選修1知識歸納

1、文檔編碼 : CS1L6R1W9T3 HY5N10G9O4V2 ZS5P8G4I2A4選修 1生物技術(shù)實踐學問歸納圖解果 酒 和 果 醋 的 制 作留意：留意：原理： 主要菌種是酵母菌； 要 先 清 洗 后 除 枝 梗留意：酵母菌是異養(yǎng)兼性原理： 主要菌種是醋酸桿菌異養(yǎng)需氧型 防止除去枝梗時引厭氧微生物起葡萄破舊,增加被榨汁機要清洗干凈,C6H12O6C 2H5OHC02 溫度： 20左右最適合酵雜菌污染的機會,同并晾干 防雜菌污染 當氧氣糖源均充分時,糖醋酸時,防止葡萄汁流失 防止將果核壓破 因當氧氣充分、缺少糖源時,乙醇乙醛醋酸母菌繁殖,一般把握不能反復沖洗防止果核含有多種有害葡溫度： 3

2、0 35；在 18 25；挑選新穎的葡萄菌種流失 萄酒風味的物質(zhì) 挑選葡萄沖洗榨汁酒精發(fā)酵醋酸發(fā)酵果酒果醋留意：留意： 需適時通入空氣發(fā)酵裝置要清洗干凈,并用體積分數(shù)為70的酒精消毒發(fā)酵瓶裝入葡萄汁后留有l(wèi)/3 的空間 目的是先讓酵母菌進行有氧呼吸快速繁殖,耗盡氧氣后再進行酒精發(fā)酵；其次,防止發(fā)酵過程中產(chǎn)生的CO2 造成發(fā)酵液的溢出 如用帶蓋的瓶子制葡萄酒,每隔 12 h 左右將瓶蓋擰松一次高考警示 ：由于醋酸菌和乳酸菌屬于原 核生物,所以在利用者兩類 微生物時,其環(huán)境中確定不 能加入抗生素；酵母菌在養(yǎng)分和氧氣充分時 進行出芽生殖留意不是打開瓶蓋,防雜菌污染,之后再將瓶蓋擰緊目的:排出余外的氣

3、體放炸裂 裝入葡萄汁封閉充氣口無氧環(huán)境和放雜菌污染 發(fā)酵過程中,隨著酒精度數(shù)的提高,葡萄酒顯現(xiàn)深紅色因紅葡萄皮的色素也進入發(fā)酵液 酒精的鑒定 :與酸性重鉻酸鉀呈灰綠色 對比組2mL 白酒 3mL/L 的 H2SO43 滴混勻試驗組2mL 發(fā)酵液重鉻酸鉀 3 滴觀看試管甲2mL 發(fā)酵前液3mL/L 的 H2SO43 滴混勻試管乙2mL 發(fā)酵后液重鉻酸鉀 3 滴觀看1 （一）培養(yǎng)基的基本學問 微生物的試驗室培養(yǎng) 1 培養(yǎng)基的養(yǎng)分成分養(yǎng)分物質(zhì)定義作用主要來源及所涉及的微生物碳源凡是能供應微生物所需碳元構(gòu)成生物細胞、生物體及細胞代謝產(chǎn)物,無機化合物： C02、NaHC0 3 等 自養(yǎng)生物 素的物質(zhì)有些

4、能為異養(yǎng)生物供應能源有機化合物：糖類、脂質(zhì)、花生粉餅、石油等 異養(yǎng)生物 氮源凡是能供應微生物所需氮元合成蛋白質(zhì)、核酸及含氮的代謝產(chǎn)物,也無機化合物： N2、NH3、銨鹽、硝酸鹽,自養(yǎng)生物有機化合素的物質(zhì)可為異養(yǎng)微生物供應能源物：尿素、牛肉膏、蛋白胨等,異養(yǎng)生物水分生物體內(nèi)含量最高的組成成良好的溶劑、細胞生活及生化反應的介質(zhì)、培養(yǎng)基、大氣、代謝產(chǎn)物分,分為結(jié)合水和自由水參與物質(zhì)運輸及參與生化反應的反應物無機鹽為微生物供應大量除C、H、0細胞組成成分,生命調(diào)劑物質(zhì),自養(yǎng)菌的培養(yǎng)基、大氣等環(huán)境以外的各種元素能源或其他養(yǎng)分來源,酶的激活劑生長因子微生物正常生長繁殖, 必不行可作為酶與核酸等的組成成分維

