細胞生物學重點串講

1、Cell Biology第一節(jié)：一、細胞學說Cell Theory是19世紀的重大發(fā)現(xiàn)之一，其基本內(nèi)容有三條：有機體是由細胞構(gòu)成的；細胞是構(gòu)成有機體的基本單位；新細胞來源于已存在細胞的分裂。 二、細胞概念新思考三、細胞的共性第二節(jié)：病毒及與細胞的聯(lián)系1、結(jié)構(gòu)2、類型3、增殖4、與細胞 的關(guān)系第三節(jié)：原核細胞與古核細胞細菌古細菌真菌2.2 細菌的細胞壁 細胞壁(cellwall)是位于細胞表面，內(nèi)側(cè)緊貼細胞膜的一層較為堅韌、略具彈性的結(jié)構(gòu)。占細胞干重的10-25%。*細胞壁的功能 維持菌體固有的形態(tài) 保護細菌抵抗低滲環(huán)境 參與菌體內(nèi)外的物質(zhì)交換 菌體表面帶有多種抗原分子，可誘發(fā)機體的免疫應答。G

2、+和G-的細胞壁比較細胞壁革蘭陽性菌革蘭陰性菌強 度較堅韌較疏松厚 度20-80nm10-15nm肽聚糖層數(shù)可多達560層1-2層肽聚糖含量占細胞壁干重50%-80%占細胞壁干重5%-20%磷 壁 酸有無外 膜無有革蘭氏染色法(Giamstaining) 由丹麥醫(yī)生GhristianGram于1884年創(chuàng)立。通過革蘭氏染色法可將所有細菌分為革蘭氏陽性和革蘭氏陰性兩大類。它是鑒別細菌的重要方法。初染復染脫色媒染結(jié)晶紫碘液95%乙醇復紅甲菌乙菌 Procedures of Gram StainingG+G-顯微鏡下菌體呈紅色者為革蘭氏染色陰性細菌(常以G-表示)，呈深藍紫色者為革蘭氏染色陽性反應細

3、菌(常以G+表示)。目前一般認為革蘭氏染色是基于細菌細胞壁特殊化學組分基礎(chǔ)上的一種物理原因。通過初染和媒染后，細胞內(nèi)形成了不溶于水的結(jié)晶紫-碘的大分子復合物。革蘭氏陽性細菌由于細胞壁較厚、肽聚糖含量較高和其分子交聯(lián)度較緊密，故在用乙醇洗脫時，肽聚糖網(wǎng)孔會因脫水而明顯收縮，加上它基本不含類脂，故乙醇處理不能在壁上溶出縫隙，因此，結(jié)晶紫與碘復合物仍牢牢阻留在細胞壁內(nèi)，使其呈現(xiàn)紫色。而革蘭氏陰性細菌因其壁薄、肽聚糖含量低和交聯(lián)松散，故遇乙醇后，肽聚糖網(wǎng)孔不易收縮，加上它類脂含量高，所以當乙醇把類脂溶解后，在細胞壁上就會出現(xiàn)較大縫隙，復合物容易溶出細胞壁，因此通過乙醇脫色后，細胞又成無色。這時再用紅色

4、染料進行復染，革蘭氏陰性細菌獲得一層新的顏色紅色，而革蘭氏陽性菌則仍呈紫色。革蘭氏染色的機制原核細胞與真核細胞第四節(jié)：真核細胞一、基本結(jié)構(gòu)二、細胞大小三、形態(tài)結(jié)構(gòu)與功能第三章：細胞生物學研究方法（一）顯微鏡的類型 電子顯微鏡使用電子束作光源的一類顯微鏡,以特殊的電極和磁極作為透鏡代替玻璃透鏡,能分辨相距0.2左右的物體放大倍數(shù)可80-120萬倍 光學顯微鏡以可見光作為光源,用玻璃制作透鏡的顯微鏡.其有效放大倍數(shù)可達1250倍,最高分辨力為0.2微米.顯微鏡可分為光學顯微鏡和電子顯微鏡 光學顯微鏡可分為單式顯微鏡和復式顯微鏡。 單式顯微鏡結(jié)構(gòu)簡單,擴大的是方向一致的 虛像。 復式顯微鏡結(jié)構(gòu)比較復

