ABIVeriti梯度PCR儀使用說(shuō)明

1、GeneCompanyLimilEnl呈因有魚乞司ABIVeriti梯度PCR儀使用說(shuō)明基因有限公司GeneCompanyLimited（聲明：此說(shuō)明僅供一般操作參考，未經(jīng)廠家審核也不代表任何技術(shù)承諾，請(qǐng)以原版資料為準(zhǔn)）操作步驟:1、打開PCR儀的熱蓋，插入0.2ml的樣品管。蓋好熱蓋。2、打開PCR儀的電源，儀器程序開始初始化，需等待幾分鐘。3、初始化完成后，顯示主菜單：4、點(diǎn)“Browse/NewMethods，進(jìn)入PCR程序列表:GeneCompany.iinilEd呈因有曲乞司GeneCompanyLimilEnl呈因有魚乞司5、可以直接點(diǎn)一個(gè)PCR程序，選擇“StartRun”運(yùn)行；

2、點(diǎn)右邊的符號(hào)，可以選擇不同的文件夾。如要新建一個(gè)PCR程序，點(diǎn)“New”，出現(xiàn)PCR程序：6、添加一段程序：點(diǎn)中上方的“Stage”位置，該位置變紅；再點(diǎn)“Add”，軟件將加入一段新的程序。GeneConipanv.iuiikd墾因肓破乞司GeneCompany墾因有破乞司7、修改循環(huán)數(shù)、溫度、時(shí)間：點(diǎn)中循環(huán)次數(shù)、溫度或時(shí)間位置，下方出現(xiàn)數(shù)字鍵。依次點(diǎn)數(shù)字鍵，出現(xiàn)合適數(shù)字后，點(diǎn)“Done”確定。8、增加一個(gè)步驟：點(diǎn)“Step”位置，該位置變紅；再點(diǎn)“Add”，軟件將加入一個(gè)新的步驟。9、刪除一個(gè)步驟：點(diǎn)“Step”位置，在點(diǎn)“Delete”，軟件將該步驟刪除。10、建立梯度模式：1）點(diǎn)中一個(gè)步

3、驟，再點(diǎn)“Option”鍵，出現(xiàn)選項(xiàng)如下2）點(diǎn)“VeriFlexstep”，出現(xiàn)梯度創(chuàng)建窗口:輸入6個(gè)梯度溫度，溫度下方的“12”是指對(duì)應(yīng)的1、2兩行加熱孔，全部輸好后,點(diǎn)“Done”確定。注意：相鄰的兩個(gè)梯度溫度之差最大不能超過(guò)5C!GeneConipanvLimited呈囲有破乞司GeneCompanyLimited呈囲有曲乞司11、建立漸變模式：1）點(diǎn)中一個(gè)步驟，再點(diǎn)“Option”鍵，出現(xiàn)選項(xiàng)如下2）點(diǎn)“AutoDelta”，出現(xiàn)漸變模式創(chuàng)建窗口。點(diǎn)“StaringCycle”，輸入起始循環(huán)數(shù)；點(diǎn)“DeltaTemperature”，輸入溫度變化值；點(diǎn)“DeltaTime”，輸入時(shí)間變

4、化值。漸變模式適用于touchdownPCR，可以提高PCR反應(yīng)的特異性。例：輸入起始循環(huán)數(shù)為2,溫度變化值為+0.5C，時(shí)間變化值為+5s,則表示從第2個(gè)循環(huán)開始，每循環(huán)一次升溫0.5C，時(shí)間增加5s。12、增加暫停步驟：1）點(diǎn)中一個(gè)步驟，再點(diǎn)“Option”鍵，出現(xiàn)選項(xiàng)如下3）點(diǎn)“Pause”，出現(xiàn)如下窗口。輸入暫停的起始位置，暫停間隔和暫停時(shí)間，點(diǎn)“Done”確定。上圖表示每隔10個(gè)循環(huán)暫停10s，在10個(gè)循環(huán)的第1個(gè)循環(huán)之前暫停。GeneConipanvLimilcd呈因有破乞司GeneCompanyLimited呈囲有曲乞司13、編輯PCR程序完成后，點(diǎn)“Save”保存。點(diǎn)“RunM

