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文檔簡介

1、實驗一母種培育基的制作一、本次實驗的目的和要求學會母種培育基的配制方法,認識食用菌母種制作的工藝流程和制作母種的基本技術。二、實驗內容或原理母種培育基配制。工藝流程:培育基配方培育基的配制分裝試管理滅菌擺斜面三、需用的儀器或試劑等儀器:接種箱或超凈工作臺、高壓滅菌鍋、電爐、天平、試管、試管架、漏斗、漏斗架、橡皮管、玻璃管。試劑:、馬鈴薯、葡萄糖、瓊脂等。四、實驗步驟培育基配方以PDA培育基為例,馬鈴薯(去皮)200g、葡萄糖20g、瓊脂20g、水1000ml。為經加強營養(yǎng)或準備收藏菌種,可增添KH2PO43g、VB110mg。培育基配制第一將馬鈴薯去皮、洗凈、挖去芽眼、切成薄片,稱取200g,

2、放入鋁鍋頂用1000ml清水加熱煮沸,保持20min左右,煮至軟而不爛為止。用雙層濕沙布過濾,此后取濾液并補足蒸發(fā)損失的水分。再加入瓊脂連續(xù)加熱淚,待瓊脂熔解后,增添葡萄糖及其余成分,攪拌均勻后準備裝管。分裝試管培育基配制后應趁熱分裝。裝管時勿使管內外壁沾上溶液,免得浸潤棉塞,污染雜菌。裝管后塞上棉塞。棉塞的大小、松緊度應適合,以用手提棉塞、試管不零落為準。此后每10支度試管扎成一捆,棉塞上方用牛皮紙包好,防范滅菌時被水蒸汽浸潤。滅菌滅菌前將水加至鍋內水位標志高度。將試管放入鍋內,蓋上鍋蓋,對角旋緊鍋上螺旋,并閉排氣閥,開始加熱,當鍋內蒸汽大批排出時再連續(xù)排汽3-5min,封閉放氣閥。當壓力表

3、指針指到0.15Kg/cm2時(滅菌所需壓強)開始計時,連續(xù)保持該壓強30min。滅菌結束持壓力表指針自然回到”0”位時翻開放汽閥,排出鍋內節(jié)余蒸汽后,翻開鍋蓋。注意切忌在壓力表未到”0”位時就放汽,免得試管內的培育基向上沖浸潤棉塞,造成此后菌種的污染。5、擺斜面當培育基的溫度降到60時,將試管斜面放在木棒上,使呈斜面,斜面的長度以占試管長度的1/2為宜。冷卻后即成斜面培育基。五、講課方式以分組的形式進行實驗、討論六、核查要求掌握母種培育基的配制比率與高壓滅菌方法。依據提交的實驗報告、實驗過程與結果,評分方式為優(yōu)、良、中、及格、不及格。七、實驗的報告要求要求有察看記錄數(shù)據,完成實驗報告與作業(yè)。

4、50%以上。依據提交的實驗報告、實驗過程與結實驗二菌種的分別與培育一、本次實驗的目的和要求掌握母種轉管繼代培育技術,認識食用菌制作母種的基本技術。二、實驗內容或原理本實驗以組織分別為例進行菌種分別與培育,工藝流程:種菇的選擇與消毒組織塊的切取菌絲培育三、需用的儀器或試劑等儀器:接種箱或超凈工作臺、解剖刀、牛角勺、棉花、紗布、酒精燈等。試劑:75%酒精、高錳酸鉀、富爾馬林等。四、實驗步驟菌種的分別與培育(本實驗以組織分別為例)種菇的選擇與消毒選擇出菇早,菇形正,菇蓋肥厚,擁有該品種特點,無病蟲害、無雜菌污染,子實體八九分紅熟的作為種菇。種菇選定后,用75%酒精進行表面消毒。組織塊的切取將斜面培育

5、基放進接種室、接種箱或超凈工作臺內,用紫外燈(或化學藥品)進行消毒0.5h以上,封閉紫外燈后20min后,再開始進入接種室內進行接種。接種是一項技術性很強的工作,需要在無菌的環(huán)境中以無菌操作方法進行接種,才能減少污染。無菌操作是接種過程中最基本的操作方法,要求操作嫻熟,動作快速。用無菌刀在菇柄或菇蓋中部縱切一刀,此后用手將菇體掰成兩面三刀半,在菌柄和菌蓋交界處用刀切取的小方塊組織,將其移接到試管內培育基的中央,將其移接到試管內培育基的中央。菌絲培育接種后置于25恒溫箱中培育,2-3天后可見組織塊四周發(fā)生白色絨毛狀菌絲,此時每日要檢查雜菌污染狀況。培育7-10天后,菌絲即可長滿斜面。察看記錄詳盡

6、察看比較母種菌絲生長發(fā)育動向,計算出均勻每日菌絲生長速度。菌落的直徑(mm)-菌種塊直徑(mm)試管內菌絲生長的速度=菌落生長的時間(d)察看母種菌絲的表面形態(tài)特點。經過鏡檢,察看菌絲細胞核的變化規(guī)律及鎖狀結合的形成。五、講課方式以分組的形式進行實驗、討論六、核查要求要求組織分別成功率在果,評分方式為優(yōu)、良、中、及格、不及格。七、實驗的報告要求要求有察看記錄數(shù)據,完成實驗報告。實驗三原種與栽各種制作一、本次實驗的目的和要求學會原種與栽各種培育基的配制方法,掌握原種與栽各種的接種技術,認識食用菌原種與栽各種制作的工藝流程和制作的基本技術。二、實驗內容或原理原種與栽各種培育基配制工藝流程:培育基配

