上海市地方標(biāo)準(zhǔn)《海三棱藨草組織培養(yǎng)育苗技術(shù)規(guī)程》編制說明

1、上海市地方標(biāo)準(zhǔn)海三棱藨草組織培養(yǎng)育苗技術(shù)規(guī)程編制說明一、任務(wù)來源根據(jù)上海市市場監(jiān)督管理局2017年度第三批上海市地方標(biāo)準(zhǔn)制修訂項目計劃（滬質(zhì)技監(jiān)標(biāo)2017454號）要求，由上海市園林科學(xué)規(guī)劃研究院負(fù)責(zé)組織落實海三棱藨草組織培養(yǎng)育苗技術(shù)規(guī)程地方標(biāo)準(zhǔn)的制定工作。二、背景情況海三棱藨草（Scirpus mariqueter）為莎草科（Cyperaceae）、藨草屬（Scirpus.）多年生草本植物，是我國長江口和杭州灣濱海濕地的特有種，也是重要的本土建群種之一。海三棱藨草具有極高的生態(tài)價值，不僅能夠為濕地水鳥提供食物和棲息地，為底棲動物提供豐富的碎屑食物來源，深度參與碎屑食物鏈，還具有較強的固碳、消

2、浪促淤、保灘護(hù)岸和促進(jìn)底泥沉降等多種重要生態(tài)系統(tǒng)服務(wù)功能。然而，受互花米草入侵、海平面上升等作用的共同影響，近年來海三棱藨草種群面積銳減，嚴(yán)重威脅著我國東部沿海的生態(tài)安全，亟需開展海三棱藨草種群恢復(fù)工作。上海崇明東灘自然保護(hù)區(qū)管理事務(wù)中心自2012年開始，在科技部、上海市科委的支持下，聯(lián)合復(fù)旦大學(xué)、華東師范大學(xué)及上海市園林科學(xué)規(guī)劃研究院，就崇明東灘關(guān)鍵土著種海三棱藨草的保護(hù)及恢復(fù)開展了系列研究，并結(jié)合崇明東灘生態(tài)修復(fù)工程開展應(yīng)用示范，目前恢復(fù)海三棱藨草共計5000余畝。華東師范大學(xué)從2002年開始，在國家自然科學(xué)基金委、教育部、上海市科委以及水務(wù)局、保護(hù)區(qū)等部門的支持下，圍繞海三棱藨草恢復(fù)機制

3、、恢復(fù)技術(shù)及應(yīng)用示范等方面開展了一系列研究，在國內(nèi)外學(xué)術(shù)期刊發(fā)表論文百余篇，關(guān)鍵的生態(tài)修復(fù)技術(shù)申請發(fā)明專利10余項，已獲批2項。依托國家科技支撐計劃、上海市科委重大科技攻關(guān)項目、海洋公益性行業(yè)科研專項經(jīng)費項目等，開展了本土植物海三棱藨草種群恢復(fù)技術(shù)研究及示范，建立示范樣地1500畝以上。上海市園林科學(xué)規(guī)劃研究院隸屬上海市綠化市容行業(yè)綜合性研究機構(gòu)，主要承擔(dān)綠化、林業(yè)、濕地、環(huán)衛(wèi)等領(lǐng)域的應(yīng)用技術(shù)研究和規(guī)劃編制等；圍繞城鎮(zhèn)濱海濕地受損修復(fù)、濱海鹽堿地綠化等方面形成行業(yè)研究特色。復(fù)旦大學(xué)從2002年開始，在國家自然科學(xué)基金委、教育部、上海市科委以及崇明東灘和九段沙國家級自然保護(hù)區(qū)等部門的支持下，圍繞

4、崇明東灘關(guān)鍵土著種海三棱藨草的受損及恢復(fù)機制、過程、關(guān)鍵技術(shù)，及入侵植物的入侵機制、控制和治理等方面開展了一系列的研究。本標(biāo)準(zhǔn)正是在以上系統(tǒng)研究和實踐總結(jié)的基礎(chǔ)上所編制的。三、編制原則本標(biāo)準(zhǔn)適用于海三棱藨草種群的生態(tài)修復(fù)恢復(fù)與重建。規(guī)定了恢復(fù)場地的選擇、恢復(fù)材料的選擇與培育、實施恢復(fù)的方法與要求，以及監(jiān)測與管理的要求。本標(biāo)準(zhǔn)依據(jù)標(biāo)準(zhǔn)化工作導(dǎo)則 第1部分:標(biāo)準(zhǔn)的結(jié)構(gòu)和編寫（GB/T 1.1-2020）等基礎(chǔ)標(biāo)準(zhǔn)的編寫要求進(jìn)行編制，又兼顧了標(biāo)準(zhǔn)可行性和先進(jìn)性。主要遵循以下原則：（1）適用性：海三棱藨草是長江口非常重要的濕地先鋒植物，本市尚無相關(guān)海三棱藨草種群恢復(fù)技術(shù)方面的標(biāo)準(zhǔn)，而在全國濱海濕地的植

