細(xì)菌檢驗(yàn)的自動(dòng)化課件

1、 細(xì)菌檢驗(yàn)的自動(dòng)化重點(diǎn)提示熟悉自動(dòng)血液培養(yǎng)系統(tǒng)、自動(dòng)化細(xì)菌鑒定藥敏系統(tǒng)原理；了解微生物標(biāo)本前處理系統(tǒng)及自動(dòng)染色系統(tǒng)、微生物醫(yī)院感染分析系統(tǒng)、微生物實(shí)驗(yàn)室信息系統(tǒng)以及微生物自動(dòng)化檢測(cè)系統(tǒng)的進(jìn)展。概述 近年來，隨著物理、化學(xué)、分子生物學(xué)和計(jì)算機(jī)等領(lǐng)域先進(jìn)技術(shù)的快速發(fā)展并向臨床微生物學(xué)的滲透以及多學(xué)科的交叉互融，臨床微生物檢測(cè)逐漸向快速化、自動(dòng)化方向發(fā)展，并且已經(jīng)取得了許多突破性的進(jìn)展，出現(xiàn)了許多自動(dòng)化接種培養(yǎng)系統(tǒng)、自動(dòng)化染色系統(tǒng)、微生物自動(dòng)鑒定系統(tǒng)和藥敏分析系統(tǒng)，以及全套的自動(dòng)化系統(tǒng)。一、微生物標(biāo)本前處理系統(tǒng)及自動(dòng)染色系統(tǒng)（一）微生物標(biāo)本前處理系統(tǒng) 應(yīng)用工業(yè)化設(shè)計(jì)，通過計(jì)算機(jī)控制、條形碼識(shí)別、軌道

2、和機(jī)械臂的操作，完成微生物標(biāo)本的接收、接種和培養(yǎng)的自動(dòng)化。PREVI Isola全自動(dòng)平板接種儀 一、微生物標(biāo)本前處理系統(tǒng)及自動(dòng)染色系統(tǒng)WASP全自動(dòng)樣品前處理工作站 （二）自動(dòng)染色系統(tǒng)1. 革蘭染色儀 采用霧化噴嘴，對(duì)玻片上標(biāo)本進(jìn)行標(biāo)準(zhǔn)化染色，染色基本原理基于不同細(xì)胞壁對(duì)結(jié)晶紫的滲透性不同，將革蘭陽(yáng)性菌染成藍(lán)紫色，將革蘭陰性菌染成紅色。2. 抗酸染色儀 使用浸泡染色法，對(duì)涂有標(biāo)本玻片進(jìn)行抗酸染色或熒光染色，主要采用冷染法。一、微生物標(biāo)本前處理系統(tǒng)及自動(dòng)染色系統(tǒng)一、微生物標(biāo)本前處理系統(tǒng)及自動(dòng)染色系統(tǒng)PREVI Color Gram全自動(dòng)革蘭染色系統(tǒng) RAL STAINER染色系統(tǒng) 二、自動(dòng)血液

3、培養(yǎng)系統(tǒng) 傳統(tǒng)的手工血培養(yǎng)需每天觀察培養(yǎng)瓶的變化并進(jìn)行盲目轉(zhuǎn)種，既費(fèi)時(shí)、費(fèi)力，陽(yáng)性率又不高。20世紀(jì)70年代以后，出現(xiàn)了許多半自動(dòng)化和全自動(dòng)化的血培養(yǎng)檢測(cè)和分析系統(tǒng)，使檢測(cè)變成快速簡(jiǎn)單的自動(dòng)化操作，縮短了工作時(shí)間，提高了陽(yáng)性檢出率。二、自動(dòng)血液培養(yǎng)系統(tǒng)（一）以檢測(cè)導(dǎo)電性和電壓為基礎(chǔ)的血培養(yǎng)系統(tǒng) 細(xì)菌在生長(zhǎng)代謝過程中，可產(chǎn)生電子、質(zhì)子和各種帶電荷的原子團(tuán)，可通過檢測(cè)培養(yǎng)基的導(dǎo)電性或電壓判斷有無微生物生長(zhǎng)。（二）應(yīng)用測(cè)壓原理的血培養(yǎng)系統(tǒng) 部分細(xì)菌在生長(zhǎng)繁殖過程中，會(huì)吸收或產(chǎn)生少量氣體。例如，多數(shù)需氧菌在胰酶消化大豆肉湯中生長(zhǎng)時(shí)，首先消耗培養(yǎng)瓶中的氧氣，表現(xiàn)為吸收氣體；厭氧菌生長(zhǎng)時(shí)最初僅產(chǎn)生氣體（主

