藥物鑒別試驗

1、關于藥物的鑒別試驗第一張，PPT共三十七頁，創(chuàng)作于2022年6月一 概述 藥物的鑒別實驗是根據(jù)分子結構、理化性質，采用化學、物理化學或生物學方法來判斷藥物的真?zhèn)巍?鑒別是藥品質量檢驗工作中的首要任務，只有在藥物鑒別無誤后，雜質檢查、含量測定等分析才有意義。 鑒別只能證實藥物的真?zhèn)?，不能對未知物進行定性分析。第二張，PPT共三十七頁，創(chuàng)作于2022年6月二 鑒別試驗的項目（一） 性狀1. 外觀 指物質的凝聚狀態(tài)、晶型、色澤以及臭、味等性質2. 溶解度 反映了藥品的純度。描述有“極易溶解、易溶、溶解、略溶、微溶、極微溶解、幾乎不溶或不溶”來描述藥品的溶解性能。3. 物理常數(shù) 藥品質量的重要指標，不

2、僅具有鑒別意義，也反映藥品純雜程度。 常數(shù)包括：熔點、比旋度、吸光系數(shù)、相對密度、餾程、凝點、折光率、黏度、酸值、皂化值、羥值、碘值等。（P23）第三張，PPT共三十七頁，創(chuàng)作于2022年6月（1）熔點：固體 液體的溫度（2）比旋度：在一定波長與溫度下，偏振光透過長ldm且每1ml中含有旋光性物質1g的溶液時測得的旋光度稱為比旋度。是反映手性藥物特性及其純度的主要指標，用于鑒別藥品、含量測定。 第四張，PPT共三十七頁，創(chuàng)作于2022年6月（3）吸收系數(shù)：在給定的波長、溶劑和溫度等條件下，吸光物質在單位濃度、單位液層厚度時的吸收度稱為吸收系數(shù)。 有兩種表示方式：摩爾吸收系數(shù)和百分吸收系數(shù)。后者

3、是中國藥典收載的方法，它是指在一定波長下，溶液濃度為1（W/V)，厚度為lcm時的吸收度，用 表示。 用于考查藥品的質量，定量分析。第五張，PPT共三十七頁，創(chuàng)作于2022年6月（二） 一般鑒別實驗 * 概念：依據(jù)某一類藥物的化學結構或理化性質的特征，通過化學反應來鑒別藥物的真?zhèn)巍?* 無機藥物：根據(jù)其組成的陰離子和陽離子的特殊反應 * 有機藥物：則大都采用典型的官能團反應 * 一般鑒別試驗只能證實是某一類藥物,而不能證實是哪一種藥物. * 僅供確認單一的化學藥物，如為數(shù)種化學藥物的混合物或有干擾物質存在時，除另有規(guī)定外，應不適用。第六張，PPT共三十七頁，創(chuàng)作于2022年6月一般鑒別試驗例如

4、，經一般鑒別反應的鈉鹽試驗，證實某一藥物為鈉鹽，但不能辨認是氯化鈉、苯甲酸鈉或者是其它某一種鈉鹽藥物。要想最后證實被鑒別的物質到底是哪一種藥物，必須在一般鑒別試驗的基礎上，再進行專屬鑒別試驗，方可確認。 第七張，PPT共三十七頁，創(chuàng)作于2022年6月一般鑒別試驗項目Ch.P附錄項下一般鑒別試驗的項目： 丙二酰脲類、托烷生物堿類、芳香第一胺類、有機氟化物類、 無機金屬鹽類（鈉鹽、鉀鹽、鋰鹽、鈣鹽、鋇鹽、銨鹽、鎂鹽、鐵鹽、鋁鹽、鋅鹽、銅鹽、銀鹽、汞鹽、鉍鹽、銻鹽、亞錫鹽）、有機酸鹽（水楊酸鹽、枸櫞酸鹽、乳酸鹽、苯甲酸鹽、酒石酸鹽）、無機酸鹽（亞硫酸鹽或亞硫酸氫鹽、硫酸鹽、硝酸鹽、硼酸鹽、碳酸鹽與碳