5、被恢復(fù)方面僅在紅樹林恢復(fù)方面有一些技術(shù)指南，因此要根據(jù)本市海三棱藨草種群恢復(fù)需求制定出適合本市應(yīng)用的海三棱藨草種群生態(tài)恢復(fù)技術(shù)標(biāo)準(zhǔn)。本標(biāo)準(zhǔn)的內(nèi)容適用于各級行政管理部門、技術(shù)管理單位、相關(guān)企業(yè)及第三方評價單位。（2）前瞻性：本標(biāo)準(zhǔn)針對海三棱藨草種群在恢復(fù)過程中的實際需求，分別針對自然潮灘濕地生境和無潮汐的優(yōu)化區(qū)生境提出各自適宜的恢復(fù)技術(shù)，包括繁殖體的選擇及處理、恢復(fù)時間、恢復(fù)方法、監(jiān)測與管理等。此外，還根據(jù)自然潮灘水動力強弱提供了適宜的恢復(fù)方法。本標(biāo)準(zhǔn)既是對多年來海三棱藨草種群恢復(fù)成功經(jīng)驗的總結(jié)，也是未來實施大面積海三棱藨草種群恢復(fù)的重要技術(shù)指南，為上海踐行長江經(jīng)濟帶生態(tài)大保護(hù)和推動“雙重工程”

6、提供了重要的技術(shù)支撐。（3）操作性：本標(biāo)準(zhǔn)應(yīng)涵蓋了海三棱藨草種群生態(tài)恢復(fù)的全部流程，包括恢復(fù)場地的選擇、恢復(fù)材料的選擇與培育、實施恢復(fù)的方法與要求，以及監(jiān)測與管理等，在實踐的基礎(chǔ)上，廣泛吸收各相關(guān)單位和人員的意見和建議，因此，在各環(huán)節(jié)操作上做到準(zhǔn)確，清晰，文字表達(dá)上言簡意賅，本標(biāo)準(zhǔn)有較強的可復(fù)制性和可操作性。四、起草過程2017年11月，本標(biāo)準(zhǔn)制定任務(wù)下達(dá)后，由上海市崇明東灘自然保護(hù)區(qū)管理事務(wù)中心聯(lián)合華東師范大學(xué)、復(fù)旦大學(xué)、上海市園林科學(xué)規(guī)劃研究院成立了標(biāo)準(zhǔn)起草組。（一）工作準(zhǔn)備2017年6月，本地方標(biāo)準(zhǔn)編寫任務(wù)下達(dá)后，上海市園林科學(xué)規(guī)劃研究院成立了標(biāo)準(zhǔn)起草小組，認(rèn)真學(xué)習(xí)GB/T 1.1200

7、9中有關(guān)標(biāo)準(zhǔn)編寫的要求，以及與制標(biāo)相關(guān)的法律法規(guī)，確定了起草組成員和任務(wù)分工。（二）工作組討論稿2017年710月，在充分調(diào)研、文獻(xiàn)查閱和分析總結(jié)的基礎(chǔ)上，制訂了標(biāo)準(zhǔn)編制提綱，并廣泛收集、分析、歸納與研究相關(guān)技術(shù)資料，撰寫了標(biāo)準(zhǔn)草稿，通過多次內(nèi)部討論和修改，形成了本標(biāo)準(zhǔn)工作組討論稿（含編制說明討論稿）。（三）征求意見稿2017年11月，標(biāo)準(zhǔn)起草組到崇明東灘進(jìn)行實地調(diào)研，了解標(biāo)準(zhǔn)中相關(guān)技術(shù)的實際應(yīng)用情況及其工程效果，對本標(biāo)準(zhǔn)工作組討論稿細(xì)節(jié)問題進(jìn)行修改完善。2017年12月2018年5月，發(fā)送修改稿給行業(yè)專業(yè)人士和相關(guān)管理人員，征求、匯總并處理專家意見，并對相關(guān)技術(shù)及其參數(shù)進(jìn)行第二次修改完善。2