5、ethod”，輸入PCR程序名稱；點(diǎn),選擇保存PCR程序的文件夾（如果要保存在USB文件夾中，需要先插U盤）。再輸入反應(yīng)體積和熱蓋溫度（這兩項(xiàng)在運(yùn)行程序時(shí)可以修改）。點(diǎn)“Save5Exit”確定。14、回到PCR程序列表界面，選擇新建的PCR程序。GeneCompany.imikd呈因有曲乞司GeneCompanvLimited呈囲有臥苕司15、點(diǎn)“StartRun,出現(xiàn)運(yùn)行參數(shù)設(shè)置窗口輸入反應(yīng)體積和熱蓋溫度，點(diǎn)“StartRunNow開始運(yùn)行PCR程序。16、儀器運(yùn)行選中的PCR程序，顯示運(yùn)行監(jiān)視窗口。A-運(yùn)行狀態(tài)欄，顯示運(yùn)行溫度和剩余時(shí)間B-加熱警示標(biāo)記C-階段指示F-步驟指示D-步驟溫度

6、E-步驟時(shí)間C-狀態(tài)報(bào)告，顯示日期、時(shí)間和儀器狀態(tài)D-延伸箭頭，點(diǎn)箭頭可以顯示更多的步驟16、暫停運(yùn)行：點(diǎn)“PauseRun”，儀器暫停，出現(xiàn)暫停選項(xiàng)欄“RemainingTime”顯示暫停剩余時(shí)間，“ElapseTime”顯示已暫停時(shí)間。如果需要修改暫停時(shí)間，點(diǎn)，輸入時(shí)間值，點(diǎn)“Done”確定；點(diǎn)“ResumeRun”,結(jié)束暫停，繼續(xù)運(yùn)行PCR程序。17、終止運(yùn)行：點(diǎn)“Stop”可以終止整個(gè)PCR程序。18、反應(yīng)報(bào)告:PCR程序結(jié)束后，儀器會(huì)自動(dòng)生成反應(yīng)報(bào)告，顯示當(dāng)次反應(yīng)的各項(xiàng)指數(shù)。該報(bào)告可以保存和打印。19、PCR反應(yīng)結(jié)束后，打開熱蓋，取出樣品，關(guān)閉儀器電源。并開蓋放置，使熱蓋和加熱模塊正

7、常降溫。GeneConipanv.iniitsd墾因有破乞司GeneCompanvLimited呈囲有臥苕司應(yīng)用軟件使用一、使用9700模式運(yùn)行PCR程序Veriti和9700具有不同的升降溫控制模式，但是在Veriti中可以通過(guò)模式轉(zhuǎn)換，使儀器運(yùn)行9700的升降溫模式。對(duì)于已在9700上摸索好的PCR程序，可以直接在Veriti上運(yùn)行，不用再修改反應(yīng)條件。1、在主菜單，點(diǎn)“ToolsManu，2、點(diǎn)“ConvertaMethod,GeneCompanyLiimifed呈因肓破乞司GeneCompanvLimited呈囲有臥苕司GeneCompanyLiimifed呈因肓破乞司GeneComp

8、anvLimited呈囲有臥苕司3、選中“9700MaxMode”，點(diǎn)箭頭GeneCompanyLiimifed呈因肓破乞司GeneCompanvLimited呈囲有臥苕司GeneCompanyLiimifed呈因肓破乞司GeneCompanvLimited呈囲有臥苕司箭頭輸入9700上的PCR反應(yīng)條件，設(shè)定PCR程序，點(diǎn)4、在保存程序窗口，輸入名稱，選擇文件夾保存程序。5、回到PCR程序列表界面，選擇新建的9700模式PCR程序，運(yùn)行程序。GeneCompanv.imitEd呈因肓破乞司GeneCompanvLimited呈囲有臥苕司二、Tm值計(jì)算1、在主菜單，點(diǎn)“ToolsManu”2、點(diǎn)“CalculateTmGeneCompanivlimited呈因有破乞司GeneCompanvLimited呈囲有臥苕司3、輸入鹽濃度和引物濃度，在“Primer1Sequence”和“Primer2Sequence”分別輸入引物的