蛋白質(zhì)共價結(jié)構(gòu)課件

1、HPhe-Val-Asn-Gln-His-Leu-Cys-Gly-Ser-His- Leu-Val- Glu- Ala- Leu- Tyr Leu -Val-Cys-GlyGlu-Arg-Gly-Phe-Phe-Tyr-Thr-Pro-Lys-AlaOHB鏈15710151920212530HGly-Ile-Val-Glu-Gln-Cys-Cys-Ala-Ser-Val-Cys-Ser-Leu-Tyr-Gln-Leu-Glu-Asn-Tyr-Cys-AsnOH15102015A鏈711621SSSS牛胰島素的化學(xué)結(jié)構(gòu)SS第四章 蛋白質(zhì) 是由20多種-氨基酸按一定的序列通過肽鍵縮合而成的、具有較

2、穩(wěn)定構(gòu)象和一定生物功能的大分子。蛋白質(zhì)結(jié) 構(gòu)化學(xué)結(jié)構(gòu)立體結(jié)構(gòu)共價結(jié)構(gòu)初級結(jié)構(gòu)空間結(jié)構(gòu)構(gòu)象高級結(jié)構(gòu)一級結(jié)構(gòu)二級結(jié)構(gòu)三級結(jié)構(gòu)四級結(jié)構(gòu) 第一節(jié) 通論 一、元素組成和分類（掌握）元素組成 （） 元素組成特點 （） （）法的理論基礎(chǔ) 蛋白質(zhì)含量=蛋白氮（）分類據(jù)分子組成 分（）（） 又分別根據(jù)（）分為（）二、分子形狀和大小（了解） 蛋白質(zhì)形狀（）（） 長軸/ 短軸5長軸/ 短軸5大小 相對分子質(zhì)量103 106 氨基酸殘基相對分子質(zhì)量以110計 氨基酸相對分子質(zhì)量以128計 三、功能多樣性（熟悉）理論上無數(shù)，估計在10101012 功能多樣性決定于分子多樣性功能多樣性決定生命現(xiàn)象多樣性蛋白質(zhì)的生物學(xué)意義

3、（掌握）1、結(jié)構(gòu) 例如（）2、催化 例如（）3、調(diào)節(jié) 例如（）4、轉(zhuǎn)運(yùn) 例如（）5、運(yùn)動 例如（）6、支架 例如（）7、防御和進(jìn)攻 例如（）8、異常功能 例如（） 9、貯存 例如（）一、肽和肽鍵（重點）一個氨基酸的-羧基和另一個氨基酸的-氨基脫水縮合而成的化合物。氨基酸之間脫水后形成的酰胺鍵稱肽鍵（肽基、肽單位）。H2NCH CO OH | R1H NHCH COOH | R2 H2O二硫鍵SS兩個半胱氨酸之間形成第二節(jié) 肽二、肽的性質(zhì)（了解）解離 短肽基本同氨基酸的雙縮脲反應(yīng) 三、天然活性肽（了解） 谷胱甘肽（GSH）H2N-CHCH2CH2COCOOH-GluNHCHCO CH2SHCys

4、NHCH2COOHGly2GSHGSSG巰基酶巰基保護(hù)劑 胰高血糖素 （）部位分泌，（）氨基酸，有（）用 腦肽腦啡肽催產(chǎn)素升壓素等同上要求多多益善B鏈HPhe-Val-Asn-Gln-His-Leu-Cys-Gly-Ser-His- Leu-Val- Glu- Ala- Leu- Tyr Leu -Val-Cys-GlyGlu-Arg-Gly-Phe-Phe-Tyr-Thr-Pro-Lys-AlaOH15710151920212530HGly-Ile-Val-Glu-Gln-Cys-Cys-Ala-Ser-Val-Cys-Ser-Leu-Tyr-Gln-Leu-Glu-Asn-Tyr-Cys-

