格列齊特對糖尿病大鼠心肌ATP敏感性鉀通道m(xù)RNA表達(dá)的影響

1、格列齊特對糖尿病大鼠心肌ATP敏感性鉀通道m(xù)RNA表達(dá)的影響吳國亭，徐倍，李文君，程曉蕓，盛春君【關(guān)鍵詞】糖尿病EffetfGlilazidenRNAexpressinfATPsensitiveptassiuhannelsinyardiufdiabetirats【Abstrat】AI:TbservetheeffetfGlilazidenRNAexpressinfATPsensitiveptassiuhannelsKATPinyardiufdiabetirats.ETHDS:Ratdiabetidelasadebystreptztzinipandfednhighfatdietfr6eeks.Th

2、eratserethenallatedrandlyint3grups:thediabetesdelgrup,theGlilazidegrupandthepsitiventrlgruptreatedithinsulin.Anralntrlgrupasalssetup.KATPRNAexpressininyardialellsftheratsasdetetedbythereversetransriptaseplyerasehainreatinRTPR.RESULTS:ThereasnsignifiantdiffereneinRNAexpressinlevelsfKATPinheartbeteend

3、iabeti,insulintreateddiabetiandnralntrlgrupsP0.05.parisnbeteenGlilazidetreateddiabetiandnntreateddiabetiratsshedthatthereasnhangeinRNAlevelsfKATPinheartP0.05.NLUSIN:ThestreptztinindueddiabetesitselfdesntaffettheRNAexpressinfKATPSUR2andKir6.2inyardialtissues.Glilazideithtreatentdsagehasneffetngeneexp

4、ressinfKATP.【Keyrds】diabetesellitus；yardiu；ATPsensitiveptassiuhannels；Glilazide【關(guān)鍵詞】糖尿??；心??；ATP敏感性鉀通道；格列齊特0弁言磺脲類藥物sulfnylureas，SU治療糖尿病尤其是對歸并心血管疾病的糖尿病的寧靜性不停有爭議1.SU對心血管體系產(chǎn)生倒霉影響的作用機制大概是它與心肌和血管平滑肌上ATP敏感性鉀通道ATPsensitiveptassiuhannels，KATP相結(jié)合，結(jié)合位點重要是該通道的調(diào)治亞基磺脲類藥物受體sulfnylureareeptr，SUR，別的內(nèi)向整流鉀通道6.2inardret

5、ifierptassiuhannel6.2，Kir6.2亞基上也有SU低親和力位點；線粒體膜上KATP通道被停滯也有必然作用2.但如今爭議的核心是心肌KATP通道對SU的反響是否因患糖尿病而異，差異SU對心血管體系的影響是否雷同，治療劑量的SU是否足以對心血管體系產(chǎn)生不良影響3？我們應(yīng)用RTPR的要領(lǐng)不雅察正常和糖尿病istar大鼠心肌KATP通道RNA表達(dá)，并用胰島素作比較不雅察格列齊特(Glilazide)治療劑量對基因表達(dá)的影響.1質(zhì)料和要領(lǐng)1.1質(zhì)料1.2要領(lǐng)用RTPR要領(lǐng)檢測心肌構(gòu)造KATP通道各構(gòu)成亞單元磺脲類藥物受體2SUR2和內(nèi)向整流鉀通道6.2Kir6.2的基因表達(dá)程度.總R

6、NA提取試劑TrizlT提取心肌構(gòu)造總RNA，紫外分光法檢測RNA純度，TBE/瓊脂糖電泳檢測RNA的完備性.以ligdT15為隨機引物，總RNA為模板，將RNA逆轉(zhuǎn)錄成DNA.然后以DNA為模板，創(chuàng)立PR反響體系.按照GenBank提供序列，用Preier5.0軟件方案引物：SUR25AAGTGTTAGATG3，5GAGGAGAAAGTGTT3，目的產(chǎn)物長231bp，Kir6.25TAAAGGTTA3，5GATGGGGAAAAAGTG3，目的產(chǎn)物長167bp，內(nèi)參基因GAPDH5AAAGTATGATA3，5TAATGTTGTGTA3，目的產(chǎn)物長432bp.PR反響步伐為：94變性45s，退火