5、生素、氨基酸、堿基等少的微量有機物自養(yǎng)微生物與異養(yǎng)微生物所需的養(yǎng)分物質(zhì)不同高考警示鐘1 自養(yǎng)微生物所需的碳源、氮源來自含碳、含氮的無機物,而異養(yǎng)微生物需要的碳源、氮源來自含碳、含氮的有機物,因此可依據(jù)培 養(yǎng)基中養(yǎng)分物質(zhì)判定微生物的代謝類型；2 含氮無機物不但能給自養(yǎng)微生物供應氮源,也能作為能源物質(zhì),供應能量,如NH3既作為硝化細菌的氮源也作為能源；2培養(yǎng)基的配制原就 1 目的明確；要依據(jù)微生物的種類、培養(yǎng)目的等挑選原料、配制培養(yǎng)基； 2 養(yǎng)分要和諧；各種養(yǎng)分物質(zhì)要保證適當?shù)臐舛群捅壤?；養(yǎng)分物質(zhì)比例過低,不能中意微生物生長；濃度過高就會抑制微生物的正常生長；營養(yǎng)物質(zhì)的濃度比 如 C/N仍會直接影

6、響某些微生物的代謝產(chǎn)物,如谷氨酸生產(chǎn),C/N=4 1 時,菌體大量繁殖,谷氨酸產(chǎn)量少；而C/N=31 時,菌體繁殖受抑制,但谷氨酸合成量大； 3pH要適當；不同微生物生長所需pH 不同；如細菌pH保持在 6.5 7.5 之間；放線菌保持在7.5 8.5 之間；真菌應保持在5.0 6.0 之間；3培養(yǎng)基的分類及作用：培養(yǎng)基種類很多,作用也不同；依據(jù)不同的分類標準,可將培養(yǎng)基分為不同種類；劃分標準培養(yǎng)基種類特點用途及實例物理性質(zhì)液體培養(yǎng)基不加凝固劑工業(yè)生產(chǎn)半固體培養(yǎng)基觀看微生物的運動、分類鑒定、保藏菌種加凝固劑,如：瓊脂固體培養(yǎng)基微生物分別、鑒定、活菌計數(shù)、化學成分自然培養(yǎng)基含化學成分不明確的自然

7、物質(zhì)工業(yè)生產(chǎn)合成培養(yǎng)基培養(yǎng)基成分明確 用化學成分已知的化學物質(zhì)配成 分類、鑒定用途挑選培養(yǎng)基培養(yǎng)基中加入某種化學物質(zhì),以抑制不需要的微生物培養(yǎng)、分別出特定微生物 如：培養(yǎng)酵母茵或霉菌,可在培養(yǎng)基中加入青霉素；培養(yǎng)金黃色葡萄球菌,的生長,促進所需要的微生物的生長可在培養(yǎng)基中加入高濃度食鹽 鑒別培養(yǎng)基依據(jù)微生物的代謝特點,在培養(yǎng)基中加入某種指示劑鑒別不同種類的微生物,如可用伊紅一美藍培養(yǎng)基鑒別飲用水或乳制品中是否有大腸桿菌 如有,茵落或化學藥品呈深紫色,并帶有金屬光澤 2 說明： 病毒為非細胞結(jié)構(gòu)的生物體,專營活細胞寄生,目前不能利用人工培養(yǎng)基來培養(yǎng),需接種在動植物組織中才能增殖；常用于培養(yǎng)病毒的

8、是活雞胚；加入培養(yǎng)基中的凝固劑 如瓊脂 ,一般不能被微生物利用,只起到凝固作用；挑選培養(yǎng)基一般只生長具有特定的微生物,鑒別培養(yǎng)基可以存在其他微生物,而且能鑒別特定的微生物；留意： 挑選培養(yǎng)基的挑選方法1在培養(yǎng)基中加入某種化學物質(zhì)；例如,加入青霉素可以分別出酵母菌和霉菌；加入高濃度的食鹽可以得到金黃色葡萄球菌；這里的加入是在主要養(yǎng)分成分完整的基礎(chǔ)上加入；2轉(zhuǎn)變培養(yǎng)基中的養(yǎng)分成分；例如缺乏氮源時可以分別出固氮微生物；石油作為惟一碳源時,可以分別出排除石油污染的微生物；3轉(zhuǎn)變微生物的培養(yǎng)條件；例如,將培養(yǎng)基放在高溫環(huán)境下培養(yǎng),可以得到耐高溫的微生物；（二）滅菌技術(shù)1無菌技術(shù)的概念在微生物培養(yǎng)中,獲得

