.1mol/L鹽酸中與Fe3+顯翠綠色，加氨試液后，顯紫色或紫紅色 2、甲醛-硫酸反應(yīng) 本類藥物與甲醛硫酸反應(yīng)生成具有醌式結(jié)構(gòu)的有色物質(zhì)第58頁(yè)，共69頁(yè)。3、氧化反應(yīng)4、紫外分光光度法與紅外分光光度法5、與亞硝基鐵氰化鈉的反應(yīng)（Rimini試驗(yàn)）脂肪伯氨基亞硝基鐵氰化鈉丙酮碳酸氫鈉 紅紫色6、雙縮脲反應(yīng)：氨基醇結(jié)構(gòu)與硫酸銅的反應(yīng) 鹽酸麻黃堿+硫酸銅藍(lán)紫色+乙醚第59頁(yè)，共69頁(yè)。三、腎上腺素中酮體的檢查第60頁(yè)，共69頁(yè)。四、含量測(cè)定（一） 非水溶液滴定法 利用本類藥物分子中側(cè)鏈脂烴胺的堿性。 溶劑：冰醋酸醋酐 指示劑：結(jié)晶紫；滴定劑：高氯酸；終點(diǎn)判斷：顯藍(lán)綠色 注意：氫鹵酸鹽需用醋

17、酸汞消除干擾。含氨基的藥物如果需加入醋酐，應(yīng)在加入冰HAc溶解放冷后再加醋酐，防止氨基被乙酰化。第61頁(yè)，共69頁(yè)。第62頁(yè)，共69頁(yè)。（二）、溴量法：以鹽酸去氧腎上腺素為例。1）原理： Br2+2KI2KBr + I2 I2 + 2Na2S2O3 2NaI + Na2S4O62)操作要點(diǎn)游離溴及碘極易揮散，操作過程中防逸失不能加入太過量的溴液，以防酚羥基氧化或溴化。一般以過量2為宜。平行條件作空白，校正操作中溴及碘揮發(fā)。第63頁(yè)，共69頁(yè)。（三）提取中和法1基本原理 利用藥物鹽的形式可溶于水,游離藥物不溶于水而溶于有機(jī)溶劑的性質(zhì)進(jìn)行提取，然后進(jìn)行滴定的方法。第64頁(yè)，共69頁(yè)。 4、紫外分光光度法與比色法 5、高效液相色譜法 6、體內(nèi)藥物分析第65頁(yè)，共69頁(yè)。 第三節(jié) 苯丙胺類藥物的分析一、苯丙胺類藥物的基本結(jié)構(gòu)與典型性質(zhì)馬來酸依那普利西拉普利第66頁(yè)，共69頁(yè)