5、酸氫鹽、醋酸鹽、磷酸鹽、氯化物、溴化物、碘化物）。第八張，PPT共三十七頁，創(chuàng)作于2022年6月一般鑒別試驗舉例1.有機氟化物 (1)鑒別試驗 取供試品約7mg，照氧瓶燃燒法（附錄VIIC）進行有機破壞，用水20ml與0.01mol/L氫氧化鈉溶液6.5ml為吸收液，俟燃燒完全后，充分振搖；取吸收液2ml，加茜素氟藍試液0.5ml，再加12%醋酸鈉的稀醋酸溶液0.2ml，用水稀釋至4ml，加硝酸亞鈰試液0.5ml，即顯藍紫色；同時做空白對照試驗。 (2)試驗原理 有機氟化物經氧瓶燃燒法破壞，為堿性溶液吸收成為無機氟化物后，與茜素氟藍、硝酸亞鈰形成藍紫色絡合物。 第九張，PPT共三十七頁，創(chuàng)作于

6、2022年6月 2.有機酸鹽 (1)水楊酸鹽 鑒別試驗一: 取供試品的稀溶液，加三氯化鐵試液1滴，即顯紫色。 原理 :本品在中性或弱酸性條件下，和三氯化鐵試液生成配位化合物，在中性時呈紅色，弱酸性時呈紫色；若在強酸性中，配位化合物分解生成游離水楊酸。 鑒別試驗二: 取供試品溶液，加稀鹽酸，即析出白色水楊酸沉淀；分離，沉淀在醋酸按試液中溶解。第十張，PPT共三十七頁，創(chuàng)作于2022年6月 (2)酒石酸鹽 方法 取供試品的中性溶液，置潔凈的試管中，加氨制硝酸銀試液數(shù)滴，置水浴中加熱，銀即游離并附在管的內壁成銀鏡。 取供試品溶液，加醋酸成酸性后，加硫酸亞鐵試液1滴和過氧化氫試液1滴，俟溶液退色后，用

7、氫氧化鈉試液堿化，溶液即顯紫色。第十一張，PPT共三十七頁，創(chuàng)作于2022年6月 (3)枸櫞酸鹽 取供試品溶液2ml（約相當于枸櫞酸10mg）,加稀硫酸數(shù)滴, 加熱至沸，加高錳酸鉀試液數(shù)滴，振搖，紫色即消失；溶液分成兩份，一份中加硫酸汞試液1滴,另一份中逐滴加入溴試液，均生成白色沉淀。 取供試品約5mg，加吡啶醋酐(31)約5ml，振搖，即生成黃色到紅色或紫紅色的溶液。第十二張，PPT共三十七頁，創(chuàng)作于2022年6月 3.無機金屬鹽 (1)鈉鹽 鑒別試驗一 取鉑絲，用鹽酸濕潤后，蘸取供試品，在無色火焰中燃燒，火焰即顯鮮黃色。 原理 鈉的火焰光譜在可見光區(qū)，有589.0nm、589.6nm主要譜

8、線，故其燃燒火焰顯黃色。本焰色反應極為靈敏（最低檢出限量為0.1ng鈉離子）。因此，對所用儀器和試劑要求必須很嚴格。在檢測前應將鉑絲燒紅，趁熱浸入鹽酸中，如此反復數(shù)次，直至火焰不染黃色后，再蘸取供試品進行測定。只有當強烈的黃色火焰持續(xù)數(shù)秒鐘不退，才能確認為鈉鹽。 第十三張，PPT共三十七頁，創(chuàng)作于2022年6月一般鑒別試驗 (2)鉀鹽 鑒別試液一 焰色反應顯紫色，但有少量鈉鹽混存時，須隔藍色鈷玻璃透視，方能辨認。 原理 鉀的火焰光譜在可見光區(qū)有766.49nm、769.90nm與404.4nm幾條譜線，其中以766.49nm與769.90nm兩條譜線最強。由于人眼在此波長附近敏感度較差，故鉀鹽

9、的燃燒火焰顯紫色。如有鈉鹽混存，因鈉焰靈敏度很高，需透過藍色鈷玻璃將鈉焰黃色濾去，此時火焰顯粉紅色。 第十四張，PPT共三十七頁，創(chuàng)作于2022年6月一般鑒別試驗 (3)鈣鹽鑒別試驗一 焰色反應顯磚紅色（622nm）。鑒別試驗二 取供試品溶液（120），加甲基紅指示液2滴，用氨試液中和，再滴加鹽酸至呈酸性，加草酸銨試液，即生成白色沉淀；分離，沉淀不溶于醋酸，但可溶于鹽酸。第十五張，PPT共三十七頁，創(chuàng)作于2022年6月 (4)銨鹽 鑒別試驗 取供試品，加過量氫氧化鈉試液后，加熱，即分解，發(fā)生氨臭；遇濕潤的紅色石蕊試紙，能使之變藍，并能使硝酸亞汞試液濕潤的濾紙顯黑色。第十六張，PPT共三十七頁，

