設(shè)計方案和技術(shù)指標25-2hdl設(shè)計開發(fā)方案

1、設(shè)計開發(fā)方案：HR-SHSJ0025項目名稱高密度脂蛋白膽固醇測定試劑盒（直接測定法）（簡稱：HDL）產(chǎn)品概述高密度脂蛋白膽固醇(HDL-C) 指的是高密度脂蛋白中的膽固醇，它可反映血漿中高密度脂蛋白的多少，它的主要功能是將肝外組織中過多的膽固醇轉(zhuǎn)運到肝臟代謝，以防膽固醇在這些組織中過多地 ,是由載脂蛋白、磷脂、膽固醇和少量脂肪酸組成?，F(xiàn)代研究證實高度膽固醇具有防止動脈粥樣硬化、降低冠心病病死率的作用。也就是人們常說的“好膽固醇”。 中 HDL-C 的正常參考值范圍為（0.90-2.19）mmol/L（各醫(yī)院的測試方法不同，參考值不完全相同）。高密度脂蛋白膽固醇與冠心病低 HDL-C 血癥是目

2、前冠心病患者中最常見脂質(zhì)異常。業(yè)已顯示，冠心病患者中有63%的患者存在低高密度脂蛋白血癥。HDL 水平降低還與心肌梗死、腦卒中、猝死、成形術(shù)后再狹窄及嚴重或早發(fā)冠心病如左主干近段病變等相關(guān)。大量的流行病學(xué)表明，血漿 HDL-C 水平與冠心病的患險性呈負相關(guān)，當HDL-C60mg/L 時，HDL-C是冠心病的保護因子；但當 HDL-C40mg/L 時，冠心病的性則明顯增加。Franingham表明，血漿 HDL-C 水平低下是冠心病的主要致病性，HDL-C 水平每升高 1mg/dl，冠心病的相對性在降低 2%，女性降低 3%，在校正了其它后，這種仍持續(xù)存在?？笨诵呐K研究顯示，HDL-C 水平每

3、下降 10%，冠心病性將增加 13%。Franingham 研究顯示，老年組冠心病最主要的易患是 HDL-C 降低，當HDL-C0.90mmol/L 時，其冠心病的比 HDL-C1.70mmol/L 者高 8 倍；在 LDL-C 水平固定的情況下，冠心險性隨著 HDL-C 水平的下降而增加，隨著 HDL-C水平增加而下降。高密度脂蛋白膽固醇與缺血性腦病、動脈粥樣硬化近代流行病學(xué) 研究證明:一些 與缺血性腦 疾病的發(fā)病密切相關(guān)，其中高密度脂蛋白膽固醇等高脂血癥作為一個獨立的 ，在國內(nèi)外基本已達成共識。缺血性腦 病的病因主要是動脈粥樣硬化，形成動脈粥樣硬化的重要原因是高膽固醇血癥及 LDL-C 高

4、水平而在 相對年輕的缺血性腦 病患者體內(nèi)血脂情況如何，是否遵循同樣的規(guī)律，目前尚有爭議。有研究顯示 49 歲以下 組患者血漿 LDL-C 并無顯著增高。同時 T-CHOL 水平似乎與卒中的 關(guān)系也不大，而該 組缺血性腦 病患者體內(nèi) HDL-C 呈較低水平，且病灶面積越大 HDL-C 下降越明顯，兩者呈負相關(guān)。由此推論在年輕成 內(nèi)血脂組分中T-CHOL 及 LDL-C 水平可能不高或略高;而 HDL-C 水平明顯降低，使得機體抗動脈粥樣硬化的能力下降，易于形成血栓，造成該 段人群缺血性腦病早發(fā)。 HDL-C 抗動脈粥樣硬化的機制可能表現(xiàn)在以下諸多方面。HDL-C 顆粒具有膽固醇逆轉(zhuǎn)作用和抗 壁平

5、滑肌增生的作用。新近研究發(fā)現(xiàn) HDL-C 具有抗體內(nèi) LDL-C 被氧化的作用，而氧化的 LDL-C 極易被吞噬細胞吞噬而形成 細胞。HDL-C 還可能具有加強前列環(huán)素的作用及促進 蛋白溶解的作用。也就是說 HDL-C 可能通過多種方式起著抗血栓的作用。此外，高密度脂蛋白膽固醇降低還見于急 染、 、慢性腎功能衰竭、腎病綜合癥、肝炎、肝硬變等。隨著對 HDL-C 的深入研究，檢測方法也不斷發(fā)展。目前已發(fā)展到了第三代。測定方法是采用勻相測定法，采試劑，其基本原理為試劑 1 與樣品混合時，其中的 LDL、 VLDL、CM 與聚陰離子、表面活性劑作用生成可溶性復(fù)合體，與此同時生成的 HDL 復(fù)合體親和