8、018年11月，上海市林業(yè)標(biāo)準(zhǔn)化技術(shù)委員會組織相關(guān)專家，對本標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行中期驗收。根據(jù)專家組意見，編制組對標(biāo)準(zhǔn)文本內(nèi)容進(jìn)行了進(jìn)一步修改完善，形成了標(biāo)準(zhǔn)征求意見稿和編制說明。（四）公開征求意見2018年11月2018年12月，標(biāo)準(zhǔn)起草組公開征求意見，匯總并處理反饋意見，進(jìn)一步明確了應(yīng)用范圍；修正術(shù)語與定義；調(diào)整結(jié)構(gòu)，歸納方案編制等，對標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行進(jìn)一步修改。（五）召開標(biāo)準(zhǔn)現(xiàn)場征詢會2019年6月，上海市林業(yè)標(biāo)準(zhǔn)化技術(shù)委員會組織召開了上海地方標(biāo)準(zhǔn)海三棱藨草組織培養(yǎng)育苗技術(shù)規(guī)程征求意見稿專家咨詢會，專家組聽取了標(biāo)準(zhǔn)起草單位關(guān)于標(biāo)準(zhǔn)制定情況和主要內(nèi)容的說明，并對標(biāo)準(zhǔn)征求意見稿進(jìn)行了逐條討論，專家建議該標(biāo)準(zhǔn)應(yīng)進(jìn)

9、一步擴充相關(guān)內(nèi)容，加入崇明東灘優(yōu)化區(qū)及潮灘恢復(fù)的內(nèi)容。（六）根據(jù)新標(biāo)準(zhǔn)法進(jìn)一步修改中華人民共和國標(biāo)準(zhǔn)化法于2018年1月實施，為使該標(biāo)準(zhǔn)符合新法要求，結(jié)合行業(yè)專家組的意見，經(jīng)請示上海市林業(yè)標(biāo)準(zhǔn)化技術(shù)委員會及上海市綠化和市容管理局后，調(diào)整“上海崇明東灘自然保護(hù)區(qū)管理事務(wù)中心”作為本標(biāo)準(zhǔn)的主編單位，負(fù)責(zé)組織協(xié)調(diào)上海市園林科學(xué)規(guī)劃研究院、復(fù)旦大學(xué)、華東師范大學(xué)，并增加自然潮灘涂的恢復(fù)內(nèi)容。（七）重新組織標(biāo)準(zhǔn)起草組2019年10月，本地方標(biāo)準(zhǔn)編寫任務(wù)下達(dá)后，上海崇明東灘自然保護(hù)區(qū)管理事務(wù)中心組建標(biāo)準(zhǔn)起草小組，明確了工作指導(dǎo)思想和原則，確定了起草組成員和任務(wù)分工。（八）送審討論稿2021年5月，結(jié)合專家

10、組意見以及GB/T 1.1-2020要求，重新調(diào)整標(biāo)準(zhǔn)內(nèi)容，形成標(biāo)準(zhǔn)征求意見稿與編制說明，并公開征求意見。2021年6月，標(biāo)準(zhǔn)起草組匯總征求意見，再次對標(biāo)準(zhǔn)文本進(jìn)行修改完善，形成標(biāo)準(zhǔn)的送審討論稿，編制說明和征求意見匯總處理表。（九）召開專家征詢會2021年8月20日，由上海市林業(yè)標(biāo)準(zhǔn)化委員會組織召開了上海市地方標(biāo)準(zhǔn)海三棱藨草組織培養(yǎng)育苗技術(shù)規(guī)程專家征詢會，專家組對標(biāo)準(zhǔn)送審討論稿、編制說明、征求意見匯總處理表進(jìn)行了逐條討論。建議該標(biāo)準(zhǔn)的題目修改為“海三棱藨草種群生態(tài)恢復(fù)技術(shù)規(guī)程”。會后標(biāo)準(zhǔn)編制組成員根據(jù)專家建議進(jìn)行認(rèn)真修改，形成標(biāo)準(zhǔn)送審稿及編制說明。五、關(guān)鍵技術(shù)內(nèi)容的說明（一）潮灘恢復(fù)的關(guān)鍵技術(shù)

11、說明1.若選擇種子為恢復(fù)材料，對其進(jìn)行不少于30天的層積處理是關(guān)鍵，層積處理后種子的萌發(fā)率可提高至60%以上。2.在自然潮灘恢復(fù)海三棱藨草種群時，根據(jù)恢復(fù)場地的水動力條件，選擇適宜的恢復(fù)方法是至關(guān)重要的。在水動力相對較弱的修復(fù)場地，最大波能密度小于150 J/m2的恢復(fù)區(qū)，可采用球莖苗移栽或人工輔助播種的方法；而水動力相對較強的修復(fù)場地，最大波能密度大于150 J/m2且小于250 J/m2的恢復(fù)區(qū)，僅人工輔助播種方法可取得較好的恢復(fù)效果，球莖苗移栽易被沖刷或連根拔起，成功定植率低。3.自然潮灘人工輔助播種方法實施時，用竹竿或U形釘將麻袋牢固地固定于灘面是關(guān)鍵，否則易被沖走，影響恢復(fù)效果。（二