10、創(chuàng)作于2022年6月（三）專屬鑒別試驗（三）專屬鑒別試驗 （specific identification test） 根據(jù)每一種藥物化學結構的差異及其所引起的物理化學特性的不同，選用某些特有的靈敏的定性反應，來鑒別藥物真?zhèn)蔚蔫b別試驗。是證實某一種藥物的依據(jù)。第十七張，PPT共三十七頁，創(chuàng)作于2022年6月綜上所述一般鑒別試驗是以某些類別藥物的共同化學結構為依據(jù)，根據(jù)其相同的物理化學性質進行藥物真?zhèn)蔚蔫b別，以區(qū)別不同類別的藥物。而專屬鑒別試驗，則是在一般鑒別試驗的基礎上，利用各種藥物的化學結構差異，來鑒別藥物，以區(qū)別同類藥物或具有相同化學結構部分的各個藥物單體，達到最終確證藥物真?zhèn)蔚哪康?。第?/p>

11、八張，PPT共三十七頁，創(chuàng)作于2022年6月三.鑒別的方法（一）化學鑒別法（二）光譜鑒別法（三）色譜鑒別法（四）x射線粉末衍射法（五）生物學法第十九張，PPT共三十七頁，創(chuàng)作于2022年6月（一）化學鑒別法(1）呈色反應鑒別法：系指供試品溶液中加入適當?shù)脑噭┤芤?，在一定條件下進行反應，生成易于觀測的有色產物。在鑒別試驗中最為常用的反應類型有：1）三氯化鐵呈色反應-酚羥基的三氯化鐵呈色反應； 2）異羥肟酸鐵反應-多為芳酸及其酯類、酰胺類； 3）茚三酮呈色反應-脂肪氨基； 4）重氮化-偶合顯色反應-芳伯氨基或能產生芳伯氨基； 5）氧化還原顯色反應及其它顏色反應。 第二十張，PPT共三十七頁，創(chuàng)作于

12、2022年6月（一）化學鑒別法（2）沉淀生成反應鑒別法：常用的這類反應有： 1）與重金屬離子的沉淀反應在一定條件下，藥物和重金屬離子反應，生成不同形式的沉淀； 2）與硫氰化鉻銨（雷氏鹽）的沉淀反應多為生物堿及其鹽，具有芳香環(huán)的有機堿及其鹽； 3）其它沉淀反應。第二十一張，PPT共三十七頁，創(chuàng)作于2022年6月（一）化學鑒別法（3）熒光反應鑒別法：常用的熒光發(fā)射形式有以下類型： 1）藥物本身可在可見光下發(fā)射熒光：麥角新堿、潘生丁等； 2）藥物溶液加硫酸使呈酸性后，在可見光下發(fā)射熒光(奎寧、安定等)； 3）藥物和溴反應后，于可見光下發(fā)射熒光； 4）藥物和間苯二酚反應后，發(fā)射出熒光及藥物經其它反應后

13、，發(fā)射熒光。第二十二張，PPT共三十七頁，創(chuàng)作于2022年6月（一）化學鑒別法(4）氣體生成反應鑒別法： 1）大多數(shù)的胺（銨）類藥物、酰脲類藥物以及某些酰胺類藥物，可經強堿處理后，加熱，產生氨（胺）氣； 2）化學結構中含硫的藥物，可經強酸處理后，加熱，發(fā)生硫化氫氣體； 3）含碘有機藥物經直火加熱，可生成紫色碘蒸氣；含醋酸酯和乙酰胺類藥物，經硫酸水解后，加乙醇可產生乙酸乙酯的香味。 第二十三張，PPT共三十七頁，創(chuàng)作于2022年6月（5）使試劑退色的法： （6）測定生成物的熔點： 第二十四張，PPT共三十七頁，創(chuàng)作于2022年6月1紫外光譜鑒別法 原理：多數(shù)有機藥物分子中含有能吸收紫外可見光的集