9、純潔培養(yǎng)物的關(guān)鍵是防止外來雜菌入侵,其主要技術(shù)是無菌操作；無菌技術(shù)是指通過確定物理、化學的手段,防止試驗室培養(yǎng)物被外來微生物污染；無菌技術(shù)主要圍繞如何防止雜菌污染開放的；2消毒、滅菌的方法項目概念常用方法應用范疇消毒使用較為溫存的物理或化學方法,僅殺死巴氏消毒法：7075水中煮 30min 或在 80水中煮 15min 一些不耐高溫的物體如牛奶煮沸消毒法：在100水浴中煮沸56 min 一般物品物體表面或內(nèi)部一部分對人體等有害的微化學藥劑消毒法：用乙醇、氯氣、漂白粉、KMnO 4 等藥劑來可用來對環(huán)境、雙手和衣物等消毒生物 不包括孢子和芽孢 殺死或抑制細菌生長或繁殖滅菌使用猛烈的理化因素殺死物

10、體內(nèi)外全部的紫外線消毒法： 30W紫外燈照射30min 接種室灼燒滅菌法：酒精燈火焰接種工具如接種環(huán)、接種針等3 微生物,包括芽孢和孢子干熱滅菌法：在160 170加熱 12h 如玻璃器皿 吸管、培養(yǎng)皿 和金屬用具高壓蒸汽滅菌：壓力為100 kPa ,溫度為 12l 的條件下,培養(yǎng)基及容器的滅菌保護 15 30 min 留意：無菌操作是微生物培養(yǎng)過程中,防止雜茵污染的關(guān)鍵步驟；消毒只能毀滅或抑制養(yǎng)分體的活動,而不能達到完全滅菌；酒精消毒用體積分數(shù)為70% 的酒精成效最好,因濃度過高,會使菌體表面蛋白凝固成一層愛惜膜,乙醇分子不能進入其中；濃度過低,殺菌力減弱；而滅菌除殺死養(yǎng)分體外,仍必需殺死芽

11、孢和孢子；滅菌消毒的原理,就是通過確定理化手段,使病原茵蛋白質(zhì)變性,失去生命活性；（三）微生物的純化培養(yǎng)技術(shù)1常用細菌培養(yǎng)基蛋白胨培養(yǎng)基配制流程：留意：留意：溶化瓊脂時要把握火力的大小并不 斷攪拌,以免培養(yǎng)基溢出或燒焦；留意： 分裝至試管時 可用高壓蒸汽滅菌法 用干熱滅菌法時溫度 160 170 留意： 據(jù)配方運算配 制確定體積培養(yǎng)基 時各成分的用量 加熱過程中部分水分蒸發(fā),待瓊脂 完全溶化后應補加蒸餾水,以保持 溶液的濃度 培養(yǎng)基的高度 不要超過試管 高度的 1/5 不能超過 180 ,否就易引起報紙等燃燒 一般是培養(yǎng)基先滅菌再倒平板,也可先倒 平板 ,再滅菌 運算 稱量 溶化（調(diào) PH）裝

12、瓶 滅菌 倒平板留意：留意：留意：牛肉膏較粘稠,應玻棒挑取,在稱 由于不同微生物適宜 倒平板時,燒杯口要通過酒精燈火焰滅菌；量紙上稱量 的 pH 不同, 因此在熔 平板冷凝后要將平板倒置,以確保拿放便利, 同時防止水分蒸發(fā),牛肉膏蛋白胨易吸潮,動作要快速 化后,必需用 NaOH 以利微生物生長,也可防止皿蓋上凝結(jié)的水滴滴入培養(yǎng)基,影響或 HCl 來調(diào)劑 pH pH ；其次防止細菌透過皿底、皿蓋的縫隙,落在培養(yǎng)基上；倒平板時, 不能將培養(yǎng)基濺在皿底與皿蓋之間,以防止雜菌滋生,污染培養(yǎng)基2純化大腸桿菌原理：在培養(yǎng)基上將細菌稀釋或分散成單個細胞,使其長成單個的菌落,這個菌落就是純化的細菌菌落；4 微