7、料裝瓶(或裝袋)滅菌冷卻接種掌握原種與栽各種的接種操作技術接種箱消毒器材消毒無菌接種菌絲培育三、需用的儀器或試劑等儀器:接種箱、高壓滅菌鍋、750毫升廣口瓶、酒精燈、接種勾等。試劑:75%酒精、氣霧消毒劑、棉籽殼、木屑、麩皮、石膏粉、棉花等。四、實驗步驟配方本實驗以棉籽殼為主料培育基為例。配方為:棉籽殼78%,麥麩或米糠20%,過磷酸鈣1%,蔗糖1%。拌料先依據要做原種的數(shù)目,算出各樣原料的用量,此后稱量、混淆,加水拌料。混賞賜時,先將棉籽殼和玫麩混淆在一同,過磷酸鈣和糖混溶在拌料用的水中。拌料時,邊加水邊攪拌,邊測試含水量。含水量的測定拌好料后,用手抓一把培育料,捏在手中緊握,手指縫中有水印

8、但以水不往下滴為適,此時含水量為62%-64%。裝瓶將拌好的培育料裝入原種瓶或塑料袋中央,邊裝邊壓實(但不得過緊),向來裝到瓶肩處為宜。擦瓶將瓶口和瓶外粘的培育料擦掉,免得接種后污染雜菌。封口用棉塞塞住瓶口或用透氣膜包住瓶口,再包一層防潮紙(或牛皮紙),用線繩將瓶口扎好,準備滅菌。7、滅菌滅菌方法同母種的滅菌方法,壓強為,8、接種挑取母種培育基一小塊,置于原種或栽各種培育基中央孔邊,隨即按原樣封口。9、菌絲培育接種后的原種,置于25的培育室培育。3-5天后菌絲即可恢復生長。5-7天菌絲開始伸入培育基內。當菌絲長滿瓶后,即可直接分移種植種,栽各種菌絲長滿面瓶后,需要養(yǎng)菌1-2周,以增添菌絲量及加

9、強菌絲活力后,再用于生產。察看記錄察看原種菌絲的表面形態(tài)特點。五、講課方式以分組的形式進行實驗、討論六、核查要求掌握原種與栽各種培育基的料水比率與高壓、常壓蒸汽滅菌方法,要求原種與栽各種成功率在90%以上。依據提交的實驗報告、實驗過程與結果,評分方式為優(yōu)、良、中、及格、不及格。七、實驗的報告要求要求有察看記錄數(shù)據,完成實驗報告。實驗四食用菌種植技術一、本次實驗的目的和要求學會平菇或金針菇種植袋的的制作方法,掌握其出菇管理技術。二、實驗內容或原理平菇或金針菇種植袋制作工藝流程:種植原料配制裝袋滅菌冷卻搬入接種室接種室消毒接種適溫培育菌絲2、出菇管理:控溫調溫通風采收補水三、需用的儀器或試劑等儀器

10、與設施:接種箱、高壓滅菌鍋或常壓滅菌灶、接種鏟、酒精燈。試劑:75%酒精、氣霧消毒劑、棉籽殼、木屑、麩皮、石膏粉等。四、實驗步驟配方本實驗以棉籽殼為主料培育基為例。配方為:棉籽殼78%,麥麩或米糠20%,過磷酸鈣1%,蔗糖1%。拌料先依據要做原種的數(shù)目,算出各樣原料的用量,此后稱量、混淆,加水拌料。混賞賜時,先將棉籽殼和玫麩混淆在一同,過磷酸鈣和糖混溶在拌料用的水中。拌料時,邊加水邊攪拌,邊測試含水量。含水量的測定拌好料后,用手抓一把培育料,捏在手中緊握,手指縫中有水印但以水不往下滴為適,此時含水量為62%-64%。裝袋將拌好的培育料裝入塑料袋中央,邊裝邊壓實(但不得過緊),向來裝到2/3長為

11、宜。套環(huán)用雙套環(huán)或纖維繩扎實袋口,準備滅菌。滅菌滅菌方法同原各栽各種的滅菌方法。7.接種挑取栽各種培育基一小塊,置于種植袋中,隨即按原樣封口。菌絲培育接種后的種植袋,置于培育室培育。3-5天后菌絲即可恢復生長。5-7天菌絲開始伸入培育基內。當菌絲長滿袋后,移入菇房。出菇管理控溫、調溫、通風、采收、補水五、講課方式以分組的形式進行實驗、討論六、核查要求掌握平菇或金針菇種植袋的制作技術,要求制袋成功率在95%以上。依據提交的實驗報告、實驗過程與結果,評分方式為優(yōu)、良、中、及格、不及格。六、實驗的報告要求要求有察看記錄數(shù)據,完成實驗報告。實驗五食用菌種植與加工現(xiàn)場觀光一、本次實驗的目的和要求經過觀光食用菌種植與加工現(xiàn)場,加強食用菌規(guī)?;a或工廠化生產與食用菌加工的感性認識。二、實驗內容或原理觀光金針菇、平菇、香菇等食用菌大型菇場或加工廠。三、需要的實驗資料無四、實驗步驟觀光采集資料總結、歸類撰寫實驗報告講堂討論實驗六食用菌電化講課一、目的要求經過觀

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