5、AsnOH15102015A鏈711621SSSS牛胰島素的化學(xué)結(jié)構(gòu)SS第三節(jié) 一級結(jié)構(gòu)的測定五、部分裂解和分離純化（重點、難點）1、酶法裂解胰蛋白酶 精、賴羧基端肽鍵靡蛋白酶 苯丙、酪、色羧基端肽鍵嗜熱菌蛋白酶 同糜但為氨基端肽鍵葡萄球菌蛋白酶 谷、天羧基端肽鍵 梭菌蛋白酶 精羧基端肽鍵 2、化學(xué)法裂解溴化氰 蛋羧基端肽鍵羥胺 天甘之間 3、分離電泳、層析等六、肽段測序（了解）艾德曼降解法酶解法質(zhì)譜法核苷酸序列推定法七、順序確定（了解）一個氨基，末端為1；一個羧基，末端為20，無二硫鍵。組成為120，含量各1個。裂解并測序后得一套切5及其倍數(shù)，得4段12345 678910 11121314

6、15 1617181920二套切6及其倍數(shù)， 得4段123456 789101112 131415161718 192012345 1920123456 1617181920 678910 131415161718 789101112 11121314151234567891012121314151617181920 八、二硫鍵位置的確定（掌握）對角線電泳法酶解肽鏈，紙電泳，用過甲酸蒸汽熏蒸濾紙，然后垂直方向二次電泳，則含二硫鍵的肽段成兩個斑點，確定其順序后，和上步的順序?qū)φ眨?23456 789101112 131415161718 1920經(jīng)鑒定，A順序為789101112B順序為131

7、41516 1718C1順序為123456C2順序為19205、10、20為半胱氨酸所以，5、20之間成二硫鍵BAC2 C1 （1）用羧肽酶A和B處理該十肽無效（1）的結(jié)論是19ProPhe NH4+ 、Asp、Glu、Tyr、Arg、Met、Pro、Lys、Ser、（2）胰蛋白酶處理產(chǎn)生兩個四肽和游離的Lys（2）的結(jié)論是123Arg，Lys，Lys，789Pro 或者Lys，Lys，345Arg，789Pro（3）梭菌蛋白酶處理產(chǎn)生一個四肽和一個六肽（3）的結(jié)論是Arg在4或6位，同上（4）溴化氫處理產(chǎn)生一個八肽和一個二肽， 用單字母符號表示其序列為NPNP是Asn、Pro（4）的結(jié)論是1

8、23ArgLysLys7Met，AsnPro 或者LysLys345Arg7Met，AsnPro （5）胰凝乳蛋白酶處理產(chǎn)生兩個三肽和一個四肽。N-端的胰凝乳蛋白酶水解肽段在中性pH時攜帶1凈電荷，在pH12時攜帶3凈電荷（5.1）的結(jié)論是3和7一個是Phe，另一個是Tyr （123，ArgLysLys7，MetAsnPro） 或者4和7一個是Phe，另一個是Tyr （LysLys34，5Arg7，MetAsnPro） （5.2）的結(jié)論是1和2有一個是酸性氨基酸，為Glu； 前述的或者是不可能的 （5.3）的結(jié)論是3是Tyr，則7是Phe（6）的結(jié)論是1是Ser綜上：該十肽的序列為： SerG

9、luTyrArgLySLysPheMetAsnPro（6）一輪Edman降解給出下列的PTH衍生物：SCH2OHONCNCCHH第四節(jié) 肽鏈人工合成一、概述（熟悉） 氨基酸1掩蔽氨基，活化羧基；氨基酸2掩蔽羧基；R基團(tuán)的官能團(tuán)也需掩蔽 A1 A2 掩蔽激活Y-HN-A1-CO-X H2N-A2-CO-Z | | R-M R-N 縮合Y-HN-A1-COHN-A2-CO-Z | | R-M R-N 分離，除去羧基掩蔽劑，改為活化劑 Y-HN-A1-COHN-A2-CO-X | | R-M R-N 掩蔽羧基的氨基酸3 縮合 分離，除去羧基掩蔽劑，改為活化劑 三步循環(huán) 除去所有掩蔽劑 多肽（1234）此合成方法的方向是從()端到()端基團(tuán)的掩蔽激活見氨基酸性質(zhì)。 除去方法主要有 皂化、透析等合成甘丙賴，如何進(jìn)行？胰島素人工合成1965年，中國，意義：理論上突破了生物大分子不能人工合成的觀念