13、生物接種方法：1平板劃線法：平板劃線法中細胞的分別和稀釋 過程發(fā)生在接種環(huán)在固體平板表 面上的劃線和移動過程中；在線 的開頭部分,微生物往往連在一起生長,隨著線的延長,菌數(shù)逐步削減,最終可能形成純種的單個菌落；如 圖 2稀釋涂布平板法：10 倍系列稀釋操作劃線操作時留意：（1）用接種環(huán)取菌種之前、每次劃線之前和劃線終止都要進行灼燒滅菌,灼燒后要在酒精燈鄰近冷卻后再操作；第一次操作：殺死接種環(huán)上原有的微生物；每次劃線之前：殺死上次劃線后接種環(huán)上殘留的菌種,使下次劃線的菌種直接來源于上次劃線的末端；劃線終止后：殺死接種環(huán)上殘存的菌種,防止細菌污染環(huán)境和感染操作者 （2）劃線時不要劃破培養(yǎng)基,假如接

14、受分段劃線法操作從其次次操作應總在上一次劃線末端開頭,首尾區(qū)不能相連；（3）操作必需始終在酒精燈火焰旁進行；涂布操作時留意：（1）配制系列梯度稀釋液時,所用的試管和移液管均需滅菌,必需用無菌水配制；（2）涂布器用 70% 的酒精消毒, 余外酒精在燒杯中滴盡,沾有少量酒精的涂布器在酒精燈火焰引燃；不要將過熱的涂布器放入盛有酒精的燒杯中,一面引燃其中的酒精；5 （3）配制系列梯度稀釋液和轉(zhuǎn)移菌液以及涂布過程等必需都在酒精燈火焰旁進行,移液管頭不能接觸任何物體；3菌種的儲存 對于頻繁使用的菌種,可以接受臨時保藏的方法；對于需要長期儲存的菌種,可以接受甘油管藏的方法；留意： 菌種保藏的原理是：低溫、干

15、燥和隔絕空氣,使微生物代謝才能和繁殖才能降低；不同菌種的保藏方法因不同菌種而異；需氧型,必需低溫有氧,而厭氧型必需低溫無氧；腐生微生物可供應牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基,而寄生微生物需供應活體組織等非人工培養(yǎng)基,如病毒需供應活雞胚；（三）微生物的挑選與計數(shù)（以“ 土壤中分解尿素的細菌” 為例）挑選菌株菌落計數(shù)菌種的鑒定原就：人為供應有利于目對比：將不接種的培養(yǎng)基置于相同溫度恒溫箱培養(yǎng) 目的 : 證明培養(yǎng)基是否被雜菌污染方法：檢測培養(yǎng)基pH統(tǒng)計茵落數(shù)目的方法：的菌生長的條件,的變化判定1 顯微鏡直接計數(shù)法同時抑制或阻擋其原理：在細菌分解尿素原理：利用特定細菌計數(shù)板或血細胞計數(shù)板,在顯微鏡下運算確定容積樣品

16、中微生物數(shù)量他微生物的生長時,分泌的脲酶方法：用計數(shù)板計數(shù)；缺點：不能區(qū)分死菌與活菌；培養(yǎng)基的成分：尿素作為將 尿 素 分 解 為2 間接計數(shù)法 活菌計數(shù)法 惟一的氮源 挑選培氨,氨使培養(yǎng)基原理：當樣品的稀釋度足夠高時,培養(yǎng)基表面生長的一個菌落,來源于樣品稀釋液中的一個活菌,通過養(yǎng)基、固體培養(yǎng)基 堿 性 增 高 , pH統(tǒng)計平板上的菌落數(shù),就能估量出樣品中大約含有多少活菌；上升運算公式：每克樣品中的菌株數(shù)C V M,其中, C 代表某一稀釋度下平板上生長的平均菌落數(shù),V代表涂布平板時所用的稀釋液的體積mL ,M代表稀釋倍數(shù)；操作：設置重復組,增強試驗的說服力與精確性；同時為了保證結(jié)果精確,一般