5、雜,放大倍數(shù)較高,包括普通生物顯微鏡, 暗視野顯微鏡, 相差顯微鏡, 熒光顯微鏡等。光學顯微鏡（二）顯微鏡的光學原理 顯微鏡的光學系統(tǒng)中，有兩組重要的透鏡，一組是接物鏡，一組是接目鏡。這兩組透鏡雖然結(jié)構(gòu)很復雜，但它們的作用都相當于一個凸透鏡。凸鏡的成像原理，也就是顯微鏡放大成像的光學原理。只不過是通過兩次放大而已，其成像原理和光路圖如圖所示。 被檢物AB放在物鏡 下方的一倍焦距之間，則在物鏡 后方形成一個倒立得放大實像，這個實像正好位于目鏡的下焦點之內(nèi)，通過目鏡后形成一個放大的虛像,這個虛像通過調(diào)焦裝置使其落在眼睛明視距處，即 25cm ，使所看到的物體最清晰，也就是虛像是在眼睛晶狀體的兩倍焦

6、距之外，在眼球后的視網(wǎng)膜形成一個倒立的縮小像.（三） 顯微鏡的構(gòu)造 顯微鏡的基本構(gòu)造包括兩大部分，光學系統(tǒng)和機械系統(tǒng)，機械系統(tǒng)有鏡座、鏡柱、鏡壁、鏡筒、物鏡轉(zhuǎn)換器、載物臺、調(diào)焦螺旋、聚光器調(diào)節(jié)螺旋。光學系統(tǒng)有物鏡、目鏡、反光鏡、聚光器、虹彩光圈。（四） 使用顯微鏡的主要步驟和方法1、低倍鏡觀察2、高倍鏡的使用3、油鏡的使用4、顯微鏡使用后整理3、油鏡的使用（1）先從低倍油鏡找到被檢部分后,再換高倍鏡調(diào)整焦點,然后再換用油浸鏡頭.（2）在換用油鏡前在蓋玻片上滴加一滴香柏油，在油鏡觀察標本時，用細調(diào)焦螺旋調(diào)節(jié)焦點。（3）油鏡使用完畢，需立即擦凈，擦拭方法是用棉棒或擦鏡紙蘸少許清潔劑（乙醇或無水酒精

7、的混合物，最好不用二甲苯，以免侵入鏡頭后使樹膠溶化，透鏡松散）4、顯微鏡使用后整理 觀察完畢升高鏡筒取下玻片，再轉(zhuǎn)動物鏡轉(zhuǎn)換器，使兩個物鏡位于載物臺上通光孔的兩側(cè)，罩上防塵罩。 使用電子束作光源的年一類顯微鏡,以特殊的電極和磁極作為透鏡代替玻璃透鏡,能分辨相距0.2左右的物體放大倍數(shù)可80-120萬倍。 透射電鏡是以電子束透過樣品經(jīng)過聚焦與放大后所產(chǎn)生的物像， 投射到熒光屏上或照相底片上進行觀察。透射電鏡的分辨率為0.10.2nm，放大倍數(shù)為幾萬幾十萬倍。 掃描電鏡是用極細的電子束在樣品表面掃描，將產(chǎn)生的二次電子用特制的探測器收集，形成電信號運送到顯像管，在熒光屏上顯示物體。（細胞、組織）表面

8、的立體構(gòu)像，可攝制成照片。電子顯微鏡3 細胞膜根據(jù)Fluid-mosaic model：細胞膜由流動的雙脂層和嵌在其中的蛋白質(zhì)組成。磷脂分子以疏水性尾部相對，極性頭部朝向水相組成生物膜骨架；蛋白質(zhì)或嵌在雙脂層表面，或嵌在其內(nèi)部，或橫跨整個雙脂層，表現(xiàn)出分布的不對稱性。細胞膜的功能：為細胞的生命活動提供相對穩(wěn)定的內(nèi)環(huán)境；選擇性的物質(zhì)運輸，包括代謝底物的輸入與代謝產(chǎn)物的排出；提供細胞識別位點，并完成細胞內(nèi)外信息的跨膜傳遞；為多種酶提供結(jié)合位點，使酶促反應高效而有序地進行；介導細胞與細胞、細胞與基質(zhì)之間的連接；參與形成具有不同功能的細胞表面特化結(jié)構(gòu)。4 物質(zhì)的跨膜運輸 . 脂溶性小分子物質(zhì)可通過物理擴散透過質(zhì)膜； . 水溶性小分子物質(zhì)和帶電離子需要借助于一系列相關(guān)膜蛋白的介導來完成轉(zhuǎn)運； .