4、要為CO2），無吸收氣體現(xiàn)象。因此，可利用培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)壓力的改變判斷微生物的生長(zhǎng)狀況。二、自動(dòng)血液培養(yǎng)系統(tǒng)二、自動(dòng)血液培養(yǎng)系統(tǒng)（三）采用光電原理檢測(cè)的血培養(yǎng)系統(tǒng) 微生物在生長(zhǎng)代謝過程中會(huì)產(chǎn)生CO2，引起培養(yǎng)基pH值及氧化還原電位改變，培養(yǎng)瓶中的某些代謝產(chǎn)物采用光電比色法檢測(cè)，可以判斷有無微生物生長(zhǎng)。此法是目前國(guó)內(nèi)外應(yīng)用最廣泛的自動(dòng)血培養(yǎng)系統(tǒng)。二、自動(dòng)血液培養(yǎng)系統(tǒng) 每個(gè)血培養(yǎng)瓶底部裝置一個(gè)CO2感受器，微生物在代謝過程中產(chǎn)生的CO2與瓶底感受物質(zhì)發(fā)生反應(yīng)，產(chǎn)生游離氫離子使感受器上的指示劑變色或被激發(fā)光源激發(fā)釋放出特定波長(zhǎng)的熒光，產(chǎn)生的光信號(hào)通過儀器內(nèi)高靈敏的光電信號(hào)系統(tǒng)轉(zhuǎn)化為電信號(hào)，由計(jì)算機(jī)分析判斷

5、有無微生物生長(zhǎng)。二、自動(dòng)血液培養(yǎng)系統(tǒng)BacT/Alert全自動(dòng)血培養(yǎng)系統(tǒng)三、自動(dòng)化細(xì)菌鑒定藥敏系統(tǒng)（一）自動(dòng)微生物數(shù)碼分類鑒定系統(tǒng)及自動(dòng)化細(xì)菌藥敏系統(tǒng) 商品化的手工細(xì)菌/真菌鑒定系統(tǒng)和自動(dòng)微生物數(shù)碼分類鑒定系統(tǒng)均采用微生物數(shù)值編碼鑒定技術(shù)。自動(dòng)藥敏分析儀主要采用微量肉湯稀釋法，通過自動(dòng)化儀器進(jìn)行判讀。三、自動(dòng)化細(xì)菌鑒定藥敏系統(tǒng)BD Phoenix100全自動(dòng)細(xì)菌鑒定藥敏儀梅里埃 VITEK 2 Compact 全自動(dòng)細(xì)菌鑒定藥敏儀圖1- 12 MicroScan WalkAway 全自動(dòng)細(xì)菌鑒定及藥敏分析系統(tǒng)MicroScan WalkAway 全自動(dòng)細(xì)菌鑒定及藥敏分析系統(tǒng) 三、自動(dòng)化細(xì)菌鑒定

6、藥敏系統(tǒng)（二）質(zhì)譜分析儀器 基于基質(zhì)輔助激光解吸電離/飛行時(shí)間檢測(cè)技術(shù)而建立的細(xì)菌鑒定系統(tǒng)。其原理是：微生物電離后，帶電樣本通過電場(chǎng)進(jìn)入飛行時(shí)間檢測(cè)器，離子依質(zhì)荷比不同而分離，最終可以在飛行管的末端檢測(cè)到每個(gè)離子的豐度，形成指紋譜圖，通過軟件對(duì)這些指紋譜圖進(jìn)行處理并和數(shù)據(jù)庫(kù)中各種已知微生物的標(biāo)準(zhǔn)指紋圖譜進(jìn)行比對(duì)，從而完成對(duì)微生物的鑒定。三、自動(dòng)化細(xì)菌鑒定藥敏系統(tǒng)MALDI-TOF原理圖四、微生物醫(yī)院感染分析系統(tǒng) DiversiLab系統(tǒng)是基于Repetitive-sequence-based PCR（REP-PCR）原理的一種新的分型方法，利用細(xì)菌基因組中廣泛分布的小的、高度保守且重復(fù)的寡核苷酸序列為引物擴(kuò)增DNA，并通過電泳條帶比較分析，揭示基因組間的差異和判定細(xì)菌間的親緣關(guān)系。四、微生物醫(yī)院感染分析系統(tǒng)DiversiLab系統(tǒng)五、微生物實(shí)驗(yàn)室信息化 臨床微生物L(fēng)IS通過與微生物檢驗(yàn)相關(guān)儀器連接，與醫(yī)院信息系統(tǒng)一并實(shí)現(xiàn)臨床微生物室的無紙化，將檢驗(yàn)過程中從接收接種標(biāo)本相關(guān)信息、分純鑒定菌落形態(tài)的描述再到藥敏試驗(yàn)結(jié)果所產(chǎn)生的大量數(shù)據(jù)實(shí)現(xiàn)信息化。六、微生物自動(dòng)化檢測(cè)系統(tǒng)的進(jìn)展 臨床微生物檢驗(yàn)隨著這幾年的發(fā)展已經(jīng)有全自