大鼠孕晚期七氟烷吸入麻醉對子代神經(jīng)行為和學(xué)習(xí)記憶功能的影響

1、大鼠孕晚期七氟烷吸入麻醉對子代神經(jīng)行為和學(xué)習(xí)記憶功能的影響【摘要】目的觀察大鼠孕晚期長時(shí)間、不同濃度使用七氟烷吸入麻醉對仔鼠神經(jīng)行為和學(xué)習(xí)記憶功能的影響。方法SD孕鼠15只，隨機(jī)分為高濃度麻醉H組、低濃度麻醉L組和對照組，其中H、L組分別于孕第18天吸入4%、2%的七氟烷6h。出生后仔鼠進(jìn)展后續(xù)實(shí)驗(yàn)：P8P14行懸崖逃避實(shí)驗(yàn)，P21和P60行曠場實(shí)驗(yàn)，P21P26期和P60P65期行rris水迷宮實(shí)驗(yàn)。結(jié)果在懸崖逃避實(shí)驗(yàn)和曠場實(shí)驗(yàn)中，各組仔鼠的神經(jīng)行為改變差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義P0.05。水迷宮實(shí)驗(yàn)、期，與組比擬，H、L組平均逃逸埋伏期時(shí)間均明顯延長P0.01、第三象限活動(dòng)時(shí)間和穿越平臺次數(shù)均明顯減

2、少期：P0.01；期：P0.05，而L組在定向航行實(shí)驗(yàn)和空間探究實(shí)驗(yàn)中差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義P0.05。結(jié)論孕晚期高濃度使用七氟烷麻醉6h可導(dǎo)致仔鼠學(xué)習(xí)記憶功能降低，并且持續(xù)到成熟期。含氟揮發(fā)性吸入麻醉藥是臨床全身麻醉中使用最為廣泛的一類藥物，具有增強(qiáng)GABAA受體活性的作用，同時(shí)對NDA受體也有一定的阻滯作用，而且認(rèn)為此二者作用與其麻醉機(jī)制有關(guān)。七氟烷是新型的含氟揮發(fā)性吸入麻醉藥，因其血/氣、油/氣分配系數(shù)低，麻醉誘導(dǎo)、清醒迅速，近年來在各種手術(shù)的全身麻醉中應(yīng)用逐漸廣泛。筆者以2種不同臨床麻醉濃度的七氟烷麻醉孕晚期大鼠，觀察仔鼠的神經(jīng)行為和學(xué)習(xí)記憶功能的變化情況，討論作為胎兒腦細(xì)胞生長發(fā)育重要時(shí)

3、期之一的孕晚期接觸七氟烷，是否將對子代神經(jīng)功能發(fā)育產(chǎn)生不利影響。1材料和方法1.1材料1.2方法吸入麻醉實(shí)驗(yàn)完畢時(shí)，各大鼠均清醒良好，繼續(xù)飼養(yǎng)23d，各組孕鼠分別自然分娩：H組51只、L組56只、組53只，新生鼠出生后天數(shù)以分娩當(dāng)天記為出生后第0天，此后累加。7d內(nèi)每組幼鼠均有出現(xiàn)死亡，H組8只、L組5只、組6只；成活分別為43、51、47只。從存活仔鼠中，每組分別隨機(jī)選定8只雄性鼠進(jìn)展神經(jīng)行為和學(xué)習(xí)記憶才能測定。1.2.1懸崖逃避實(shí)驗(yàn)待出生后第8天P8開場，將其放置于30高的平臺上，頭和兩前肢越過平臺邊緣，60s內(nèi)大鼠的頭和身體向內(nèi)側(cè)挪動(dòng)為陽性反響。記錄從放置開場到向內(nèi)挪動(dòng)的時(shí)間，假設(shè)60s