14、團而顯示特征吸收光譜，可作為鑒別的依據(jù)。 優(yōu)缺點：光譜較為簡單，曲線形狀變化不大,專屬性較紅外光譜差，宜采用在指定溶劑中測定2-3個特定波長處的吸光度比值，以提高專屬性。（二）光譜鑒別法第二十五張，PPT共三十七頁，創(chuàng)作于2022年6月紫外光譜鑒別法常用的方法有： 1）測定最大吸收波長，或同時測定最小吸收波長； 2）規(guī)定一定濃度的供試液在最大吸收波長處的吸收度； 3）規(guī)定吸收波長和吸收系數(shù)法； 4）規(guī)定吸收波長和吸收度比值法； 5）經化學處理后，測定其反應產物的吸收光譜特性。第二十六張，PPT共三十七頁，創(chuàng)作于2022年6月紫外光譜鑒別法國外藥典采用的紫外法的特點：USP（29）采用對照品法；

15、BP（2005）采用一定波長范圍內僅有一個最大吸收或一個最小吸收。JP（15）同Ch.P.相似第二十七張，PPT共三十七頁，創(chuàng)作于2022年6月2紅外光譜鑒別法 特點： （1）紅外光譜法是一種專屬性很強、應用較廣（固體、液體、氣體樣品）的鑒別方法。 （2）主要用于組分單一、結構明確的原料藥，特別適合于其他方法不易區(qū)分的同類藥物，如磺胺類、甾體激素類等.第二十八張，PPT共三十七頁，創(chuàng)作于2022年6月紅外光譜鑒別法方法： Ch.P與BP（2005）均采用標準圖譜對照法。如Ch.P對XX藥物的鑒別試驗：“本品的紅外吸收圖譜應與對造的圖譜（光譜集XX圖）一致”。USP（29）采用對照品法；JP（1

16、5）采用規(guī)定條件下測定一定波數(shù)處的特征吸收峰。第二十九張，PPT共三十七頁，創(chuàng)作于2022年6月（三）色譜鑒別法原理： 利用不同物質在不同色譜條件下，產生各自的特征色譜行為（Rf值或保留時間）進行鑒別試驗。（與對照品或已經確證的已知藥品的色譜行為比較一致）1.薄層色譜鑒別法2.HPLC與GC鑒別法3.質譜鑒別法第三十張，PPT共三十七頁，創(chuàng)作于2022年6月四.鑒別試驗的條件 鑒別試驗是以所采用的化學反應或物理特性產生的明顯的易于覺察的特征變化為依據(jù)。因此，能影響鑒別試驗判定結果的特征變化的因素都是應當精心選擇和嚴格控制的。 也就是說，鑒別試驗應該是在規(guī)定條件下完成的，否則鑒別試驗的結果是不可

17、信的。第三十一張，PPT共三十七頁，創(chuàng)作于2022年6月（一）溶液的濃度 主要指被鑒別藥物的濃度，及所用試劑的濃度。 由于鑒別試驗多采用觀測沉淀、顏色或各種光學參數(shù)的變化，來判定結果，而藥物和有關試劑的濃度會直接影響上述的各種變化，必須嚴格規(guī)定溶液的濃度。第三十二張，PPT共三十七頁，創(chuàng)作于2022年6月（二）溶液的溫度 溫度對化學反應的影響很大，一般溫度每升高10，可使反應速度增加2-4倍。 （三）溶液的酸堿度 許多鑒別反應都需要在一定酸堿度的條件下才能進行。溶液酸堿度的作用，在于能使各反應物有足夠的濃度處于反應活化狀態(tài)，使反應生成物處于穩(wěn)定和易于觀測的狀態(tài)。 第三十三張，PPT共三十七頁，

18、創(chuàng)作于2022年6月（四）干擾成分的存在 在鑒別試驗中，如藥物結構中的其它部分或藥物制劑中的其它組分也可參加鑒別反應，產生干擾，應選擇專屬性更高的鑒別反應將其消除或將其分離。第三十四張，PPT共三十七頁，創(chuàng)作于2022年6月（五）試驗時間 有機化合物的化學反應和無機化合物不同，一般反應速度較慢，達到預期試驗結果需要較長的時間。 因為有機化合物是以共價鍵相結合，化學反應能否進行，依賴于共價鍵的斷裂和新價鍵形成的難易，這些價鍵的更替需要一定的反應時間和條件。同時在化學反應過程中，有時存在著許多中間階段，甚至需加入催化劑才能啟動反應。因此，使鑒別反應完成，需要一定時間。第三十五張，PPT共三十七頁，創(chuàng)作于2022年6月1.中國藥典中既對藥品具有鑒別意義，又能反映藥品純雜程度的項目是( )。 A.外觀性狀 B. 檢查 C.鑒別 D.物理常數(shù) E.含量測定2.藥品質量標準中的鑒別試驗是判斷( ) A.藥品的純度 B.未知藥品的真