17、挑選菌落數(shù)在30300的平板進行計數(shù)；菊 花 的 組 織 培 養(yǎng) 6 溫度： 1822有利愈傷組織光照 ：在初期菊花的組織培養(yǎng)需光照,月季的花藥培養(yǎng)不需光照形成 ,二者后期均需要光照 留意： 生長素和細胞分裂素的使用有利葉綠素形成和光合作用使用次序不同結(jié)果不同先生長素,后細胞分裂素：有利于細胞分裂,但不分化材料： 植物的種類、年齡、儲存時間 先細胞分裂素,后生長素：細胞既分裂也分化消毒緣由： 大部分來自田間, 帶有大量病毒、同時使用：分化頻率提高 用量比例不同發(fā)育方向不同菊花莖段消毒：細菌所用消毒劑為體積分數(shù)為 高：利用根的分化,抑制芽的形成低：利用芽的分化,抑制根的形成 留意： 培養(yǎng)一株完整

18、的試管苗,必需70的酒精和質(zhì)量分數(shù)為汞溶液,所使用的清洗液是無菌水；0.1的氯化適中：促進愈傷組織的生長 先進行生芽培養(yǎng),然后進行生根培養(yǎng),假如次序顛倒,先誘導生根,留意： 不同植株或同一植株的不同部位,所選用的消毒劑種類及濃度可能不同；培養(yǎng) 就不好誘導生芽了；制備 MS培養(yǎng)基 外植體消毒 接種 愈傷組織 胚狀體 或不定芽 試管苗 移栽 煉苗 栽培脫分化 再分化成分： 無機物 大量元素、微量元素 、有機 方法： 始終在酒精 脫分化階段只分裂；人工種子制備階段 緣由： 因試管苗光合作用才能低,對物：糖類 最常使用的糖是蔗糖,供應 燈火焰旁進 再分化階段既有分裂也有分化 不良環(huán)境耐受力差,確定要在

19、能源和保護滲透壓 、維生素、氨基酸、灼燒滅菌；保溫、保濕一段時間以增強適有機添加劑（生長因子） 、激素 留意： 將菊花莖段 應力pH：5.8 左右 插入培養(yǎng)基 方法： 流水清洗根部,移栽至消過毒滅菌： 高壓蒸汽滅菌 時不要倒插 的蛭石或珍寶巖環(huán)境培養(yǎng)留意：為降低工作量、 削減誤差, 可通過配制母 原理：細胞的全能性 高度分化的植物細胞,仍具有發(fā)育為完整個體的潛能 液,達到一次稱量藥品、多次使用； 1 緣由： 體細胞攜帶有本物種全部的遺傳信息配制培養(yǎng)基時, 母液的應用應先搖勻,移 2 實現(xiàn)的條件： 離體狀態(tài)和適宜條件 水分、無機鹽、有機養(yǎng)分及激素、溫度、pH 等 液用的移液管或量筒需清洗兩次,以

20、免造 3 細胞的全能性大小與細胞種類的關(guān)系：成誤差；受精卵生殖細胞體細胞；植物細胞動物細胞；分化程度低的細胞分化程度高的細胞一般的,離體的植物細胞的全能性在確定條件下可充分地表達出來；離體的動物細胞的全能性受到限制,但其細胞核的全能性借助卵細胞的細胞質(zhì)可表達出來；未離體的細胞的全能性不能表達,只是在機體的調(diào)控下進行定向分化；胡 蘿 卜 素 的 提 取7 一、胡蘿卜素基礎(chǔ)學問 1原理：依據(jù)胡蘿卜素易溶于有機溶劑的特點,可實行有機溶劑萃取的方法來提取胡蘿卜素；即將粉碎、干燥的植物原料用有機溶劑浸泡,使胡 蘿卜素溶解在有機溶劑中,再蒸發(fā)出有機溶劑可獲得；2萃取劑的挑選（1）有機溶劑的分類：分為水溶性（如乙醇和丙酮）和水不溶性（如石油醚、乙酸乙酯、乙醚、苯、四氯化碳）兩類；多數(shù)對人體有確定毒性；（2）選取萃取胡蘿卜素的有機溶劑的原就 具有較高的熔點,能夠充分溶解胡蘿卜素,并且不與水混溶；萃取效率高；對人無毒、不易燃、易與產(chǎn)品分別、不影響產(chǎn)品質(zhì)量 萃取胡蘿卜素的有機溶劑應當具有較高的沸點,能夠充分溶解胡蘿卜素且不與水混溶；另外,仍要考慮對人體是否有毒性等安全問題；因乙醚 的沸點較低,苯和四氯化碳對