4、內(nèi)無陽性反響那么記為60s；一放置到平臺就有陽性反響那么記為1s。連續(xù)測試7dP8P14，直至大鼠均能在1s內(nèi)呈現(xiàn)陽性反響。1.2.2曠場實(shí)驗(yàn)于出生后21dP21和60dP60行曠場實(shí)驗(yàn)，曠場行為觀察箱為長、寬、高分別為808060的無頂木箱，箱底以墨線劃分為25個(gè)等面積的小方格(1616)，自中央格放入大鼠，觀察120s內(nèi)穿越的格子數(shù)3只腳進(jìn)入其他小方格、后腿兩前腿同時(shí)離地面直立次數(shù)、理毛次數(shù)。每完成一只大鼠測試后清理木箱，以免前只大鼠的氣味遺留影響實(shí)驗(yàn)。1.2.3rris水迷宮實(shí)驗(yàn)直徑120、高50的水槽，槽壁為均勻黑色，劃分為4個(gè)象限，每個(gè)象限設(shè)置入水點(diǎn)標(biāo)記，于第三象限內(nèi)設(shè)一直徑12、高

5、29的透明平臺，槽內(nèi)水深30，使平臺沒于水下1，水溫控制在242，水池上方安裝自動(dòng)攝像系統(tǒng)。rris水迷宮實(shí)驗(yàn)包括2期，分別于P21期和P60期進(jìn)展，內(nèi)容包括定向航行和空間探究，每期持續(xù)6d，前5d為定向航行實(shí)驗(yàn)：1天4次，將大鼠分別從4個(gè)象限入水點(diǎn)面向池壁放入水中，記錄60s內(nèi)尋找到平臺的時(shí)間并讓大鼠在平臺上停留10s，超過60s未能找到平臺者，用木棒輕柔的將其引上平臺并停留在臺上10s，認(rèn)定其尋找平臺時(shí)間為60s，取4次測定結(jié)果的平均值為當(dāng)天的逃逸埋伏期；第6天觀察空間探究時(shí)移走平臺，從第三象限入水將大鼠面向槽壁放入水中，記錄60s內(nèi)在原平臺處穿臺次數(shù)、第三象限活動(dòng)時(shí)間及活動(dòng)軌跡圖。以上各

6、項(xiàng)實(shí)驗(yàn)過程保持室內(nèi)安靜，各物體的擺放、燈光的位置和強(qiáng)度保持不變，實(shí)驗(yàn)人員站立的位置也相對固定。實(shí)驗(yàn)開場時(shí)間均為800，每次實(shí)驗(yàn)完畢后將大鼠擦干放回籠子，注意保暖，自由飲食。2結(jié)果2.1一般情況各組孕鼠Sp2均波動(dòng)于95%100%。H組與組、L組與組比擬，各組仔鼠出生死亡率差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義P0.05，圖1。2.2懸崖逃避實(shí)驗(yàn)組仔鼠懸崖逃避時(shí)間于P9、P10稍短于H、L組，但僅顯示縮短趨勢，未顯示統(tǒng)計(jì)學(xué)意義P0.05；3組仔鼠隨著年齡的增大逃避埋伏期時(shí)間均縮短，并在P14時(shí)全部呈陽性反響，各組之間的差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義P0.05。表1仔鼠出生后21d和60d行曠場行為實(shí)驗(yàn)結(jié)果2.4水迷宮實(shí)驗(yàn)期定向航行實(shí)驗(yàn)從出生后第21天持續(xù)到第25天，空間探究實(shí)驗(yàn)于出生后第26天進(jìn)展。H組和L組的每天平均逃逸埋伏期均明顯比組長P0.01；空間探究實(shí)驗(yàn)H組和L組第三象限活動(dòng)時(shí)間明顯短于組P0.01，穿越原平臺次數(shù)明顯比H組少P0.01。期H組各天的平均逃逸埋伏期均明顯比組延長P0.01，L組與組比擬各天的平均逃逸埋伏期差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義P0.05；第三象限活動(dòng)時(shí)間及穿越平臺次數(shù)H組明顯少于組P0.05，而L組與組比擬差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義P0.05，表23。各組仔鼠空間探究活動(dòng)軌跡如圖2所示。表2各實(shí)驗(yàn)組期和期定向航行實(shí)驗(yàn)結(jié)果表3