6、力較弱。在試劑 2 加入后，其中的促進劑與 HDL 具有很強的親和力，可以置換吸附在表面的少量抑制劑，然后在膽固醇酯、膽固醇氧化酶、過氧化物酶催化下，生成過氧化氫，并與 4-氨基、色原反應(yīng)生成素。在 546nm 測定其吸光度，色素顏色的深淺與 HDL 濃度成正比。標準和規(guī)范GB/T 191-2009包裝儲運圖示標志YY/T 0466.1-2009 醫(yī)療器械 用于醫(yī)療器械、標記和提供信息的符號 第 1 部分GB/T 26124-2011 臨床化學(xué)體外試劑（盒）臨床檢驗操作規(guī)程（第 3 版）體外試劑分析性能評估系列指導(dǎo)原則（征求） 國食藥監(jiān)械2007229 號體外試劑管理辦法（試行）國食藥監(jiān)械20

7、07240 號體外試劑臨床研究技術(shù)指導(dǎo)原則國食藥監(jiān)械2007240 號體外試劑說明書編寫指導(dǎo)原則國家食品藥品監(jiān)督管理局令第 10 號醫(yī)療器械說明書、和包裝標識管理規(guī)定產(chǎn)品試劑盒由液體雙試劑組成。試劑 1 主要成分：抗壞血酸氧化酶、硫酸葡萄糖、膽固醇酯酶、過氧化物酶、膽固醇氧化酶、曲拉通等試劑 2 主要成分：4-氨基、N-（2-羥基-3-磺丙基）-35-二甲氧基苯胺鈉鹽等。預(yù)期用途本試劑盒用于體外定量測定中高密度脂蛋白膽固醇（HDL）的含量，臨主要用于高膽固醇血癥、冠心病和動脈粥樣硬化的輔助。主要技術(shù)參數(shù)或指標1、試劑空白：試劑空白吸光度 A 空白0.100（37，光徑 1cm，546nm），2

8、、分析靈敏度：濃度為 2.19mmol/L 時，吸光度差值 A0. 010；3、準確度：質(zhì)控品測試，測定結(jié)果在質(zhì)控范圍內(nèi)；4、精密度：重復(fù)性 CV（%）5%，批間差8%；5、線性范圍：在（0.1-3.90）mmol/L 線性范圍內(nèi)，r0.990。在0.50-3.90）mmol/L范圍內(nèi)偏差不超過 10%；測定結(jié)果（0.1-0.50）mmol/L 時絕對偏差不超過 0.05mmol/L。6、穩(wěn)定性：原包裝試劑盒在 28密閉避光，有效期為 12 個月。開瓶后，28避光可穩(wěn)定 2 周。檢驗原理本試劑盒采用直接測定法，試劑 1 與樣品混合時，其中的 LDL、VLDL、CM 與聚陰離子、表面活性劑作用生

9、成可溶性復(fù)合體，與此同時生成的 HDL 復(fù)合體親和力較弱。在試劑 2 加入后，其中的促進劑與 HDL 具有很強的親和力，可以置換吸附在表面的少量抑制劑，然后在膽固醇酯、膽固醇氧化酶、過氧化物酶催化下，生成過氧化氫，并與 4-氨基、色原反應(yīng)生成素。在 546nm 測定其吸光度，色素顏色的深淺與 HDL 濃度成正比。實施方案本項目開發(fā)實施計劃周期為：2013 年 07 月 01 日起2015 年 09 月 30 日止，具體進度安排如下：1、2013 年 07 月 01 日8 月 30 日完成主要原材料的研究、篩選與采購工作。2、2013 年 09 月 05 日前完成主要原材料的驗收檢驗工作。3、2013 年 09 月 20 日前完成配方和工藝的選定，樣品小試及試生產(chǎn)驗證工作。4、2013 年 11 月 20 日前完成中試生產(chǎn)放大與驗證工作。5、2015 年 01 月 31 日前完成分析性能評估、穩(wěn)定性研究及機型驗證。6、2014 年 11 月 10 日2014 年 12 月 31 日間完成及臨床樣品的生產(chǎn)與自檢。7、2015 年 03 月 31 日前完成產(chǎn)品的檢驗。8、2015 年 05 月 31 日前完成產(chǎn)品的臨床試驗。9、2015 年 06 月 30 日前完成申報資料