7、561in，延伸722in，初次循環(huán)94預(yù)變性4in，共舉行32個循環(huán)，末了72延伸8in.PR結(jié)果用12g/L瓊脂糖凝膠電泳檢測，Gene凝膠圖像闡發(fā)體系測定電泳條帶吸光度值，基因表達(dá)程度以該基因條帶吸光度占內(nèi)參基因條帶吸光度的百分比表現(xiàn).統(tǒng)計學(xué)處置懲罰：數(shù)據(jù)以xs表現(xiàn)，接納SPSS11.5軟件處置懲罰，治療前后數(shù)據(jù)用重復(fù)丈量數(shù)據(jù)的方差闡發(fā)，基因表達(dá)量用neayANVA單因素方差闡發(fā)要領(lǐng)，方差齊性用Leastsignifiantdifferene最小明顯差法查驗.2結(jié)果2.1治療前后體質(zhì)量和血糖比力實行期間糖尿病比較組2只大鼠殞命，未尸解.治療前各組體質(zhì)量無顯著差異P0.05.治療12k后，

8、正常組大鼠體質(zhì)量增長顯著，糖尿病組瘦弱顯著.與正常組比力，實行各組體質(zhì)量增長遲鈍P0.05；但格列齊特組和糖尿病胰島素治療組體質(zhì)量增長較糖尿病組多P0.05，糖尿病病癥也較模子組輕表1.治療前糖尿病組、糖尿病格列齊特組及糖尿病胰島素治療組血糖程度無顯著差異P0.05.糖尿病格列齊特組血糖治療后較治療前落落，差異有明顯性P0.05，其落落程度較糖尿病胰島素組小，但無統(tǒng)計學(xué)意義P0.05；糖尿病胰島素治療組治療后血糖落落顯著P0.05.治療后糖尿病組血糖仍高于正常組P0.05；糖尿病格列齊特組和胰島素組血糖程度雖高于正常比較組，但無明顯差異P0.05，表1.表1格列齊特治療糖尿病大鼠的體質(zhì)量、血糖

9、和心肌構(gòu)造ATP敏感性鉀通道表達(dá)(略)3討論文獻表現(xiàn)SU通過阻斷心血管質(zhì)膜和部門線粒體KATP通道的開放而對心血管體系產(chǎn)生倒霉影響1.但臨床實行的結(jié)論存在差異，有學(xué)者提出SU用于人類落糖的藥物濃度很低，不敷以引起心肌KATP通道的狀態(tài)改變4.我們的結(jié)果表現(xiàn)鏈脲佐菌素誘導(dǎo)的實行性2型糖尿病不影響心肌KATP通道各構(gòu)成亞單元的RNA程度，這可用糖尿病時葡萄糖代謝特點和KATP通道的生理調(diào)治歷程說明.在實行性2型糖尿病大鼠，由于胰島素排泄不敷和胰島素對抗，構(gòu)造對葡萄糖的攝取和使用淘汰，乳酸天生增多，耗氧量落落，能量代謝低落5，但是除非是嚴(yán)峻的代謝紊亂如酮癥酸中毒時，構(gòu)造的KATP通道數(shù)目不會由于糖尿

10、病而產(chǎn)生改變，即便是在血糖未操縱的環(huán)境下還是云云.格列齊特是常用的中效SU，落糖結(jié)果精良.我們用格列齊特干預(yù)糖尿病大鼠后血糖程度顯著落落，說明該劑量是落糖的有用劑量.該劑量的格列齊特作用于糖尿病大鼠后，并未對大鼠心肌構(gòu)造KATP通道的構(gòu)成亞單元SUR2和Kir6.2的RNA程度產(chǎn)生影響，可以從分子生物學(xué)的角度提示治療劑量的格列齊特在發(fā)揮其落糖作用的同時并不影響2型糖尿病大鼠的心血管成效，但仍需進一步底子和臨床研究證明.【參考文獻】1REiannF,Dabrski,JnesP,etal.AnalysisfthedifferentialdulatinfsulphnylureablkfellandardiaKATPhannelsbygnuletidesJ.JPhysil,2022,547(1):159-168.2SeinS,ikiT.PhysilgialandpathphysilgialrlesfATPsensitiveK+hannelsJ.PrgBiphyslBil,2022,81(2):133-176.3GribbleF,ReiannF.Sulfnylureaatinrevisited:ThepstlningeraJ.Diabetlgia,2022,46(7):87