ABIVeriti梯度PCR儀使用說明

1、GeneCompanyLimilEnl呈因有魚乞司ABIVeriti梯度PCR儀使用說明基因有限公司GeneCompanyLimited（聲明：此說明僅供一般操作參考，未經廠家審核也不代表任何技術承諾，請以原版資料為準）操作步驟:1、打開PCR儀的熱蓋，插入0.2ml的樣品管。蓋好熱蓋。2、打開PCR儀的電源，儀器程序開始初始化，需等待幾分鐘。3、初始化完成后，顯示主菜單：4、點“Browse/NewMethods，進入PCR程序列表:GeneCompany.iinilEd呈因有曲乞司GeneCompanyLimilEnl呈因有魚乞司5、可以直接點一個PCR程序，選擇“StartRun”運行；

2、點右邊的符號，可以選擇不同的文件夾。如要新建一個PCR程序，點“New”，出現(xiàn)PCR程序：6、添加一段程序：點中上方的“Stage”位置，該位置變紅；再點“Add”，軟件將加入一段新的程序。GeneConipanv.iuiikd墾因肓破乞司GeneCompany墾因有破乞司7、修改循環(huán)數(shù)、溫度、時間：點中循環(huán)次數(shù)、溫度或時間位置，下方出現(xiàn)數(shù)字鍵。依次點數(shù)字鍵，出現(xiàn)合適數(shù)字后，點“Done”確定。8、增加一個步驟：點“Step”位置，該位置變紅；再點“Add”，軟件將加入一個新的步驟。9、刪除一個步驟：點“Step”位置，在點“Delete”，軟件將該步驟刪除。10、建立梯度模式：1）點中一個步

3、驟，再點“Option”鍵，出現(xiàn)選項如下2）點“VeriFlexstep”，出現(xiàn)梯度創(chuàng)建窗口:輸入6個梯度溫度，溫度下方的“12”是指對應的1、2兩行加熱孔，全部輸好后,點“Done”確定。注意：相鄰的兩個梯度溫度之差最大不能超過5C!GeneConipanvLimited呈囲有破乞司GeneCompanyLimited呈囲有曲乞司11、建立漸變模式：1）點中一個步驟，再點“Option”鍵，出現(xiàn)選項如下2）點“AutoDelta”，出現(xiàn)漸變模式創(chuàng)建窗口。點“StaringCycle”，輸入起始循環(huán)數(shù)；點“DeltaTemperature”，輸入溫度變化值；點“DeltaTime”，輸入時間變

4、化值。漸變模式適用于touchdownPCR，可以提高PCR反應的特異性。例：輸入起始循環(huán)數(shù)為2,溫度變化值為+0.5C，時間變化值為+5s,則表示從第2個循環(huán)開始，每循環(huán)一次升溫0.5C，時間增加5s。12、增加暫停步驟：1）點中一個步驟，再點“Option”鍵，出現(xiàn)選項如下3）點“Pause”，出現(xiàn)如下窗口。輸入暫停的起始位置，暫停間隔和暫停時間，點“Done”確定。上圖表示每隔10個循環(huán)暫停10s，在10個循環(huán)的第1個循環(huán)之前暫停。GeneConipanvLimilcd呈因有破乞司GeneCompanyLimited呈囲有曲乞司13、編輯PCR程序完成后，點“Save”保存。點“RunM

5、ethod”，輸入PCR程序名稱；點,選擇保存PCR程序的文件夾（如果要保存在USB文件夾中，需要先插U盤）。再輸入反應體積和熱蓋溫度（這兩項在運行程序時可以修改）。點“Save5Exit”確定。14、回到PCR程序列表界面，選擇新建的PCR程序。GeneCompany.imikd呈因有曲乞司GeneCompanvLimited呈囲有臥苕司15、點“StartRun,出現(xiàn)運行參數(shù)設置窗口輸入反應體積和熱蓋溫度，點“StartRunNow開始運行PCR程序。16、儀器運行選中的PCR程序，顯示運行監(jiān)視窗口。A-運行狀態(tài)欄，顯示運行溫度和剩余時間B-加熱警示標記C-階段指示F-步驟指示D-步驟溫度

6、E-步驟時間C-狀態(tài)報告，顯示日期、時間和儀器狀態(tài)D-延伸箭頭，點箭頭可以顯示更多的步驟16、暫停運行：點“PauseRun”，儀器暫停，出現(xiàn)暫停選項欄“RemainingTime”顯示暫停剩余時間，“ElapseTime”顯示已暫停時間。如果需要修改暫停時間，點，輸入時間值，點“Done”確定；點“ResumeRun”,結束暫停，繼續(xù)運行PCR程序。17、終止運行：點“Stop”可以終止整個PCR程序。18、反應報告:PCR程序結束后，儀器會自動生成反應報告，顯示當次反應的各項指數(shù)。該報告可以保存和打印。19、PCR反應結束后，打開熱蓋，取出樣品，關閉儀器電源。并開蓋放置，使熱蓋和加熱模塊正

7、常降溫。GeneConipanv.iniitsd墾因有破乞司GeneCompanvLimited呈囲有臥苕司應用軟件使用一、使用9700模式運行PCR程序Veriti和9700具有不同的升降溫控制模式，但是在Veriti中可以通過模式轉換，使儀器運行9700的升降溫模式。對于已在9700上摸索好的PCR程序，可以直接在Veriti上運行，不用再修改反應條件。1、在主菜單，點“ToolsManu，2、點“ConvertaMethod,GeneCompanyLiimifed呈因肓破乞司GeneCompanvLimited呈囲有臥苕司GeneCompanyLiimifed呈因肓破乞司GeneComp

8、anvLimited呈囲有臥苕司3、選中“9700MaxMode”，點箭頭GeneCompanyLiimifed呈因肓破乞司GeneCompanvLimited呈囲有臥苕司GeneCompanyLiimifed呈因肓破乞司GeneCompanvLimited呈囲有臥苕司箭頭輸入9700上的PCR反應條件，設定PCR程序，點4、在保存程序窗口，輸入名稱，選擇文件夾保存程序。5、回到PCR程序列表界面，選擇新建的9700模式PCR程序，運行程序。GeneCompanv.imitEd呈因肓破乞司GeneCompanvLimited呈囲有臥苕司二、Tm值計算1、在主菜單，點“ToolsManu”2、點“CalculateTmGeneCompanivlimited呈因有破乞司GeneCompanvLimited呈囲有臥苕司3、輸入鹽濃度和引物濃度，在“Primer1Sequence”和“Primer2Sequence”分別輸入引物的