12、）優(yōu)化區(qū)恢復(fù)的關(guān)鍵技術(shù)說明1.自野外采集來的海三棱藨草種子的萌發(fā)率很低，種子經(jīng)過春化處理（濕藏并經(jīng)歷30 d以上的4 低溫，可以極大提高其種子的萌發(fā)率。2.再生苗無菌材料獲取。種子流水沖洗20分鐘后，用72%乙醇浸泡15秒，然后用0.1% HgCl2振蕩消毒種子5至15分鐘，再用無菌水沖洗5次，最后用無菌濾紙吸干水分后接種于培養(yǎng)基上。種子萌發(fā)培養(yǎng)基M1以MS為基本培養(yǎng)基，加入0.5 mgL-1 6-BA及0.5 mgL-1 GA3，添加3%蔗糖和0.6%瓊脂粉，即M1：MS+0.5 mgL-1 6-BA+0.5 mgL-1 GA3+3%蔗糖+0.6%瓊脂粉，pH 5.8至6.0，光照時間12小

13、時/天，光照強度2500 lx，培養(yǎng)溫度為251。3.再生苗誘導(dǎo)增殖培養(yǎng)。利用種子萌發(fā)得到的無菌苗進(jìn)行誘導(dǎo)增殖培養(yǎng)，采用MS+2.0 mgL-16-BA+0.002 mgL-1TDZ+0.2 mgL-1 IBA+3%蔗糖+0.6%瓊脂粉，為海三棱藨草誘導(dǎo)增殖的適宜培養(yǎng)基，繼代培養(yǎng)10-12次后，無明顯白化現(xiàn)象產(chǎn)生。4.生根培養(yǎng)。生根培養(yǎng)基以1/2MS為基本培養(yǎng)基，加入0.2 mgL-1IBA后，生根率高達(dá)100%，再生苗長勢良好，一致性高，根系長度數(shù)量均勻適合移栽。5.再生苗煉苗移栽。選擇的根系發(fā)達(dá)、生長健壯的再生苗，在溫室大棚內(nèi)開瓶煉苗3 d，以提高小植株的木質(zhì)化程度。初期保持85至95%的

14、濕度，保證葉面濕潤，并定期噴施殺菌劑，后期逐漸降低濕度至70至85%。最適基質(zhì)為珍珠巖:草炭:蛭石=1:1:1，密度分別為1株/穴和2株/穴時的成活率均高于85%。六、標(biāo)準(zhǔn)的主要技術(shù)內(nèi)容文件規(guī)定了海三棱藨草在自然潮灘生境和優(yōu)化區(qū)生境恢復(fù)時的水文、地貌、水動力、鹽度等場地要求；在恢復(fù)材料選擇上，規(guī)定了種子采集、層積處理和催芽等環(huán)節(jié)的技術(shù)要求，球莖苗的采集時間、采集方法等技術(shù)要求，實生苗的育苗方法及過程的技術(shù)要求，再生苗外植體選取、外植體滅菌、培養(yǎng)基準(zhǔn)備及培養(yǎng)條件、再生苗培養(yǎng)、再生苗移栽等環(huán)節(jié)的技術(shù)要求；實施恢復(fù)方面，針對自然潮灘生境的海三棱藨草種群恢復(fù)，規(guī)定了如何根據(jù)水動力條件篩選適宜的恢復(fù)方法，球莖苗移栽和人工輔助播種的時間、方法等具體技術(shù)要求，針對優(yōu)化區(qū)生境的海三棱藨草種群恢復(fù)，規(guī)定了時間、場地準(zhǔn)備、繁殖體運輸、種植方法、繁殖體保存、養(yǎng)護(hù)要求等各環(huán)節(jié)的技術(shù)要求；規(guī)定了在自然潮灘生境和優(yōu)化區(qū)生境恢復(fù)海三棱藨草種群后的監(jiān)測及管理的具體技術(shù)要求。七、重大分歧意見的處理結(jié)果及理由無。八、標(biāo)準(zhǔn)實施建議為使本標(biāo)準(zhǔn)更好的指導(dǎo)組培技術(shù)發(fā)展，建議做好宣傳培訓(xùn)，加強示范推廣，讓本標(biāo)準(zhǔn)在適合研發(fā)生產(chǎn)以及種植海三棱藨草的科研機構(gòu)、自然保護(hù)區(qū)、各級政府管理部門等